試驗五血液分析儀的使用和結果分析

1、實驗五血液分析儀的使用和結果分析Usage and Result Assessment of Hematology Analyzer實驗原理電阻抗型血細胞分析儀原理： 儀器的小孔管有內外兩個電極， 在接通電源的電解質溶液中， 內、外電極之間形成一個穩(wěn)定的電流。 細胞懸液經負壓吸引通過小孔管上的寶石計數(shù)小孔時， 由于血細胞具有相對非導電的特性， 使電路中小孔感應區(qū)內的電阻突然增大， 引起瞬間電壓變化而形成脈沖信號。 這些脈沖信號經過放大、閾值調節(jié)、甄別、整形、計數(shù)及自動控制保護系統(tǒng)，完成對血細胞進行計數(shù)和體積的測定， 自動打印出結果。 脈沖信號的強弱反映細胞體積的大小， 脈沖信號的多少反映細胞的

2、數(shù)量。儀器的光電比色裝置可測定血紅蛋白濃度。1紅細胞分析（1）細胞計數(shù)：與血小板在同一通道進行檢測。采用閾值調節(jié)和浮動界標法區(qū)分紅細胞與血小板。通道內的細胞介質為等滲、近中性的電解質溶液。（2）血紅蛋白測定：在白細胞通道內進行。紅細胞被溶血劑破壞后，釋放出的血紅蛋白轉化為血紅蛋白衍生物， 吸收峰在 530nm 550nm 之間，儀器內有流動比色裝置進行測定。因 ICSH 推薦使用 HiCN 法進行儀器矯正，故采用的溶血劑中多含氰化物， 形成氰化血紅蛋白； 為避免環(huán)境污染， 也可以采用不含氰化物的溶血劑，如 SLS-Hb 法。（3）紅細胞參數(shù)分析： MCV 、 RDW ：儀器取自近萬個紅細胞體積

3、的檢測數(shù)據(jù)，由統(tǒng)計學運算得到的平均值和變異系數(shù)。 HCT ：MCV 與紅細胞計數(shù)的乘機。 MCH 、MCHC ：計算方法與手工法相同。2白細胞分析（1）白細胞計數(shù)：白細胞通道有滴加溶血素的裝置，破壞紅細胞后方可進行白細胞計數(shù)。（2）白細胞分群：溶血素在破壞紅細胞的同時，也改變了白細胞膜的通透性，使細胞內液外溢而引起了白細胞體積的改變， 此時細胞體積的大小取決于細胞內顆粒的含量和細胞核的大小。將白細胞分成 2 群 3 群，可計算出各自百分率及絕對值：小細胞群： 30fl 90fl ，以淋巴細胞為主。因淋巴細胞核較小，細胞質最少。中間細胞群： 90fl 160fl ，主要包括嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒

4、細胞、單核細胞。嗜酸性粒細胞、 嗜堿性粒細胞顆粒較淋巴細胞豐富； 單核細胞核體積最大但胞質顆粒并不豐富。大細胞群： 160fl 450fl，以中性粒細胞為主。中性粒細胞顆粒最豐富。3血小板分析（1）血小板計數(shù)：與紅細胞在同一通道進行檢測。（2）血小板參數(shù)分析： MPV 和 PDW ：原理同 MCV 和 RDW 。 PCT 是 PLT 和 MPV 的乘積4血細胞體積分布直方圖：血細胞分析儀的微電腦以各種細胞的體積為橫坐標，相應大小的細胞所占百分率為縱坐標繪制成的 3 個擬合曲線。分別反映各類血細胞的群體分布情況。試劑與器材校正后的電阻抗型血細胞分析儀、配套試劑和消耗品（樣品杯、抗凝管、采血器材、

5、消毒紗布或紙巾） 。操作步驟1啟動儀器、準備器材。2采血、稀釋 毛細血管血和靜脈血都可使用，采血方法同第一章實驗 1，抗凝劑首選 EDTA-K 2 。毛細血管血可隨時進行預稀釋，也可先轉移到盛有抗凝劑的帶蓋容器中等待集中測定。 如使用靜脈血測定， 多采用機內自動稀釋， 測定前需注意轉換儀器的測定模式。3上機測定，具體的儀器按說明書操作。儀器將自動對標本進行測試并打印結果。4記錄結果、關機。注意事項1確認儀器在正常工作狀態(tài)（1）稀釋液空白計數(shù)各項指標應達到說明書要求。（2）測定低、中、高定值的全血質控標本或單項指標質控標本時，其結果應在 X2SD 之內，或質控圖處于質控狀態(tài)。（3）檢測標本時，儀

6、器計數(shù)時間在規(guī)定范圍內，無堵孔現(xiàn)象。防止堵孔的措施有采血順利，及時混勻。防止消毒棉或紙巾上的纖維物質混入血液中。保證稀釋液清潔無污染。疑為冷凝集的標本，可在37溫箱溫育后測定。2堅持檢查結果審核復查制度 對已確診或懷疑血液病、 發(fā)熱待查患者的標本，無論檢查參數(shù)及直方圖是否正常， 均應進行血涂片的顯微鏡檢查。 對白細胞計數(shù)和分類異常的標本、血小板嚴重減少或顯著增加的標本，也應進行復查。3嚴格按照操作手冊使用儀器并作好儀器使用登記。4定期保養(yǎng)儀器。參考范圍儀器型號不同， 所提供的參數(shù)數(shù)量和直方圖的圖形也不盡相同。 但各項參數(shù)的數(shù)值（見表 2-9）與手工檢測結果差異不大。表 2-9血細胞自動分析儀提

7、供的參數(shù)和直方圖（以成人為例）項目（英文縮寫）參考值報告方式白細胞數(shù) (WBC)410（靜脈血 3.59.5）×109/L紅細胞數(shù) (RBC)M：4.0 5.5；F：3.54.0×1012/L血紅蛋白 (Hb or HGB)M：120 160； F： 110150g/L血紅細胞比容 (HCT or PCV)M：0.4 0.5；F：0.3.70.48L/L平均紅細胞體積（ MCV ）80 100fl平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH ）27 31pg平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC ）320 360g/L血小板數(shù)（ PLT or Plt）150 350×109/L小細胞

8、或淋巴細胞百分比20 40（ W SCR or lymph ）大細胞或中性粒細胞百分比50 70（ W-LCR or Gran ）中等大小細胞（單核細胞+嗜酸<10+嗜堿粒細胞）百分比 W-MCRor Mid （ M+E+B ）小細胞或淋巴細胞絕對值0.84.0×109/L（ W-SCC or lymph# ）大細胞或中性粒細胞絕對值W-LCC or Gran#中等大小細胞（單核細胞+嗜酸+嗜堿粒細胞）絕對值（ W-MCC or Mid# ）紅細胞體積分布寬度（ RDW ）血小板比容（ PCT）平均血小板體積（MPV ）血小板體積分布寬度（PDW ）白細胞體積分布直方圖紅細胞體

9、積分布直方圖血小板體積分布直方圖2.07.0×109/L<1.0×109/L14.5 15.5%L/L6.813.6fl15.5 18.1%結果分析1紅細胞參數(shù)的變化 意義同前面章節(jié)。血細胞分析儀還可提供反映紅細胞彼此之間體積差異程度的指標 RDW ，其意義在于幫助鑒別缺鐵性貧血和輕型珠蛋白合成障礙性貧血：前者 RDW 增大而后者可以正常，可能性各占 100%及 88%。早期診斷缺鐵性貧血： RDW 升高早于 MCV 的下降。貧血形態(tài)學分類： Bessman根據(jù) MCV / RDW 可將貧血分為 6 類（表 2-10），對貧血的鑒別診斷有一定價值。表 2-10 Bes

10、sman 的貧血形態(tài)學分類類型MCVRDW常見疾病小細胞均一性貧血正常輕型珠蛋白合成障礙性貧血、慢性疾?。ǜ腥尽⒛蚨景Y、腫瘤、類風濕性關節(jié)炎等）小細胞非均一性貧血缺鐵性貧血、慢性失血性貧血、鐵粒幼細胞貧血正細胞均一性貧血正常正常再生障礙性貧血早期、 MDS、急性失血性貧血和溶血性貧血正細胞非均一性貧血正常早期缺鐵性貧血、營養(yǎng)性混合性貧血大細胞均一性貧血正常部分再生障礙性貧血、溶血性貧血、甲狀腺機能低下大細胞非均一性貧血巨幼細胞貧血、免疫性溶血性貧血2白細胞參數(shù)的變化 如白細胞檢查各項參數(shù)都正常，可直接報告，無須復查血涂片。 白細胞計數(shù)異常， 臨床意義同手工計數(shù)， 但白細胞分群并不能真正代表白細

11、胞分類結果。儀器出現(xiàn)報警信號時仍需手工復查。3血小板參數(shù)的變化 血小板計數(shù)見第四章實驗四。血小板其他參數(shù)中臨床價值較大的指標為 MPV 和 PDW，是判斷骨髓生成巨核細胞和血小板能力的重要依據(jù)。 MPV 的參考值并非在一個統(tǒng)一的范圍。 Bessman 研究表明，血小板數(shù)與 MPV 值呈非線性負相關。血小板減少紫癜病人血小板持續(xù)減少伴 MPV 下降和 PDW 上升提示骨髓衰竭、預后不良。另外，血標本的干擾如：血小板聚集，可導致血小板計數(shù)減少，MPV 增大。紅細胞碎片造成血小板計數(shù)增多。小紅細胞，造成血小板計數(shù)增多，MPV 及 PDW 增大。4血細胞體積分布直方圖（1）白血細胞體積分布直方圖：白細

12、胞直方圖的變化，可以評價血液中白細胞群體的變化， 但缺乏特異性，不同種類的白細胞增多或減低可使白細胞直方圖產生相似的變化。 因此，異常白細胞直方圖只能提示白細胞分群之間的比例變化或可能出現(xiàn)的異常細胞（表2-11），具體診斷時必須用顯微鏡復查血液涂片。更多的是作為檢驗醫(yī)師進行室內質量控制的依據(jù)之一。表 2-11影響白血細胞體積分布直方圖圖形改變及出現(xiàn)警報信號的原因分析警告信號出現(xiàn)位置可能的原因直方圖改變R0或R1淋巴細胞左側血小板聚集、巨大血小板、瘧原蟲、有核紅細胞、不溶解紅細胞、異常淋巴細胞、冷球蛋白等。R2淋巴細胞和單異型淋巴細胞，異常淋巴細胞，原幼細胞、個核細胞之間漿細胞，嗜酸性粒細胞，嗜

13、堿性粒細胞等R3單個核細胞和未成熟細胞，異常細胞，嗜酸性粒細胞等粒細胞之間R4粒細胞右側粒細胞增多癥RM多個區(qū)域以上多種因素同時出現(xiàn)（2）紅細胞直方圖：紅細胞直方圖的臨床應用價值不同于白細胞直方圖，對指導臨床醫(yī)師進行貧血的鑒別診斷和療效觀察意義較大。不同類型的貧血直方圖形峰的位置、峰低的寬度、峰頂?shù)男螤畋憩F(xiàn)不同，根據(jù)直方圖形的不同，對不同類型的貧血進行鑒別診斷； 在貧血的治療過程中通過觀察紅細胞直方圖是否出現(xiàn)峰頂移動， 是否可出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象來進行治療效果的觀察。但應明確，因紅細胞平均壽命約 120d，故而貧血有效治療后出現(xiàn)的雙峰現(xiàn)象可持續(xù)較長時間。（3）血小板直方圖：血細胞自動分析儀根據(jù)血小板體

14、積的大小和離散情況表現(xiàn)出不同的直方圖，其范圍主要分布在 2fl-30fl 之間。影響血小板直方圖的因素有：紅細胞碎片：可干擾血小板直方圖，使其出現(xiàn)異常。血小板聚集：直方圖顯示峰左側起點較高， 血液涂片上可見聚集成堆的血小板。 小紅細胞干擾：直方圖顯示峰的右側離橫坐標較高， 呈拖尾狀，血液涂片上可見較多的小紅細胞。血小板體積異?？s小：直方圖顯示峰左移， MPV 偏小，提示血樣中以小血小板為主。實驗評價1血細胞分析儀可分為電阻抗型、光電型、光散射型、電容型等。目前臨床實驗室應用最為廣泛的儀器為電阻抗型，主要完成紅細胞、 血小板各項參數(shù)的檢測及白細胞計數(shù)及三部法分類?？蛇M行五部法白細胞分類的儀器有：容量、電導、光散射型，阻抗與射頻聯(lián)合白細胞分類法，激光與細胞化學技術聯(lián)合白細胞分類計數(shù)和多角度偏振光散射白細胞分類技術。其中電阻抗型血液分析儀在臨床應用范圍最廣。2本法具有標