平胃散對(duì)心梗后心衰大鼠濕阻中焦證醛固酮的影響

1、平胃散對(duì)心梗后心衰大鼠濕阻中焦證醛固酮的影響【摘要】目的 觀察平胃散心衰濕阻中焦證大鼠模型的ALD的變化，從而了解平胃散對(duì)心衰的作用。方法 塑造心衰模型、心衰濕阻中焦證模型，將大鼠分為正常對(duì)照組、心衰模型組、心衰濕阻中焦證模型組、平胃散組，采用放免法檢測(cè)ALD的濃度。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，心衰模型組和心衰濕阻中焦證模型組ALD明顯升高，具有顯著性差異（P0.01）；經(jīng)治療后，平胃散組與心衰模型組及心衰濕阻中焦證模型組比較，ALD均明顯降低，具有顯著性差異（P0.01）。結(jié)論 平胃散能明顯降低ALD的分泌，使心衰濕阻中焦證大鼠潴留的水、鈉得以排泄，從而改善心衰的癥狀。 【關(guān)鍵詞】 平胃散；心衰

2、；濕阻中焦證；醛固酮；大鼠 The Effect of Pingweisan on ALD of the Syndrome of Damp Blockage of Middle Energizer in Rats with Congestive Heart Failure after Myocardial Infarction LIU Defang, YU Zhihe, GUO Mingyang, LUO Yong, ZHANG Jun, Chengdu Military General Hospital, Chengdu, Sichuan Province 610083 To study t

3、he effect of Pingweisan on congestive heart failure by observing the change of ALD of the syndrome of damp blockage of middle energizer in rats with congestive heart failure with the treatment of Pingweisan. The congestive heart failure model and the model of damp blockage of middle energizer of hea

4、rt failure were set up; the rats were divided into 4 groups: the control group, the congestive heart failure group, the damp blockage of middle energizer of heart failure group and the Pingweisan group; immunoassay was applied to detect the ALD density. ALD increased obviously in the congestive hear

5、t failure group and the damp blockage of middle energizer of heart failure group, with significant difference (P0.01) compared with that in the control group, after treatment of Pingweisan, except the control group, the other 3 groups all showed an obvious decrease of ALD with significant difference

6、 (P0.01). Pingweisan can obviously decrease the secretion of ALD and can help the excretion of water and Na+ in the rats with the syndrome of damp blockage of middle energizer so as to improve the symptoms of congestive heart failure. Pingweisan congestive heart failure syndrome of damp blockage of

7、middle energizer aldosterone (ALD) rat 目前多數(shù)中醫(yī)醫(yī)家認(rèn)為心衰屬本虛標(biāo)實(shí)病證，以氣虛、陰虛、陽(yáng)虛為本，血瘀、痰飲、水濕為標(biāo)，治療講求急則治標(biāo)，所以，多從痰飲、水濕入手。濕阻中焦證是各種內(nèi)外病因?qū)е屡K腑調(diào)節(jié)水液的功能失常，使津液輸布不利，聚而為濕，困阻脾胃而形成的。濕阻中焦證可出現(xiàn)于多種疾病中，當(dāng)然也不排除與水濕有密切關(guān)系的心衰。醛固酮（ALD）是腎上腺皮質(zhì)球狀帶合成和分泌的類固醇激素，是電解質(zhì)排泄的重要調(diào)節(jié)因子，其作用是保鈉排鉀，在維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定中起著重要作用。平胃散為芳香化濕的代表方，實(shí)驗(yàn)研究表明平胃散能明顯抑制ALD的分泌。因此，本人制作了心衰大鼠

8、濕阻中焦證模型，并觀察平胃散對(duì)其醛固酮的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。 1 材料與方法 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組 選用健康雄性Wister大鼠40只，體重230-250g，由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為正常對(duì)照組、心衰模型組、心衰濕阻中焦證模型組、平胃散組。每組10只大鼠。動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料由成都中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。 1.2 主要試劑 ALD放免試劑盒，天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司生產(chǎn)。 1.3 儀器設(shè)備 低溫離心機(jī)（ALLERGRAGR型，美國(guó)貝克曼）；-放射免疫計(jì)數(shù)器（FJ-2008PS型）；美國(guó)寶特酶標(biāo)儀（ELX808）；芬蘭中國(guó)數(shù)字顯示移液器（芬蘭雷勃集團(tuán)中國(guó)總部生產(chǎn)）；賽多利斯B

9、P-61型電子天平（德國(guó)，分辨率0.1mg）。平胃散（源自太平惠民和劑局方，原藥材購(gòu)自成都同仁堂藥店）。 1.4 平胃散水煎劑的制備 平胃散藥物組成：蒼術(shù)15g，厚樸9g，陳皮9g，甘草4g。將藥物加涼水300ml浸泡30min后，加水500ml煎開10min，濾出藥液；又加水500ml煎開15min，濾出藥液；將兩次濾液合并置濃縮得400ml，制成0.3g/ml濃度的中藥煎劑，置于4冰箱里備用。 1.5 心衰大鼠模型的建立 心衰大鼠模型制備仿照文獻(xiàn)1方法進(jìn)行，選用Wister大鼠30只， 1%戊巴比妥鈉4550mg/kg大鼠腹腔注射麻醉，行氣管插管；連接小動(dòng)物呼吸機(jī)，呼吸頻率80次/分，吸氣

10、與呼氣時(shí)間比1：2.0。連接心電圖，左側(cè)開胸，暴露心臟，用6/0絲線在冠狀動(dòng)脈起始后23mm處結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支，觀察標(biāo)準(zhǔn)導(dǎo)心電圖，出現(xiàn)ST段和/或T波抬高或降低，心臟局部顏色變暗等心肌缺血變化作為結(jié)扎成功的標(biāo)志，關(guān)胸。室內(nèi)飼養(yǎng)，自由進(jìn)食常規(guī)飼料及飲水，連續(xù)飼養(yǎng)8周。 1.6 心衰濕阻中焦證大鼠模型的建立 在心衰模型建立的基礎(chǔ)上，隨機(jī)取20只大鼠進(jìn)行濕阻證造模，濕阻中焦證模型制備仿照文獻(xiàn)2方法，具體參考文獻(xiàn)3的步驟進(jìn)行。正常對(duì)照組大鼠于正常環(huán)境中喂養(yǎng)，溫度1925，相對(duì)濕度4265，自由進(jìn)食飲水。 1.7 造模后處理 動(dòng)物造模成功后，隨機(jī)取10只心衰濕阻中焦證模型組大鼠、10只心衰模型組大鼠

11、、10只正常對(duì)照組大鼠處死，測(cè)定ALD。剩下10只濕阻模型大鼠于正常環(huán)境中喂養(yǎng)，以平胃散0.6mg/100g原藥材劑量每日灌胃1次，于第四天灌胃后處死，測(cè)定血漿ALD。 1.8 指標(biāo)檢測(cè)方法 采用大鼠股動(dòng)脈放血法取新鮮全血4ml，EDTA抗凝，并加抑肽酶400U，以4 2000r/min離心分離血漿，-30保存，以備測(cè)定ALD。按試劑盒要求用放免法測(cè)定ALD的濃度。 1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，各組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以s表示，組間均數(shù)比較采用單因數(shù)方差分析。 2 結(jié) 果 （見表1） 表1 各組ALD的濃度比較注：P與正常對(duì)照組比較，P0.01；與心衰模型組及心衰濕阻模型

12、組比較，P0.05。 3 討 論 西醫(yī)認(rèn)為心衰（CHF）的基本發(fā)病機(jī)制是心肌細(xì)胞的異常，即不同因素誘導(dǎo)心肌細(xì)胞的基因表達(dá)異常，引起細(xì)胞的肥大、細(xì)胞的死亡（包括凋亡）及間質(zhì)成分的改變及纖維化。新近研究表明,在CHF發(fā)展過(guò)程中,循環(huán)激素起著重要的作用，特別是腎素-血管緊張素 -醛固酮系統(tǒng)(RAS)，在發(fā)揮代償作用的同時(shí)，由于過(guò)度激活而引起的血管收縮和水鈉潴留，進(jìn)一步使心臟的前后負(fù)荷增加，造成惡性循環(huán)，從而使體、肺循環(huán)瘀血加重，心衰也隨之加重。已有研究證實(shí),血漿RAS激活程度與CHF嚴(yán)重程度正相關(guān)，可作為CHF病情評(píng)估和藥物療效常規(guī)評(píng)價(jià)的補(bǔ)充4，其中以Ag、ALD最為重要。并且Ag、ALD激活可引起

13、心肌細(xì)胞壞死，繼以修補(bǔ)性纖維化和瘢痕形成，造成心肌細(xì)胞纖維化。Losartan治療老年人心衰評(píng)估實(shí)驗(yàn)(ELITE)結(jié)果表明, Ag的降低能明顯降低死亡危險(xiǎn)5。同時(shí), Ag、ALD的降低除了可以減輕心室負(fù)荷，還能減輕心肌肥厚和纖維化，逆轉(zhuǎn)心室重構(gòu)6，也可以降低血管對(duì)交感神經(jīng)的反應(yīng)性，從而直接擴(kuò)張血管，改善心功能。 本研究結(jié)果顯示，心衰模型組和心衰濕阻中焦證模型組的ALD皆明顯升高，與對(duì)照組比較有顯著性差異，說(shuō)明心衰和濕阻中焦證模型是成功的。心衰模型為結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支所致，由于心排血量降低，腎血流量隨之減低，RAS被激活。其有利的一面是心肌收縮力增強(qiáng)，周圍血管收縮維持血壓，調(diào)節(jié)血液的再分配，保

14、證心、腦等重要臟器的血液供應(yīng)。同時(shí)促進(jìn)醛固酮分泌，使水、鈉潴留7。現(xiàn)代研究平胃散能促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)潴留的鈉排泄，起到保鉀排鈉的作用8。本研究結(jié)果還顯示平胃散能明顯降低ALD的分泌，從而改善心衰疾病的癥狀。 平胃散為芳香化濕的代表方和基礎(chǔ)方，一般用于治療胃腸疾病，本研究表明其對(duì)心衰疾病的RAS有一定影響作用，正好印證了中醫(yī)“胃絡(luò)通于心”的理論?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 倪新海，郜朝暉.提高心肌梗塞-心衰大鼠模型動(dòng)物存活率的實(shí)驗(yàn)研究.中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志，1999，9（4）：2062092 邱賽紅.芳香化濕藥開胃作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究-對(duì)濕困動(dòng)物模型的影響J.中藥藥理與臨床，1997，13（2）：13 黃秀深，趙 燕，張

15、力華等.中焦?jié)褡枳C大鼠紅細(xì)胞Na-K-ATP酶活性研究J.成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，23（4）：234 Dickstein K,Larsen AL,Bonarjee V,et al.Plasma proatrial natriuretic factor is predictive of clinical status inpatients with congestive hear failureJ.Am J Carciol,1995,76(10):679683.5 Pitt B,Segal R,Martines FA,et al.Randomised trial of losartan versus captopril in patients over 65 with heart failure.Lacent,1997,349:747752.6 Weber KT,Sun Y,Campbel