病理學(xué)技士專業(yè)實(shí)踐能力考試大綱知識(shí)點(diǎn)

1、專業(yè)實(shí)踐能力一、病理解剖技術(shù)1.病理尸體解剖的方法和步驟 （1）病理尸體解剖的準(zhǔn)備（2）體表檢查（一）體表檢查稱體重，量體長(zhǎng)，觀察發(fā)育、營(yíng)養(yǎng)狀況，檢查體表有無(wú)黃疸，發(fā)疳，出血點(diǎn)，疤痕，創(chuàng)口等，及其部位，大??；眼、耳、鼻、口腔等有無(wú)潰瘍、分泌物或液體流出，外生殖器有病變，淺表淋巴結(jié)腫大否；有無(wú)尸冷、僵、腐敗現(xiàn)象。（3）胸腹腔檢查（二）體腔檢查1， 胸、腹壁皮膚切開(kāi)及剝離：根據(jù)情況，選擇Y形、T形或直線切口切開(kāi)皮膚。切開(kāi)腹膜時(shí)，先切一小孔，插入兩指，再?gòu)膬芍钢g剪開(kāi)，以免劃破內(nèi)臟。剝離胸壁皮膚時(shí)，應(yīng)注意將胸肌一并剝離，但勿損及肋間肌。2， 腹腔檢查：檢查腹腔內(nèi)有無(wú)積液和積氣，腹膜情況，各器官的位置

2、。與關(guān)系，有無(wú)粘連，肝脾腫大否，其邊緣在鎖骨中線肋緣下及劍突下幾厘米，檢查左右橫膈的高度。（三）胸腔檢查1、必要時(shí)在胸腔未切開(kāi)前檢查有無(wú)氣胸?？捎凶⑸淦魑螅诘谝焕唛g處自胸壁刺入，觀察有無(wú)氣體自水面下上升。2.在肋骨軟骨聯(lián)接線內(nèi)側(cè)約0.5cm處，將第二肋骨到肋弓的軟骨切斷，緊沿胸骨后壁將橫及縱隔割離，注意勿損及心包及大血管，然后檢查胸腔有無(wú)積液，其量及性質(zhì)，必要時(shí)涂片檢查與細(xì)菌培養(yǎng)。3.切斷第一肋骨，分離胸鎖關(guān)節(jié)，將胸骨及肋骨取下，觀察各器官的位置，兩肺表面情況，胸腺是否已經(jīng)脂肪化。鋸開(kāi)胸骨，看骨髓造血情況。4.自心尖部向上，作人形剪開(kāi)心包，檢查腔內(nèi)液量，心包膜內(nèi)壁情況，必要時(shí)取心血作細(xì)菌

3、培養(yǎng)。5.疑有空氣體栓塞時(shí)，將心包剪開(kāi)一小口，用鑷子拉緊切口兩側(cè)心包膜，心包腔內(nèi)注滿水，然后，在水上剪開(kāi)右心房及肺動(dòng)脈，觀察有無(wú)氣泡逸出，或者先結(jié)扎進(jìn)出心臟的大血管，取出心臟，淹沒(méi)于水下剪開(kāi)右心，觀察有無(wú)氣泡逸出。（4）內(nèi)臟器官的取出及檢查（四）各臟器的取出 各器官取出前，應(yīng)仔細(xì)檢查周圍情況及與其他器官的關(guān)系，檢查有困難時(shí)，一時(shí)不能明確者，可與其它器官一并取出，然后再仔細(xì)檢查。檢查各器官前，應(yīng)稱其重量，量大小。1.心臟的取出與檢查，在體內(nèi)剖開(kāi)右心，檢查肺動(dòng)脈有無(wú)栓塞后，將心臟提起，從根部或心包膜內(nèi)壁分別剪斷上、下腔靜脈，（于距瓣膜2cm處）肺靜脈和主動(dòng)脈（于距瓣膜5cm處），取出心臟，（若有心

4、、血管畸形，則應(yīng)將心臟連同肺臟一并取出）。檢查心臟增大否，外膜光滑度，有無(wú)滲出物等，心臟按血流方向剖開(kāi)，測(cè)量各瓣膜的周徑及左右心室的厚度。 A：右心剖開(kāi)法：第一步，用刀或剪將右心從上、 下靜脈入口處直線剖開(kāi)，如欲避免破壞竇房結(jié)，從下腔靜脈向上，剖至房室間溝上1cm處，向右心耳剪開(kāi)，保持上腔靜脈口完整，上腔靜脈至少保留1cm。第二步，從此線中點(diǎn)沿心臟右緣剖至心尖部，檢查三尖瓣，并用手指檢查動(dòng)脈有無(wú)血栓或狹窄。第三步，從心尖部沿心室中隔剖至肺動(dòng)脈，檢查肺動(dòng)脈瓣。 B：左心剖開(kāi)法：第一步，用刀或剪將左心房從左、右靜脈入口之間作直線剖開(kāi)，以手指檢查二尖瓣是否狹窄。第二步，從此線的左端沿心臟左緣剖開(kāi)至心

5、尖剖。第三步，從心尖部沿心室中隔，避開(kāi)肺動(dòng)脈剖開(kāi)肺動(dòng)脈剖開(kāi)主動(dòng)脈，檢查二尖瓣與主動(dòng)脈瓣。剖開(kāi)有瓣膜病變的心臟時(shí)，應(yīng)注意避免破壞有病變的瓣膜。心臟剖開(kāi)后，檢查心肌厚度、硬度、色澤、心內(nèi)膜光滑度，瓣膜周圍有無(wú)增厚，及贅生物，有無(wú)狹窄或關(guān)閉不全，檢查冠狀動(dòng)脈開(kāi)口情況。2.肺臟的取出：可由肺根部將主支氣管和血管切斷取出，或與頸部器官一并取出。 如兩層胸膜間有粘連，需細(xì)心分離，勿損及肺，如粘連牢固，可連同胸膜壁層一并剝離，取出肺臟。取出后檢查其表面情況。切開(kāi)檢查肺切面的改變，有無(wú)病灶、氣腫、萎陷等，肺門淋巴結(jié)腫大否，切面情況。3.頸部器官的取出：A，充分分離頸部皮膚與軟組織，用長(zhǎng)刀刺入割斷舌下系帶，緊沿

6、下頜骨內(nèi)面向左、右盡量地將下頜與舌間的軟組織分離。B，將舌拉下，自硬腭后緣割離軟腭，注意應(yīng)將兩側(cè)扁桃體完全取下。C，將舌、咽、喉頭、氣管、食管、肺拉下于橫膈上將食管、下腔靜脈及主動(dòng)脈切斷，連同胸腔器官一并取出。4.腹腔及盆腔器官的取出：一般先將脾臟摘出，繼之取出小腸、腎上腺、肝、膽囊、胃、十二指腸、胰，最后取出腎及盆腔器官。 將脾臟提至腹腔前方，割斷脾門部血管，取出脾臟。檢查其大小，重量，硬度，表面色澤。切面有無(wú)外翻；有無(wú)糊狀物刮下，脾門血管及脾小體、脾小梁的情況等。 小腸與大腸的取出前， 應(yīng)檢查腸系膜 淋巴結(jié)及血管，找出空腸的起端，切斷，自腸系膜附著處將腸割下，直至直腸處將其切斷取出，腸的斷

7、端應(yīng)鉗緊或結(jié)扎，以免糞便污染腹腔。待其他器官檢查完畢后再檢查腸。先量其長(zhǎng)度，在腸系膜附著處沿縱軸剪開(kāi)腸腔，檢查粘膜有無(wú)病變，腔內(nèi)有無(wú)寄生蟲(chóng)等，必要時(shí)可保持腸與腸系膜的關(guān)系，并將其一并取出。 十二指腸在原位從前面剪開(kāi)，用手?jǐn)D壓膽囊：看膽道通暢否。沿胃大彎剪開(kāi)胃，檢查粘膜病變，將胃及十二指腸從后壁分離，與胰臟一并取出，在檢查胰臟前，注意觀察脾靜脈有何變化。檢察胰臟重量，大小，硬度，作多橫切面，檢查切面情況。小心分離腎上腺周圍組織，取出腎上腺，分離右側(cè)腎上腺時(shí)，將肝向上方推，注意分離與皮膚上腺相連的肝組織，腎上腺取出后，作多人橫切面，檢察皮質(zhì)與髓質(zhì)的特征，有無(wú)出血等。取出肝與膽囊前，應(yīng)仔細(xì)檢查膽管、

8、門靜脈、肝靜脈，然后剪斷肝門的膽管及血管，分離鐮狀韌帶，將門靜脈及肝背部部一段下腔靜脈與肝一并取出。檢查肝的大小，重量，硬度，色澤，注意檢查肝靜脈及腔靜脈，切面外翻否，小葉結(jié)構(gòu)清楚否及有無(wú)其它病變。分離腎周圍脂肪結(jié)締組織，將腎提出，凸面向上剖開(kāi)，注意包膜剝離要難否，檢查表面的性狀，切面皮質(zhì)及髓質(zhì)紋理是否清楚，腎盂粘膜有無(wú)病變。然后連輸尿管一起取出腎臟。盆腔內(nèi)器官的取出：先分離腹膜及周圍組織，再取盆腔器官，男性可將直腸、膀胱一并取出，結(jié)腸斷端應(yīng)結(jié)扎或縫合。（5）尸檢后的修復(fù)尸檢時(shí)應(yīng)盡少破壞尸體的外形，檢查完畢后，應(yīng)吸去體腔內(nèi)的血水，凡不需保留的器官，均應(yīng)放回體腔內(nèi)，并應(yīng)以木屑或其它吸水物質(zhì)填塞，

9、逢合切口?？p合時(shí)要盡量注意整副尸體外形，將體表洗凈擦干，包裹或穿著妥善后放入尸箱內(nèi)。（6）微生物和寄生蟲(chóng)檢查采取細(xì)菌培養(yǎng)的方法1.心血培養(yǎng)標(biāo)本：1.1用無(wú)菌鑷子提起右心耳，在下腔靜脈入口處的上方進(jìn)行燒灼消毒，（用一有柄銅片在酒精燈上燒紅，燒灼器官表面，面積約2*2cm）.1.2用無(wú)菌吸管或注射器從消毒部位插入，順下腔靜脈入口推進(jìn)，取血液2-3ml1.3在無(wú)菌操作下，將吸取之血液立即注入無(wú)菌的肉湯培養(yǎng)基，或有玻璃珠的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，立即洗凈吸管或注射器，以免凝固，若在右心取不到血液，可從下腔靜脈吸取。1.4腔（胸腔、腹腔）內(nèi)滲出液，心包腔內(nèi)積液，必要時(shí)作細(xì)菌培養(yǎng)，采取液體時(shí)應(yīng)盡量避免污染。采取腦脊液培

10、養(yǎng)時(shí)，于尸檢前用無(wú)菌手術(shù)，在第二及第三腰椎間隙作穿刺，取腦脊液2-3ml,置于無(wú)菌試管內(nèi)送檢。1.5腸內(nèi)容物培養(yǎng)：在回腸末端及乙狀結(jié)腸下端，或病變明顯處的漿膜面經(jīng)燒灼滅菌后剪開(kāi)，用棉花拭子插入腸腔內(nèi)，在粘膜面擦取粘液、滲出物粘膜，放入無(wú)菌試管或培養(yǎng)基內(nèi)送檢。1.6臟器細(xì)菌培養(yǎng)：臟器表面灼燒滅菌，切取不小于2*2*1.5cm的組織塊，裝無(wú)菌容器內(nèi)送檢。1.7腦組織作病毒分離：用無(wú)菌手術(shù)取大腦皮質(zhì)，中腦，海馬，腦橋組織塊，每塊不小于2*2*1.5cm，以冰瓶保藏迅速送檢。路途遙遠(yuǎn)者，可將檢材放入無(wú)菌甘油瓶?jī)?nèi)，在低溫下送檢。（7）化學(xué)和毒物檢查（8）尸檢記錄尸體檢時(shí)所見(jiàn)由尸檢室技術(shù)人員或指定工作人員

11、，按剖檢者口述填寫臨時(shí)記錄單，必要時(shí)攝影記錄，做為書寫尸檢記錄的基礎(chǔ)二、病理大標(biāo)本制作技術(shù)1.大體標(biāo)本的收集、取材、固定和保存（1）收集(尸體解剖和活體組織檢查、其次是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的模型收集標(biāo)本)（2）取材（越新鮮越好，標(biāo)本應(yīng)仔細(xì)處理，盡可能的修掉多余的組織）（3）固定（甲醛氣飽和于水的甲醛液，濃度40%；體積10%，濃度4%的甲醛固定，10%福爾馬林）（4）保存（含血多的標(biāo)本用凱氏法；膽色素用柯氏法；虐色素、脂肪等標(biāo)本用甲醛）4.大體標(biāo)本的裝缸與封存法（封存在玻璃或有機(jī)玻璃標(biāo)本缸）:修整標(biāo)本、適當(dāng)標(biāo)本缸、標(biāo)本支架、拴好的標(biāo)本略加沖洗、封口（松香蜂蠟、502膠、玻璃膠封口法）三、組織的取材、固定方

12、法和切片技術(shù)2.組織固定（1）固定的方法單純固定液（甲醛、重鉻酸鉀、苦味酸、升汞、醋酸、鉻酸、餓酸、丙酮、三氯醋酸、乙醇）和混合固定液（B-5液淋巴組織、Bouin液結(jié)締組織三色染色、Carnoy液染色體、Muller液媒染和硬化組織、Orth液胚胎神經(jīng)脂肪、PFG液肽類抗原、PLP和PLPD液糖類組織、Rossman液糖原、Zenker液細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)三色染色、4%多聚甲醛免疫組化、甲醛鈣液脂肪組織組織化學(xué)、乙醇甲醛皮下組織肥大細(xì)胞、乙醚乙醇細(xì)胞涂片、中性緩沖甲醛液免疫組化、中性甲醛液常用）（2）固定后洗滌：一般沖洗24h小組織210h（1用水配制的固定液固定的組織洗滌法、2用含乙醇固定液固定

13、的組織洗滌法、3特殊固定液固定的組織洗滌法）3.組織的脫水（1）脫水的方法：（2）注意事項(xiàng)乙醇（純乙醇不宜過(guò)長(zhǎng)否則組織過(guò)度硬化）丙酮（收縮比乙醇更嚴(yán)重）異丙醇、過(guò)氧己環(huán)、四氫呋喃、環(huán)己酮、松脂醇4.組織的透明 （1）透明的方法（2）注意事項(xiàng)二甲苯（易使組織變硬變脆）氯仿（易揮發(fā)和吸收水分）香柏油（透明時(shí)間長(zhǎng)）松油醇、丁香油、冬青油5.組織的浸蠟及組織處理程序（1）浸蠟的方法（2）石蠟的應(yīng)用（3）自動(dòng)組織處理機(jī)的應(yīng)用（4）組織處理程序人工操作程序自動(dòng)組織處理機(jī)程序6.骨和含鈣組織脫鈣方法（1）脫鈣的方法 硝酸脫鈣法：10%硝酸水溶液、硝酸10ml和10%甲醛90ml的混合液。鹽酸脫鈣法：鹽酸8.

14、5ml，甲酸5ml，氯化鋁7g，蒸餾水100ml；鹽酸和甲酸各20ml，蒸餾水100ml。8.石蠟切片法（1）切片前準(zhǔn)備和黏附劑：固定后標(biāo)本經(jīng)脫水、透明、浸蠟和包埋后，制成蠟塊。鋒利的刀片；充足的經(jīng)處理的載玻片和恒溫烤箱，毛筆和鉛筆。（2）切片制作方法：組織經(jīng)石蠟包埋制成蠟塊，用切片機(jī)制成切片的過(guò)程。（3）切片的注意事項(xiàng)：組織的固定和取材；組織的脫水、透明和浸蠟；切片；切片刀和切片機(jī)；特殊切片的制作。9.冰凍切片方法（1）直接冰凍切片法：恒冷箱切片；半導(dǎo)體制冷冷凍切片法；甲醇制冷器；二氧化碳冷凍法。（2）冰凍切片粘片法：蛋白甘油粘片法；Lille明膠粘片法；乙醇明膠粘片法四、蘇木精-伊紅染色方

15、法（HE染色）1.HE染色的方法（1）人工操作程序（2）自動(dòng)染色機(jī)程序（3）冰凍切片染色方法2.HE染色試劑的配制（1）蘇木精染液配制Harris蘇木精的配制：蘇木精1g；硫酸鋁鉀15g；氧化汞0.5g；乙醇10ml，蒸餾水200ml；先用蒸餾水加熱溶解硫酸鋁鉀，用無(wú)水乙醇溶解蘇木精再倒入已溶解的硫酸鋁鉀的蒸餾水中，煮沸1分鐘，稍冷卻，慢慢加入紅色氧化汞0.5g，繼續(xù)加熱至染液變?yōu)樽霞t色，用紗布蓋住瓶口，用前濾紙過(guò)濾后每100ml加冰醋酸5ml。（2）伊紅染液的配制水溶性伊紅：伊紅-Y0.51g；蒸餾水100ml。先將水溶性伊紅加入蒸餾水中，再用玻璃棒將伊紅攪溶解后過(guò)濾，每100ml加冰醋酸1

16、滴。乙醇性伊紅液：伊紅-Y0.51g；90%乙醇100ml。先將伊紅溶于乙醇中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml加冰醋酸1滴。直接用85%乙醇脫水。（3）分化液配制(濃鹽酸0.51ml；75%乙醇99ml)（4）返藍(lán)液的配制(1%的氨水)（5）注意事項(xiàng)(脫蠟、染色、脫水、透明與封膠)五、常用的特殊染色技術(shù)1.結(jié)締組織染色法（2）Masson三色染色法2.膠原纖維染色法 （1）VG染色法（2）Sirius red苦味酸法3.網(wǎng)狀纖維染色法（1）Gomori法（2）Janes法4.彈力纖維染色法（1）維多利亞藍(lán)（2）醛復(fù)紅法（3）地衣紅（4）weigerts染色法（5）彈力和膠原纖維雙重染色法5.

17、肌肉染色法（1）橫紋肌染色法（PTAH）6.糖原染色法PAS法7.粘多糖染色法（1）Mowry阿爾辛蘭-過(guò)碘酸雪夫（ABPAS）法（2）Singh阿爾辛蘭地衣紅法8.黑色素染色法（1）黑色素染色法（Masson Fontana）（2）Lillie硫酸亞鐵染色法9.含鐵血黃素染色法普魯士藍(lán)染色法10.膽色素染色法Hall膽紅素反應(yīng)染色法11.脫色素法（1）脫甲醛色素法（2）脫黑色素法13.淀粉樣物質(zhì)染色法（1）剛果紅染色法15.細(xì)菌染色法（1）Grams染色法（2）Ziehl-Neelson抗酸桿菌染色法（3）胃幽門螺桿菌染色法16.螺旋體染色法（1）硝酸銀染色法（2）Giemsa染色法18.乙

18、型肝炎表面抗原染色法（1）Shikata地衣紅染色法（3）維多利亞蘭染色法19.神經(jīng)組織染色法 （1）神經(jīng)細(xì)胞尼氏小體染色法（2）神經(jīng)纖維染色法（3）神經(jīng)髓鞘染色法（4）神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞染色法20.神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞染色（1）親銀反應(yīng)法（2）嗜銀反應(yīng)法21.嗜鉻細(xì)胞染色法（1）Giemsa改良法八、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)2.熒光顯微鏡檢查方法（1）顯微鏡觀察（2）標(biāo)本制作要求（載玻片厚度0.81.2mm；蓋玻片0.17mm，光潔；標(biāo)本不易太厚；封裱劑常用甘油，無(wú)自發(fā)熒光，無(wú)色透明）（3）注意事項(xiàng)（嚴(yán)格要求經(jīng)行操作；暗室中進(jìn)行檢查；防止紫外線對(duì)眼睛的損害；檢查時(shí)間每次12h為宜；標(biāo)本應(yīng)集中檢查，節(jié)省時(shí)間保護(hù)光

19、源；標(biāo)本染色后立即檢查；熒光亮度判斷標(biāo)準(zhǔn)（四級(jí)：“-”無(wú)或可見(jiàn)微弱自發(fā)熒光；“+”僅能見(jiàn)明確可見(jiàn)的熒光；“+”可見(jiàn)明亮的熒光；“+”可見(jiàn)耀眼的熒光）3.免疫酶化學(xué)的組織固定和切片（1）固定（AMEX法，同新鮮組織冷凍切片同樣的抗原保持性和石蠟切片保存的良好組織結(jié)構(gòu)；機(jī)制：組織在丙酮中固定（脫水），組織細(xì)胞內(nèi)水分逐漸被丙酮取代；繼之，用苯甲酸酯取代組織內(nèi)的丙酮，經(jīng)二甲苯置換后，石蠟包埋。微波固定 ，保持良好的組織結(jié)構(gòu)和抗原性；適用切片的酶組化、ICC以及免疫電鏡等）（2）切片：冰凍切片（ICC研究首選）和石蠟切片4.酶的標(biāo)記和染色方法（1）酶標(biāo)抗體法：通過(guò)共價(jià)鍵將酶連接在抗體上，制成酶標(biāo)抗體，再

20、借酶對(duì)底物的特異催化作用，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，在光鏡或電鏡下進(jìn)行細(xì)胞表面及細(xì)胞內(nèi)各種抗原成分的定位。5.生物素-抗生物素免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)（1）目前廣泛使用的生物素-抗生物素方法（生物素-抗生物素-過(guò)氧化物酶復(fù)合物技術(shù)ABC技術(shù)、橋抗生物素-生物素技術(shù)、標(biāo)記生物素-抗生物素技術(shù)）（2）其他生物素-抗生物素染色法（快速ABC法、二步ABC法、PAP法與ABC法連續(xù)應(yīng)用）十四、腎活檢標(biāo)本制作技術(shù)1.標(biāo)本的處理（標(biāo)本分三部分，分兩半，一半行光鏡檢查；另一半大部做免疫病理，小部做電鏡檢查。免疫熒光標(biāo)本應(yīng)放于滴有生理鹽水的小紗布上，一同置入小瓶中送檢；光鏡標(biāo)本即放進(jìn)10%甲醛固定

21、液中，電鏡標(biāo)本立即放入2.5%戊二醛內(nèi)于4度冰箱內(nèi)固定。）2.免疫病理標(biāo)本的制作（1）冰凍制片方法：將標(biāo)本置于恒冷切片機(jī)的冷凍頭上，加少許OCT包埋劑，于冷室內(nèi)-20度冷凍切片，厚度要求34um，附貼于載玻片上，需十片以上備用。3.光學(xué)顯微鏡的標(biāo)本制作（1）石蠟包埋制片：1.腎組織的固定（緩沖甲醛、磷酸氫二鈉和復(fù)合固定FAA固定液；室溫固定45分鐘）2.脫水（70-80-90-95-100，每梯度兩缸，每缸20分鐘）、透明（氯仿或二甲苯，兩缸每缸10分鐘）、浸蠟（58-62度石蠟，兩缸每缸30分鐘）、包埋3.切片（2-3um）4.染色（2）常用的染色方法（HE染色、PAS染色、PASM染色、PASM-Masson復(fù)合染色法、纖維蛋白染色法）十五、診斷細(xì)胞學(xué)技術(shù)1.細(xì)胞涂片、組織印片和壓片的制備（1）涂片質(zhì)量的基本要求（2）涂片方法（涂抹法、拉片法、推片法）（3）痰涂片的制作（選擇有效成分用棉簽等均勻涂抹于載玻片上。）4.固定（1）常用固定液（95%乙醇、乙醚乙醇固定液、Carnoy液、甲醇、丙酮）（2）固定方法（浸入法、滴加法）5.涂片的染色方法（巴氏染色、HE染色、瑞氏染色、邁格姬染色）（1）HE染色法（質(zhì)量穩(wěn)定，細(xì)胞透明度好，核質(zhì)對(duì)比鮮明；胞質(zhì)顏色單一，不易觀察胞質(zhì)角化程度，不適做雌激素