弧菌屬Vibriopacini的檢驗(yàn)

1、弧菌屬Vibrio pacini的檢驗(yàn)c II拿羊:SE 機(jī)卸;福也工，刁¥柱羊 R 舌'引E.7Sq-it <> t舌L 曲1、菌體大小與形態(tài):G-,菌體短小，直或彎桿菌（0.5-0.8卩m x 1.4-2.6卩m）,以1根或幾根極生鞭毛運(yùn)動(dòng)， 無(wú)莢膜， 無(wú)芽孢。2、培養(yǎng)特性與代謝特征：多數(shù)在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好；兼性厭氧，具呼吸和發(fā)酵兩種代謝類型。所有的種可在25 C 生長(zhǎng)，多數(shù)在30C生長(zhǎng)。pH值6.0-9.0。Na+刺激所有種生 長(zhǎng)，并且為多數(shù)種所必需。氧化酶陽(yáng)性。不產(chǎn)色或產(chǎn)黃色?？纱x D-葡萄糖和其他碳 水化合物，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。還原硝酸鹽 （產(chǎn)氣弧菌、梅

2、氏弧菌 和病海魚(yú)弧菌除外）。多數(shù)種發(fā)酵麥芽糖、甘露糖和海藻糖。 多數(shù)對(duì)弧菌抑制劑 0/129敏感。1、生態(tài)特性：發(fā)現(xiàn)于各種鹽度的水生生境，最常見(jiàn)于海、海岸、海面和海生動(dòng)物的消化道，有的在淡水中也有發(fā)現(xiàn)。有的是人病原菌，有的對(duì)海洋脊椎和無(wú)脊椎動(dòng)物致病。最重要的人病原菌：霍亂弧菌(V.cholerea)可引起霍亂；副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）污染過(guò)的魚(yú)和貝類引起人食物中毒；創(chuàng)傷弧菌（V.vulnificus ）可引起高致死性的敗血癥。臨床意義（臨床表現(xiàn)）劇烈上吐卜瀉，嚴(yán)電脫水、酸中奇、痙攣、屎閉、休克、死t':jlj 1r* w. J| fl* 1Zu_JA 1fca

3、sl jll J -fJr lllC zwri/Ar?夕卜Wd tTfi企霄蘋(píng)萄郴» 刈 引氐歯擁JffcU齊U W 王些霸zJ曲C在無(wú)斎KH寸不倉(cāng)邑塵長(zhǎng)酣於 C K zzfnz Wr 夕卜 FH 十生i發(fā)欝菊萄柄求寸弧1對(duì)抑需U齊破？感fH物株劉n耆鈦鑿 C在無(wú)戕:H寸不肓巨壬工弧菌檢驗(yàn)方法：1）初步腕足：與O1群和029群抗血沽多價(jià)和單價(jià)）凝 集，歯落和歯體艱態(tài)、氧化酚試驗(yàn)等作出初步報(bào)吿。2）最股鑒定二根捌純培養(yǎng)后金面生化反應(yīng).血消學(xué)分群及分型。(一)霍亂弧菌(V. cholerae )分型：H前-常用的° * .忙!方法有1frij &埠丄些111 il J

4、f*zx jfy /1 鳴h *生物#和0-丁 j tt jr |rT 11f=t,T_4 IEi 1 平 Tj UiK血消學(xué)分吃根捺H抗脈利<J抗原分型> H抗原為共同抗原*特并性低：O抗原兵有群特異性和型特異性, 是乂 ch/erae分群和分型的基礎(chǔ)>根擁O抗原的不R * K cholerae現(xiàn)分為155亍血詁椰.It中僅01 群和O139APJI起祀亂* 02O1軸血消群可引起人類的円腸炎, 不引起霍亂流行> K cholerae O/的O抗原由A、B . C三種抗原成分組成*其中A是 oittr的押特并性抗原*通過(guò)三種抗原成分的不冋紐合可分成3個(gè) 型：AB構(gòu)成小

5、川型.AC構(gòu)成稻葉型* AUC構(gòu)成彥島型霍亂弧菌血清學(xué)分型出否與O!抗血清凝集O1群0139 群非O1群根據(jù)O抗康組成不同稻葉型 (lnaba>小川型 (Ogawa)彥隔型 (Hikojitnu)(<>1 群ACABABC生物學(xué)性狀：革蘭陰性 彎曲弧形或逗點(diǎn)狀，首尾相接魚(yú)群樣平行排列單端極鞭毛，有普通菌毛和性菌毛懸滴觀察：細(xì)菌運(yùn)動(dòng)，非?；顫姡蚀┧髽踊蛄餍菭?。培養(yǎng)特性：> pH 6. 810. 2 耐堿拍酸）>初次分離川PH& 5堿性赍白籐水A 經(jīng)46h液體衣面大最繁殖，形威菌離選樣性培養(yǎng)甚> TCBS <硫彳弋硫酸誌-枸樓酸撒-儲(chǔ)-應(yīng)WO瓊牙

6、旨平板> 含亞磚酸鉀的培養(yǎng)基* XX洗瓊脂 慶大褲素瓊脂El Tor塵物型在血平板上帀形成R -溶血霍亂弧菌在TCBS瓊脂平板上形成發(fā)酵廉糖的較大的黃色曲落霍亂弧菌檢驗(yàn)方法：鑒別試驗(yàn)；霍亂紅試驗(yàn)、粘絲試驗(yàn)、0/129敏感試驗(yàn)、雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)、多粘菌素 B敏感試驗(yàn)、噬菌體裂解試驗(yàn)、耐鹽 培養(yǎng)試驗(yàn)霍亂紅試驗(yàn)：K Ms辰皿呂在含朋i酸盤(pán)的苗門(mén)H加水中培養(yǎng)H寸. 能分解培養(yǎng)壘中的色氮険產(chǎn)生叼I味同時(shí)，將硝酸話還原威為亞硝繼銘兩種產(chǎn)物結(jié)合空威亞硝梭旳I味" 滴加濃硫梭后呈現(xiàn)醬薇色P為崔亂紅試驗(yàn)陽(yáng)性*但該試滋lb K 濟(jì) 協(xié)祥他屣分瞬色或利還JK4硝棱鹽的細(xì)鑿均能發(fā)生陽(yáng)性反應(yīng) 粘絲試驗(yàn):

7、 將（k5% 去氧膽酸鈉水溶液與乂 "2滄“甘昆勻血濃懇液夕 lmm內(nèi)懸液由混變濘h 并變得粘稠.以接種環(huán)挑取時(shí)有 粘絲形成弧閑居細(xì) 閑除 K para haem f>lyticus部分 閑株夕卜* 均有此反、0/129敏感試驗(yàn)0/1292« 4-Diamino-6 r 7-Diisopropylpteridiiie2, 4-二抵基_G 7-丙壘嗥癥卜將0/129及150-（5的紙貼在接種冇待測(cè)産j的瓊月旨平板上，35X7WVJ lH-24h® ,紙片閥圍出現(xiàn)任何大小的抑闘 圈均為敏!磴 01 君羊利-101 群 K <rhJSj 敏感但己育對(duì)O八29

8、耐藥的苗株田現(xiàn)，用此試聆作強(qiáng)足肘需 諜慎雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)任濘f凈的玻片上商力II生理占丘水1渝，I&L1H-24 11的細(xì)閔余斗1阪 培養(yǎng)物與生理鹽水混勻型濃厚萌懸液加入用塵理航水洗滌3次的2佔(zhàn) 新鮮雞紅細(xì)胞誌水恐液一 満,死分混勻* 1 min內(nèi)出現(xiàn)凝傘為陽(yáng)性古典生物唄陽(yáng)性，El Tor生物瑕陰性多粘菌素B敏感試驗(yàn)在融化并已冷卻至50 C的普通瓊脂中加入50u/ml 粘菌素 B*混勻后傾注平板，凝罔備用取被測(cè)試歯株23h的肉湯培養(yǎng)物*接種平板表m匚35 C 孵 療訶24h后觀察冇無(wú)細(xì) 鑿生長(zhǎng)占典塵物型不生長(zhǎng) <做感），ElToMt物型生長(zhǎng) C不皈?咚噬菌體裂解試驗(yàn)第IV組噬菌體

9、可裂解古典生物型不能裂解E】Tor生物糧第V組噬鑿體口J裂解El Tor生物型*不能裂解占典生物型V-P試驗(yàn)K 屜占典生物糧陰性El Tot生物空囚彳性， 但育個(gè)另U超株為陰性耐鹽試驗(yàn)K chalerae能在含0%Y% 氯化鈉培養(yǎng)基屮生長(zhǎng) 氯化鈉濃度崗于6%則不生長(zhǎng)（二）副溶血弧菌（ V. parahaemolyticu®具嗜鹽性，為海產(chǎn)魚(yú)弧菌病的病原菌，一般在20-28 C引起魚(yú)發(fā)病。人類食用或接觸污染本菌的魚(yú)、器具類等引致食物中毒。1、形態(tài)特征培養(yǎng)特性：系革蘭陰性菌呈弧狀、桿狀、絲狀等形態(tài)。菌體一端有單鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑、無(wú)莢膜、無(wú)芽孢2、培養(yǎng)特性? 兼性厭氧，菌落中等大小，培養(yǎng) 24h時(shí)直徑約2mm。? 最適生長(zhǎng)溫度是30-37 C, 42 C仍可生長(zhǎng)。生長(zhǎng)pH5.6-9.6(8.0)。? 代時(shí)10-20 min，增殖速度是大腸桿菌和志賀氏菌的2倍。? 多數(shù)菌株對(duì)弧菌抑制劑0/129不敏感，是弧菌屬中少有的例外。? 生長(zhǎng)繁殖時(shí)必須有鈉離子。在含2.5% NaCI培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，不含NaCI的培養(yǎng)基不能生長(zhǎng)，具嗜鹽性。培養(yǎng)特征：A 嗜鹽，不耐鹽(0%. 1%, 6%. «% ,10%)在TCBS培養(yǎng)基上：為蔗糖不發(fā)酵的綠色菌落lf!i (Kanagawa phenomenon