血細胞分析原理及白細胞散點圖臨床意義

1、血細胞分析儀原理及散點圖臨床血細胞分析儀原理及散點圖臨床應用應用一、血細胞各通道分析原理及散點圖分析 二、散點圖案例分析一、血細胞各通道分析原理及散點圖分析一、血細胞各通道分析原理及散點圖分析血細胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究血細胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究 參數，如直方圖，參數，如直方圖，DIFFDIFF散點圖，散點圖， NRBCNRBC散點圖等。實驗散點圖等。實驗人員可根據這些信息從大量的標本中挑出需要重點關注人員可根據這些信息從大量的標本中挑出需要重點關注的的, ,進行涂片復檢確認，提高工作效率，減少漏診率。進行涂片復檢確認，提高工作效率，減少漏診率。DIF

2、FWBC/BASONRBC半導體激光熒光染色（聚次甲基+噁嗪 ）主要原理FSC前向散射光：細胞大小SSC側向散射光：復雜程度（細胞的顆粒 和細胞核等內含物的信息）SFL側向熒光：核酸含量（DNA 、RNA)DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑）完全溶解RBCPLT 在WBC膜上打孔溶血素中加入有機酸，與嗜酸粒細胞內的堿 性蛋白粘附，使Eo顆粒的復雜程度增加，在SSC顯示復雜程度是最大的。4DS對核酸染色縱坐標：側向熒光（SFL）反映核酸含量橫坐標：側向散射光（SSC）反映細胞內部復雜程度化學粘附化學粘附大分子有機酸與嗜酸 粒細胞中的堿性顆粒 發(fā)生化學粘附嗜酸粒細胞大分子有機酸RNA/D

3、NA熒光染色原理成熟白細胞：高熒光特性網織紅細胞：弱熒光特性血小板：成熟RBC：原始細胞：幼稚細胞：微弱熒光特性 無熒光特性 極高熒光特性 極高熒光特性熒光染色WBC分類的優(yōu)勢檢測異常細胞提供幼稚粒細胞信息（IG）提供原始細胞信息（Other）10SFB溶血劑 （酸性，低滲）溶解RBCPLT除嗜堿性粒細胞以外的白細胞處理成 裸核形態(tài)Baso保持原狀縱坐標：前向散射光（縱坐標：前向散射光（FSC） 反反映細胞大小映細胞大小橫坐標：側向散射光（橫坐標：側向散射光（SSC）反映細胞內部復雜程度反映細胞內部復雜程度嗜堿其它有 核細胞嗜堿粒細胞溶血素為酸性低滲溶液，Baso內的蛋白為酸性蛋白，因此在該溶

4、液中受到保護，而其他有核細胞則被 溶解成裸核WBC/BASO 通道分析原理NRBC通道分析原理NR溶血劑完全溶解RBC，PLTWBC保持原狀NRBC溶解為裸核NR染液對核酸染色縱坐標：前向散射光（FSC）反映細胞大小橫坐標：側向熒光（SFL）反映核酸含量NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC#出現(xiàn)有核紅時WBC的修正紅系增生活躍時，外周血易見較多的紅系增生活躍時，外周血易見較多的NRBC，在，在WBC 計數時不被溶解，常被計入淋巴細胞中。計數時不被溶解，常被計入淋巴細胞中。WBC增多對增多對RBC計數的干擾計數的干擾RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L時，需校正紅系

5、統(tǒng)參數貧血越嚴重，對RBC影響越大血紅蛋白通道光電比色法光電比色法SLS（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒二、散點圖案例分析二、散點圖案例分析嗜堿性粒細胞增多癥在BASO散點圖上，嗜堿區(qū) 域出現(xiàn)大量散點，另外DIFF散點圖上，中性區(qū)域的左下方也為嗜堿區(qū)域， 也出現(xiàn)了大量的散點。BASO%：儀器13.4%鏡檢13.5%AML-M1(例1)不可信不可信DIFF散點圖顯示淋巴與單核之 間融合，有分類結果，但不可 信。IMI散點圖也提示大量原始細 胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有77.5%的原始細胞。細胞表面標志CD13和CD33陽 性，CD36陰性；為急性髓細 胞性白血病。AML-M2DIFF散

6、點圖顯示白細胞完全融合 且不分類。IMI散點圖顯示大量原始細胞和幼 稚粒細胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)有90%的原始細胞、3% 的早幼粒細胞哦、1%中幼粒細胞。流式細胞儀檢測結果顯示細胞表 面標志CD13和CD33陽性，為髓 細胞性白血病。AML-M3DIFF散點圖顯示白細胞完全融合且不分 類。IMI散點圖也顯示大量原始細胞和幼稚粒 細胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)3%的原始細胞，91%的早幼粒 細胞、3.5%的中幼粒細胞，0.5%晚幼 粒細胞。AML-M4DIFF散點圖，白細胞區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點，完全融合，不分類。 大致分成兩群，一群為原始細胞， 一群為幼稚粒細胞。IMI散

7、點圖也顯示大量原始細胞和幼 稚粒細胞。AML-M5bDIFF散點圖淋巴與單核 融為一體，不分類，IMI散點圖顯示大量原始細胞 和幼稚粒細胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細胞，0.5%的早幼粒細胞，單 核細胞24.5%。慢粒危象DIFF散點圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大 量散點，中性粒細胞上方也有少 量散點，IMI散點圖也出現(xiàn)大量紅色散點，儀器報警提示有大量 原始細胞和幼稚粒細胞。NRBC散點圖：紅色散點鏡檢發(fā)現(xiàn)38.5%的原始細胞，幼 稚粒細胞和幼稚的單核細胞。酯 酶染色陰性或弱陽性，可被氟化 鈉抑制。這是一例慢粒急單變。MDSDIFF：淋巴細胞和單核細胞之間界限不清，提示出現(xiàn)原 始細胞。中性粒細胞散點向 左

8、下方延伸到嗜堿區(qū)域。IMI：少量紅點NRBC：幼紅鏡檢：原始：1%，BASO：5%，NRBC：2.5/100WBC范*，女，67y。2016.11，診 斷為MDS伴原始細胞增多（10%）DIFF散點圖淋巴與單核區(qū)域融 合，提示出現(xiàn)原始細胞報警提示異常淋巴細胞/原始細 胞，異淋？鏡檢：47%原始淋巴細胞，未見 異淋。血片POX（-）。2018.4.MDS急淋變MDS急淋變急性T淋巴細胞白血病DIFF散點圖淋巴與單核完 全融合，IMI散點圖幾乎沒有紅色散點，儀器提示異 常淋巴/原始淋巴細胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有59.5%的異常淋 巴細胞。本例被診為ATL。CLL淋巴與單核區(qū)域分界不 清，儀器提示淋巴細胞 增

9、多/原始淋巴。鏡檢：L：86.5%，幼淋2.0%異型淋巴細胞異型淋巴細胞增高與 多種病毒感染及變態(tài) 反應有關。常見有：傳染性單核 細胞增多癥、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、 腎綜合征出血熱等病 毒性感染。特點：胞體增大，胞 質增多、嗜堿性增強，細胞核母細胞化， 熒光強度最強。散點圖特點：嗜酸性粒細胞群向中性粒細胞靠攏，間距小。散點圖特點：嗜酸性粒細胞群向中性粒細胞靠攏，間距小。原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細胞中釋放出來，繼而被白細胞吞噬，吞噬原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細胞中釋放出來，繼而被白細胞吞噬，吞噬 了瘧色素的白細胞側向散射光強度改變，顯示在散點圖靠近中性粒細胞一側

10、，但也被儀器了瘧色素的白細胞側向散射光強度改變，顯示在散點圖靠近中性粒細胞一側，但也被儀器 以以EoEo特有的紅色標示出來。特有的紅色標示出來。張時民等張時民等. .血細胞分析儀測定瘧原蟲感染患者特征二例血細胞分析儀測定瘧原蟲感染患者特征二例. .中華臨床醫(yī)師雜志，中華臨床醫(yī)師雜志，2011,52011,5（2 2）:633-635:633-635瘧原蟲感染的散點圖（一）瘧原蟲感染的散點圖（一）從儀器從儀器報警報警EOEO增高增高或或無無EOEO分類分類結果的結果的1 5011 501份份標本中發(fā)現(xiàn)有標本中發(fā)現(xiàn)有9 9份份瘧瘧 原蟲標原蟲標本，本，6 6份份散點圖表現(xiàn)為散點圖表現(xiàn)為EOEO與與NEGNEG之間之間間距縮小間距縮小( (圖圖1) 1) ，3 3份份報警白細胞散報警白細胞散 點圖點圖異常異常, ,且散點圖顯示且散點圖顯示EOEO與與NEGNEG之間無間距之間無間距( (圖圖2)2)。其他其他1 4921 492份散點圖基本正常。因為是真性份散點圖基本正常。因為是真性E