實驗1.2.顯微鏡及細菌形態(tài)(1)

1、實實 驗驗 一一 油鏡的使用及細菌形態(tài)觀察油鏡的使用及細菌形態(tài)觀察實驗目的實驗目的v了解顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法了解顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法v掌握油鏡的原理和使用方法掌握油鏡的原理和使用方法v了解細菌的三種基本形態(tài)了解細菌的三種基本形態(tài)實驗原理實驗原理顯微鏡的構(gòu)造顯微鏡的構(gòu)造機械裝置機械裝置光學系統(tǒng)光學系統(tǒng)鏡座鏡座載物臺載物臺（粗調(diào)旋轉(zhuǎn)盤）（粗調(diào)旋轉(zhuǎn)盤）鏡筒鏡筒-鏡臂鏡臂-鏡體鏡體標本夾標本夾（垂直（垂直/水平移動旋轉(zhuǎn)桿）水平移動旋轉(zhuǎn)桿）粗調(diào)粗調(diào)/細調(diào)旋轉(zhuǎn)盤細調(diào)旋轉(zhuǎn)盤聚光鏡聚光鏡（轉(zhuǎn)紐（轉(zhuǎn)紐/孔徑光闌環(huán)）孔徑光闌環(huán)）目鏡目鏡物鏡及物鏡轉(zhuǎn)盤物鏡及物鏡轉(zhuǎn)盤聚光鏡聚光鏡 光源光源反光鏡反光鏡實實

2、 驗驗 原原 理理顯微鏡放大倍數(shù)顯微鏡放大倍數(shù)v顯微鏡放大物體，首先經(jīng)過物鏡第一次放大造象，目鏡在明視距離造成第二次放大象。放大率就是最后的象和原物體兩者體積大小之比例。因此，顯微鏡的放大率（V）等于物鏡放大率（V1）和目鏡放大率（V2）的乘積，即：V=V1V2分辨率v指能夠分辨出兩點間最小距離的能力。v主要是物鏡的性能。相同的總放大倍率，物鏡倍率大的，分辨率就好。焦深焦深 在顯微鏡下觀察一個標本時，焦點對在某一象面時，物象最清晰，這象面為目的面。在視野內(nèi)除目的面外，還能在目的面的上面和下面看見模糊的物象，這兩個面之間的距離稱為焦深。物鏡的焦深和數(shù)值孔徑及放大率成反比：即數(shù)值孔徑和放大率愈大，

3、焦深愈小。因此調(diào)節(jié)油鏡比調(diào)節(jié)低倍鏡要更加仔細，否則容易使物象滑過而找不到。數(shù)值孔徑：數(shù)值孔徑：NA=nsin/2v為物鏡的鏡口角，指從物鏡光軸上的物點發(fā)出的光線與物鏡前透鏡有效直徑的邊緣所張的角度。鏡口角總是小于180。v數(shù)值孔徑NA是物鏡和聚光器的主要參數(shù)，是判斷它們性能的最重要指標。NA與顯微鏡的分辨率成正比，與焦深成反比。 v干燥物鏡的數(shù)值孔徑總是小于1，一般為0.050.95；油浸物鏡如用香柏油（折射率為1.515）浸沒，則數(shù)值孔徑最大可接近1.5。vn為介質(zhì)折射率，幾種物質(zhì)的折射率為：空氣為1.0，水為1.33，玻璃為1.52，香柏油為1.515 ，甘油為1.47 。1、增加照明亮度

4、、增加照明亮度2、增加顯微鏡的分辨率、增加顯微鏡的分辨率數(shù)值孔徑數(shù)值孔徑NA=n*sin鏡口角鏡口角/2分辨率分辨率D=/2NA實驗器材實驗器材1、標本片、標本片細菌基本形態(tài)：球菌細菌基本形態(tài)：球菌 、桿菌、螺旋菌、桿菌、螺旋菌特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、芽孢、鞭毛特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、芽孢、鞭毛2、顯微鏡、顯微鏡3、鏡油、鏡油 4、鏡頭紙、鏡頭紙操作步驟操作步驟v放置好顯微鏡放置好顯微鏡v調(diào)整光強，放置標本調(diào)整光強，放置標本v低倍鏡聚焦低倍鏡聚焦v高倍鏡觀察高倍鏡觀察v油鏡觀察油鏡觀察v清潔顯微鏡清潔顯微鏡v還原顯微鏡還原顯微鏡打開主電源，調(diào)整照亮度 放置標本 將10倍物鏡放入光路 對標本聚焦 調(diào)整瞳距，調(diào)整屈光度調(diào)整瞳距，調(diào)整屈光度 調(diào)整孔徑光闌 將需要使用的物鏡放入光路，調(diào)整對標本的焦距（高倍鏡油鏡） 放入必要的濾色鏡，調(diào)整照明度放入必要的濾色鏡，調(diào)整照明度觀察 擦鏡 還原破傷風桿菌(頂端芽胞） 芽胞梭狀芽孢桿菌梭狀芽孢桿菌炭疽桿菌(芽孢)炭疽桿菌炭疽桿