心肌三項(xiàng)I(cTnICK-MBMYO)SOP

1、1檢驗(yàn)?zāi)康臏y定血液樣本中的心肌肌鈣蛋白I （cTnl ）、肌酸激酶同工酶（CK-MB和肌紅蛋白（My。含量.2檢測原理本試劑采用免疫熒光雙抗體夾心法定量檢測人全血、血清或者血漿中心肌肌蛋白I （cTnl）、肌酸激酶同工酶（CK-MB和肌紅蛋白（MYO的濃度。將待測樣本加入緩沖液中混勻，樣品中的待測物和緩 沖液中的熒光標(biāo)記抗體結(jié)合形成反應(yīng)復(fù)合物。將混合樣本滴加至試劑卡的加樣孔中，在層析作用下，反應(yīng)復(fù)合物沿著硝酸纖維素膜向前擴(kuò)散，被固定在硝酸纖維素膜檢測線上對應(yīng)抗體所捕獲。 樣本中的待測物越多，檢測線上積聚的復(fù)合物越多，熒光抗體信號強(qiáng)度反應(yīng)了被捕獲的待測物數(shù)量。經(jīng)廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的

2、免疫熒光檢測儀，可檢測出樣本中待測物的濃度。檢測儀默認(rèn)的待測物檢測結(jié)果以ng/ml為單位。 3標(biāo)本準(zhǔn)備3.1 全血、血漿及血清樣本均可用于測試。3.2 全血收集：采用抗凝管采血，或在采血管里先加入抗凝劑（不建議使用EDTA以外的抗凝劑），將采集血樣加入并搖勻備用。樣本采集后應(yīng)盡快使用，若采血后不能在2個小時內(nèi)檢測的，應(yīng)放在 2-8 C保存，不得超過2天。3.3血漿/血清收集：取血后應(yīng)盡快分離血漿、血清，以免溶血。分離后的血漿、血清應(yīng)盡快進(jìn)行測試，如不能及時使用，應(yīng)放在 2-8 C保存，超過3天應(yīng)加入0.1%硫柳汞防腐，置-20 C冷凍保存，測試前注 意復(fù)溫，避免反復(fù)凍融。4檢測試劑4.1 名稱

3、：心肌三項(xiàng) I （cTnI/CK-MB/MYO）4.2 代碼：cTnI/CK-MB/MYO4.3 廠商：廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司4.4 組成：試劑卡：心肌肌鈣蛋白I單克隆抗體；肌酸激酶同工酶單克隆抗體；肌紅蛋白單克隆抗體；鼠抗IgG多克隆抗體；硝酸纖維素膜、玻璃纖維、吸水紙、PVC板及其他試紙條支持物緩沖液：磷酸鹽緩沖液（PBS,內(nèi)含表面活性劑及防腐劑ID芯片、使用說明書及合格證。4.5 儲存條件及有效期：緩沖液 2 8c保存，試劑卡4 30c保存，不得凍存，有效期 18個月。在室 溫保存可穩(wěn)定14天。試劑卡鋁箔袋開封后，應(yīng)在1小時內(nèi)盡快使用。5檢測儀器飛測免疫熒光檢測儀6操作步驟6.1

4、準(zhǔn)備：6.1.1 打開儀器左面的電源開關(guān)，儀器啟動并加載檢測系統(tǒng)，約 30s后進(jìn)入“萬孚免疫熒光層析定量檢 測系統(tǒng)”初始界面，若需要使用快捷模式測試，選擇“快捷測試”；若需使用標(biāo)準(zhǔn)模式測試，選擇“標(biāo)準(zhǔn)測試”；隨后儀器自檢，提示自檢成功后，點(diǎn)擊“卡出”按鈕。6.1.2 將試劑從儲存環(huán)境中取出，并平衡至室溫（25C）。6.1.3 6.1.3 從試劑盒中取出ID芯片，插入儀器的芯片端口。注：同項(xiàng)目批次試劑，成功完成一次檢測后，該項(xiàng)目批次的芯片數(shù)據(jù)已儲存至儀器系統(tǒng)中，儀器 能識別調(diào)用，該項(xiàng)目批次可不用插入ID芯片。6.1.4 撕開試劑卡鋁箔袋，取出試劑卡。6.2 取樣：全血/血漿/血清樣本：用移液器吸

5、取75ul樣本；6.3 混勻：打開離心管蓋，將樣本加入緩沖液中，充分混勻 1min。6.4 加樣：移液器加樣：用移液器從上述溶液中吸取75ul加入到試劑卡的加樣孔中。6.5 測試：6.5.1 “快捷測試”模式：試劑卡加樣15min （配合計時器）后，立即將試劑卡插入儀器卡槽中中，點(diǎn)擊“測試”按鈕，系統(tǒng)將自動讀卡并給出測試結(jié)果。6.5.2 “標(biāo)準(zhǔn)測試”模式：試劑卡加樣時，即點(diǎn)擊“測試”按鈕，并在倒計時1min內(nèi)將試劑卡插入儀器中，系統(tǒng)將繼續(xù)倒計時，并自動讀卡給出測試結(jié)果。6.5.3 點(diǎn)擊“打印”按鈕，系統(tǒng)將自動將測試結(jié)果打印在打印紙上。6.6 退卡：將用過的試劑卡從儀器中取出，并和多余的緩沖液及

6、移液器槍頭按傳染性物品進(jìn)行處理。 7室內(nèi)質(zhì)控采用免疫熒光檢測儀和配套使用的心肌肌鈣蛋白I定量檢測試劑盒（免疫熒光法）檢測質(zhì)控品（未提供），重復(fù)測定后計算精密度CV 15%相對偏差（Bias%）在 15%,則該儀器與試劑性能符合要求。8生物參考區(qū)間正常參考值：cTnI<0.3ng/ml CK-MB<5ng/ml Myo<58ng/ml建議各實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)際情況，建立自己的參考范圍9檢驗(yàn)結(jié)果的可報告區(qū)間cTnI:0.1-50ng/ml CK-MB:0.3-100ng/ml Myo:2.0-400ng/ml10.注意事項(xiàng)10.1 儀器使用注意事項(xiàng)10.1.1 除廠方提供的試劑卡外，不

7、要將其它物品放入試卡承載器中；10.1.2 不要將液體濺到檢測儀上，這可能會導(dǎo)致系統(tǒng)失效；10.1.3 切勿將檢測儀從高處跌落或其他碰撞；10.1.4 不要使檢測儀處于機(jī)械顫動的環(huán)境中；10.1.5 沒有萬孚公司或其銷售代表的書面授權(quán)，請勿拆卸檢測儀；10.1.6 不要在檢測儀上放置重物。這將導(dǎo)致檢測儀性以下降或機(jī)械損壞；10.1.7 只能使用檢測儀專用的電源適配器；10.1.8 請在第四章規(guī)定的環(huán)境中使用檢測儀；10.1.9 測試結(jié)果作為預(yù)篩選參考，測試結(jié)果應(yīng)由專業(yè)醫(yī)療人員進(jìn)解釋；10.1.10 應(yīng)由專業(yè)人士操作使用。10.2 試劑卡使用注意事項(xiàng)10.2.1 本品為一次性使用體外診斷試劑，請

8、勿重復(fù)使用，過期產(chǎn)品請勿使用；10.2.2 在收集、處置、儲存、混勻樣本和檢測過程中應(yīng)采取適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)措施；10.2.3 產(chǎn)品在使用前請不要開封，不要使用有明顯損壞的試劑盒、包裝有破損的試劑卡；10.2.4 不同批號的試劑不能混用，ID芯片與試劑卡不得混批號使用；10.2.5 試劑卡及其組件僅適用于萬孚檢測儀；10.2.6 切勿把表面被其它液體沾濕的試劑卡插入檢測儀，否則會污染或損壞儀器。用過的試劑卡請妥善處理，不要隨意丟棄。10.2.7 應(yīng)避免實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過高，低溫保存的試劑卡需要恢復(fù)到室溫后再打開，以免吸潮。10.2.8 試劑卡和檢測儀在使用時應(yīng)避開顫動和電磁環(huán)境；在正常使用中儀器本身產(chǎn)生顫

9、動屬正?，F(xiàn)象； 檢測進(jìn)行時請勿拔出ID芯片。10.2.9 建議使用新鮮樣本，若樣本中有顯溶血或血凝塊則會干擾測試和導(dǎo)致錯誤結(jié)果，切勿使用。10.2.10 鋁箔袋內(nèi)有干燥劑，不得內(nèi)服。10.2.11 與所有診斷試劑一樣，最終的確認(rèn)應(yīng)由醫(yī)生綜合各檢測指標(biāo)及臨床癥狀后作出。10.2.12 使用本試劑過程中如有問題或建議，請與廠家聯(lián)系。11實(shí)驗(yàn)室解釋11.1 發(fā)生胸痛時請結(jié)合其它心肌標(biāo)志物檢測，可作為早期預(yù)警和輔助診斷心肌梗塞的指標(biāo)。11.2 人血cTnl的測定可提示有急性心肌梗死風(fēng)險，此值在 3-6小時升高，14-20小時達(dá)到高峰值，5-7天 回到正常水平。11.3 人血肌酸激酶同工酶的測定提示該病

10、人患心肌梗死風(fēng)險。在心肌梗死發(fā)生后8小時值升高；8-24小時達(dá)到高峰；3天后回到正常水平。11.4 人血Myo的測定提示有急性心肌木M死風(fēng)險，此值在3小時內(nèi)升高，5-12小時達(dá)到高峰值，18-30小時回到正常水平，發(fā)生胸痛超過2小時請結(jié)合其它心肌標(biāo)志物檢測。項(xiàng)目名稱檢測結(jié)果臨床應(yīng)用建議cTnl<0.3ng/mL正常水平。> 0.3ng/mL提示有急性心肌梗死風(fēng)險，此值在 3-6小時升高，14-20小時達(dá)到高峰 值，5-7天回到正常水平，發(fā)生胸痛 時請結(jié)合其它心肌標(biāo)志物檢測。CK-MB< 5ng/mL初步確定該病人沒患心肌梗死> 5ng/mL提示該病人患心肌梗死風(fēng)險，注： 在心肌梗死發(fā)生后8小時值升高； 8-24小時達(dá)到高峰；3天后回到正常 水平。Myo<58ng/mL正常水平。> 58ng/mL提示有急性心肌梗死風(fēng)險，此值在3 小時內(nèi)升高，5-12小時達(dá)到高峰值， 18-30