專題動物細胞工程

1、齊河一中齊河一中 王英王英 從動物機體中取出相關的組從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然織，將它分散成單個細胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。這些細胞生長和增殖。原理：細胞增殖動物胚胎或幼齡動動物胚胎或幼齡動物的組織、器官物的組織、器官細胞懸浮液細胞懸浮液10代細胞代細胞50代細胞代細胞傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)無限傳代無限傳代單個細胞單個細胞加培養(yǎng)液加培養(yǎng)液（分解彈性纖維）（分解彈性纖維）原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎細胞株細胞株細胞系細胞系動物組織細胞間隙中動物組織細胞間隙中含有一定量的彈性纖含有一定量的彈性纖維等蛋白質，將細胞維等

2、蛋白質，將細胞網(wǎng)絡起來形成具有一網(wǎng)絡起來形成具有一定彈性和韌性的組織定彈性和韌性的組織和器官。和器官。遺傳物質遺傳物質未改變未改變遺傳物質遺傳物質已改變已改變接觸抑制接觸抑制細胞株：細胞株：原代細胞一般傳至原代細胞一般傳至1010代左右細胞代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到活到40504050代，這種傳代細胞為細胞株。代，這種傳代細胞為細胞株。 細胞系：細胞系：細胞株傳代至細胞株傳代至5050代后又出現(xiàn)細胞代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質的生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代

3、，這改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。種傳代細胞為細胞系。 細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞株和細胞系的區(qū)別： 細胞系的遺傳細胞系的遺傳物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，物質改變，具有癌細胞的特點，失去接觸抑制，容易傳代培養(yǎng)。容易傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)：將動物組織消化后的初次培養(yǎng)將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。稱為原代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：傳代培養(yǎng)：用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制用胰蛋白酶將出現(xiàn)接觸抑制的貼壁細胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來，制的貼壁細胞從培養(yǎng)瓶壁上脫離下來，制成細胞懸液，分裝到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)成細胞懸液，分裝到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，這個過程叫傳代培養(yǎng)。培

4、養(yǎng)，這個過程叫傳代培養(yǎng)。 上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到上述過程中，在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)到接觸抑制就是原代培養(yǎng)，之后轉移到其接觸抑制就是原代培養(yǎng)，之后轉移到其它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng)它培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就是傳代培養(yǎng)細胞接觸抑制細胞接觸抑制 細胞在貼壁生長過程中，隨著細胞分裂，數(shù)細胞在貼壁生長過程中，隨著細胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細胞間相量不斷增加，最后形成一個單層，此時細胞間相互接觸，細胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加?；ソ佑|，細胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。1、無菌、無毒的環(huán)境、無菌、無毒的環(huán)境 （添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）（添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）2、

5、營養(yǎng)、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血漿等、維生素。漿等、維生素。）3、溫度和、溫度和PH 36.5 +0.5度 ；PH為7.2-7.4。4、氣體環(huán)境：、氣體環(huán)境： O2和和CO2（95%空氣和空氣和5% CO2 ）補充合成培養(yǎng)基補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質中缺乏的物質（1 1）生產(chǎn)蛋白質生物制品：病毒疫苗、干）生產(chǎn)蛋白質生物制品：病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。擾素、單克隆抗體等。（2 2）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。）獲得大量自身的皮膚細胞，用于植皮。（3 3）用于檢測有毒物質）用于檢測有毒物質（4 4）用于生理、病理、

6、藥理等方面的研究，）用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預防疾病提供理論依據(jù)為治療和預防疾病提供理論依據(jù)2、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？、為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做動物細胞培養(yǎng)材料？1、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？、動物細胞培養(yǎng)液的主要成分是什么？較植物組培培養(yǎng)基有何獨特之處？3、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？、為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？4、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？新個體？主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機

7、鹽、維生素和動物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。獨特之處有：獨特之處有：1、液體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基 2、成分中有動物血清等、成分中有動物血清等因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強因為這些組織或器官上的細胞生命力旺盛，分裂能力強成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細胞懸浮液利于培養(yǎng)不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體4、細胞膜的主要成份是什么？、細胞膜的主要成份是什么？5、胰蛋白酶能將細胞消化掉嗎？、胰蛋白酶能將細胞消化掉嗎？6、既然

8、胰蛋白酶能將細胞消化掉，那將動物、既然胰蛋白酶能將細胞消化掉，那將動物組織分散成單個細胞要注意什么問題呢？組織分散成單個細胞要注意什么問題呢？蛋白質和磷脂蛋白質和磷脂能能注意時間的控制注意時間的控制思考題思考題3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可說明細胞間的物質是什么成份？胞間的物質是什么成份？胰蛋白酶水解蛋白質胰蛋白酶水解蛋白質細胞間的成份是蛋白質細胞間的成份是蛋白質細胞的全能性細胞的全能性細胞株、細胞系細胞株、細胞系植物體或組織植物體或組織培養(yǎng)結果培養(yǎng)結果獲得細胞獲得細胞或細胞分泌蛋白或細胞分泌蛋白快速繁殖、培育快速繁殖、培育無病毒植株等無病毒植株等培養(yǎng)

9、目的培養(yǎng)目的葡萄糖、動物血清葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質培養(yǎng)基性質細胞增殖細胞增殖原理原理動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目比較項目 動物核移植： 將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已將動物的一個細胞的細胞核，移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。發(fā)育為動物個體。 用核移植的方法得到的動物。用核移植的方法得到的動物?？寺游铮侯愋皖愋停号咛ゼ毎艘浦?/p>

10、和體細胞核移植：胚胎細胞核移植和體細胞核移植（M卵母細胞）卵母細胞）減數(shù)第二次分裂中期減數(shù)第二次分裂中期去核的卵母細去核的卵母細胞胞供體細胞供體細胞注入去核注入去核卵母細胞卵母細胞受體細胞受體細胞激活，完激活，完成減數(shù)分成減數(shù)分裂、發(fā)育裂、發(fā)育胚胎移胚胎移植植體細胞核移植技術的應用前景體細胞核移植技術的應用前景畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領域有著廣泛應用前畜牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生以及其他領域有著廣泛應用前景景1加速加速家畜遺傳改良家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育進程，促進優(yōu)良畜群繁育2保護瀕危物種，增加動物保護瀕危物種，增加動物 的存活數(shù)量的存活數(shù)量3可作為生物反應器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白，克隆動物細可作為生物反應器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白，克隆動物細胞、組織、器官可作為移植的供體，了解胚胎發(fā)胞、組織、器官可作為移植的供體，了解胚胎發(fā)育及衰老過程、做疾病模型等