果蔬菜中農(nóng)藥殘留測定實驗報告

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上實驗四 果蔬菜中農(nóng)藥殘留測定環(huán)境工程 李婷婷 一、 實驗?zāi)康?、 練習(xí)使用農(nóng)藥殘留快速檢測儀，掌握其操作過程；2、 掌握酶抑制法的實驗原理。二、 實驗原理本實驗采用酶抑制法，有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥能抑酶活性，使本可以由酶參與的顯色反應(yīng)而失去顏色，呈白色?？捎帽壬ǘ恳种瞥潭?。抑制率是有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制酶能力的強弱。在一定條件下,有機磷和氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿脂酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)。產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算

2、出抑制率。通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有高劑量有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。三、 實驗步驟 1 參數(shù)設(shè)置 2 校準(zhǔn)測量：選擇校準(zhǔn)菜單后，取2.5ml試劑一移入比色瓶后，各取100ul試劑二和試劑三倒入比色瓶中，蓋緊搖勻, 放入比色槽中放置10min，按校準(zhǔn)鍵，儀器顯示正在預(yù)熱，儀器發(fā)出嘀嘀嘀三聲后，表示校準(zhǔn)完畢。3 空白測量：接上步，按空白測量鍵，儀器顯示正在預(yù)熱，發(fā)出嘀嘀嘀三聲后，提示加入試劑四，取出比色瓶加入100ul試劑四，蓋好搖勻，放入比色瓶中，按回車?yán)^續(xù)，儀器顯示正在測量，倒計時三分鐘，結(jié)束后同樣發(fā)出嘀嘀嘀三聲。并顯示吸光度值A(chǔ)1，A2。 4 樣品測量4.1 樣品制備：選取有代

3、表性的果蔬樣品，擦去表面泥土，葉菜用葉菜取樣器取葉片部分，果實蔬菜可切割。然后切成1cm左右的見方碎片，稱取2.0g樣品。4.2 樣品中農(nóng)藥的提?。簩?個樣品提取瓶放在支架上，各放入2.0g樣品，各加10.ml 試劑一，用攪拌針使樣品全部浸入液體中，放入提取儀中萃取6分鐘。之后放回支架，取2.5ml注入比色瓶中。 4.3 樣品測量：選擇測量鍵，各加100ul試劑二和試劑三混合搖勻。按確認(rèn)鍵進行測量，預(yù)熱結(jié)束后。儀器顯示正在培養(yǎng)。10分鐘后結(jié)束，發(fā)出嘀嘀嘀三聲。提示加入試劑四。加入后，按確認(rèn)鍵三分鐘后，屏幕顯示結(jié)果。四、 實驗結(jié)果與分析 1 抑制率公式： E（%）=(A2-A1)-(A4-A3)

4、 /(A2-A1) × 100% E ：抑制率 A1：空白測量3分鐘前的吸光度值 A2：空白測量3分鐘后的吸光度值 A3：樣品測量3分鐘前的吸光度值 A4：樣品測量3分鐘后的吸光度值 2 結(jié)果判定：當(dāng)被測樣品的抑制率在50%以上時，表示被測樣品中有高劑量有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要檢測兩次以上。對陽性結(jié)果的樣品，可用其他方法進一步確定農(nóng)藥品種的含量，并報有關(guān)部門處理。實驗所測樣品為豆角， 經(jīng)實驗測得：A1=-0.029，A2=0.617，A2-A1=0.646>0.300，所以空白有效。A3=0.329，A4=1.117<1.8，所以此樣品檢測有效。抑制率為4.1%，小于50%，所以樣品檢測一次即可。五、 問題與討論本次實驗中應(yīng)注意的問題有以下幾點：1、試劑二用量：若A2-A1小于0.300，此空白無效，需要重新檢測，若多次測定后，仍小于0.300，則需要增加試劑二的用量，直到大于為止。2、吸光度確認(rèn)：在樣品測量結(jié)束后。若A4大于1.80，則此樣品檢測無效，需重新檢測，多次測量后仍大于1.80，為果蔬色素干擾，需要對被測樣品進行整株提取，不要剪碎樣品。 3、注意時間間隔：提示加入試劑四時應(yīng)該在嘀嘀嘀三聲后加入(空白和樣品)。且做空白和樣品時加入試劑四的時間間隔應(yīng)一致。