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文檔簡介

1、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)范文實(shí)驗(yàn)指的是科學(xué)研究的根本方法之一根據(jù)科學(xué)研究的目的盡可能地排除外界的影響突出主要因素并利用一些專門的儀器設(shè)備而人為地變革、限制或模擬研究對象以下關(guān)于實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)是小編為各位讀者們整理收集的希望能給大家一個(gè)參考?xì)g送閱讀與借鑒一、實(shí)驗(yàn)名稱:臨時(shí)裝片、切片、涂片的制作、觀察和指導(dǎo)二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo):讓學(xué)生通過獨(dú)立自主的制作臨時(shí)裝片、切片、涂片的方法來感知細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)從而使學(xué)生對細(xì)胞到達(dá)一定的熟悉為以后的教學(xué)作下鋪墊制作臨時(shí)裝片的成功對提升學(xué)生的生物學(xué)興趣和生物科學(xué)素養(yǎng)都起著重要的作用同時(shí)這樣鍛煉了學(xué)生的動手水平也培養(yǎng)了學(xué)生的自己動腦思考的水平三、實(shí)驗(yàn)方法及步驟:一實(shí)驗(yàn)材料:顯微鏡、載玻

2、片、蓋玻片、鐐子、刀片、吸水紙、解剖針、毛筆、滴管、擦鏡紙;清水、碘酒溶液;西紅柿、空心蓮子草、洋蔥;創(chuàng)可貼切片時(shí)可能會有人受傷二實(shí)驗(yàn)步驟:1 、臨時(shí)裝片的制作準(zhǔn)備擦用擦鏡紙把載玻片和蓋玻片擦拭干凈改良:將潔凈的紗布改為擦鏡紙擦拭玻片時(shí)要注意用左手的拇指和食指夾住玻片的兩端右手的拇指和食指襯墊上潔凈的紗布后夾在玻片兩面同時(shí)擦拭以防將玻片損壞滴用滴管在載玻片中央滴12滴清水改良:在制片時(shí)至少滴2滴清水這樣加蓋玻片時(shí)蓋玻片下的空間中水較充盈氣泡就少細(xì)胞的活性也較好取用刀片在洋蔥外表上劃“井字大約.5cm2用鐐子撕取外表皮問題:由于葉表皮皺縮、學(xué)生不熟練等導(dǎo)致撕下的表皮薄膜過厚在顯微鏡視野中難以找到

3、理想的觀察對象致使實(shí)驗(yàn)效果較差改良:首先將洋蔥鱗片葉切成寬1.1.5cm的縱向窄條再用刀片將洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)表皮劃成小塊切忌劃透然后用鐐子夾住所劃表皮的邊緣將其輕輕取下洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)表皮易與葉肉別離操作簡便即可這一改良降低了實(shí)驗(yàn)操作難度提升了制片質(zhì)量放把撕取的表皮浸入載玻片上的水滴中并展平蓋蓋玻片蓋用鐐子夾起蓋玻片使它的一邊先接觸載玻片上的水滴然后緩緩地放下蓋在要觀察的材料上染色染:將玻片傾斜1度左右從高的一側(cè)滴入碘液讓其自己流入玻片問題:染色時(shí)書中要求是把12滴碘液滴在蓋玻片的一側(cè)然后用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引使染液浸潤標(biāo)本的全部然而局部同學(xué)可能將蓋玻片下所有水全部吸干做出的裝片會有很多的大

4、氣泡且氣泡將細(xì)胞掩蓋了或者有人將氣泡誤認(rèn)為細(xì)胞改良:染色時(shí)不用吸水紙吸水而是將玻片傾斜1度左右這個(gè)角度一定不能太大太大水就會流出蓋玻片下的小空間然后從較高一側(cè)的蓋玻片與載玻片的縫隙往里滴碘液讓碘液自己流進(jìn)蓋玻片下如果有液體流到蓋玻片外用吸水紙擦拭但一定要強(qiáng)調(diào)不能從蓋玻片邊緣吸水蓋玻片周圍一定要有充盈的液體這樣才不會出現(xiàn)大氣泡鏡檢用顯微鏡觀察2 、臨時(shí)切片的制作選材選擇軟硬適度的材料先截成適當(dāng)長度一般以23mmi宜便于手持即可材料太軟可用馬鈴薯塊莖、胡蘿卜根或肥皂將欲切取的材料夾住一起進(jìn)行切片本實(shí)驗(yàn)用空心蓮子草可直接用于切片切片用三只手指夾住空心蓮子草使其高于手指右手持刀片刀片用水潤濕將空心蓮子

5、草削去一層形成平面刀口向內(nèi)與斷面平行以均勻的動作自左前方向右前方快速拉刀滑行切片注意要整個(gè)臂部用力而不要腕部用力鏡檢如此連續(xù)動作切下一些薄片然后用毛筆將最薄的幾片材料移至滴有一滴清水的潔凈的載玻片中央蓋上蓋玻片用顯微鏡觀察3 、臨時(shí)涂片的制作把成熟的番茄果肉放在培養(yǎng)皿內(nèi)讓汁液流出汁液中有均勻的離散細(xì)胞吸取汁液滴在潔凈的載玻片上將涂抹的液滴滴于載玻片的中央或偏右約1/4處左手持載玻片或放在平臺上右手持另一載玻片作推片先慢慢向右移動讓短邊接觸溶液兩載玻片的夾角約為3-45度再向左迅速推載玻片即可涂成一均勻的薄片也可用解剖針、牙簽、火柴桿等涂成薄片蓋上蓋玻片即可四、預(yù)期結(jié)果:1 、成功觀察到了洋蔥表

6、皮細(xì)胞、西紅柿果肉細(xì)胞及空心蓮子草莖的結(jié)構(gòu)2 、通過使用顯微鏡對細(xì)胞的觀察同學(xué)們對顯微鏡的使用有進(jìn)一步的了解和熟悉3 、通過學(xué)生們對臨時(shí)裝片、切片、涂片獨(dú)立自主的制作使得大家根本掌握制作臨時(shí)裝片、切片、涂片的方法4 、通過對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察使同學(xué)們對于細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)有更進(jìn)一步的了解五、指導(dǎo)方法與指導(dǎo)流程:講解實(shí)驗(yàn)中涉及到的知識點(diǎn)植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)徒手切片的方法臨時(shí)裝片、切片、涂片的制作方法顯微鏡的使用方法演示實(shí)驗(yàn)強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)考前須知讓學(xué)生自己實(shí)驗(yàn)教師進(jìn)行巡回指導(dǎo)及時(shí)發(fā)現(xiàn)和糾正學(xué)生中的問題做到重點(diǎn)深入個(gè)別指導(dǎo)與普遍照顧相結(jié)合實(shí)驗(yàn)總結(jié)1、比照洋蔥表皮細(xì)胞與西紅柿果肉細(xì)胞的差異;2、由同學(xué)們提出發(fā)現(xiàn)的問題號

7、召所有的人一起討論解決問題一.實(shí)驗(yàn)?zāi)康? 、學(xué)習(xí)從土壤中別離、純化微生物的原理與方法2 、學(xué)習(xí)、掌握微生物的鑒定方法3 、對提取的土樣進(jìn)行微生物的別離、純化培養(yǎng)并進(jìn)行簡單的形態(tài)鑒定4 、對簡單鑒定后的微生物進(jìn)行生理生化鑒定并由鑒定結(jié)果查伯杰氏手冊以確定別離出微生物的品種二.實(shí)驗(yàn)原理口淀粉酶是一種液化型淀粉酶它的產(chǎn)生菌芽胞桿菌廣泛分布于自然界尤其是在含有淀粉類物質(zhì)的土壤等樣品中從自然界篩選菌種的具體做法大致可以分成以下四個(gè)步驟:采樣、增殖培養(yǎng)、純種別離和性能測定1 、采樣:即采集含菌的樣品采集含菌樣品前應(yīng)調(diào)查研究一下自己打算篩選的微生物在些地方分布最多然后才可著手做各項(xiàng)具體工作在土壤中幾乎各種微

8、生物都可以找到因而土壤可說是微生物的大本營在土壤中數(shù)量最多的當(dāng)推細(xì)菌其次是放線菌第三霉菌酵母菌最少除土壤以外其他各類物體上都有相應(yīng)的占優(yōu)勢生長的微生物例如枯枝、爛葉、腐土和朽木中纖維素分解菌較多廚房土壤、面粉加工廠和菜園土壤中淀粉的分解菌較多果實(shí)、蜜餞外表酵母菌較多;蔬菜牛奶中乳酸菌較多油田、煉油廠附近的土壤中石油分解菌較多等2 、增殖培養(yǎng)又稱豐富培養(yǎng)增殖培養(yǎng)就是在所采集的土壤等含菌樣品中參加某些物質(zhì)并創(chuàng)造一些有利于待別離微生物生長的其他條件使能分解利用這類物質(zhì)的微生物大量繁殖從而便于我們從其中別離到這類微生物因此增殖培養(yǎng)事實(shí)上是選擇性培養(yǎng)基的一種實(shí)際應(yīng)用3 、純種別離在生產(chǎn)實(shí)踐中一般都應(yīng)用純

9、種微生物進(jìn)行生產(chǎn)通過上述的增殖培養(yǎng)只能說我們要別離的微生物從數(shù)量上的劣勢轉(zhuǎn)變?yōu)閮?yōu)勢從而提高了篩選的效率但是要得到純種微生物就必須進(jìn)行純種別離純種別離的方法很多主要有:平板劃線別離法、稀釋別離法、單抱子或單細(xì)胞別離法、菌絲尖端切割法等三.實(shí)驗(yàn)材料1、器材:小鐵鏟和無菌紙或袋、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、無菌水試管每支4.5mL水、燒杯、三角瓶、電爐、玻璃棒、接種環(huán)、鐐子、搪瓷杯、恒溫培養(yǎng)箱、高溫滅菌鍋、移液槍槍頭、天平、濾紙、pH試紙等2、試劑:配制牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基的原料牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白月東、Lugol氏碘液、.2%可溶性淀粉液、結(jié)晶紫染液、番紅染

10、液、碘液、95%乙醇、.5%番紅水染液、無菌水等3、土樣:取自桂林師專1棟宿舍樓后面土壤地下1cm左右四.實(shí)驗(yàn)方法步驟1 、采集土樣帶上小鐵鏟和無菌袋到土豆地采集較細(xì)碎土壤2 、樣品稀釋在無菌紙上稱取樣品1g放入1mL無菌水的三角瓶中手搖1分鐘使土和水充分混合用1mL無菌吸管吸取.5mL注入4.5mL無菌水試管中梯度稀釋至13 、別離用稀釋樣品的同支吸管分別依次從1、1、1樣品稀釋液中吸取lmL注入無菌培養(yǎng)皿中然后倒入滅菌并融化冷至5c左右的固體培養(yǎng)基小心搖動冷凝后倒置于37c溫箱中培養(yǎng)48小時(shí)培養(yǎng)基的配制一稱取蛋白月東1.g;NaCl.5g;牛肉膏.3g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;1ml

11、水定容4 、初步鑒定對多種菌進(jìn)行形態(tài)特征的觀察、簡單染色、革蘭氏染色以及芽抱染色觀察記錄結(jié)果5 、0c淀粉酶鑒定6 、1實(shí)驗(yàn)原理:細(xì)菌能否產(chǎn)生淀粉酶主要依據(jù)是鑒定有能否分解淀粉0c淀粉酶該酶可以把淀粉分解因淀粉遇碘變藍(lán)色如菌落周圍有無色圈說明該菌能分解淀粉2步驟:將培養(yǎng)的的各種待測菌種接種在含有.2%淀粉液的牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基中培養(yǎng)基的配制一稱取蛋白月東1.g;NaCl.5g;牛肉膏.3g;可溶性淀粉.2g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;1ml水定容注:先將可溶性淀粉加少量蒸儲水調(diào)成糊狀再加到溶化好的培養(yǎng)基中調(diào)勻倒置于37c溫箱中培養(yǎng)1824小時(shí)后取出平板向皿中注入l滴Lugol氏碘液因淀粉遇碘變藍(lán)色如菌落周圍有無色圈說明該菌能分解淀粉8、純化從平板上選取淀粉水解圈直徑與菌落直徑之比擬大的菌落用接種環(huán)沾取少量培養(yǎng)物至斜面上并進(jìn)行23次劃線別離挑取單菌落至斜面上培養(yǎng)后觀察菌苔生長情況并鏡檢驗(yàn)證為純培養(yǎng)4 .實(shí)驗(yàn)結(jié)果5 .個(gè)人總結(jié)1 、在別離實(shí)驗(yàn)中原土樣的13g/mL濃度中得到5種不同的能夠分解淀粉的菌落經(jīng)初步淀粉酶實(shí)驗(yàn)1號菌的淀粉分解圈大2號、3號、4號次之5號最小2 、在淀粉酶試驗(yàn)中3號培養(yǎng)基感染雜菌出現(xiàn)不同菌落故后面不再對其處理;其它菌種均得到較純的單菌落淀粉酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果不變與上面相同3 、各種菌落的革蘭氏染色中大局部為陽性菌體形態(tài)多為橢圓形趨于桿狀只有4

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