納豆激酶介紹

1、納豆激酶介紹 納豆激酶納豆激酶(nattokinase簡(jiǎn)稱NK)是一種枯草桿菌蛋白激酶，是在納豆發(fā)酵過程中由納豆枯草桿菌(Bacillus subtilisl natto)產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶。具有溶解血栓，降低血粘度，改善血液循環(huán)，軟化和增加血管彈性等作用。1980年在納豆中被發(fā)現(xiàn)，由275個(gè)氨基酸按照固定排列方式組成，分子量是27724，有分解血栓的獨(dú)特功能，活性效果用固有單位FU表示。發(fā)現(xiàn)歷程納豆激酶的發(fā)現(xiàn)來自著名的"兩點(diǎn)半實(shí)驗(yàn)"須見洋行博士須見洋行博士1980年的一天，從事溶解血栓藥物研究工作的日本心腦血管專家須見洋行博士，他突然想起納豆不是纖維蛋

2、白發(fā)酵的嗎？而血栓最頑固的部分就是纖維蛋白，于是，下午兩點(diǎn)半時(shí)，須見洋行博士把納豆中提取的物質(zhì)加入到人工血栓中。原本準(zhǔn)備第二天看結(jié)果的，但5點(diǎn)半的時(shí)候，一次偶然的察看，奇跡發(fā)生了，血栓居然溶解了2厘米，而平常用尿激酶做溶血栓的實(shí)驗(yàn)溶解2厘米需要近兩天的時(shí)間，也就是說納豆發(fā)酵物溶解血栓的速度是尿激酶的19倍之多。于是，就將納豆的這種強(qiáng)力溶栓物命名為納豆激酶Nattokinase，簡(jiǎn)稱NK，這就是震驚世界的溶血栓藥物研究史上有名的“下午兩點(diǎn)半”實(shí)驗(yàn)。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)株式會(huì)社日本生物科學(xué)研究所與韓國(guó)首爾延世大學(xué)研究院心腦血管疾病中心共同研究關(guān)于納豆激酶對(duì)高血壓的效果。該研究報(bào)告的結(jié)論是：“總之，納豆激酶會(huì)導(dǎo)

3、致收縮壓和舒張壓下降。這個(gè)結(jié)果表明增加納豆激酶的攝入，可能對(duì)于預(yù)防和治療高血壓起著重要的作用?！痹撗芯繄?bào)告被國(guó)際權(quán)威學(xué)刊SCI收錄(Japanese society of hypertension VOL.31NO.8.August，2008ISSN0916_9636)。株式會(huì)社日本生物科學(xué)研究所與印度孟買市TNMC&BYLNair醫(yī)院共同進(jìn)行的急性腦中風(fēng)患者應(yīng)用納豆激酶+低分子肝素+抗凝藥物治療的綜合臨床研究。試驗(yàn)結(jié)論表明：納豆激酶經(jīng)口服攝取+低分子量肝素+抗血小板凝集藥對(duì)于急性缺血腦中風(fēng)的治療效果顯著。該研究報(bào)告也被國(guó)際權(quán)威學(xué)刊SCI收錄(Jpn pharmacol the

4、r vol.32 No 7 2004 TNMC&BYLNair 醫(yī)院腦神經(jīng)外科)。株式會(huì)社日本生物科學(xué)研究所和日本圣瑪麗安娜醫(yī)科大學(xué)疑難疾病治療研究中心共同進(jìn)行關(guān)于納豆激酶抑制血小板凝固和預(yù)防血栓形成的研究。該項(xiàng)研究的結(jié)論是：證實(shí)了納豆激酶不但能溶解血栓，還能抑制血小板凝固，起到防范血栓形成的作用。這項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果于2003年3月在日本藥學(xué)會(huì)發(fā)表。此外，株式會(huì)社日本生物科學(xué)研究所還進(jìn)行過納豆激酶攝取后血液形態(tài)學(xué)的研究，手指血液流動(dòng)變化試驗(yàn)對(duì)視網(wǎng)膜靜脈塞栓試驗(yàn)、以及納豆中維生素K2對(duì)華法令拮抗作用 的研究。神奇之處據(jù)小笠原博士介紹，從醫(yī)學(xué)的角度解析，納豆激酶溶栓機(jī)理是：納豆激酶通過刺

5、激血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)，t-PA將纖溶酶原激活為纖溶酶，溶解纖維蛋白，直接溶解血栓；同時(shí)將人體內(nèi)的尿激酶原激活為尿激酶，尿激酶與t-PA一同激活纖溶酶原，達(dá)到溶解血栓。由此可見，納豆激酶在直接溶解已經(jīng)形成血栓的同時(shí)，還能激活增強(qiáng)人體自身的溶栓能力，從而起到持久平穩(wěn)的溶栓作用。而且，小笠原博士又說：“納豆激酶只溶解血栓的主體物質(zhì)纖維蛋白，不水解血漿纖維蛋白原，所以不會(huì)引發(fā)出血的危險(xiǎn)?！边@一點(diǎn)是臨床溶栓藥劑所普遍缺失的。此外，進(jìn)一步的臨床研究發(fā)現(xiàn)，納豆激酶還具有明顯的降血壓和抑制血小板凝集作用。作用研究納豆激酶(NattoKinase，NK)由食品納豆中提取或納豆菌發(fā)酵

6、生產(chǎn)，是一種分子量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于 UK、SK、tPA的蛋白質(zhì)，并可由腸道，吸收，納豆激酶的體外、體內(nèi)溶栓性質(zhì)通過實(shí)驗(yàn)也已得到確定，同時(shí)得出納豆激酶的體內(nèi)溶栓活性為纖溶酶的四倍，在體內(nèi)作用迅速、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，還能激活體內(nèi)的tPA，使之溫和、持續(xù)地提高血液的纖溶活性?；夹募」Ｈ奈ｋU(xiǎn)患者，一次需投入尿激酶30萬單位，而50克的 納豆中含有80萬單位尿激酶的血栓溶解作用。(須見洋行等報(bào)道每克濕重納豆約相當(dāng)于1600尿激酶單位。)藥理特性論文截圖藥理特性論文截圖 (4張)日本圣瑪麗安娜醫(yī)科大學(xué)疑難病治療研究中心和日本生物科學(xué)研究所最發(fā)現(xiàn)，納豆激酶有抑制血小板凝固的作用，有助于預(yù)防高血壓和動(dòng)脈硬化。據(jù)日經(jīng)產(chǎn)業(yè)新

7、聞報(bào)道，研究人員讓接受實(shí)驗(yàn)者食用納豆激酶的培養(yǎng)提取物，然后化驗(yàn)他們的血液。他們發(fā)現(xiàn)，食用這種提取物6小時(shí)后，實(shí)驗(yàn)對(duì)象血小板的凝固作用受到抑制。研究人員據(jù)此斷定，納豆激酶具有溶化血栓、使血流順暢的功能。因而，納豆激酶成為一種新型的口服性溶血栓藥物(第二代溶栓藥)，在預(yù)防、治療心腦血管栓塞癥及栓塞性老年癡呆癥等方面起到積極作用。藥理作用納豆激酶與其他溶栓藥物相比成本低、安全性好、分子量小、口服效果好、溶栓活性高、作用持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等，有望被開發(fā)為一種市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)能力強(qiáng)的新型溶栓藥劑（附論文截圖）。含量標(biāo)識(shí)國(guó)際通用的標(biāo)準(zhǔn)含量標(biāo)識(shí)FU2010年12月20日，日本納豆激酶協(xié)會(huì)與納豆激酶專利所有者日本生物科學(xué)研究

8、所邀請(qǐng)中國(guó)國(guó)家醫(yī)學(xué)教育發(fā)展中心在北京梅地亞中心召開新聞發(fā)布會(huì)，并發(fā)表聲明：日本生物科學(xué)研究所是日本及全球最大的納豆激酶原料生產(chǎn)企業(yè)，唯一擁有 日本專利廳授予的納豆激酶生產(chǎn)專利（專利號(hào)第3881494）。該研究所研制的納豆激酶是通過納豆菌培養(yǎng)液發(fā)酵產(chǎn)生納豆激酶，經(jīng)特殊的技術(shù)和工藝提取和提純。以這種物質(zhì)為主要原料制作而成的高純度納豆激酶產(chǎn)品具有溶解血栓作用，是現(xiàn)代生物領(lǐng)域的一項(xiàng)高科技產(chǎn)品，其安全性和有效性已經(jīng)過醫(yī)學(xué)臨床驗(yàn)證，也得到日本納豆激酶協(xié)會(huì)的充分認(rèn)可。此外，日本官方健康營(yíng)養(yǎng)食品協(xié)會(huì)制定的納豆激酶產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)單位為“FU”，而非“IU”。FU與FU/g的區(qū)別納豆激酶在國(guó)際上的標(biāo)準(zhǔn)單位為“FU”，

9、是指每粒納豆激酶產(chǎn)品的納豆激酶含量；“FU/g”是指每克納豆原料中的納豆激酶含量，兩者存在區(qū)別。理化特點(diǎn)1、納豆激酶是在納豆發(fā)酵過程中由納豆枯草桿菌(Bacillus subtilisl natto)產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶（單鏈多肽酶），分子量為27728道爾頓。2、納豆激酶在溫度超過80時(shí)迅速變性失活，但反復(fù)凍融對(duì)其影響不大。3、納豆激酶在PH值從7升至12時(shí)，10min內(nèi)穩(wěn)定；PH值低于5時(shí)，迅速變性失活。胃酸環(huán)境中的PH值只有1.2到2之間，納豆激酶根本無法通過。4、納豆激酶與粘性物質(zhì)混合后，在PH值2-3的酸性環(huán)境中，還能保持不超過7.5%的活性。5、納豆激酶是大分子的單鏈多肽酶，可被

10、腸道消化液（糜蛋白酶、胰蛋白酶、小腸液等）分解成氨基酸片段或分子量更小的肽鏈。溶栓特點(diǎn)1、納豆激酶對(duì)交聯(lián)狀態(tài)的纖維蛋白（已形成血栓的纖維蛋白）尤其敏感，可以將其直接降解，對(duì)血漿纖維蛋白無影響，不易引起出血。2、納豆激酶具有多元化的溶栓機(jī)制。除上述直接溶栓效果，還有少量的間接溶栓效果。激活血管內(nèi)皮產(chǎn)生內(nèi)源性纖維酶原激活劑（T-PA）。激活腎臟產(chǎn)生的尿激酶原成為有活性的尿激酶。溶解纖溶酶原激活劑抑制物，確保溶栓效果。作用說明維生素K2與納豆激酶的作用卻正好相反，納豆激酶是溶解血栓促進(jìn)血液循環(huán)，而維生素K2則是凝血。所以，納豆激酶產(chǎn)品中含有維生素K2，是會(huì)大大影響納豆激酶的溶栓作用的。選擇方法市場(chǎng)上

11、納豆激酶的種類太多，價(jià)格和品質(zhì)參差不齊，很多人不知道如何選購(gòu)，如何選擇優(yōu)質(zhì)的納豆激酶產(chǎn)品，可以參考以下四點(diǎn)進(jìn)行購(gòu)買。一、產(chǎn)品是否符合國(guó)家食品相關(guān)部門規(guī)定？納豆激酶屬于膳食補(bǔ)充劑，根據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督局規(guī)定，生產(chǎn)企業(yè)必須具有“生產(chǎn)許可證”，產(chǎn)品包裝必須明確注明生產(chǎn)商、生產(chǎn)地址、條形碼、QS生產(chǎn)許可、執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)、主要成分表、營(yíng)養(yǎng)成分等信息，缺少任何一項(xiàng)均屬于違規(guī)的假冒偽劣產(chǎn)品。二、產(chǎn)品或生產(chǎn)商是否擁有納豆激酶行業(yè) 的相關(guān)認(rèn)證？擁有國(guó)際國(guó)內(nèi)納豆激酶行業(yè)機(jī)構(gòu)、國(guó)家級(jí)研究機(jī)構(gòu)、國(guó)家食品藥品行業(yè)等機(jī)構(gòu)認(rèn)證的納豆激酶產(chǎn)品，比沒有相關(guān)認(rèn)證的納豆激酶產(chǎn)品更具有權(quán)威性、規(guī)范性、安全性、有效性。三、納豆激酶的含量及標(biāo)

12、示是否符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)？含量是衡量納豆激酶產(chǎn)品品質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)之一。國(guó)際上規(guī)定：納豆激酶的含量單位為FU/片，每日推薦服用量為2000-4000FU，且產(chǎn)品包裝上必須注明真實(shí)含量，即每粒含多少FU；如包裝上使用FU/g（納豆激酶原料的單位）屬于不符合行業(yè)規(guī)范的虛假行為，購(gòu)買時(shí)需謹(jǐn)慎。四、納豆激酶的劑型是否安全?膠囊/軟膠囊：主要原料為明膠，1 國(guó)內(nèi)明膠行業(yè)魚龍混雜，央視多次曝光毒膠囊事件，工業(yè)明膠中含有大量重金屬元素，不利于人體健康。片劑：采用植物提取物作為包衣，不含重金屬元素。服用方法日本營(yíng)養(yǎng)健康食品協(xié)會(huì)規(guī)定納豆激酶的每日正常維持量應(yīng)該不低于2000FU。因此，醫(yī)學(xué)營(yíng)養(yǎng)專家建議納豆激酶服用人群的基本用

13、量如下：1、每日攝取量2000FU，是正常或亞健康人群預(yù)防心腦血管疾病用量，多數(shù)人在服用7天左右身體出現(xiàn)反應(yīng)，自覺精力充沛，眼睛干澀癥狀等開始好轉(zhuǎn)；敏感人群當(dāng)天即有反應(yīng)。2、每日攝取量2000FU-4000FU，是心腦血管疾病患者建議用量，15天左右大多身體出現(xiàn)積極反應(yīng)，比如手腳冰涼、胸悶心慌、肢體麻木、頭暈眼花、失眠等癥狀逐漸緩解，2-3個(gè)月左右血壓、血脂指標(biāo)逐漸向正常值靠攏，待指標(biāo)正常時(shí)可減量至健康維持量。3、每日攝取量4000FU-6000FU，是心腦血管疾病重病患者建議用量，1月左右自覺癥狀開始減緩，維持3個(gè)月減緩明顯，待指標(biāo)好轉(zhuǎn)后，可逐漸減量。服用禁忌1嚴(yán)重腹瀉，嘔吐，消化不良者；2

14、需要促凝藥物治療的病患。3皮膚、內(nèi)臟器官出血、滲血者。4治療中使用大劑量溶栓藥物者。5支架術(shù)后人群遵醫(yī)囑。注意事項(xiàng)孕婦不推薦食用，手術(shù)前后2周暫停食用，以免影響傷口愈合。其它與血液凝集相關(guān)疾病，須先請(qǐng)教醫(yī)生后方可食用。若有大量出血,如血管破裂、意外事故等也應(yīng)避免食用。如腦溢血患者須在癥狀發(fā)作期后3個(gè)月才適合食用。納豆激酶屬于功能性食品不能替代藥物。不受胃酸干擾，直達(dá)小腸吸收，體內(nèi)作用時(shí)間8-12小時(shí)。低熱量，低蛋白，肥胖及腎病患者可安心食用。與藥物同食無抵觸且可降低藥物的不良反應(yīng)。調(diào)控機(jī)制同其它生物活性物質(zhì)一樣，納豆激酶的分秘表達(dá)受多種因素的影響。W ong，S_L_| 等 的研究了與aprN

15、同源性很好的基因aprE，結(jié)果表明基因的分 秘表達(dá)受口 啟動(dòng)子舫控制，他們利用s1按酸酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)分析法確定了該基因在體內(nèi)外轉(zhuǎn)錄的起始位點(diǎn)，體外轉(zhuǎn)錄用 RNA 聚臺(tái)酶(Eo)，體內(nèi)轉(zhuǎn)錄利用從T孢子細(xì)胞中分離得到的mRNA，基于轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)同腺苷有關(guān)，從而選擇了+t位點(diǎn)，這種方法被mRAN 序列分析所證實(shí)。結(jié)果表明，基因在體外轉(zhuǎn)錄有兩個(gè)啟動(dòng)位點(diǎn)，之間被15個(gè)核苷酸隔開；體內(nèi)轉(zhuǎn)錄也在這兩個(gè)位點(diǎn)或其附近。下游位點(diǎn)(P：)具有一個(gè)獨(dú)特的d”識(shí)別序列。Moran等人對(duì)該基因的d”啟動(dòng)子和其它兩種枯草芽孢桿菌的d”啟動(dòng)子怍了比較，比較了它們的保守堿基序列，在一35區(qū)P：?jiǎn)?dòng)子的共有序列為5個(gè)堿基；在一10區(qū)共有

16、序列為8個(gè)堿基兩區(qū)之間被15個(gè)堿基隔開。另外兩個(gè)堿基區(qū)可能調(diào)節(jié)該基因的表達(dá)一個(gè)是在啟動(dòng)子上游35bp處的二分體對(duì)稱區(qū)，另外就是mRNA 上樁糖體結(jié)臺(tái)位點(diǎn)，mRNA 上桉糖體結(jié)臺(tái)位點(diǎn)序列為：pppAAAAG一0 0 A_0 00 U。此外在納豆激酶基因的105-336bp處編碼了一段有77個(gè)氨基酸的蛋白肽(pmpeptide)，其有可能參與調(diào)節(jié)納豆激酶的活性。納豆激酶的表達(dá)同其它枯草桿菌蛋白酶一樣受葡萄糖阻遏和被許多SpoO 孢子形成突變株阻斷，另外Cat A、hpr、Scoe突變株位點(diǎn)可以提高其表達(dá)。分解血栓1、直接血栓、分解血栓2、活化尿激酶的前驅(qū)物使其轉(zhuǎn)為具有活性的尿激酶，以作用血栓分解酵

17、素（酶）。3、增加組織胞漿素原活化劑的量，間接達(dá)到分解血栓目的。理化特性納豆激酶與其他酵素一樣，有其物理、化學(xué)上的特性：1、分子量在20，000-30，000之間有275個(gè)胺基酸。2、等電點(diǎn)（Pi）為0.6±0.3（svensson卡瓦姆法）。3、穩(wěn)定性：ph6-12溫度60°仍穩(wěn)定。分子改造納豆激酶對(duì)纖維蛋白有高度的親和性，能夠直接作用于交聯(lián)的纖維蛋白，應(yīng)用后引起全身出血的傾向小，納豆激酶能否成為新一代的溶栓制劑主要取決于納豆激酶功能的提高，如延長(zhǎng)半衰期、提高酶活力和熱穩(wěn)定性等。由于人們對(duì)納豆激酶分子的結(jié)構(gòu)已很清楚，并且已能熟練操作納豆激酶基因針對(duì)納豆激酶 的缺點(diǎn)，可有目

18、的地進(jìn)行納豆激酶分子的改造研究， HircJfi T 等人采用定點(diǎn)突變使GIC 和變?yōu)镃ys6 C 突變株，再使用 計(jì)算機(jī)分析，找到臺(tái)適的雙硫鍵位點(diǎn)，雙硫鍵的引A ，提高了酶的耐熱性，而不改變其催化性能Cys6 /Cy 突變株的半衰期是野生型的23倍；引入雙硫鍵后，熱穩(wěn)定性提高了45； Takagi H等人采用定點(diǎn)突變的方法，改變括性中心Asp3 附近的1Ie ，然后將突變基因轉(zhuǎn)入Ecoli中表達(dá)，獲得了較高的酶活力，其催化效率是野生型的26倍，作為對(duì)照，他們?cè)贗Ie位點(diǎn)引入了8種不 同的氨基酸殘基(Cys，Ser，Thr，Gly，Ala，Val，Leu，Phe)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有Var 和Leu 突變株表現(xiàn)出酶活力增加，其中Leu 突變株的酶活力顯著增加，其它六種突變株的酶活力均明顯下降，這表明在31位點(diǎn)的側(cè)鏈氨基酸對(duì)納豆激酶活力的表現(xiàn)是非常重要的，并且酶活力表現(xiàn)的水平依賴于側(cè)鏈基團(tuán)的結(jié)構(gòu)。主要功能納豆激酶的一個(gè)顯著功能便是具有溶解血栓的作用Mimugu F 等人用血凝塊溶解分析法涮定了納豆激酶的纖溶