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1、廣州中醫(yī)藥大學(xué) 科學(xué)學(xué)位碩士研究生學(xué)位論文開題報(bào)告姓 名袁智先院、所研究生進(jìn)修班2010級(jí)學(xué)號(hào)201001018導(dǎo)師姓名專 業(yè)中醫(yī)骨傷研究方向中藥藥效研究擬定學(xué)位論文題目麻杏石甘治療過敏性哮喘的藥效研究本研究題目是否屬導(dǎo)師課題的一部分?如果是的話,屬哪一部分?并注明該課題名稱、編號(hào)、經(jīng)費(fèi)來源 國(guó)家計(jì)委,科委項(xiàng)目/國(guó)家經(jīng)貿(mào)委項(xiàng)目( ) 教育部人文、社會(huì)科學(xué)研究項(xiàng)目 ( ) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目 ( ) 省(自治區(qū)、直轄市)項(xiàng)目 ( ) 學(xué)校級(jí)項(xiàng)目 ( ) 國(guó)際合作項(xiàng)目/與港、澳、臺(tái)合作項(xiàng)目( ) 導(dǎo)師課題 ( ) 自選課題 ( ) 其它 ( )學(xué)位論文的類型()1 基礎(chǔ)研究( )2 應(yīng)用基礎(chǔ)(
2、)3 應(yīng)用研究( )4 其 他( )一、 選題依據(jù)(包括研究目的、意義,國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢(shì)評(píng)述,并附參考文獻(xiàn)):(一) 研究目的和意義麻杏石甘湯記載于傷寒論辨太陽(yáng)病脈證并治,原文說”發(fā)汗后,不可更行桂枝湯,汗出而喘,無(wú)大熱者,可與麻黃杏仁甘草石膏湯。”本條所指的發(fā)汗后,是指太陽(yáng)病發(fā)汗不得法,或發(fā)汗太過,或誤用下法,均可使邪熱內(nèi)傳,病情轉(zhuǎn)重。因其邪熱內(nèi)傳,則表示大熱,汗出而喘是肺熱壅盛所致。因肺主氣,外合皮毛,熱壅于肺,津液外走毛竅,故汗出;肺司呼吸,熱盛則氣逆,故喘,由此可見,汗出而喘,癥候已發(fā)生改變,不可再用桂枝湯,而應(yīng)以麻杏石甘湯清熱宣肺止喘。其中的麻黃配石膏,清熱透邪,宣肺定喘,且
3、石膏用量多于麻黃,以制約麻黃辛溫之性而為平?jīng)鲋茫屎钩霾患陕辄S,無(wú)大熱不忌石膏,正所謂治病必求其本。杏仁宣降肺氣,配麻黃則增強(qiáng)治喘之力,甘草安胃和中,調(diào)和諸藥。后世用于風(fēng)寒化熱,或風(fēng)熱犯肺,以及內(nèi)熱外寒,但是邪熱壅肺之身熱喘咳,口渴脈數(shù),無(wú)論有汗、無(wú)汗,皆可以本方加減而獲效。而風(fēng)寒咳喘,痰熱壅盛不可用此方。本課題所研究的麻杏石甘湯方由麻黃、杏仁、甘草、甘草、石膏,理研究表明,麻杏甘石湯臨床上用于治療哮喘、蕁麻疹等疾病,取得較好療效,從現(xiàn)代免疫學(xué)角度分析,哮喘和蕁麻疹均屬第一型變態(tài)反應(yīng)性疾病,防治第一型變態(tài)反應(yīng)性疾病,首先要控制其發(fā)生的幾個(gè)主要環(huán)節(jié),其中防止過敏原進(jìn)入機(jī)體外,在機(jī)體方面,可控制
4、IgE的產(chǎn)生;阻斷IgE與肥大細(xì)胞的嗜酸性粒細(xì)胞結(jié)合,抑制肥大細(xì)胞釋放生物活性物質(zhì);阻止生物活性物質(zhì)作用于效應(yīng)器官以及解除效應(yīng)器官反應(yīng)等。本文采用Schwartz等法進(jìn)行大白鼠腹腔肥大細(xì)胞脫顆粒實(shí)驗(yàn),說明麻杏甘石湯有抑制肥大細(xì)胞脫顆粒作用,證明本方還有一定的抑制效應(yīng)器官反應(yīng)的作用,可緩解由于抗原刺激而增強(qiáng)的腸管蠕動(dòng),能保護(hù)腸管中肥大細(xì)胞免受抗原的攻擊。上述實(shí)驗(yàn)表明,麻杏甘石湯對(duì)肥大細(xì)胞脫顆粒、抗原刺激致敏腸管釋放組織胺以及對(duì)致敏腸管蠕動(dòng)的影響,可在一定程度上說明本方治療第一型變態(tài)反應(yīng)的機(jī)理。國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀1 中醫(yī)對(duì)麻杏石甘湯的認(rèn)識(shí)1.1麻杏石甘湯用法麻黃、杏仁、甘草、石膏四味,以水七升,煮麻黃
5、,減二升,去上沫,內(nèi)諸藥,煮取二升,去滓。溫服一升(現(xiàn)代用法:水煎溫服)。1.2麻杏石甘湯功用辛涼宣泄,清肺平喘:用于外感風(fēng)熱,或風(fēng)寒郁而化熱,熱壅于肺,而見咳嗽、氣急、鼻煽、口渴、高熱不退,舌紅苔白或黃,脈滑數(shù)者。常用本方配伍魚腥草、黃芩、瓜蔞、貝母等,治療急慢性支氣管炎、肺炎以及麻疹合并肺炎。1.3麻杏石甘湯方解君藥:麻黃,辛甘溫,宣肺解表而平喘,石膏,辛甘大寒,清泄肺胃之熱以生津兩藥相配,既能宣肺,又能泄熱。臣藥:杏仁,苦降肺氣,止咳平喘,既助石膏沉降下行,又助麻黃瀉肺熱。佐使:炙甘草,顧護(hù)胃氣,防石膏之大寒傷胃,調(diào)和麻黃、石膏之寒溫。1.4配伍特點(diǎn)縱觀全方,藥僅四味,配伍嚴(yán)謹(jǐn),清宣降三
6、法俱備,共奏辛涼宣泄,清肺平喘之功。1.5注意事項(xiàng)本方出自傷寒論,原治太陽(yáng)病,發(fā)汗未愈,風(fēng)寒入里化熱,“汗出而喘”者。后世用于風(fēng)寒化熱,或風(fēng)熱犯肺,以及內(nèi)熱外寒,但見肺中熱盛,身熱喘咳,口渴脈數(shù),無(wú)論有汗、無(wú)汗,便以本方加減治療,都能獲效。對(duì)于麻疹已透或未透而出現(xiàn)身熱煩渴,咳嗽氣粗而喘,屬疹毒內(nèi)陷,肺熱熾盛者,亦可加味用之。1.6病癥分析風(fēng)熱襲表,表邪不解而入里,或風(fēng)寒之邪郁而化熱入里,邪熱充斥風(fēng)外,故身熱不解、汗出、口渴、苔黃、脈數(shù);熱壅于肺,肺失宣降,故咳逆氣急,甚則鼻煽。若表邪未盡,可在衛(wèi)氣被郁,毛竅閉塞而無(wú)汗;苔薄白,脈浮亦是表證未盡之征。1.7文獻(xiàn)摘要醫(yī)宗金鑒·刪補(bǔ)名醫(yī)方論
7、柯琴:“石膏為清火之重劑,青龍、白虎皆賴以建功,然用之不當(dāng),適足以招禍。故青龍以無(wú)汗煩躁,得姜桂以宣衛(wèi)外之陽(yáng)也;白虎以有汗煩渴,須粳米以存胃中津液也。此但熱無(wú)寒,故不用姜桂,喘不在胃而在肺,故于麻黃湯去桂枝之監(jiān)制,取麻黃之開,杏仁之降,甘草之和,倍石膏之大寒,除內(nèi)外之實(shí)熱,斯溱溱汗出,而內(nèi)外之煩熱與喘悉除矣。1.8臨床應(yīng)用及研究1.8.1辨證要點(diǎn):本方為治療表邪未解,邪熱壅肺之喘咳的基礎(chǔ)方。因石膏倍麻黃,其功用重清宣肺熱,不在發(fā)汗,所以臨床應(yīng)用以發(fā)熱、喘咳、苔薄黃、脈數(shù)為辨證要點(diǎn)。 傷寒論原用本方治療太陽(yáng)病,發(fā)汗未愈,風(fēng)寒入里化熱,“汗出而喘”者。后世用于風(fēng)寒化熱,或風(fēng)熱犯肺,以及內(nèi)熱外寒,但
8、見邪熱壅肺之身熱喘咳、口渴脈數(shù),無(wú)論有汗、無(wú)汗,皆可以本方加減而獲效。 對(duì)于麻疹已透或未透而出現(xiàn)身熱煩躁、咳嗽氣粗而喘屬疹毒內(nèi)陷,肺熱熾盛者,亦可以本方加味。1.8.2加減變化:如肺熱甚,壯熱汗出者,宜加重石膏用量,并酌加桑白皮、黃芩、知母以清泄肺熱;表邪偏重,無(wú)汗而惡寒,石膏用量宜減輕,酌加薄荷、蘇葉、桑葉等以助解表宣肺之力;痰多氣急,可加葶藶子、枇杷葉以降氣化痰;痰黃稠而胸悶者,宜加瓜蔞、貝母、黃芩、桔梗以清熱化痰,寬胸利膈。1.8.3現(xiàn)代運(yùn)用:本方常用于感冒、上呼吸道感染、急性支氣管炎、支氣管肺炎、大葉性肺炎、支氣管哮喘、麻疹合并肺炎等屬表邪未盡,熱邪壅肺者。1.8.5使用注意:風(fēng)寒咳喘
9、,痰熱壅盛者,非本方所宜。2、現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)麻杏石甘湯的認(rèn)識(shí)2.1對(duì)免疫功能的影響:中藥由267%麻杏石甘湯口服液加生理鹽水,按5:3稀釋而成。觀察麻杏石甘湯對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響:取健康昆明種小鼠16只,體重18-22g,隨機(jī)分為兩組,每組8只,雌、雄各半,中藥組用上藥0.4ml/日灌胃,對(duì)照組用等量生理鹽水灌胃,均連續(xù)灌胃8日。對(duì)小鼠脾指數(shù)的影響:取健康NIH種小鼠20只,體重22-25g,分組和給藥方法同上,每組均連續(xù)灌胃10日。對(duì)小鼠血清溶血素含量的影響:取健康昆明種小鼠20只,體重22-25g,分組及給藥方法同上,連續(xù)灌胃11日。對(duì)小鼠皮膚遲發(fā)反應(yīng)的影響;取健康NIH種小鼠12只,
10、體重18-22g,分組和經(jīng)藥方法同上,每組可續(xù)灌胃12日。結(jié)果:麻杏石甘湯可提高患兒細(xì)胞免疫功能,調(diào)整T淋巴細(xì)胞亞群間的比例關(guān)系,使小白鼠吞噬指數(shù)、脾指數(shù)、血清溶血素增高,使小白鼠皮膚遲發(fā)反應(yīng)增強(qiáng)。又有報(bào)道,采用水煎醇沉法制成267%制劑,加生理鹽水按5:6稀釋后,置4冰箱貯存?zhèn)溆谩H〗】敌“资?6只,體重18-22g,隨機(jī)分成中藥組和對(duì)照組。中藥組按0.4ml/天劑量灌胃,每日1次,對(duì)照組用等量生理鹽水灌胃,各組連續(xù)灌胃7日,第8日采血,分離血清,用瓊脂平板打孔法測(cè)定溶菌酶含量,進(jìn)行組間比較。分組給藥方法同連續(xù)灌胃7日,未次給藥后每只小白鼠腹腔注射5%綿羊紅細(xì)胞1ml,并于3小時(shí)后腹腔注射生
11、理鹽水2ml,然后處死動(dòng)物,吸出腹腔液,以2000轉(zhuǎn)/分鐘離心沉淀10分鐘,棄上清液,涂片并用瑞氏染液染色,鏡檢計(jì)算吞噬率及吞噬指數(shù)。取健康小白鼠20只,體重18-22g,分組及灌胃方法同,連續(xù)灌胃11日,各組均在給藥第4日,用10%新鮮羊紅細(xì)胞進(jìn)行小白鼠腹腔免疫,0.5ml/只,于實(shí)驗(yàn)第11日摘眼球取血,分離血清,進(jìn)行血清凝集素試驗(yàn),測(cè)定抗體效價(jià),采用RPMI“1640”培養(yǎng)液(1%“1640”、20%胎牛血清、青霉素100U,鏈霉素100g/ml),pH7.4,每瓶2.5ml,試驗(yàn)時(shí)每瓶加入兔肝素0.2ml抗凝血,并分別加入0.15ml,0.1ml,0.05ml三種劑量的麻杏石甘湯(藥物濃
12、度調(diào)至100%,每瓶1個(gè)劑量,同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照組(上海生物化學(xué)研究所產(chǎn)品PHA10滴)和陰性對(duì)照組(即不加中藥也不加PHA),經(jīng)37孵育70小時(shí)后離心沉淀,棄上清液,將沉淀物灌入毛細(xì)玻璃管,離心分離白細(xì)胞,涂片并用瑞一姬混合染液染色,鏡檢計(jì)算淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:麻杏石甘湯能提高小白鼠巨噬細(xì)胞的吞噬率和血清溶菌酶含量,促進(jìn)淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,從而使非特異性和特異性免疫功能均有所提高。2.2退熱作用:實(shí)驗(yàn)以家免為對(duì)象、造型、采用灌胃法給藥對(duì)麻杏石甘湯、生熟、石膏的退熱作用進(jìn)行了對(duì)比觀察。結(jié)果表明:3者都有不同程序的退熱作用。同時(shí)既為本方為本方中的有機(jī)、無(wú)機(jī)兩類成分的“協(xié)同”作用提供了佐證,也會(huì)它屬絡(luò)
13、合物藥物的實(shí)際應(yīng)用展示了前景。2.3對(duì)蕁麻疹的治療作用:選擇體重2.5-3.0kg家兔10只,雌雄不拘,分給藥組和對(duì)照組。用20%烏拉坦8ml/kg行腹腔麻醉后,用12號(hào)導(dǎo)尿管從口腔插入胃中,將家兔仰位固定。在頸部正中線切口,插入氣管插管,氣管插管分叉一端與馬氏氣鼓相連,另一端自然呼吸。在氣管右側(cè)的頸A做“V”型切口,遠(yuǎn)心端結(jié)扎,近心端插入與水銀檢壓計(jì)相連,含7%枸櫞酸鈉溶液的動(dòng)脈套管經(jīng)檢壓計(jì)連馬氏氣鼓。在腹部正中打開腹腔,找中段空腸一段,在腸壁切1.0cm切口,將可充水小指套緩緩送入腸腔內(nèi),荷包縫合腸壁,關(guān)閉腹腔,通過一段橡皮管將腸內(nèi)指套連接在馬氏氣鼓上,將腸內(nèi)指套充滿水,腸蠕動(dòng)推動(dòng)描記波型
14、。而后開動(dòng)煙鼓,記錄一段正常血壓、呼吸、腸蠕動(dòng)波,然后通過胃管灌藥(麻黃、杏仁、石膏、甘草,各約成人量的1/2,按常規(guī)煎藥法,煎成50ml),繼續(xù)觀察波型。結(jié)果發(fā)現(xiàn):給藥組家兔血壓有明顯升高趨勢(shì),心率減慢,呼吸變淺減慢,腸蠕動(dòng)增強(qiáng)。而對(duì)照組給與等量水50ml,結(jié)果對(duì)家兔血壓、呼吸、腸蠕動(dòng)均無(wú)影響。證明麻杏石甘湯對(duì)蕁麻疹之血管變態(tài)反應(yīng)之病理有拮抗作用。參考文獻(xiàn)1李興,王廣生,張德清中西醫(yī)結(jié)合治療小兒支氣管肺炎64例 河南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2006,21(4):53542袁壯小兒支原體肺炎診斷治療中的幾個(gè)問題 中國(guó)實(shí)用兒科雜志,2002,17(8):4493岱明,王曉紅,陸權(quán),等門冬氨酯阿奇霉素治療兒
15、童肺炎的臨床療效及安全性fJ1_中國(guó)實(shí)用兒科雜志,2003,18(12):7494Darko Stefanovski,Joyce M.Richey,et al.Consistency of the Disposition index in the face of diet induced insulin resistance:potential role of FFA.Plos one,2011.6(3):1-8.5Magda,M.,M.Hennes,and E.Shrago,m Receptor and post receptor effects of free fatty acids(FF
16、A)on hepatocyte insulin dynamicsJ.Int J Obes,1990.14(10):831-834.二、研究?jī)?nèi)容(說明課題的具體研究?jī)?nèi)容,重點(diǎn)解決的問題,預(yù)期的研究成果):(一)具體研究?jī)?nèi)容 1、過敏性哮喘大鼠模型的建立; 2、麻杏石甘湯組方對(duì)過敏性哮喘大鼠的哮喘治療的功效; 3、麻杏石甘湯組方對(duì)過敏性哮喘大鼠免疫介質(zhì)分泌的影響; 3、麻杏石甘湯組方對(duì)過敏性哮喘大鼠作用機(jī)制的探討。(二)重點(diǎn)解決的問題 1、過敏性哮喘大鼠模型的制備方法; 2、采用Schwartz等法進(jìn)行大白鼠腹腔肥大細(xì)胞脫顆粒實(shí)驗(yàn); 3、電鏡觀察肺泡內(nèi)免疫反應(yīng)敏感程度。(三)預(yù)期研究成果 1、通過
17、實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)麻杏石甘湯治療過敏性哮喘的功效,為進(jìn)一步研究提供依據(jù)。2、將研究成果發(fā)表于核心期刊雜志。三、研究方案設(shè)計(jì)(包括研究方法,技術(shù)路線,理論分析、計(jì)算、實(shí)驗(yàn)方法和步驟及其可行性,可能出現(xiàn)的技術(shù)問題及解決辦法等):(一)研究方法1 實(shí)驗(yàn)材料1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD大鼠,SPF級(jí),雄性,體重160-180g。1.2 飼料配方 (1) 高脂飼料:普通基礎(chǔ)飼料51.8%,蛋黃粉20%,豬油7%,奶粉5%,白糖5%,魚肝油20d/kg,花生2%,黃豆5%,食鹽1%,麻油0.5%。(2) 普通飼料:大麥粉20、脫水菜(去除水分的包心菜)10、豆粉20、酵母1、骨粉5、玉米粉16、麩皮16、魚粉10、食鹽2
18、。1.3 受試藥物 麻杏石甘湯組方,低劑量為臨床用量的10倍,中劑量為臨床用量的20倍,高劑量為臨床用量的30倍。 1.4 儀器 全自動(dòng)生化分析儀;TD25WS多管架自動(dòng)平衡離心機(jī);分析天平;電子天平;T1000恒溫水浴箱;高溫高壓滅菌器;酶標(biāo)儀;可調(diào)式移液槍;低溫高速離心機(jī);低溫冰箱;超凈工作臺(tái);勻漿器;渦旋儀;實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR;核算蛋白檢測(cè)儀;掃描電鏡。 1.5 試劑 葡萄糖試劑盒;TG試劑盒;TC試劑盒;HDL-C試劑盒;LDL-C試劑盒;逆轉(zhuǎn)錄試劑盒;RT-PCR試劑盒;葡萄糖;生理鹽水;氯仿;異丙醇;乙醇;DEPC;TE buffer;Trizol。2.實(shí)驗(yàn)方法2.1支氣管哮
19、喘大鼠模型的制備 SD大鼠,隨機(jī)分為正常組和支氣管哮喘組,每天定量給予飼料,正常組給予普通飼料,支氣管哮喘組給予麻杏石甘湯混合飼料,自由飲水,造模時(shí)間6周,每周稱重一次。2.2 動(dòng)物分組及給藥方法 造模6周后,支氣管哮喘組大鼠體重顯著高于正常組大鼠體重提示為造模成功,將高脂組大鼠隨機(jī)分成4組,分別為模型組,支氣管哮喘組分為高、中、低劑量組,每組10只。從第7周開始灌胃給藥,正常組、模型組給予蒸餾水,灌胃體積為1ml/100g,給藥組按高、中、低劑量給予受試藥物,每天給藥1次,連續(xù)6周,每天記錄攝食量,每周稱重一次,計(jì)算食物利用率。2.3 檢測(cè)指標(biāo)及方法 (1)攝食量、食物利用率:每天定量給予飼
20、料,稱取剩余飼料,計(jì)算攝食量;每周稱重一次,計(jì)算一次食物利用率,食物利用率=(同期內(nèi)體重的增量/同期內(nèi)的攝食量)×100%。(2)體重、體長(zhǎng)、Lees指數(shù):每周稱重一次,觀察各組體重變化;連續(xù)給予受試樣品6周后,禁食不禁水12h,稱取體重,乙醚麻醉后測(cè)定大鼠的體長(zhǎng)(鼻尖至肛門的長(zhǎng)度,cm),計(jì)算Lees指數(shù),Lees指數(shù) =體重1/3(g)×1000體長(zhǎng)(cm)。(3)脂肪重量、脂體比:連續(xù)給予受試樣品6周后,禁食不禁水12h,稱取體重,解剖取腎臟和生殖器周圍的脂肪稱取脂肪濕重,計(jì)算脂體比,脂體比=脂肪重量(g)/體重(100g)。(4)血清生化指標(biāo):給予受試樣品6周后,禁
21、食不禁水12h小時(shí),乙醚麻醉后眼眶靜脈采血3ml,分離血清,用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定各組動(dòng)物血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的含量。(5)糖耐量測(cè)定:連續(xù)給予受試樣品6周后,禁食不禁水12h,乙醚麻醉,眼眶取血測(cè)定空腹血糖值(0h),然后灌服葡萄糖溶液(2.5g/kg) , 分別于給糖后1 h、2 h 取血測(cè)血糖值,血糖測(cè)定按葡萄糖氧化酶-過氧化酶法, 操作方法及步驟按試劑盒上要求進(jìn)行。(6)血清瘦素、神經(jīng)肽Y、游離脂肪酸、肝酯酶、脂蛋白酯酶含量測(cè)定:乙醚麻醉,眼眶取血,2000rpm離心10min,血清-20保存,按各試劑盒要求測(cè)定。(7)肝系數(shù)、肝組織電鏡:給予受試樣品6周后,禁食不
22、禁水12h小時(shí),解剖取肝臟,稱重,置于冰上剪取50mg肝組織,修剪成1mm*1mm大小,放入預(yù)冷的固定液中,經(jīng)預(yù)處理、切片后掃描電鏡觀察。(8)下丘腦瘦素受體基因、神經(jīng)肽Y mRNA表達(dá)水平測(cè)定:給予受試樣品6周后,禁食不禁水12h小時(shí),解剖取腎及睪丸周圍脂肪組織,稱重,剪取50mg放入預(yù)冷的PCR管中,迅速放入液氮中,速凍后放入-80,用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)瘦素、脂聯(lián)素mRNA表達(dá)水平。2.4 統(tǒng)計(jì)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,各組測(cè)定值用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn),多組間比較用方差分析。(二) 技術(shù)路線高脂組正常組纖體高劑量組纖體中劑量組纖體低劑量組高脂模型組減肥作用:攝食量、食物利用率、體重、體長(zhǎng)、李氏指數(shù)、脂肪濕重、脂體比調(diào)脂作用:肝臟系數(shù)肝組織電鏡血糖調(diào)節(jié)作用:空腹血糖含量測(cè)定糖耐量實(shí)驗(yàn)血清游離脂肪酸含量測(cè)定;血清肝酯酶、脂蛋白酯酶活性測(cè)定血清瘦素、神經(jīng)肽Y含量測(cè)定;下丘腦瘦素受體、神經(jīng)肽Y基因表達(dá)水平測(cè)定;脂肪組織HE染色四、可行性分析 1理論基礎(chǔ):本課題實(shí)驗(yàn)方法在國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)中均有報(bào)道,研究方法可靠。 2儀器設(shè)備
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