闡述基因工程克隆及表達(dá)的基本流程正式版

1、闡述基因工程克隆及表達(dá)的基本流程正式版定義：按照預(yù)先設(shè)計好的藍(lán)圖，利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，特別是酶學(xué)技術(shù)，對遺傳物質(zhì) DNA直接進(jìn)行體外重組操作與改造，將一種生物（供體）的基因轉(zhuǎn)移到另外一種生物（受 體）中去，從而實現(xiàn)受體生物的定向改造與改良?；静襟E：（分、切、接、轉(zhuǎn)、增、檢）? 施工材料的準(zhǔn)備：目的基因、載體、工具酶和受體細(xì)胞（宿主）的準(zhǔn)備。用限制性 內(nèi)切酶分別將外源 DNA和載體分子切開。? 目的基因與載體 DNA的體外重組，形成重組 DNA分子。1 .剪切蚱 DMADMA弼于丫構(gòu)造DNA »（載體+目的基丙轉(zhuǎn)化/頤梁f fitDNA亞糾分F進(jìn)入寄扛細(xì)胞）I拴込外源汨用在寄主細(xì)

2、胞中表達(dá)城因工稈產(chǎn)品的分因純化1.1基因工程的基本工具練習(xí)題一、選擇題1、 在基因工程中使用的限制性核酸內(nèi)切酶，其作用是（）A、將目的基因從染色體上切割出來E、識別并切割特定的 DNA核苷酸序列C、將目的基因與運載體結(jié)合D、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞2、 下列四條DN A分子,彼此間具有粘性末端的一組是（）GGTATACCL-LJT A G GUc C A TA. E.GD.3、 基因工程是 DNA分子水平的操作，下列有關(guān)基因工程的敘述中，錯誤的是（）A、限制酶只用于切割獲取目的基因、載體與目的基因必須用同一種限制酶處理C、 基因工程所用的工具酶是限制酶，DNA連接酶D、帶有目的基因的載體是否進(jìn)入

3、受體細(xì)胞需檢測4、下列有關(guān)基因工程的敘述 ，正確的是：（）A. D NA連接酶的作用是將兩個黏性末端的堿基連接起來B 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞即發(fā)生基因突變C. 目的基因與運載體結(jié)合的過程發(fā)生在細(xì)胞外D. 常使用的運載體有大腸桿菌、噬菌體和動植物病毒等5、下列關(guān)于DN A連接酶的敘述中，正確的是 （）A . DNA連接酶連接的是兩條鏈堿基對之間的氫鍵B. D NA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖Co D NA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和核糖Db同一種DNA連接酶可以切出不同的黏性末端6、實施基因工程第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來，這要

4、利用限制性內(nèi)切酶。從大腸桿菌中提取的一種限制性內(nèi)切酶 Ecor I ,能識別DNA分子中的GAA1TC 序列，切點在G與A之間.這是應(yīng)用了酶的（）A .高效性B.專一性 C .多樣性 Do催化活性受外界條件影響7、 下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，正確的是（）A. 質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器B. 質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子C.質(zhì)粒只有在侵入宿主細(xì)胞后才能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制D.細(xì)菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細(xì)胞外獨立進(jìn)行的8、右圖所示為限制酶切割某 DNA分子的過程，從圖中可知，該限制酶能識別的堿基序列及切點是 A. C TTAAG切點在 C和T之間C.GAAT TC

5、,切點在 G和A之間 D。GA ATT C,切點在9、關(guān)于右圖DNA分子片段的說法正確的是(A。限制性內(nèi)切酶可作用于部位，解旋酶作用于部位E。處的堿基缺失導(dǎo)致染色體結(jié)構(gòu)的變異B o CTTA AGr-切點在.G和A之間 J IJuAAT'l C H IC和TN間.! t iCT T A AC .把此DN放在含15N的培養(yǎng)液中復(fù)制2代,子代中含15N的D NA占3/4GA ATTC丨i r111CT TAAG15N14nD .該DNA的特異性表現(xiàn)在堿基種類和 (A+T) /(G+C)的比例1 0、下列關(guān)于各種酶作用的敘述，不正確的是A. DNA連接酶能使不同脫氧核苷酸的磷酸與脫氧核糖連接

6、 Bo RNA聚合酶能與基因的特定位點結(jié)合，催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄C 一種DNA限制酶能識別多種核苷酸序列，切割出多種目的基因D.胰蛋白酶能作用于離體的動物組織,使其分散成單個細(xì)胞11、與 限制性內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是：()A.反轉(zhuǎn)錄酶B. R N A聚合酶C . DN A連接酶 D.解旋酶12、除下列哪一項外，轉(zhuǎn)基因工程的運載體必須具備的條件是:A。能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并保存B。具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接C .具有標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選D。是環(huán)狀形態(tài)的 DNA分子1 3、下列黏性未端屬于同一限制酶切割而成的是 _AGor® CAA.B。C。D.1 4、基因工程中可用作

7、載體的是質(zhì)粒噬菌體病毒動物細(xì)胞核A.B C.D.15.關(guān)于限制酶的說法中，正確的是A。限制酶是一種酶，只識別GAATT C堿基序列B .EcoRI切割的是 A之間的氫鍵C. 限制酶一般不切割自身的DN A分子，只切割外源DN AD. 限制酶只存在于原核生物中16 限制酶是一種核酸切割酶，可辨識并切割 DNA分子上特定的核苷酸堿基序列下圖為四種限制酶BamHI, EcoRI , H i n d川以及E gl n的辨識序列。箭頭表示每一種限制酶的特定 切割部位，其中哪兩種限制酶所切割出來的DNA片段末端可以互補黏合？其正確的末端互補序列為何？EcoRIHind IIIEgl III1GGJTCCG

8、AATTCAAGCTTAGATCTCCTAGGCTTAAGTTCGAATCTAGttttA. Bam HI和EcoR I ;末端互補序列 AATTB. Ba mH I和Hi n d川；末端互補序列 一GATC-C. Eco RI和Hi nd川；末端互補序列-A ATT-D. BamHI和BglII ;末端互補序列 GATC-1 7.鐮刀型細(xì)胞貧血癥的病因是血紅蛋白基因的堿基序列發(fā)生了改變.檢測這種堿基序列改變必須使用的酶是()A。解旋酶BoDN A連接酶C.限制性內(nèi)切酶 D.RNA聚合酶1 8 .DNA連接酶催化的反應(yīng)是A .DNA復(fù)制時母鏈與子鏈之間形成氫鍵Bo黏性末端堿基之間形成氫鍵G兩個

9、DN A片段黏性末端之間的縫隙的連接D.A、B、C都不正確19. 在受體細(xì)胞中能檢測出目的基因是因為A.目的基因上有標(biāo)記B.質(zhì)粒具有某些標(biāo)記基因C. 重組質(zhì)粒能夠復(fù)制 D。以上都不正確20. 關(guān)于質(zhì)粒的敘述正確的是A.質(zhì)粒是能夠自我復(fù)制的環(huán)狀DNA分子B.質(zhì)粒是唯一的載體C重組質(zhì)粒是目的基因D。質(zhì)?？稍谒拗魍鈫为殢?fù)制二、非選擇題2 1 下圖為DNA分子的切割和連接過程。C AATT(1) EcoRI是一種酶，它識別的序列是，切割位點是與之間的切割結(jié)果產(chǎn)生的DNA片段末端形式為(2) 不同來源D NA片段結(jié)合，在這里需要的酶應(yīng)& to窪 圈應(yīng)US CT T AA囲 ICTTAAj E是酶

10、，此酶的作用是在 與之間形成鍵。有一種能連接平末端的D NA連接酶是oGlhATTjGl It FT A A| cl22. 番茄在運輸和貯藏過程中，由于過早成熟而易腐爛。 應(yīng)用基因工程技術(shù)，通過抑制某種促進(jìn)果實成熟激素的 合成，可使番茄貯藏時間延長，培育成耐貯藏的番茄新品 種.這種轉(zhuǎn)基因番茄已于199 3年在美國上市，請回答：(1) 促進(jìn)果實成熟的重要激素是 o,基因的“針線”是，基(2) 在培育轉(zhuǎn)基因番茄的操作中，所用的基因的“剪刀” 因的“運輸工具”是。(3) 與雜交育種、誘變育種相比，通過基因工程來培育新品種的主要優(yōu)點是、23。下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本過程圖，據(jù)圖回

11、答人的體細(xì)胞帥苗寬酵產(chǎn)生干疣索(Ojb厶純化的千軌秦(1) 過程需要_酶的參與。(2 )物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的 。其化學(xué)本質(zhì)是 _,它必須能在宿主細(xì)胞中.(3) 過程表明目的基因 。答案：1 - 5EDA CB6 - 1 0BBCAC1 1 15 C DBAC1 6 - 20DCDBA2 3 . (8分)(1)限制性內(nèi)切酶(2分)(2) 質(zhì)粒(1分)D N A (1分)復(fù)制并21、(1)限制酶酯黏性末端GAATTC鳥嘌呤脫氧核苷酸腺嘌呤脫氧核苷酸磷酸二(2) DNA連接 接酶鳥嘌呤脫氧核苷酸腺嘌呤脫氧核苷酸磷酸二酯T 4DN A 連22、(1 )乙烯( 2)限制酶DNA 連接酶運載體(3 )

12、定向改變生物的遺傳性狀克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙基因工程及其應(yīng)用教案【教學(xué)目標(biāo) 】知識目標(biāo) 掌握基因工程的概念、原理 ;基因操作的工具及其操作過程 .能力目標(biāo)培養(yǎng)學(xué)生分析、推理、歸納、總結(jié)的能力。德育目標(biāo) 培養(yǎng)學(xué)生實事求是的科學(xué)態(tài)度從現(xiàn)象到本質(zhì)的科學(xué)的研究方法。【教學(xué)重點】基因工程的基本原理，基因操作的工具，基本步驟及其應(yīng)用 .【教學(xué)難點】基因工程的基本原理 ,基因工程的應(yīng)用及其安全性?！菊n時安排】 1 課時【教學(xué)過程】一、情境創(chuàng)設(shè)提問 :各種生物間的性狀千差萬別這是為什么呢?引導(dǎo) :生物體的不同性狀是通過基因特異性表達(dá)而形成的.列舉：幾種生物的不同性狀：夠吐出絲;豆科植物的根瘤菌能夠固定空氣中

13、的氮氣；青霉菌能產(chǎn)生對人類有用的抗生素青霉素 .提問 :人類能不能改造性狀 ?能不能使本身沒有某個性狀的生物具有某個特定性狀呢？ 引導(dǎo)：讓禾本科植物能夠固定空氣中的氮氣; 能否讓細(xì)菌“吐出”蠶絲；讓微生物生產(chǎn)出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物。（這種設(shè)想能實現(xiàn)嗎？ ）定向改造生物的新技術(shù)基因工程。二、師生互動（1）基因工程的原理指導(dǎo)學(xué)生閱讀教材 P102 頁第二段 ,通過提問的方式指導(dǎo)學(xué)生找出概念中的關(guān)鍵詞語，并讓學(xué)生理解基因工程概念 ,引導(dǎo)學(xué)生獨立完成。最后歸納列表，便于學(xué)生的記憶.概念：在生物體外 ,通過對 DNA 分子進(jìn)行人工“剪切”和“拼接” ，對生物的基因進(jìn)行 改造和重新組合 ,然后導(dǎo)

14、入受體細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，使重組基因在受體細(xì)胞內(nèi)表 達(dá)，產(chǎn)生出所需要的基因產(chǎn)物 .2）基因操作的工具利用多媒體課件演示抗蟲棉培育過程示意圖,同時提出討論問題 ,進(jìn)行分組討論 ,最后交流討論結(jié)果 ,教師進(jìn)行歸納總結(jié)。 思考：在以上的基因工程培育的過程中,關(guān)鍵步驟或難點是什么 ?引導(dǎo)：關(guān)鍵步驟的完成過程中都要用到基因操作工具,并使學(xué)生形象地記憶“工具”的作用。A 基因的剪刀限制性內(nèi)切酶（簡稱限制酶） 。 通過演示多媒體動畫 ,將限制酶的作用過程進(jìn)行動態(tài)演示，使學(xué)生理解抽象的知識內(nèi)容。 存在：主要是存在于微生物細(xì)胞中。特性：一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并在特定的切點切割 DNA分子。作用結(jié)

15、果：得到具有黏性末端或平末端的DNA片段，如大腸桿菌中的 EcoR I,能夠?qū)Ｒ蛔R別 GA ATTC的序列,并在G和A之間將這段序列 切開 .E基因的針線一一 DNA連接酶從DNA的結(jié)構(gòu)入手，利用多媒體動畫演示連接酶的連接部位， 利用形象的比喻使學(xué)生更容易 接受和理解.DNA連接酶的作用是在 DNA分子的連接過程中， 黏合脫氧核糖和磷酸之間的缺 口,即將由同一種限制酶切割后的黏性末端（堿基互補）的脫氧核糖和磷酸連接起來。C基困的運輸工具一一運載體 對于運載體的教學(xué),應(yīng)使學(xué)生形象地理解運載體的作用、種類及其所具備的條件。 目前常用的運載體有質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒等。其中,質(zhì)粒存在于細(xì)菌及酵母菌

16、等生物中,是擬核或細(xì)胞核外能夠自我復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。學(xué)習(xí)完這些操作工具后 ,再來看看現(xiàn)有的基因工程的成果,大家一起思考下這些工具到底怎樣操作才能完成基因工程的過程呢？歸納 ：請學(xué)生寫出基因工程操作的基本步驟和操作過程?？偨Y(jié)： 基本步驟：剪切t拼接t導(dǎo)入t表達(dá)操作過程：提取目的基因t目的基因與運載體結(jié)合t目的基因?qū)胧荏wt目的基因檢測與鑒定（3）基因工程的應(yīng)用。 基因工程與作物育種 作物育種：人們利用基因工程的方法獲得了轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,耐貯存的番茄,耐鹽堿的棉花,抗除草劑的玉米、 油菜、大豆等 .抗蟲基因作物的使用, 不僅減少了農(nóng)藥的用量, 大大 降低了生產(chǎn)成本,而且還減少了農(nóng)藥對環(huán)境的

17、污染。 基因工程與藥物研制利用基因工程生產(chǎn)的藥物有胰島素、干擾素、白細(xì)胞介素、溶血栓劑、凝血因子，以及預(yù)防乙肝、霍亂、傷寒、瘧疾的疫苗等基因工程生產(chǎn)藥品的優(yōu)點是效率高、成本低、品質(zhì)好。 轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的優(yōu)點：解決糧食短缺問題；減少農(nóng)藥使用，從而減少環(huán)境污染；節(jié)省生產(chǎn)成本，降低糧食售價；增加糧食營養(yǎng)，提高附加價值；增加食物種類，提升食物品質(zhì);促進(jìn)生產(chǎn)效率，帶動相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展。轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的缺點： 可能產(chǎn)生新毒素和新過敏原， 可能產(chǎn)生抗除草劑的雜草, 可能使疾病的散播跨越物種障礙， 可能威脅其他生物的生存，可能干擾生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。三、板書設(shè)計、基因工

18、程的原理基因工程的 別名操作對象操作水平原理操作環(huán)境結(jié)果（目的）基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)基因DN A分子水 平基因重組生物體外定向地改造 生物的遺傳 性狀、基因操作的工具1基因的剪刀一-限制性內(nèi)切酶（簡稱限制酶）2基因的針線一-D NA連接酶3基困的運輸工具一一運載體三、基因工程的應(yīng)用四、課堂總結(jié)及布置作業(yè)復(fù)習(xí)基因工程操作的基本步驟和重要工具，完成課后習(xí)題課題 1. 2基因工程的基本操作程序?qū)W習(xí)目標(biāo)：簡述基因工程的原理和技術(shù)。理解基因操作的工具和基本程序及應(yīng)用。學(xué)習(xí)重點和難點：重點：提取目的基因的方法。難點：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的途徑 自學(xué)測評：基因工程的基本操作程序主要包括4個步驟：目的

19、基因的； 的構(gòu)建； 將目的基因； 目的基因的一、目的基因的獲?。?、目的基因：符合人們需要的，編碼蛋白質(zhì)的2。獲取目的基因的方法(1) 從基因文庫中獲取目的基因 基因文庫：將含有某種生物不同基因的許多，導(dǎo)人受體菌的群體中，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫?；蚪M文庫：含有一種生物的基因 種類=-CDNA文庫：含有一種生物的基因 目的基因的獲取根據(jù)基因的有關(guān)信息：基因的序列、基因在上的位置、基因的產(chǎn)物mRM、基因的產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性獲取目的基因。(2)利用PC R技術(shù)擴增目的基因 P CR:是一項在生物體外特定 DNA片段的核酸合成技術(shù). 過程：目的基因 DNA受熱形成，與結(jié)合，

20、然后在 ? _的作用下進(jìn)行延伸形成 DN A。 方式：指數(shù)擴增=(n為擴增循環(huán)的次數(shù))(3 )化學(xué)方法人工合成：基因較，核苷酸序列。二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、表達(dá)載體的組成：目的基因+標(biāo)記基因+。2、 啟動子：位于基因的，它是結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA3、終止子：位于基因的，終止。4、標(biāo)記基因：受體細(xì)胞是否含有目的基因。5、表達(dá)載體的功能：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且給下一代；使目的基因丄和發(fā)揮作用。6、 不同的受體細(xì)胞及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法，基因表達(dá)載體的構(gòu)建上也會有所差別。三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(一) 轉(zhuǎn)化：目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和的過程

21、。(二) 方法1、將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞(1 )農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 農(nóng)桿菌特點：易感染植物和裸子植物，對 植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。進(jìn)入農(nóng)桿菌T導(dǎo)入植物細(xì)胞T目的基因整合到植物細(xì)胞染色體 轉(zhuǎn)化：目的基因插人上T目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)(2) 基因槍法：是植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高。(3 )花粉管通道法2將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞(1 )方法:。(2 )操作程序：目的基因表達(dá)載體t取t顯微注射t注射了目的基因的受精卵移植到_性動物的 內(nèi)發(fā)育T新性狀動物。3。將目的基因?qū)宋⑸锛?xì)胞(1 )原核生物特點：繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相

22、對較少等。(2)轉(zhuǎn)化：處理細(xì)胞t細(xì)胞T表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合T細(xì)胞吸收D NA分子。四、目的基因的檢測與鑒定 合作探究、精講點撥： 探究一目的基因的獲取1、基因文庫類型步驟檢測內(nèi)容方法結(jié)果顯示第一步目的基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞是否成功顯示岀雜交帶水平檢測第二步目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRN A是否成功顯示岀雜交帶水平鑒定第三步目的基因是否翻譯岀蛋白質(zhì)某生徇體內(nèi)全部DMA限制酌eRN eDNA文庫文庫2.原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)(1)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū) :編碼區(qū)r-非編碼區(qū)-與RNAJg合酶結(jié)合位點(2)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)；編碼區(qū) 非蝙碼區(qū)原理：前提：一段已知目的基因的核苷酸序列，

23、以便根據(jù)這一序列合成條件：、過程:a. 變性（C）b. 退火（C）c. 延伸（C）目的基因DNA受熱變性后接連為單鏈 與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合在的作用下進(jìn)行延伸Taq酶的特點是.PCRT增技術(shù)與DNA復(fù)制的比較PCR技 術(shù)DN復(fù)制相同點原理DN A復(fù)制（堿基互補配對）不 同 占 八、解旋方式DNA在條件下變性解旋催化場所復(fù)制（P CR擴增儀）主要在內(nèi)酶酶細(xì)胞內(nèi)含有的能量結(jié)果在短時間內(nèi)形成大量的形成整個探究二 基因表達(dá)載體的構(gòu)建用一定的切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個切口 ,露出.用切斷目的基因，使其 產(chǎn)生 。將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 處，再加入適量 形成了一個重組DNA分子（重組質(zhì)粒）探究三 目的基

24、因?qū)胧荏w細(xì)胞一-轉(zhuǎn)化細(xì)胞類型常用方法轉(zhuǎn)化過程植物細(xì)胞將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T DNA上t轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌t導(dǎo)入植物細(xì)胞 t整合到受體細(xì)胞的 DNA上t表達(dá)動物細(xì)胞將含有目的基因的表達(dá)載體提純t取卵（受精卵）t顯微注射T早 期胚胎培養(yǎng)t胚胎移植T發(fā)育成為具有新性狀的動物微生物用CW+處理細(xì)胞t感受態(tài)細(xì)胞T重組表達(dá)載體DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合T感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子探究四 目的基因的檢測與鑒定一一檢查是否成功問題1 :受體細(xì)胞攝入 DNA分子后就說明目的基因完成了表達(dá)嗎?問題2試分析真核生物的基因?qū)爰?xì)菌細(xì)胞后，不能正常發(fā)揮功效的可能原因有哪些?拓展提高、達(dá)標(biāo)測評：1.下列正確表示基因操作“四

25、部曲”的是（）A. 提取目的基因t目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞t基因表達(dá)載體的構(gòu)建t目的基因的檢測和鑒定E。目的基因的檢測和鑒定t提取目的基因t基因表達(dá)載體的構(gòu)建t目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞C. 提取目的基因T基因表達(dá)載體的構(gòu)建T目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞T目的基因的檢測和鑒定D. 基因表達(dá)載體的構(gòu)建T提取目的基因T目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞T目的基因的檢測和鑒定2 .下列不屬于.獲得目的基因的方法的是（）A. 利用DNA連接酶復(fù)制目的基因E.利用D NA聚合酶復(fù)制目的基因C.從基因文庫中獲取目的基因D 利用PCR技術(shù)擴增目的基因3°P CR技術(shù)擴增DN A,需要的條件是（）目的基因 高溫 四種脫氧核苷酸DN

26、A聚合酶等mRNk核糖體A.B. C.D。4. 根據(jù)mNA的信息推出獲取目的基因的方法是（）A.用DNA探針測出目的基因B .用mRNA探針測出目的基因C.用mRA反轉(zhuǎn)錄形成目的基因D .用PCR技術(shù)擴增mR NA5在已知某小片段基因堿基序列的情況下，獲得該基因的最佳方法是（）A. 用mRA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成 DNAB. 以4種脫氧核苷酸為原料人工合成C。 由蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測mRNAD. 將供體D NA片段轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞中，再進(jìn)一步篩選6、在基因工程中,把選出的目的基因（共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是4 6 0個）放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧

27、核苷酸的個數(shù) 是（ ）A.540 個 B. 8 10 0 個？ C. 1728 0 個 D. 7 56 0 個7. 下列不屬于目的基因與運載體結(jié)合過程的是A. 用一定的限制酶切割質(zhì)粒露出黏性末端B. 用同種限制酶切割目的基因露出黏性末端C. 將切下的目的基因的片段插入到質(zhì)粒切口處D. 將重組D下NA導(dǎo)入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴增 列哪項不是基因表體的組成（）A. 啟動子9. 在基因表達(dá)載體的構(gòu)建中，所需要的酶是限制酶DNA連接酶 解旋酶DNA聚合酶A.B.C。B. 終止密碼子C 標(biāo)記基因D。復(fù)制原點D.10植物學(xué)家在培育抗蟲棉時，對目的基因作適當(dāng)修飾，使目的基因在棉花植株的整個生 長發(fā)育期都表達(dá) ,

28、以防止害蟲侵害，這種對目的基因所作的修飾發(fā)生在（）A.終止子 B .引物 C. 標(biāo)記基因D 。啟動子11。下列哪項不是 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法（A.基因槍法B .顯微注射法12在基因工程操作的基本步驟中C .農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法D.花粉管通道法, 不進(jìn)行 堿基互補配對的是（A.人工合成目的基因C。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞13。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞之前B .目的基因與載體結(jié)合D. 目的基因的檢測與鑒定,要用Ca 2+處理細(xì)胞，處理過的細(xì)胞叫（A .感受態(tài)細(xì)胞E.敏感性細(xì)胞C.吸收性細(xì)胞 D.接受細(xì)胞14。農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)移目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，目的基因的最終位置是（）A. Ti質(zhì)粒上 B。受體細(xì)胞

29、染色體上C。裸露細(xì)胞核中D.存在細(xì)胞質(zhì)中, 只有通過鑒定和檢測才15. 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后， 是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性 能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是檢測受體細(xì)胞是否有目的基因檢測受體細(xì)胞是否有致病基因 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄 mFN A檢測目的基因是否翻譯蛋白質(zhì)B.C.D.1 6要檢測目的基因是否成功地插入了受體DNA中，需要用基因探針，基因探針是指 （ ）A. 用于檢測疾病的醫(yī)療器械B。用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的目的基因C .合成球蛋白的 DN AD。合成苯丙羥化酶的 DNA片段17.（多選）用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì) .下列敘述正確的是（）A. 常用

30、相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒B. DNA連接酶和RNA聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必須的工具酶C. 可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒D. 導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)1 8 .（多選）我國科學(xué)家運用基因工程技術(shù)將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞并成功表達(dá) , 培育出了抗蟲棉。下列敘述正確的是（）A. 基因非編碼區(qū)對于抗蟲基因在棉花細(xì)胞中的表達(dá)不可缺少B. 重組DNA分子中增加一個堿基對，可能導(dǎo)致毒蛋白的毒性喪失C . 抗蟲棉的抗蟲基因可通過花粉傳遞至近緣作物，從而造成基因污染D。轉(zhuǎn)基因棉花是否具有抗蟲特性是可以通過檢測棉花對抗生素抗性來確定的19。（多選）

31、 科學(xué)家通過基因工程的方法 ,能使馬鈴薯塊莖內(nèi)含有人奶主要蛋白。 以下有關(guān)該 基因工程的敘述，正確的是（）A. 采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到目的基因有內(nèi)含子B. 基因非編碼區(qū)對于目的基因在塊莖中表達(dá)是不可缺少的C. 馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞D. 用同一種限制性內(nèi)切酶，分別處理質(zhì)粒和含目的基因的DNA,可產(chǎn)生黏性末端而形成重組 DN A 分子20 .人體受到病毒刺激后可以產(chǎn)生干擾素。干擾素分為a.3. 丫三類。1 980年生物學(xué)家成功地破譯了a干擾素的全部遺傳信息并運用插入質(zhì)粒的方法.用大腸桿菌生產(chǎn)。得到的干擾素可以用于治療肝炎和腫瘤.回答下列問題 :（1）上述材料中涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)有 .（2） 人體中能合成干擾素的細(xì)胞是 , 合