《實驗紀(jì)錄規(guī)范》

1、實驗記錄規(guī)范實驗記錄規(guī)范唐濤唐濤主要內(nèi)容主要內(nèi)容工作學(xué)習(xí)中幾點體會工作學(xué)習(xí)中幾點體會1課題中幾個創(chuàng)新點介紹課題中幾個創(chuàng)新點介紹2HPLC在有機(jī)合成中的應(yīng)用在有機(jī)合成中的應(yīng)用31 工作學(xué)習(xí)中的幾點體會工作學(xué)習(xí)中的幾點體會1.1 實驗計劃實驗計劃例：衍生化溶液穩(wěn)定性測試?yán)貉苌芤悍€(wěn)定性測試考察對象：考察對象：衍生化衍生化溶液中溶液中DNFB的有效的有效成分成分測試方法：測試方法：衍生物衍生物比例；比例；確定標(biāo)確定標(biāo)準(zhǔn)物；準(zhǔn)物；設(shè)定參設(shè)定參數(shù)數(shù)。測試項目：測試項目：不同反不同反應(yīng)比例應(yīng)比例產(chǎn)物峰產(chǎn)物峰面積；面積；樣品和樣品和標(biāo)準(zhǔn)物標(biāo)準(zhǔn)物的峰面的峰面積。積。數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)處理：繪制反繪制反應(yīng)物比應(yīng)

2、物比例變化例變化曲線；曲線；繪 制繪 制 隨時間隨時間變化曲變化曲線線 。儀器試劑：儀器試劑：各 種 試各 種 試劑 ， 相劑 ， 相關(guān) 設(shè) 備關(guān) 設(shè) 備調(diào) 試 ，調(diào) 試 ，安 排 實安 排 實驗 時 間驗 時 間。1.2 實驗記錄實驗記錄1) 記錄第二日所記錄第二日所需完成的實驗；需完成的實驗；2) 核實第二日所核實第二日所需儀器試劑；需儀器試劑；3) 記錄各次實驗記錄各次實驗的實驗現(xiàn)象、實的實驗現(xiàn)象、實驗數(shù)據(jù)；驗數(shù)據(jù)；4) 處理數(shù)據(jù)；處理數(shù)據(jù)；5) 小結(jié)實驗，根小結(jié)實驗，根據(jù)情況更改實驗據(jù)情況更改實驗計劃；計劃； Lab Meeting 兩周一次兩周一次 口頭報告口頭報告 書面報告書面報告

3、 報告需包含內(nèi)容：報告需包含內(nèi)容：v 本階段工作小結(jié)本階段工作小結(jié) 詳細(xì)給出實驗?zāi)康摹嶒瀮?nèi)容、測試方法、結(jié)果；必要的圖詳細(xì)給出實驗?zāi)康?、實驗?nèi)容、測試方法、結(jié)果；必要的圖譜和討論。譜和討論。v 下階段工作計劃下階段工作計劃 1.3 工作報告工作報告一篇有主題的小論文一篇有主題的小論文寥寥一兩頁紙寥寥一兩頁紙只有圖缺少必要文字只有圖缺少必要文字1.4 技術(shù)報告技術(shù)報告兩周一次，以專題形式匯報階段工作，對全公司員工開放兩周一次，以專題形式匯報階段工作，對全公司員工開放。報告要求報告要求：1) PPT圖文結(jié)合，層次分明；圖文結(jié)合，層次分明；2) 表述清晰，最好脫稿講解；表述清晰，最好脫稿講解；(報

4、告之前自己至少講三遍報告之前自己至少講三遍)3) 避免出現(xiàn)低級錯誤；避免出現(xiàn)低級錯誤；4) 控制時間，準(zhǔn)確把握。控制時間，準(zhǔn)確把握。不一定要做到最好，但必須比前一個報告者更好！不一定要做到最好，但必須比前一個報告者更好！2 課題中幾個創(chuàng)新點介紹課題中幾個創(chuàng)新點介紹2.1 改進(jìn)實驗步驟改進(jìn)實驗步驟去除水解液中的去除水解液中的HCl傳統(tǒng)氮吹法傳統(tǒng)氮吹法蒸發(fā)皿水浴法蒸發(fā)皿水浴法 時間相對較長，時間相對較長，3mL樣品需樣品需6h左右。左右。 需先將樣品從安瓿瓶中轉(zhuǎn)需先將樣品從安瓿瓶中轉(zhuǎn)移到蒸發(fā)皿中，再水浴加熱。移到蒸發(fā)皿中，再水浴加熱。3mL樣品需樣品需2h左右。左右。N2去除水解液中的去除水解液中

5、的HCl在氮氣保護(hù)下水浴在氮氣保護(hù)下水浴優(yōu)點：優(yōu)點：時間上縮短時間上縮短了，了，3mL樣樣品品2h左右；左右；減少轉(zhuǎn)移步減少轉(zhuǎn)移步驟，避免樣驟，避免樣品損失；品損失；操作過程保操作過程保持在氮氣保持在氮氣保護(hù)下進(jìn)行。護(hù)下進(jìn)行。N22.2 模式上的改進(jìn)模式上的改進(jìn)檢測器串聯(lián)模式檢測器串聯(lián)模式OPA衍生氨基酸：衍生氨基酸：18種基本氨基酸中僅能檢出種基本氨基酸中僅能檢出16種，脯氨酸、半胱氨酸為檢出。種，脯氨酸、半胱氨酸為檢出。NHCHCH2CH2CH2COOHPro響應(yīng)值太低響應(yīng)值太低解決方案：解決方案：1) 聯(lián)用聯(lián)用FMOC-Cl，使，使Pro、Cys也得到衍生。使用也得到衍生。使用2個熒光個

6、熒光檢測器串聯(lián)，不同激發(fā)和發(fā)射波長，分別檢測。檢測器串聯(lián)，不同激發(fā)和發(fā)射波長，分別檢測。2) 只用只用OPA作為衍生試劑，在紫外檢測器后再串聯(lián)一個作為衍生試劑，在紫外檢測器后再串聯(lián)一個 DAD檢測器。檢測器。色譜柱模式上的改進(jìn)色譜柱模式上的改進(jìn)串聯(lián)模式串聯(lián)模式色譜柱模式上的改進(jìn)色譜柱模式上的改進(jìn)混裝模式混裝模式3 HPLC在有機(jī)分析中的應(yīng)用在有機(jī)分析中的應(yīng)用HPLC分析系統(tǒng)分析系統(tǒng)3.2 合格譜圖的要求合格譜圖的要求a. 平穩(wěn)的基線平穩(wěn)的基線基線噪聲基線噪聲(510-5V) 基線漂移基線漂移(510-4V)51015200100200300400500600Signal(mV)Retentio

7、n time(min)12 317.518.018.519.019.501020Signal(mV)Retention time(min)213合格譜圖的要求合格譜圖的要求b. 尖銳的峰形尖銳的峰形100100200300400Signal(mV)Retention time(min)3.3 定性分析上的應(yīng)用定性分析上的應(yīng)用1020050100150200Signal(mV)Retention time(min)保留時間保留時間(Retention Time)3.4 定量分析上的應(yīng)用定量分析上的應(yīng)用1) 峰面積歸一化法；峰面積歸一化法；2) 外標(biāo)校正法；外標(biāo)校正法；3) 內(nèi)標(biāo)校正法；內(nèi)標(biāo)校正法；4) 標(biāo)準(zhǔn)加入法。標(biāo)準(zhǔn)加入法。例：例：TPTAA2003004005006000100200300400500Signal(mV)(nm)207.0244.8TPTAA紫外吸收圖紫外吸收圖例：例：TPTAA123450100200300400500Signal(mV)Retention time(min)1299.10 2710.41 2.57 1相對含量相對含量(%)峰面積峰面積(mVsec)保留時間保留時間(min) 組分名組分名0.90 24.44 3.26 2檢測波長：檢測波長：245nm例：例：TPTAA01234560100200300400500S