專題動物細(xì)胞工程

1、齊河一中齊河一中 王英王英 從動物機體中取出相關(guān)的組從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然織，將它分散成單個細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。這些細(xì)胞生長和增殖。原理：細(xì)胞增殖動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞代細(xì)胞50代細(xì)胞代細(xì)胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)無限傳代無限傳代單個細(xì)胞單個細(xì)胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎細(xì)胞株細(xì)胞株細(xì)胞系細(xì)胞系動物組織細(xì)胞間隙中動物組織細(xì)胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，將細(xì)胞維等

2、蛋白質(zhì)，將細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)未改變未改變遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)已改變已改變接觸抑制接觸抑制細(xì)胞株：細(xì)胞株：原代細(xì)胞一般傳至原代細(xì)胞一般傳至1010代左右細(xì)胞代左右細(xì)胞生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存生長停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，少數(shù)細(xì)胞存活到活到40504050代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞株。 細(xì)胞系：細(xì)胞系：細(xì)胞株傳代至細(xì)胞株傳代至5050代后又出現(xiàn)細(xì)胞代后又出現(xiàn)細(xì)胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的生長停滯狀態(tài)，只有部分細(xì)胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代

3、，這改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。種傳代細(xì)胞為細(xì)胞系。 細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別：細(xì)胞株和細(xì)胞系的區(qū)別： 細(xì)胞系的遺傳細(xì)胞系的遺傳物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點，失去接觸抑制，物質(zhì)改變，具有癌細(xì)胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。容易傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)：將動物組織消化后的初次培養(yǎng)將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)：用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制的貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來，制的貼壁細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來，制成細(xì)胞懸液，分裝到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)成細(xì)胞懸液，分裝到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，這個過程叫傳代培養(yǎng)。培

4、養(yǎng)，這個過程叫傳代培養(yǎng)。 上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到接觸抑制就是原代培養(yǎng)，之后轉(zhuǎn)移到其接觸抑制就是原代培養(yǎng)，之后轉(zhuǎn)移到其它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng)它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng)細(xì)胞接觸抑制細(xì)胞接觸抑制 細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細(xì)胞間相量不斷增加，最后形成一個單層，此時細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加?；ソ佑|，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。1、無菌、無毒的環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、

5、營養(yǎng)、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血漿等、維生素。漿等、維生素。）3、溫度和、溫度和PH 36.5 +0.5度 ；PH為7.2-7.4。4、氣體環(huán)境：、氣體環(huán)境： O2和和CO2（95%空氣和空氣和5% CO2 ）補充合成培養(yǎng)基補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)中缺乏的物質(zhì)（1 1）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干）生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。擾素、單克隆抗體等。（2 2）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。）獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，用于植皮。（3 3）用于檢測有毒物質(zhì)）用于檢測有毒物質(zhì)（4 4）用于生理、病理、

6、藥理等方面的研究，）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？1、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞？、為什么培養(yǎng)前要將組織細(xì)胞分散成單個細(xì)胞？4、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機

7、鹽、維生素和動物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強因為這些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體不能，動物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體4、細(xì)胞膜的主要成份是什么？、細(xì)胞膜的主要成份是什么？5、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎？、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉嗎？6、既然

8、胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉，那將動物、既然胰蛋白酶能將細(xì)胞消化掉，那將動物組織分散成單個細(xì)胞要注意什么問題呢？組織分散成單個細(xì)胞要注意什么問題呢？蛋白質(zhì)和磷脂蛋白質(zhì)和磷脂能能注意時間的控制注意時間的控制思考題思考題3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細(xì)、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)是什么成份？胞間的物質(zhì)是什么成份？胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)胰蛋白酶水解蛋白質(zhì)細(xì)胞間的成份是蛋白質(zhì)細(xì)胞間的成份是蛋白質(zhì)細(xì)胞的全能性細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體或組織植物體或組織培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果獲得細(xì)胞獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白或細(xì)胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養(yǎng)

9、目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖原理原理動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目比較項目 動物核移植： 將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。發(fā)育為動物個體。 用核移植的方法得到的動物。用核移植的方法得到的動物?？寺游铮侯愋皖愋停号咛ゼ?xì)胞核移植

10、和體細(xì)胞核移植：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植（M卵母細(xì)胞）卵母細(xì)胞）減數(shù)第二次分裂中期減數(shù)第二次分裂中期去核的卵母細(xì)去核的卵母細(xì)胞胞供體細(xì)胞供體細(xì)胞注入去核注入去核卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞受體細(xì)胞受體細(xì)胞激活，完激活，完成減數(shù)分成減數(shù)分裂、發(fā)育裂、發(fā)育胚胎移胚胎移植植體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用前畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用前景景1加速加速家畜遺傳改良家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育進程，促進優(yōu)良畜群繁育2保護瀕危物種，增加動物保護瀕危物種，增加動物 的存活數(shù)量的存活數(shù)量3可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白，克隆動物細(xì)可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白，克隆動物細(xì)胞、組織、器官可作為移植的供體，了解胚胎發(fā)胞、組織、器官可作為移植的供體，了解胚胎發(fā)育及衰老過程、做疾病模型等