大量制備單克隆抗體

1、lAGE-SCALE PREPARATIONlAGE-SCALE PREPARATION單克隆抗體的大量制備體內(nèi)誘生法（IN ANIMALS）體外誘生法（IN CELLS）研究進(jìn)展（RESEARCH PROGRESS）CONTENTSCATALOG取Balb/c雌性經(jīng)產(chǎn)鼠若干只預(yù)處理：腹腔注射0.5ml液態(tài)石蠟或降植烷注射器抽取腹水，得到大量單克隆抗體腹腔內(nèi)接種1ml對數(shù)生長期的雜交瘤細(xì)胞懸浮液12周后體內(nèi)誘生法接種10天左右腹水的雜交瘤細(xì)胞Advantages可得到大量的腹水單抗獲的抗體濃度高操作簡便、經(jīng)濟(jì)腹腔有自然吞噬作用，避免組織污染造成的雜交瘤細(xì)胞生長不良腹腔本身為雜交瘤細(xì)胞良好培養(yǎng)壞

2、境，使其始終處于對數(shù)生長期Disadvantages腹水中?；煊行∈蟮母鞣N雜蛋白（包括Ig），提純困難有污染動物病毒的危險鼠源性單抗有抗原性，在人體內(nèi)產(chǎn)生人抗鼠抗體，降低治療效果又誘發(fā)變態(tài)反應(yīng)將雜交瘤細(xì)胞置于培養(yǎng)瓶進(jìn)行培養(yǎng)得到單克隆抗體離心去除細(xì)胞及其碎片收集培養(yǎng)上清液一段時間體外誘生法Advantages 減少鼠類動物疾病給產(chǎn)物帶來的污染; 避免鼠的其它抗體的存在過程可以工程化和自動控制, 提高了重演性可以采用單元操作法培養(yǎng), 隨著規(guī)模增大, 降低生產(chǎn)成本 Disadvantages得到的單克隆抗體有限，不能超過特定的細(xì)胞濃度每天要換培養(yǎng)液，且細(xì)胞對剪切力和環(huán)境非常敏感會積累有毒的代謝產(chǎn)物血

3、清培養(yǎng)干擾抗體活性，影響抗體分離，增加成本牛初乳免疫球蛋白IgG單克隆抗體的制備 利用標(biāo)準(zhǔn) IgG蛋白作為免疫原，免疫 6周齡 Balb/c 雌性小鼠，運(yùn)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，通過間接 ELISA法篩選，采用有限稀釋法，經(jīng)過 3次克隆篩選，獲得2株穩(wěn)定分泌抗 IgG蛋白的雜交瘤細(xì)胞株，單抗細(xì)胞注射小鼠腹腔收集腹水；亞類鑒定試劑盒確定單抗細(xì)胞亞類；測定收集小鼠腹水的抗體效價?？笴PV-2a單克隆抗體的制備 純化的犬細(xì)小病毒(CPV)2a型分離株免疫Balb/c 小鼠,運(yùn)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，間接 ELISA方法篩選陽性雜交瘤細(xì)胞,采用有限稀釋法對陽性雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行3次亞克隆，得到4株穩(wěn)定分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，單抗細(xì)胞注射小鼠腹腔收集腹水；亞類鑒定試劑盒確定單抗細(xì)胞亞類；測定收集小鼠腹水的抗體效價。1 隨著分子生物學(xué)的飛躍發(fā)展，人鼠嵌合抗體、人源化抗體、完全人源性單克隆抗體應(yīng)運(yùn)而生2 嵌合單克隆抗體和由轉(zhuǎn)基因小鼠、噬菌體展示技術(shù)、核糖體展示技術(shù)及共價展示技術(shù)所制備的單克隆抗體取得了激蕩人心的豐碩成果體內(nèi)誘生法1 細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展：空纖維固定術(shù)、徽膠囊術(shù)、空氣升液器、生物反應(yīng)大量培養(yǎng)術(shù)、恒化器培養(yǎng)、OPTICELL培養(yǎng)系統(tǒng)2 細(xì)胞表達(dá)抗體的研究在抗細(xì)胞凋亡、促細(xì)胞增殖、優(yōu)化