鄰菲羅啉分光光度法測定鐵lz)

1、鄰菲羅啉分光光度法測定鐵鄰菲羅啉分光光度法測定鐵儀器分析實驗儀器分析實驗（可見分光光度法）（可見分光光度法） 實驗一實驗一 紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法F 紫外紫外-可見分光光度法是研究物質(zhì)分子在紫外可見分光光度法是研究物質(zhì)分子在紫外-可見光區(qū)可見光區(qū)分子吸收光譜的分析方法。分子吸收光譜的分析方法。單色光單色光照射照射吸光物質(zhì)溶液吸光物質(zhì)溶液透射光強度透射光強度I0It 實驗一實驗一 可見分光光度法可見分光光度法 紫外分光光度法紫外分光光度法 紫外紫外- -可見光區(qū)可見光區(qū)（200800nm） 紫外光區(qū)（紫外光區(qū)（200400nm） 可見光區(qū)（波長可見光區(qū)（波長400800nm）

2、 紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法 實驗一實驗一 朗伯朗伯- -比爾定律比爾定律A =b c 濃度濃度厚度厚度吸光系數(shù)吸光系數(shù)吸光度吸光度Sample (conc. C)Path length bI0It Lambert-Beer 定律是說明物質(zhì)對單色光吸收的強弱與吸光物質(zhì)的濃度定律是說明物質(zhì)對單色光吸收的強弱與吸光物質(zhì)的濃度（C）和和 液層厚度（液層厚度（l）間的關(guān)系的定律，是光吸收的基本定律，是紫外間的關(guān)系的定律，是光吸收的基本定律，是紫外-可可見光度法定量的基礎(chǔ)。見光度法定量的基礎(chǔ)。Lambert-Beer 定律定律: 當一束平當一束平行的單色光通過溶液時，行的單色光通過溶液時

3、，溶液溶液的吸光度的吸光度 (A) 與溶液的濃度與溶液的濃度 (C) 和和光程光程 (b) 的乘積成正比。的乘積成正比。 實驗一實驗一 u熟悉分光光度測定鐵的基本原理和方法；熟悉分光光度測定鐵的基本原理和方法；u掌握分光光度法測定物質(zhì)含量的條件選定方法；掌握分光光度法測定物質(zhì)含量的條件選定方法；u掌握分光光度計的組成部分，操作操作方法和注意事項。掌握分光光度計的組成部分，操作操作方法和注意事項。u掌握鄰菲羅啉分光光度法測定鐵的標準曲線以及實際樣本的檢測掌握鄰菲羅啉分光光度法測定鐵的標準曲線以及實際樣本的檢測一、實驗目的一、實驗目的 實驗一實驗一 二、實驗原理二、實驗原理 在在pH=29的條件下

4、，的條件下，F(xiàn)e2+與鄰菲羅啉生成很穩(wěn)定的橙與鄰菲羅啉生成很穩(wěn)定的橙紅色的絡(luò)合物，其反應(yīng)如下：紅色的絡(luò)合物，其反應(yīng)如下：此絡(luò)合物的logK穩(wěn)=21.3，=11000。間接檢測法 實驗一實驗一 鄰菲羅啉鄰菲羅啉-Fe2+配合物配合物 實驗一實驗一 4Fe3+2NH2OHHCl4Fe2+N2 +H2O+4H+ +2Cl-在顯色前，首先用在顯色前，首先用鹽酸羥胺鹽酸羥胺把把Fe3+還原為還原為Fe2+：u測定時，控制溶液酸度在測定時，控制溶液酸度在pH=29較適宜，酸度過高較適宜，酸度過高，反應(yīng)速度慢；酸度太低，則，反應(yīng)速度慢；酸度太低，則Fe2+水解，影響顯色。水解，影響顯色。通常在通常在pH值值

5、5的緩沖液介質(zhì)中測定。的緩沖液介質(zhì)中測定。 提問：如何分別檢測提問：如何分別檢測Fe3+和和Fe2+？? 實驗一實驗一 三、儀器和試劑三、儀器和試劑分析天平分析天平 722型分光光度計型分光光度計 pHS-3B型酸度計型酸度計容量瓶容量瓶 50、250ml 移液管移液管 10、25ml燒杯燒杯 50ml 吸耳球吸耳球鐵標準溶液（鐵標準溶液（CFe3+=10 g/ml）鐵標準溶液（鐵標準溶液（CFe3+=0.001mol/L）10%鹽酸羥胺水溶液（臨用新配）鹽酸羥胺水溶液（臨用新配）0.1鄰菲羅啉水溶液（臨用新配）鄰菲羅啉水溶液（臨用新配）0.02（0.001mol/L）鄰菲羅啉水溶液（臨用新配

6、）鄰菲羅啉水溶液（臨用新配）1mol/L NaAc緩沖溶液緩沖溶液 實驗一實驗一 0.57光源單色器吸收池檢測器顯示輻射源分光系統(tǒng)檢測系統(tǒng)單波長單光束分光光度計記錄裝置 實驗一實驗一 1. 光源光源：鎢燈或鹵鎢燈鎢燈或鹵鎢燈可見光源可見光源 3501000nm氫燈或氘燈氫燈或氘燈紫外光源紫外光源 200360nm2. 單色器單色器（分光光度計心臟）（分光光度計心臟） 作用是將來自光源的光按波長的長短順序作用是將來自光源的光按波長的長短順序分散為單色光分散為單色光并能并能隨意調(diào)節(jié)所需隨意調(diào)節(jié)所需波長的光波長的光。主要由入射狹縫、準直鏡、色散元件、物鏡和出射狹縫組成。主要由入射狹縫、準直鏡、色散元

7、件、物鏡和出射狹縫組成。3吸收池吸收池：樣品池，比色皿樣品池，比色皿 玻璃玻璃能吸收能吸收UV光，光，僅適用于可見光區(qū)僅適用于可見光區(qū) 石英石英不能吸收紫外光，適用于不能吸收紫外光，適用于紫外和可見光區(qū)紫外和可見光區(qū) 要求：要求：匹配性匹配性（對光的吸收和反射應(yīng)一致）（對光的吸收和反射應(yīng)一致）4檢測器：檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置5記錄裝置：記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)訊號處理和顯示系統(tǒng)數(shù)字顯示數(shù)字顯示熒屏顯示熒屏顯示表頭顯示表頭顯示 實驗一實驗一 標準曲線標準曲線法法條件前提：固定儀器和測定CACKA樣樣同上條件固定條件查得測定樣品曲線分別測定配制標準系列過程

8、：CAACA要要 求：求：1. 1. r r 0.999 0.999 2. n 2. n 5-7 5-7 3. 3. 待測濃度盡量在標準曲線中間位置待測濃度盡量在標準曲線中間位置代入線性方程中求得代入線性方程中求得C C樣樣配溶液配溶液很重要很重要 實驗一實驗一 四、實驗步驟四、實驗步驟( (一）條件試驗一）條件試驗F 1 1、吸收曲線的繪制，選擇最大吸收波長作為測定波長（、吸收曲線的繪制，選擇最大吸收波長作為測定波長（510 nm)510 nm) 注：鐵標樣：注：鐵標樣：0.00 mL、5.00 mL, 依次加入依次加入10%10%鹽酸羥胺溶液、鹽酸羥胺溶液、NaAcNaAc溶液和溶液和0.

9、1%0.1%鄰菲羅啉溶液，稀釋至刻度，搖勻。鄰菲羅啉溶液，稀釋至刻度，搖勻。F 2 2、鄰菲羅啉鐵配合物的穩(wěn)定性，繪制、鄰菲羅啉鐵配合物的穩(wěn)定性，繪制A-tA-t曲線（先增大，再平臺）；曲線（先增大，再平臺）；F 3 3、顯色劑濃度的影響，繪制、顯色劑濃度的影響，繪制A-VA-V曲線曲線( (根據(jù)根據(jù)A = =bcbc判斷判斷A A的變化趨勢，的變化趨勢， 1 1份份Fe2+Fe2+對應(yīng)對應(yīng)3 3份鄰菲羅啉）；份鄰菲羅啉）；注：鐵標樣：注：鐵標樣：10.00 毫升毫升F 4 4、溶液酸度對配合物的影響，繪制、溶液酸度對配合物的影響，繪制A-pHA-pH曲線（曲線（pH=29）。）。注：注：pH

10、9一個點（一個點（8） 5 5、根據(jù)以上實驗，得出最佳條件。、根據(jù)以上實驗，得出最佳條件。 實驗一實驗一 ( (二）鐵含量的測定二）鐵含量的測定F 1 1、 用吸量管分別準確地吸取用吸量管分別準確地吸取不同體積的鐵標準溶液（不同體積的鐵標準溶液（8 8個），個），依次加入依次加入10%10%鹽酸羥胺溶液、鹽酸羥胺溶液、NaAcNaAc溶液和溶液和0.1%0.1%鄰菲羅啉溶液，稀釋至刻度，搖勻。放置鄰菲羅啉溶液，稀釋至刻度，搖勻。放置10min10min，以，以不加鐵的試劑空白溶液不加鐵的試劑空白溶液為參比溶液，在為參比溶液，在510nm510nm處分別測定各溶液的處分別測定各溶液的A A。以鐵

11、含量為橫坐標，相應(yīng)的。以鐵含量為橫坐標，相應(yīng)的A A為縱坐標，繪制標準曲線。為縱坐標，繪制標準曲線。F 2 2、水樣中微量鐵的測定、水樣中微量鐵的測定 準確吸取準確吸取5.0mL5.0mL水樣于水樣于50ml50ml容量瓶中，按上述制備標準曲線的方法配制溶容量瓶中，按上述制備標準曲線的方法配制溶液并測定其吸光度。最后根據(jù)水樣的吸光度，在標準曲線上得出水樣中鐵的液并測定其吸光度。最后根據(jù)水樣的吸光度，在標準曲線上得出水樣中鐵的含量。含量。 實驗一實驗一 五、數(shù)據(jù)處理五、數(shù)據(jù)處理用用excel作圖：插入，圖表，作圖：插入，圖表，XY散點圖，平滑線散點圖。散點圖，平滑線散點圖。 表格，表格，exce

12、l圖圖波長波長 （nm）430 450 470 490 510 520 530 540 550 560 570吸光度（吸光度（A）1、吸收曲線2、鄰菲羅啉配合物的穩(wěn)定性放置時間放置時間t（min）0 2 4 6 10 15吸光度（吸光度（A） 實驗一實驗一 六、結(jié)果與討論六、結(jié)果與討論 * * * * * *標鐵體積標鐵體積（ml)0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 水樣水樣 （5.00 ml）總鐵量（總鐵量（ g）吸光度（吸光度（A)3、標準曲線的測定Excel作圖，得標準曲線，計算樣本濃度 實驗一實驗一 1、要使比色皿中測定溶液與原溶液濃度保持一致，需用原溶液要使比色皿中測定溶液與原溶液濃度保持一致，需用原溶液蕩洗比色蕩洗比色皿皿23次次。裝溶液至皿高的。裝溶液至皿高的2/3為宜，過滿溢出會使儀器受損。為宜，過滿溢出會使儀器受損。2、遵守平行原則。配制標準系列時，空白與標準系列均應(yīng)按相同的操作遵守平行原則。配制標準系列時，空白與標準系列均應(yīng)按相同的操作步驟進行操作，包括加入試劑的量、順序、時間等均應(yīng)一致。步驟進行