動物細胞融合

1、2.2.2 動物細胞融合動物細胞融合 與單克隆抗體與單克隆抗體齊河一中齊河一中 何濤何濤溫故而知新溫故而知新植物細胞雜交植物細胞雜交（馬鈴薯番茄）（馬鈴薯番茄）融合融合的原的原生質(zhì)生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細細胞胞壁壁植物細胞的融合植物細胞的融合雜雜種種細細胞胞AB雜雜種種植植株株脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導導植物細胞植物細胞A植物細胞植物細胞B傳說中的天馬能否利用細胞工程傳說中的天馬能否利用細胞工程技術(shù)得以實現(xiàn)呢？技術(shù)得以實現(xiàn)呢？三、動物細胞融合三、動物細胞融合1.1.概念：概念： 動

2、物細胞融合也稱細胞雜交，是指動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩兩個或多個個或多個動物細胞結(jié)合形成動物細胞結(jié)合形成一個一個細胞的過細胞的過程。程。 融合后形成的具有兩個或多個細胞融合后形成的具有兩個或多個細胞遺傳信息的遺傳信息的單核細胞單核細胞，稱為雜交細胞。，稱為雜交細胞。2 2、動物細胞融合基本原理：、動物細胞融合基本原理： 與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，即細胞膜的流動性。同，即細胞膜的流動性。3、誘導方式、誘導方式物理法：物理法：化學法：化學法：生物法：生物法： 滅活的病毒滅活的病毒. .過程：過程：、植物體細胞雜交和動物細胞融合的比較、植物體細胞雜交和動物

3、細胞融合的比較比較項目比較項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合原理原理細胞融合方法細胞融合方法誘導方法誘導方法用途用途獲得獲得植物新品種植物新品種細胞膜的細胞膜的流動性流動性細胞膜的流動性細胞膜的流動性細胞的全能性細胞的全能性去除細胞壁去除細胞壁后誘后誘導原生質(zhì)體融合導原生質(zhì)體融合使細胞分散后使細胞分散后誘導細胞融合誘導細胞融合物理（離心、振物理（離心、振蕩、電刺激）蕩、電刺激）化學（聚乙二醇）化學（聚乙二醇）電激、電激、PEG、滅活的病毒滅活的病毒制備單克隆抗體制備單克隆抗體、動物細胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史告訴、動物細胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史告訴我們：科學技術(shù)是不斷發(fā)展的。那么，

4、我們：科學技術(shù)是不斷發(fā)展的。那么，實現(xiàn)動物細胞融合有什么意義呢？實現(xiàn)動物細胞融合有什么意義呢？打破生殖隔離，使遠緣雜交成為可能；打破生殖隔離，使遠緣雜交成為可能；廣泛應用多個學科領(lǐng)域；廣泛應用多個學科領(lǐng)域；重要用途：重要用途：四、單克隆抗體四、單克隆抗體 自主閱讀自主閱讀P52：傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是傳統(tǒng)的抗體的生產(chǎn)方法及缺陷是什么？什么？1.B1.B淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生特異性抗淋巴細胞受抗原刺激后，可以產(chǎn)生特異性抗體。體。2. 2.動物在免疫反應過程中，體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗動物在免疫反應過程中，體內(nèi)產(chǎn)生特異性抗體種類可達百萬種以上，每種抗體對特定的抗原體種類可達百萬種以上，每種抗

5、體對特定的抗原具有特異性免疫作用。具有特異性免疫作用。3. 3.但但每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體每一個淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。4. 4.在體外，在體外，一個淋巴細胞是不可能增殖的。一個淋巴細胞是不可能增殖的。產(chǎn)量低、純度低；產(chǎn)量低、純度低；而且制備抗體特異性差。而且制備抗體特異性差。分析：分析： B B淋巴細胞與抗體的關(guān)系淋巴細胞與抗體的關(guān)系、單克隆抗體、單克隆抗體McAb（概念）（概念） 由單個由單個B B淋巴細胞經(jīng)過淋巴細胞經(jīng)過無性繁殖無性繁殖（克隆），（克隆），形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)形成基因型相同的細胞群，這一細胞群所產(chǎn)生的生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體化學

6、性質(zhì)單一、特異性強的抗體稱為單稱為單克隆抗體?？寺】贵w。 那么，如何那么，如何大量獲得化學性質(zhì)單一、特異大量獲得化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體性強的抗體？（即？（即單克隆抗體單克隆抗體）一個一個B B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體淋巴細胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖骨髓瘤細胞（癌細胞）能無限增殖雜種細胞雜種細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)動物細胞培養(yǎng)技術(shù)、設計方案：、設計方案：動物細胞融合動物細胞融合單克隆單克隆抗體抗體既能產(chǎn)生特異性抗既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖體，又能大量繁殖雜交瘤細胞雜交瘤細胞動物細胞動物細胞融合技術(shù)融合技術(shù)B 、BB 、B瘤瘤 、瘤瘤、瘤瘤 、瘤、瘤只有雜種細

7、只有雜種細胞才能活胞才能活動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)3.3.單克隆抗體制單克隆抗體制備過程備過程獲得產(chǎn)生相應抗獲得產(chǎn)生相應抗體的體的B淋巴細胞淋巴細胞過程總結(jié)過程總結(jié)第一步：免疫機體誘導相應第一步：免疫機體誘導相應B淋巴細胞的產(chǎn)生淋巴細胞的產(chǎn)生第二步：獲取第二步：獲取B淋巴細胞和骨髓瘤細胞誘導融合淋巴細胞和骨髓瘤細胞誘導融合第三步：在選擇培養(yǎng)基上選擇雜交瘤細胞第三步：在選擇培養(yǎng)基上選擇雜交瘤細胞第四步：培養(yǎng)雜交瘤細胞從中挑選出能產(chǎn)生所第四步：培養(yǎng)雜交瘤細胞從中挑選出能產(chǎn)生所 需抗體的雜交瘤細胞需抗體的雜交瘤細胞第五步：將該雜交瘤細胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)第五步：將該雜交瘤細胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng) 增增殖，從中提取單克隆抗體增增殖，從中提取單克隆抗體4 4、單克隆抗體的、單克隆抗體的特點和應用特點和應用與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，單克隆抗體特異性強，特異性強，靈敏度高，產(chǎn)量高，靈敏度高，產(chǎn)量高，優(yōu)越性十分明顯。優(yōu)越性十分明顯。應用：應用：特點：特點：可用于作為診斷試劑：有準確，高效，快速的可用于作為診斷試劑：有準確，高效，快速的優(yōu)點優(yōu)點可用于疾病治療可用于疾病治療可用于運載藥物（作為運載對應疾病的藥物的可用于運載藥物（作為運載對應疾病的藥物的 “生物導彈生物導彈“。）。）“生物導彈生物導彈”單克隆抗體藥物單克隆抗體藥物課堂小結(jié)課堂小結(jié)兩個過程兩個過程動物細胞融合過程動物細胞融