生物化學(xué)簡(jiǎn)明教程第四版課后答案張麗萍_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、1 緒論1 生物化學(xué)研究的對(duì)象和內(nèi)容是什么?解答:生物化學(xué)主要研究:( 1 )生物機(jī)體的化學(xué)組成、生物分子的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及功能;( 2 )生物分子分解與合成及反應(yīng)過(guò)程中的能量變化;( 3 )生物遺傳信息的儲(chǔ)存、傳遞和表達(dá);( 4 )生物體新陳代謝的調(diào)節(jié)與控制。2你已經(jīng)學(xué)過(guò)的課程中哪些內(nèi)容與生物化學(xué)有關(guān)。提示:生物化學(xué)是生命科學(xué)的基礎(chǔ)學(xué)科,注意從不同的角度,去理解并運(yùn)用生物化學(xué)的知識(shí)。3.說(shuō)明生物分子的元素組成和分子組成有哪些相似的規(guī)律:。解答:生物大分子在元素組成上有相似的規(guī)律:性。碳、氫、氧、氮、磷、硫等6種是蛋白質(zhì)、核酸、糖和脂的主要組成元素。碳原子具有特殊的成鍵性質(zhì),即碳原子最外層的 4

2、個(gè) 電子可使碳與自身形成共價(jià)單鍵、共價(jià)雙鍵和共價(jià)三鍵,碳還可與氮、氧和氫原子形成共價(jià)鍵。 碳與被鍵合原子形成4 個(gè)共價(jià)鍵的性質(zhì), 使得碳骨架可形成線性、 分支以及環(huán)狀的多種多性的化合物。特殊的成鍵性質(zhì)適應(yīng)了生物大分子多樣性的需要。氮、氧、硫、磷元素構(gòu)成了生物分子碳骨架上的氨基(-NH2) 、羥基(-OH) 、羰基()、羧基(-COOH) 、巰基(-SH) 、磷酸基 ( -PO4 ) 等功能基團(tuán)。 這些功能基團(tuán)因氮、 硫和磷有著可變的氧化數(shù)及氮和氧有著較強(qiáng)的電負(fù)性而與生命物質(zhì)的許多關(guān)鍵作用密切相關(guān)。生物大分子在結(jié)構(gòu)上也有著共同的規(guī)律性。生物大分子均由相同類型的構(gòu)件通過(guò)一定的共價(jià)鍵聚合成鏈狀, 其

3、主鏈骨架呈現(xiàn)周期性重復(fù)。 構(gòu)成蛋白質(zhì)的構(gòu)件是20 種基本氨基酸。 氨基酸之間通過(guò)肽鍵相連。肽鏈具有方向性( N端-C端),蛋白質(zhì)主鏈骨架呈"肽單位"重復(fù); 核酸的構(gòu)件是核甘酸,核甘酸通過(guò)3' , 5'-磷酸二酯鍵相連,核酸鏈也具有方向性(5'、-3'),核酸的主鏈骨架呈"磷酸-核糖(或脫氧核糖)”重復(fù);構(gòu)成脂質(zhì)的構(gòu)件是甘油、脂肪酸和膽堿,其非極性烴長(zhǎng)鏈也是一種重復(fù)結(jié)構(gòu);構(gòu)成多糖的構(gòu)件是單糖,單糖間通過(guò)糖苷鍵相 連,淀粉、纖維素、糖原的糖鏈骨架均呈葡萄糖基的重復(fù)。2 蛋白質(zhì)化學(xué)1 用于測(cè)定蛋白質(zhì)多肽鏈N 端、C 端的常用方法有哪些?基

4、本原理是什么?解答:(1) N-末端測(cè)定法:常采用一二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。一二硝基氟苯(DNFB或FDNB法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與一二硝基氟苯(一DNFB反應(yīng)(Sanger反應(yīng)),生成DNJ多月t或DNJ蛋白質(zhì)。由于 DNF端氨基形成的鍵對(duì) 酸水解遠(yuǎn)比肽鍵穩(wěn)定, 因此DNJ多肽經(jīng)酸水解后,只有N一末端氨基酸為黃色 DNA氨基酸 衍生物,其余的都是游離氨基酸。 丹磺酰氯(DNS)法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與與丹磺酰氯(DNS-Cl)反應(yīng)生成DNS-多月t或DNS-蛋白質(zhì)。由于 DNS氨基形成的鍵對(duì)酸水解遠(yuǎn)比肽鍵穩(wěn)定,因此DNS-多肽經(jīng)酸水解后,只有N一末端氨基酸

5、為強(qiáng)烈的熒光物質(zhì) DNS-氨基酸,其余的都是游離氨基酸。 苯異硫氰酸脂( PITC 或 Edman 降解)法:多肽或蛋白質(zhì)的游離末端氨基與異硫氰酸苯酯(PITC)反應(yīng)(Edman反應(yīng)),生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白質(zhì)。在酸性有機(jī)溶劑中加熱 時(shí),N一末端的PTC-氨基酸發(fā)生環(huán)化,生成苯乙內(nèi)酰硫月尿的衍生物并從肽鏈上掉下來(lái),除去 N一末端氨基酸后剩下的肽鏈仍然是完整的。 氨肽酶法:氨肽酶是一類肽鏈外切酶或叫外肽酶,能從多肽鏈的 N 端逐個(gè)地向里切。根據(jù)不同的反應(yīng)時(shí)間測(cè)出酶水解釋放的氨基酸種類和數(shù)量,按反應(yīng)時(shí)間和殘基釋放量作動(dòng)力學(xué)曲線,就能知道該蛋白質(zhì)的 N 端殘基序列。(2) C末端測(cè)定法:常采用腫

6、解法、還原法、竣肽酶法。腫解法:蛋白質(zhì)或多肽與無(wú)水腫加熱發(fā)生腫解,反應(yīng)中除C端氨基酸以游離形式存在外,其他氨基酸都轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的氨基酸酰肼化物。 還原法:肽鏈 C端氨基酸可用硼氫化鋰還原成相應(yīng)的a 一氨基醇。肽鏈完全水解后,代表原來(lái)C一末端氨基酸的a一氨基醇,可用層析法加以鑒別??㈦拿阜ǎ菏且活愲逆溚馇忻福瑢R坏膹碾逆湹腃一末端開(kāi)始逐個(gè)降解,釋放出游離的氨基酸。 被釋放的氨基酸數(shù)目與種類隨反應(yīng)時(shí)間的而變化。 根據(jù)釋放的氨基酸量 (摩爾數(shù))與反應(yīng)時(shí)間的關(guān)系,便可以知道該肽鏈的C一末端氨基酸序列。2 測(cè)得一種血紅蛋白含鐵0.426%,計(jì)算其最低相對(duì)分子質(zhì)量。一種純酶按質(zhì)量計(jì)算含亮氨酸 1.65%和異

7、亮氨酸2.48% ,問(wèn)其最低相對(duì)分子質(zhì)量是多少?3 指出下面 pH 條件下, 各蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中向哪個(gè)方向移動(dòng), 即正極, 負(fù)極, 還是保持原點(diǎn)?( 1 )胃蛋白酶( pI 1.0 ) ,在 pH 5.0 ;( 2)血清清蛋白( pI 4.9 ) ,在 pH 6.0 ;(3) a -脂蛋白(pI 5.8 ),在 pH 5.0 和 pH 9.0 ;解答:(1)胃蛋白酶pI 1.0環(huán)境pH 5.0 ,帶負(fù)電荷,向正極移動(dòng);(2)血清清蛋白pl 4.9環(huán)境pH 6.0 ,帶負(fù)電荷,向正極移動(dòng);(4) a -脂蛋白pl 5.8 環(huán)境pH 5.0 ,帶正電荷,向負(fù)極移動(dòng);a-脂蛋白pl 5.8環(huán)境pH 9

8、.0 ,帶負(fù)電荷,向正極移動(dòng)。4何謂蛋白質(zhì)的變性與沉淀?二者在本質(zhì)上有何區(qū)別?解答:蛋白質(zhì)變性的概念:天然蛋白質(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響后,使其失去原有的生物活性,并伴隨著物理化學(xué)性質(zhì)的改變,這種作用稱為蛋白質(zhì)的變性。變性的本質(zhì):分子中各種次級(jí)鍵斷裂,使其空間構(gòu)象從緊密有序的狀態(tài)變成松散無(wú)序的狀態(tài),一級(jí)結(jié)構(gòu)不破壞。蛋白質(zhì)變性后的表現(xiàn): ?生物學(xué)活性消失; ?理化性質(zhì)改變: 溶解度下降, 黏度增加,紫外吸收增加,側(cè)鏈反應(yīng)增強(qiáng),對(duì)酶的作用敏感,易被水解。蛋白質(zhì)由于帶有電荷和水膜,因此在水溶液中形成穩(wěn)定的膠體。如果在蛋白質(zhì)溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭?,破壞了蛋白質(zhì)的水膜或中和了蛋白質(zhì)的電荷,則蛋白質(zhì)膠體溶液就

9、不穩(wěn)定而出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。沉淀機(jī)理:破壞蛋白質(zhì)的水化膜,中和表面的凈電荷。蛋白質(zhì)的沉淀可以分為兩類:( 1 )可逆的沉淀:蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)未發(fā)生顯著的變化,除去引起沉淀的因素,蛋白質(zhì)仍能溶于原來(lái)的溶劑中, 并保持天然性質(zhì)。 如鹽析或低溫下的乙醇 (或丙酮) 短時(shí)間作用蛋白質(zhì)。( 2 )不可逆沉淀:蛋白質(zhì)分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生重大改變,蛋白質(zhì)變性而沉淀,不再能溶于原溶劑。如加熱引起蛋白質(zhì)沉淀,與重金屬或某些酸類的反應(yīng)都屬于此類。蛋白質(zhì)變性后,有時(shí)由于維持溶液穩(wěn)定的條件仍然存在,并不析出。因此變性蛋白質(zhì)并不一定都表現(xiàn)為沉淀,而沉淀的蛋白質(zhì)也未必都已經(jīng)變性。5 下列試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學(xué)的研究中:CNBr, 異

10、硫氰酸苯酯, 丹磺酰氯, 脲, 6mol/LHCl 3-疏基乙醇,水合苛三酮,過(guò)甲酸,胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,其中哪一個(gè)最適合完成 以下各項(xiàng)任務(wù)?( 1 )測(cè)定小肽的氨基酸序列。( 2 )鑒定肽的氨基末端殘基。( 3 )不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性。若有二硫鍵存在時(shí)還需加什么試劑?( 4 )在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。( 5 )在甲硫氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。( 6 )在賴氨酸和精氨酸殘基側(cè)水解肽鍵。解答: ( 1 )異硫氰酸苯酯; ( 2 )丹黃酰氯; ( 3 )脲;- 巰基乙醇還原二硫鍵; ( 4)胰凝乳蛋白酶;( 5 ) CNBr; ( 6 )胰蛋白酶。6由下列信息求八肽的序列。(1

11、)酸水解得Ala , Arg , Leu, Met, Phe, Thr, 2Val 。( 2 ) Sanger 試劑處理得DNP-Ala 。(3)胰蛋白酶處理得Ala , Arg , Thr 和 Leu , Met, Phe, 2Val 。當(dāng)以 Sanger 試劑處理時(shí)分別得到 DNP-Ala 和 DNP-Val 。(4)澳化氟處理得 Ala , Arg,高絲氨酸內(nèi)酯,Thr, 2Val,和Leu, Phe,當(dāng)用Sanger 試劑處理時(shí),分別得DNP-Ala 和 DNP-Leu。解答:由(2)推出N末端為Ala ;由(3)推出Val位于N端第四,Arg為第三,而Thr 為第二;澳化鼠裂解,得出

12、N端第六位是Met,由于第七位是Leu,所以Phe為第八;由(4), 第五為 Val 。所以八肽為: Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe 。7 . 一個(gè)“螺旋片段含有180個(gè)氨基酸殘基,該片段中有多少圈螺旋?計(jì)算該a -螺旋片段的軸長(zhǎng)。解答:180/3.6=50圈,50X0.54=27nm,該片段中含有 50圈螺旋,其軸長(zhǎng)為27nmi8 .當(dāng)一種四肽與 FDN皈應(yīng)后,用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3種氨基酸;當(dāng)這四肽用胰蛋白酶水解時(shí)發(fā)現(xiàn)兩種碎片段;其中一片用LiBH4 (下標(biāo))還原后再進(jìn)行酸水解,水解液內(nèi)有氨基乙醇和一種在濃硫酸條件下能與乙醛酸

13、反應(yīng)產(chǎn)生紫(紅)色產(chǎn)物的氨基酸。試問(wèn)這四肽的一級(jí)結(jié)構(gòu)是由哪幾種氨基酸組成的?解答:(1)四肽與FDN阪應(yīng)后,用5.7mol/LHCl水解彳#到DNP-Val,證明N端為Val。(2) LiBH4還原后再水解,水解液中有氨基乙醇,證明肽的 C端為Gly。(3)水解液中有在濃 H2SO僚件下能與乙醛酸反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色產(chǎn)物的氨基酸,說(shuō)明此氨基酸為T(mén)rp。說(shuō)明C端為Gly Trp(4)根據(jù)胰蛋白酶的專一性,得知N端片段為Val - Arg ( Lys ).,以(1)、(2)、(3)結(jié)果可知道四肽的順序: N Val Arg ( Lys) Trp Gly C。9概述測(cè)定蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的基本步驟。解答: (

14、 1 )測(cè)定蛋白質(zhì)中氨基酸組成。(2)蛋白質(zhì)的N端和C端的測(cè)定。( 3 ) 應(yīng)用兩種或兩種以上不同的水解方法將所要測(cè)定的蛋白質(zhì)肽鏈斷裂, 各自得到一系 列大小不同的肽段。( 4 )分離提純所產(chǎn)生的肽,并測(cè)定出它們的序列。( 5 )從有重疊結(jié)構(gòu)的各個(gè)肽的序列中推斷出蛋白質(zhì)中全部氨基酸排列順序。如果蛋白質(zhì)含有一條以上的肽鏈, 則需先拆開(kāi)成單個(gè)肽鏈再按上述原則確定其一級(jí)結(jié)構(gòu)。如是含二硫鍵的蛋白質(zhì),也必須在測(cè)定其氨基酸排列順序前,拆開(kāi)二硫鍵,使肽鏈分開(kāi),并 確定二硫鍵的位置。拆開(kāi)二硫鍵可用過(guò)甲酸氧化,使胱氨酸部分氧化成兩個(gè)半胱氨磺酸。3 核酸1 . 電泳分離四種核甘酸時(shí),通常將緩沖液調(diào)到什么pH?此時(shí)

15、它們是向哪極移動(dòng)?移動(dòng)的快慢順序如何?將四種核甘酸吸附于陰離子交換柱上時(shí),應(yīng)將溶液調(diào)到什么pH?如果用逐漸降低pH 的洗脫液對(duì)陰離子交換樹(shù)脂上的四種核苷酸進(jìn)行洗脫分離, 其洗脫順序如何?為什么?解答: 電泳分離4種核甘酸時(shí)應(yīng)取pH3.5的緩沖液,在該pH時(shí),這4種單核甘酸之間所帶負(fù)電荷差異較大, 它們都向正極移動(dòng), 但移動(dòng)的速度不同, 依次為:UMP>GMP>AMP>;CMP 應(yīng)取 pH8.0 , 這樣可使核苷酸帶較多負(fù)電荷, 利于吸附于陰離子交換樹(shù)脂柱。 雖然 pH 11.4 時(shí)核甘酸帶有更多的負(fù)電荷,但pH過(guò)高對(duì)分離不利。當(dāng)不考慮樹(shù)脂的非極性吸附時(shí),根據(jù)核甘酸負(fù)電荷的多少

16、來(lái)決定洗脫速度,則洗脫順序?yàn)镃MP>AMP> GMP > UMP實(shí)際上核昔酸和聚苯乙烯陰離子交換樹(shù)脂之間存在著非極性吸附,嘌呤堿基的非極性吸附是嘧啶堿基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結(jié)果使洗脫順序?yàn)椋篊MP> AMP > UMP >GMP2 .為什么DNM易被堿水解,而 RN靖易被堿水解?解答:因?yàn)镽NA的核糖上有2(-OH基,在堿作用下形成 2(,3(-環(huán)磷酸酯,繼續(xù)水解產(chǎn)生 2(-核甘酸和3(-核甘酸。DNA的脫氧核糖上無(wú)2(-OH基,不能形成堿水解的中間產(chǎn)物,故對(duì) 堿有一定抗性。3 . 一個(gè)雙螺旋 DNA子中有一條鏈的成分A = 0.30, G

17、 = 0.24 , 請(qǐng)推測(cè)這一條鏈上的T和C的情況。 互補(bǔ)鏈的A , G , T和C的情況。解答: T + C = 1-0.30-0.24 = 0.46:T = 0.30, C = 0.24 , A + G= 0.46 。4 .對(duì)雙鏈DNA而言, 若一條鏈中(A + G)/(T + C尸0.7,則互補(bǔ)鏈中和整個(gè) DNA分子中(A+G)/(T+C)分別等于多少? 若一條鏈中(A + T)/(G + C尸0.7,則互補(bǔ)鏈中和整個(gè)DNA分子中(A + T)/(G + C)分別等于多少 ?解答:設(shè)DNA的兩條鏈分別為“和3則: A a = Tf3 , Ta = A3 , Ga = Cf3 , Ca =

18、 G 3,因?yàn)椋?Aa + Ga)/ (Ta + Ca) = (T 3 + C 3 )/ (A3 + G3) = 0.7 , 所以互補(bǔ)鏈中(A 3 + G3) / (T3 + C 3) = 1/0.7 =1.43 ;在整個(gè) DN冊(cè)子中,因?yàn)?A = T , G = C ,所以, A + G = T + C , (A + G) / (T + C) = 1; 彳 設(shè)同(1),則 Aa + T a = T 3 + A 3 , Ga + C a = C 3 + G 3 ,所以,(Aa + Ta) / (Ga + Ca) = (A3 + T 3) / (G3 + C 3 ) = 0.7 ;在 整個(gè) DN

19、A子中,(Aa + T a + A 3 + T 3) / (Ga +Ca + G 3 +C3 ) = 2 (Aa + Ta) /2 (Ga +Ca ) = 0.75 . T7噬菌體DNA便鏈B-DNA)的相對(duì)分子質(zhì)量為 2.5 X 107,計(jì)算DNAg的長(zhǎng)度(設(shè)核昔 酸對(duì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為 640) 。解答:0.34 X ( 2.5 X 107/640 ) = 1.3 X 104nm = 13 m,6 .如果人體有1014個(gè)細(xì)胞,每個(gè)體細(xì)胞的 DN蛤量為6.4 X 109個(gè)堿基對(duì)。試計(jì)算人 體DNA的總長(zhǎng)度是多少?是太陽(yáng)一地球之間距離(2.2 X 109 km)的多少倍?已知雙鏈 DNA每1

20、000個(gè)核甘酸重1 X10-18g,求人體DNA的總質(zhì)量。解答:每個(gè)體細(xì)胞的 DNA的總長(zhǎng)度為:6.4 X 109 X 0.34nm = 2.176 X 109 nm = 2.176m,人體內(nèi)所有體細(xì)胞的 DNA勺總長(zhǎng)度為:2.176mX1014 = 2.176 X 1011km,這個(gè)長(zhǎng)度 與太陽(yáng)一地球之間距離(2.2X109 km)相比為:2.176 X 1011/2.2 X 109 = 99 倍,每個(gè) 核甘酸重 1 X 10-18g/1000 = 10-21g ,所以,總 DNA 6.4 X 1023 X 10-21 = 6.4 X 102 = 640g 。7 .有一個(gè)X噬菌體突變體的 D

21、NA長(zhǎng)度是15 dm,而正常X噬菌體DNA勺長(zhǎng)度為17 m, 計(jì)算突變體DNA中丟失掉多少堿基對(duì)?解答:(17-15 ) X 103/0.34 = 5.88 X 103bp8 .概述超螺旋DNA勺生物學(xué)意義。解答: 超螺旋DNAt:匕松弓型DNAM緊密,使DNA分子的體積更小,得以包裝在細(xì)胞 內(nèi); 超螺旋會(huì)影響雙螺旋分子的解旋能力 ,從而影響到DNAW其他分子之間的相互作用; 超螺旋有利于DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制及表達(dá)調(diào)控。9 .為什么自然界的超螺旋DNAI;為負(fù)超螺旋?解答:環(huán)狀DNA自身雙螺旋的過(guò)度旋轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)不足都會(huì)導(dǎo)致超螺旋,這是因?yàn)槌菪龑?使分子能夠釋放由于自身旋轉(zhuǎn)帶來(lái)的應(yīng)力。雙螺旋過(guò)度旋

22、轉(zhuǎn)導(dǎo)致正超螺旋,而旋轉(zhuǎn)不足將導(dǎo)致負(fù)超螺旋。雖然兩種超螺旋都能釋放應(yīng)力,但是負(fù)超螺旋時(shí),如果發(fā)生DNAB鏈(即氫鏈斷開(kāi),部分雙螺旋分開(kāi))就能進(jìn)一步釋放應(yīng)力,而DNA專錄和復(fù)制需要解鏈。因此自然界環(huán)狀DN麻取負(fù)超螺旋,這可以通過(guò)拓?fù)洚悩?gòu)酶的操作實(shí)現(xiàn)。10真核生物基因組和原核生物基因組各有哪些特點(diǎn)?解答:不同點(diǎn): 真核生物DNA含量高,堿基對(duì)總數(shù)可達(dá)10 11 ,且與組蛋白穩(wěn)定結(jié)合形成染色體,具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。原核生物DN蛤量低,不含組蛋白,稱為類核體,只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。 真核生物有多個(gè)呈線形的染色體; 原核生物只有一條環(huán)形染色體。 真 核生物DNA中含有大量重復(fù)序列,原核生物細(xì)胞中無(wú)重復(fù)序列。真核

23、生物中為蛋白質(zhì)編碼 的大多數(shù)基因都含有內(nèi)含子(有斷裂基因);原核生物中不含內(nèi)含子。 真核生物的RNA是細(xì)胞核內(nèi)合成的,它必須運(yùn)輸穿過(guò)核膜到細(xì)胞質(zhì)才能翻譯,這樣嚴(yán)格的空間間隔在原核生物內(nèi) 是不存在的。 原核生物功能上密切相關(guān)的基因相互靠近,形成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,稱操縱子, 真核生物不存在操縱子。 病毒基因組中普遍存在重疊基因, 但近年發(fā)現(xiàn)這種情況在真核生 物也不少見(jiàn)。相同點(diǎn) : 都是由相同種類的核苷酸構(gòu)成的的雙螺旋結(jié)構(gòu),均是遺傳信息的載體, 均含有多個(gè)基因。11 .如何看待 RNM能的多樣性?它的核心作用是什么?解答:RNA的功能主要有: 控制蛋白質(zhì)合成; 作用于RNA轉(zhuǎn)錄后加工與修飾; 參與細(xì)胞功

24、能的調(diào)節(jié); 生物催化與其他細(xì)胞持家功能; 遺傳信息的加工; 可能是生物 進(jìn)化時(shí)比蛋白質(zhì)和 DNA更早出現(xiàn)的生物大分子。其核心作用是既可以作為信息分子又可以作 為功能分子發(fā)揮作用。12 .什么是DNA變性? DNA變性后理化性質(zhì)有何變化?解答:DNAZ鏈轉(zhuǎn)化成單鏈的過(guò)程稱變性。引起DN儂性的因素很多,如高溫、超聲波、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、有機(jī)溶劑和某些化學(xué)試劑(如尿素,酰胺) 等都能引起變性。 DNA 變性后的理化性質(zhì)變化主要有:天然DN冊(cè)子的雙螺旋結(jié)構(gòu)解鏈變成單鏈的無(wú)規(guī)則線團(tuán),生物學(xué)活性喪失;天然的線型DNA分子直徑與長(zhǎng)度之比可達(dá)1 : 10,其水溶液具有很大的黏度。變性后,發(fā)生了螺旋-線團(tuán)轉(zhuǎn)變,黏度顯

25、著降低;在氯化葩溶液中進(jìn)行密度梯度離心,變性后的DNA孚力密度大大增加,故沉降系數(shù)S增加;DNA變性后,堿基的有序堆積被破壞,堿基被暴露出來(lái),因此,紫外吸收值明顯增加,產(chǎn)生所謂增色效應(yīng)。DNA分子具旋光性,旋光方向?yàn)橛倚S捎贒NA分子的高度不對(duì)稱性,因此旋光性很強(qiáng),其 a = 150。當(dāng)DNA分子變性時(shí),比旋光值就大大下降。13 .哪些因素影響 Tm值的大???解答:影響Tm的因素主要有: G-C對(duì)含量。G-C對(duì)含3個(gè)氫鍵,A-T對(duì)含2個(gè)氫鍵, 故G-C對(duì)相對(duì)含量愈高,Tm亦越高(圖 3-29)。在0.15mol/L NaCl,0.015mol/L檸檬酸鈉溶液(1 XSSC)中,經(jīng)驗(yàn)公式為:(

26、G+C % = (Tm - 69.3 ) X 2.44 。 溶液的離子強(qiáng)度。離子 強(qiáng)度較低的介質(zhì)中,Tm較低。在純水中,DNA在室溫下即可變性。分子生物學(xué)研究工作中需 核酸變性時(shí),常采用離子強(qiáng)度較低的溶液。 溶液的pH。高pH下,堿基廣泛去質(zhì)子而喪失 形成氫鍵的有力,pH大于11.3時(shí),DNA完全變性。pH低于5.0時(shí),DNA脫喋吟,對(duì)單鏈 DNA進(jìn)行電泳時(shí),常在凝膠中加入NaOH以維持變性關(guān)態(tài)。變性劑。甲酰胺、尿素、甲醛等可破壞氫鍵,妨礙堿堆積,使Tm下降。對(duì)單鏈 DNA®行電泳時(shí),常使用上述變性劑。14 .哪些因素影響 DNAM性的速度?解答: 影響復(fù)性速度的因素主要有: 復(fù)性的

27、溫度, 復(fù)性時(shí)單鏈隨機(jī)碰撞, 不能形成堿 基配對(duì)或只形成局部堿基配對(duì)時(shí),在較高的溫度下兩鏈重又分離,經(jīng)過(guò)多次試探性碰撞才能形成正確的互補(bǔ)區(qū)。所以,核酸復(fù)性時(shí)溫度不宜過(guò)低,Tm-25c是較合適的復(fù)性溫度。 單鏈片段的濃度, 單鏈片段濃度越高, 隨機(jī)碰撞的頻率越高, 復(fù)性速度越快。 單鏈片段的長(zhǎng) 度,單鏈片段越大,擴(kuò)散速度越慢,鏈間錯(cuò)配的概率也越高。因面復(fù)性速度也越慢,即 DNA 的核苷酸對(duì)數(shù)越多, 復(fù)性的速度越慢, 若以 C0 為單鏈的初始濃度, t 為復(fù)性的時(shí)間, 復(fù)性達(dá) 一半時(shí)的C0t值稱C0t1/2 ,該數(shù)值越小,復(fù)性的速度越快。單鏈片段的復(fù)雜度,在片段大小相似的情況下,片段內(nèi)重復(fù)序列的重

28、復(fù)次數(shù)越多,或者說(shuō)復(fù)雜度越小,越容易形成互補(bǔ)區(qū),復(fù)性的速度就越快。真核生物DNA的重復(fù)序列就是復(fù)生動(dòng)力學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)的,DNA的復(fù)雜度越小,復(fù)性速度越快。15概述分子雜交的概念和應(yīng)用領(lǐng)域。解答:在退火條件下,不同來(lái)源的DNA5補(bǔ)區(qū)形成雙鏈,或DNA單鏈和RNA單鏈的互補(bǔ)區(qū)形成DNA-RN康合雙鏈的過(guò)程稱分子雜交。通常對(duì)天然或人工合成的DNA RN*段進(jìn)行放射性同位素或熒光標(biāo)記,做成探針,經(jīng)雜交后,檢測(cè)放射性同位素或熒光物質(zhì)的位置,尋 找與探針有互補(bǔ)關(guān)系的DNA或RNA直接用探針與菌落或組織細(xì)胞中的核酸雜交,因未改變核酸所在的位置,稱原位雜交技術(shù)。將核酸直接點(diǎn)在膜上,再與探針雜交稱點(diǎn)雜交,使用狹

29、縫點(diǎn)樣器時(shí),稱狹縫印跡雜交。該技術(shù)主要用于分析基因拷貝數(shù)和轉(zhuǎn)錄水平的變化,亦可用于檢測(cè)病原微生物和生物制品中的核酸污染狀況。雜交技術(shù)較廣泛的應(yīng)用是將樣品DNA切割成大小不等的片段,經(jīng)凝膠電泳分離后,用雜交技術(shù)尋找與探針互補(bǔ)的DNA片段。由于凝膠機(jī)械強(qiáng)度差, 不適合于雜交過(guò)程中較高溫度和較長(zhǎng)時(shí)間的處理, Southern 提出一種方法, 將 電泳分離的DN端段從凝膠轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)哪ぃㄈ缦跛崂w維素膜或尼龍膜)上,在進(jìn)行雜交操 作,稱 Southern 印跡法,或Southern 雜交技術(shù)。隨后, Alwine 等提出將電泳分離后的變性RNA吸印到適當(dāng)?shù)哪ど显龠M(jìn)行分子雜交的技術(shù),被戲稱為Norther

30、n 印跡法,或 Northern雜交。分子雜交廣泛用于測(cè)定基因拷貝數(shù)、基因定位、確定生物的遺傳進(jìn)化關(guān)系等。 Southern 雜交和Northern雜交還可用于研究基因變異,基因重排,DNA多態(tài)性分析和疾病診斷。雜交技術(shù)和PCR術(shù)的結(jié)合,使檢出含量極少的DNA為可能。促進(jìn)了雜交技術(shù)在分子生物學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用。DNA5片技術(shù)也是以核酸的分子雜交為基礎(chǔ)的。16概述核酸序列測(cè)定的方法和應(yīng)用領(lǐng)域。解答:DNA勺序列測(cè)定目前多采用Sanger提出的鏈終止法,和 Gilbert提出的化學(xué)法。其中鏈終止法經(jīng)不斷改進(jìn), 使用日益廣泛。 鏈終止法測(cè)序的技術(shù)基礎(chǔ)主要有: 用凝膠電泳 分離DNA|i鏈片段時(shí),

31、小片段移動(dòng),大片段移動(dòng)慢,用適當(dāng)?shù)姆椒煞蛛x分子大小僅差一個(gè) 核甘酸的DNA片段。 用合適的聚合酶可以在試管內(nèi)合成單鏈DNA莫板的互補(bǔ)鏈。反應(yīng)體系中除單鏈模板外,還應(yīng)包括合適的引物, 4 種脫氧核苷三磷酸和若干種適量的無(wú)機(jī)離子。如 果在 4 個(gè)試管中分別進(jìn)行合成反應(yīng),每個(gè)試管的反應(yīng)體系能在一種核苷酸處隨機(jī)中斷鏈的合成,就可以得到4套分子大小不等的片段,如新合成的片段序列為-CCATCGTTGA-在A處隨機(jī)中斷鏈的合成,可得到 -CCA和-CCATCGTAW種片段,在 G處中斷合成可得到-CCATCG和 -CCATCGTT畫(huà)種片段。在C和T處中斷又可以得到相應(yīng)的2套片段。用同位素或熒光物質(zhì)標(biāo)記這

32、 4套新合成的鏈,在凝膠中置于 4 個(gè)泳道中電泳,檢測(cè)這4 套片段的位置,即可直接讀出核苷酸的序列。 在特定堿基處中斷新鏈合成最有效的辦法, 是在上述 4 個(gè)試管中按一定比例分別加入一種相應(yīng)的2(,3(-雙脫氧核甘三磷酸(ddNTB,由于ddNTP的3(位無(wú)-OH,不可能形成磷酸二酯鍵,故合成自然中斷。如上述在A處中斷的試管內(nèi),既有 dATP,又有少量的ddATP,新合成的-CCA鏈中的A如果是ddAMP則鏈的合成中斷,如果是dAMP則鏈仍可延伸。 因此,鏈中有幾個(gè) A,就能得到幾種大小不等的以A為末端的片段。如果用放射性同位素標(biāo)記新合成的鏈,則 4 個(gè)試管中新合成的鏈在凝膠的 4 個(gè)泳道電泳

33、后,經(jīng)放射自顯影可檢測(cè)帶子的位置,由帶子的位置可以直接讀出核苷酸的序列。采用 T7 測(cè)序酶時(shí),一次可讀出 400 多個(gè)核苷酸的序列。 近年采用 4 種射波長(zhǎng)不同的熒光物質(zhì)分別標(biāo)記4 種不同的雙脫氧核苷酸,終止反應(yīng)后4 管反應(yīng)物可在同一泳道電泳, 用激光掃描收集電泳信號(hào), 經(jīng)計(jì)算機(jī)處理可將序列直接打印出來(lái)。 采用毛細(xì)管電泳法測(cè)序時(shí), 這種技術(shù)一次可測(cè)定700 個(gè)左右核苷酸的序列,一臺(tái)儀器可以有幾十根毛細(xì)管同時(shí)進(jìn)行測(cè)序,且電泳時(shí)間大大縮短,自動(dòng)測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步加 快了核酸測(cè)序的步伐,現(xiàn)已完成了包括人類在內(nèi)的幾十個(gè)物種的基因組測(cè)序。RN際列測(cè)定最早采用的是類似蛋白質(zhì)序列測(cè)定的片段重疊法,Holley用

34、此法測(cè)定酵母丙氨酸t(yī)RNA序列耗時(shí)達(dá)數(shù)年之久。隨后發(fā)展了與DNA1序類似的直讀法,但仍不如DNA測(cè)序容易,因此,常將RNA轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ) DNA(cDNA,測(cè)定cDNA序列后推斷 RNA的序列,目前16S rRNA 1 542 b 的全序列測(cè)定, 23S rRNA 2 904 b 的全序列測(cè)定,噬菌體MS2 RNA 3 569b 的全序列測(cè)定均已完成。4 糖類的結(jié)構(gòu)與功能1 書(shū)寫(xiě)-D- 吡喃葡萄糖, L- (-) 葡萄糖, -D- (+) 吡喃葡萄糖的結(jié)構(gòu)式,并說(shuō)明D、 L ;+、 - ; 、各符號(hào)代表的意義。解答:書(shū)寫(xiě)單糖的結(jié)構(gòu)常用D、 L ; d 或(+) 、 l 或(-) ; 、表示。 D-

35、 、 L- 是人為規(guī)定的單糖的構(gòu)型。 是以 D-、 L- 甘油醛為參照物 , 以距醛基最遠(yuǎn)的不對(duì)稱碳原子為準(zhǔn), 羥基在左面的為 L構(gòu)型 , 羥基在右的為 D 構(gòu)型。 單糖由于具有不對(duì)稱碳原子, 可使平面偏振光的偏振面發(fā)生一定角度的旋轉(zhuǎn),這種性質(zhì)稱為旋光性。其旋轉(zhuǎn)角度稱為旋光度, 偏振面向左旋轉(zhuǎn)稱為左旋, 向右則稱為右旋。 d 或 (+) 表示單糖的右旋光性,l 或 (-) 表示單糖的左旋光性。2 寫(xiě)出下列糖的結(jié)構(gòu)式: -D- 葡萄糖 -1- 磷酸, 2- 脫氧-D- 呋喃核糖, -D- 呋喃果糖, D-甘油醛 -3- 磷酸,蔗糖,葡萄糖醛酸。解答:略。3 .已知某雙糖能使本尼地(Benedic

36、t)試劑中的Cu2短化成Cu2O的醇紅色沉淀,用-葡糖糖苷酶可將其水解為兩分子-D- 吡喃葡糖糖, 將此雙糖甲基化后再水解將得到 2,3,4,6- 四氧甲基 -D- 吡喃葡糖糖和 1,2,3,6- 四氧甲基 -D- 吡喃葡糖糖 , 試寫(xiě)出此雙糖的名稱和結(jié)構(gòu)式。解答:蔗糖雙糖能使本尼地 (Benedict)試劑中的Cu2短化成Cu2O的醇紅色沉淀,說(shuō)明該 雙糖具還原性,含有半縮醛羥基。用3 葡糖甘酶可將其水解為兩分子3-D- 口比喃葡糖,說(shuō)明該雙糖是由3 -糖昔鍵構(gòu)成的。將此雙糖甲基化后再水解將得到 2,3,4,6-四氧甲基-D-口比喃葡 糖糖和1,2,3,6-四氧甲基-D-口比喃葡糖,糖基上只

37、有自由羥基才能被甲基化,說(shuō)明3 -葡糖(1-4)葡糖構(gòu)成的為纖維二糖。4 根據(jù)下列單糖和單糖衍生物的結(jié)構(gòu):(A)(B)(C)(D)(1)寫(xiě)出其構(gòu)型(D或L)和名稱;(2)指出它們能否還原本尼地試劑;(3)指出哪些能發(fā)生成苷反應(yīng)。解答: (1) 構(gòu)型是以 D-,L- 甘油醛為參照物, 以距醛基最遠(yuǎn)的不對(duì)稱碳原子為準(zhǔn), 羥基在左面的為L(zhǎng)構(gòu)型,羥基在右的為 D構(gòu)型。A、B、C為D構(gòu)型,D為L(zhǎng)構(gòu)型。(2) B 、C D均有醛基具還原性,可還原本尼地試劑。A為酮糖,無(wú)還原性。(3) 單糖的半縮醛上羥基與非糖物質(zhì)( 醇、酚等 ) 的羥基形成的縮醛結(jié)構(gòu)稱為糖苷, B,C,D均能發(fā)生成苷反應(yīng)。5 透明質(zhì)酸是細(xì)

38、胞基質(zhì)的主要成分,是一種黏性的多糖, 分子量可達(dá)100?000 ,由兩單糖衍生物的重復(fù)單位構(gòu)成 , 請(qǐng)指出該重復(fù)單位中兩組分的結(jié)構(gòu)名稱和糖苷鍵的結(jié)構(gòu)類型。解答:透明質(zhì)酸的兩個(gè)重復(fù)單位是由3D-葡萄糖醛酸和 N-乙酰氨基葡萄糖通過(guò)3-1,3糖苷鍵連接而成。6.纖維素和淀粉都是由1-4糖昔鍵連接的D葡萄糖聚合物,相對(duì)分子質(zhì)量也相當(dāng),但它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上有很大的不同, 請(qǐng)問(wèn)是什么結(jié)構(gòu)特點(diǎn)造成它們?cè)谖锢硇再|(zhì)上的如此差別 解釋它們各自性質(zhì)的生物學(xué)優(yōu)點(diǎn)。解答:淀粉是葡萄糖聚合物,既有1,4糖昔鍵,也有1,6糖昔鍵,為多分支結(jié)構(gòu)。直鏈淀粉分子的空間構(gòu)象是卷曲成螺旋形的 , 每一回轉(zhuǎn)為 6 個(gè)葡萄糖基, 淀粉在

39、水溶液中混懸時(shí)就形成這種螺旋圈。支鏈淀粉分子中除有a-(1,4)糖昔鍵的糖鏈外,還有a -(1,6)糖昔鍵連接的分支處,每一分支平均約含2030個(gè)葡萄糖基,各分支也都是卷曲成螺旋。螺旋構(gòu)象是碘顯色反應(yīng)的必要條件。碘分子進(jìn)入淀粉螺旋圈內(nèi),糖游離羥基成為電子供體,碘分子成為電子受體,形成淀粉碘絡(luò)合物,呈現(xiàn)顏色。其顏色與糖鏈的長(zhǎng)度有關(guān)。當(dāng)鏈長(zhǎng)小于 6個(gè)葡萄糖基時(shí), 不能形成一個(gè)螺旋圈 , 因而不能呈色。當(dāng)平均長(zhǎng)度為 20 個(gè)葡萄糖基時(shí)呈紅色,紅糊精、 無(wú)色糊精也因而得名。 大于 60 個(gè)葡萄糖基的直鏈淀粉呈藍(lán)色。 支鏈淀粉相對(duì)分子質(zhì)量雖大,但分支單位的長(zhǎng)度只有2030個(gè)葡萄糖基,故與碘反應(yīng)呈紫紅色。

40、纖維素雖然也是由D-口比喃葡萄糖基構(gòu)成,但它是以3 -(1,4)糖昔鍵連接的一種沒(méi)有分支的線性分子,它不卷曲成螺旋。纖維素分子的鏈與鏈間,能以眾多氫鍵像麻繩樣擰在一起,構(gòu)成堅(jiān)硬的不溶于水的纖維狀高分子 (也稱纖維素微晶束) , 構(gòu)成植物的細(xì)胞壁。 人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)沒(méi)有纖維素酶(cellulase), 因此不能將纖維素水解成葡萄糖。 雖然纖維素不能作為人類的營(yíng)養(yǎng)物 , 但人類食品中必須含纖維素。因?yàn)樗梢源龠M(jìn)胃腸蠕動(dòng)、促進(jìn)消化和排便。7說(shuō)明下列糖所含單糖的種類、糖苷鍵的類型及有無(wú)還原性?( 1 )纖維二糖( 2)麥芽糖( 3 )龍膽二糖( 4)海藻糖( 5 )蔗糖( 6)乳糖解答:(1)纖維二糖

41、含葡萄糖,3 f 1,4糖昔鍵,有還原性。(2)麥芽糖含葡萄糖,1,4糖昔鍵,有還原性。(3)龍 膽二糖含葡萄糖,3 f 1,6糖昔鍵,有還原性。(4)海藻糖含葡萄糖,1,1糖昔鍵,無(wú)還原性。(5)蔗糖含葡萄糖和果糖,1, 2糖昔鍵,無(wú)還原性。(6)乳糖含葡萄糖和半乳糖,1, 4糖昔鍵,有還原性。8 人的紅細(xì)胞質(zhì)膜上結(jié)合著一個(gè)寡糖鏈, 對(duì)細(xì)胞的識(shí)別起重要作用。被稱為抗原決定基團(tuán)。根據(jù)不同的抗原組合,人的血型主要分為 A型、B型、AB型和。型4類。不同血型的血液 互相混合將發(fā)生凝血, 危及生命。已知4種血型的差異僅在 X位組成成分的不同。請(qǐng)指出不同血型(A型、B型、AB型、O型)X 位的糖基名稱

42、。解答:A型X位是N-乙酰氨基-a -D-半乳糖;B型X位是a -D-半乳糖;AB型X位兼有A型和B型的糖;。型X位是空的。9請(qǐng)寫(xiě)出下列結(jié)構(gòu)式:(1) a L巖藻糖(2)a D-半乳糖(3) N 一乙酰氨基一a一 D-葡萄糖(4) N一乙酰氨基一a一 D-半乳糖胺解答:略。10隨著分子生物學(xué)的飛速發(fā)展,生命的奧秘正在逐漸被揭示。大量的研究已表明,各種錯(cuò)綜復(fù)雜的生命現(xiàn)象的產(chǎn)生和疾病的形成過(guò)程均與糖蛋白的糖鏈有關(guān)。請(qǐng)閱讀相關(guān)資料,列舉你感興趣的糖的生物學(xué)功能。解答:略。5 脂類化合物和生物膜1 簡(jiǎn)述脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和生物學(xué)作用。解答: (1) 脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):脂質(zhì)是生物體內(nèi)一大類不溶于水而易溶于非極

43、性有機(jī)溶劑的有機(jī)化合物,大多數(shù)脂質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是脂肪酸和醇形成的酯及其衍生物。脂肪酸多為 4 碳以上的長(zhǎng)鏈一元羧酸,醇成分包括甘油、鞘氨醇、高級(jí)一元醇和固醇。脂質(zhì)的元素組成主要為碳、氫、氧,此外還有氮、磷、硫等。(2) 脂質(zhì)的生物學(xué)作用:脂質(zhì)具有許多重要的生物功能。脂肪是生物體貯存能量的主要形式,脂肪酸是生物體的重要代謝燃料,生物體表面的脂質(zhì)有防止機(jī)械損傷和防止熱量散發(fā)的作用。磷脂、糖脂、固醇等是構(gòu)成生物膜的重要物質(zhì),它們作為細(xì)胞表面的組成成分與細(xì)胞的識(shí)別、 物種的特異性以及組織免疫性等有密切的關(guān)系。 有些脂質(zhì) (如萜類化合物和固醇等)還具有重要生物活性,具有維生素、激素等生物功能。脂質(zhì)在生物體

44、中還常以共價(jià)鍵或通過(guò)次級(jí)鍵與其他生物分子結(jié)合形成各種復(fù)合物,如糖脂、脂蛋白等重要的生物大分子物質(zhì)。2概述脂肪酸的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。解答: (1) 脂肪酸的結(jié)構(gòu):脂肪酸分子為一條長(zhǎng)的烴鏈( "尾")和一個(gè)末端羧基( "頭" )組成的羧酸。烴鏈以線性為主,分枝或環(huán)狀的為數(shù)甚少。根據(jù)烴鏈?zhǔn)欠耧柡停蓪⒅舅岱譃轱柡椭舅岷筒伙柡椭舅?。?) 脂肪酸的性質(zhì):脂肪酸的物理性質(zhì)取決于脂肪酸烴鏈的長(zhǎng)度和不飽和程度。 烴鏈越長(zhǎng), 非極性越強(qiáng), 溶 解度也就越低。脂肪酸的熔點(diǎn)也受脂肪酸烴鏈的長(zhǎng)度和不飽和程度的影響。脂肪酸中的雙鍵極易被強(qiáng)氧化劑,如H2O2超氧陰離子自由基()、

45、羥自由基( OH等所氧化,因此含不飽和脂肪酸豐富的生物膜容易發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化作用,從而繼發(fā)引起膜蛋白氧化,嚴(yán)重影響膜的結(jié)構(gòu)和功能。脂肪酸鹽屬于極性脂質(zhì),具有親水基(電離的竣基)和疏水基(長(zhǎng)的煌鏈),是典型的兩親性化合物,屬于離子型去污劑。必需脂肪酸中的亞油酸和亞麻酸可直接從植物食物中獲得, 花生四烯酸則可由亞油酸在體內(nèi)轉(zhuǎn)變而來(lái)。它們是前列腺素、血栓嗯烷和白三烯等生物活性物質(zhì)的前體。3概述磷脂、糖脂和固醇類的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生物學(xué)作用解答:I .磷脂包括甘油磷脂和鞘磷脂兩類,它們主要參與細(xì)胞膜系統(tǒng)的組成,少量存在于其他部位。(1) 甘油磷脂的結(jié)構(gòu): 甘油磷脂是由 sn- 甘油 -3- 磷酸衍生而來(lái),

46、分子中甘油的兩個(gè)醇羥基與脂肪酸成酯, 第三個(gè)醇羥基與磷酸成酯或磷酸再與其他含羥基的物質(zhì)( 如膽堿、 乙醇胺、 絲氨酸等醇類衍生物 ) 結(jié)合成酯。(2) 甘油磷脂的理化性質(zhì):物理性質(zhì):甘油磷脂脂雙分子層結(jié)構(gòu)在水中處于熱力學(xué)的穩(wěn)定狀態(tài), 構(gòu)成生物膜的結(jié)構(gòu)基本特征之一化學(xué)性質(zhì):a. 水解作用:在弱堿溶液中,甘油磷脂水解產(chǎn)生脂肪酸的金屬鹽。如果用強(qiáng)堿水解,甘油磷脂水解生成脂肪酸鹽、醇(X OH和磷酸甘油。b.氧化作用:與三酰甘油相似,甘油磷脂中所含的不飽和脂肪酸在空氣中能被氧化生成過(guò)氧化物,最終形成黑色過(guò)氧化物的聚合物。c.酶解作用:甘油磷脂可被各種磷脂酶( PLAA專一水解。(3) 鞘磷脂即鞘氨醇磷

47、脂,在高等動(dòng)物的腦髓鞘和紅細(xì)胞膜中特別豐富,也存在于許多植物種子中。鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸和磷脂酰膽堿(少數(shù)磷脂酰乙醇胺)組成。n .糖脂是指糖基通過(guò)其半縮醛羥基以糖昔鍵與脂質(zhì)連接的化合物。糖脂可分為鞘糖脂、甘油糖脂以及由固醇衍生的糖脂,其中鞘糖脂和甘油糖脂是膜脂的主要成分。(1) 鞘糖脂是神經(jīng)酰胺的 1 位羥基被糖基化形成的糖苷化合物。 依據(jù)糖基是否含有唾液酸或硫酸基成分,鞘糖脂又可分為中性鞘糖脂和酸性鞘糖脂。中性鞘糖脂:又稱腦甘脂,是由神經(jīng)酰胺的C1上的羥基與一單糖分子(半乳糖、葡萄糖等)以糖苷鍵結(jié)合而成,不含唾液酸成分。中性鞘糖脂一般為白色粉狀物,不溶于水、乙醚,溶于熱乙醇、熱丙酮、吡啶

48、及苯等,性質(zhì)穩(wěn)定,不被皂化。它們不僅是血型抗原,而且與組織和器官的特異性,細(xì)胞之間的識(shí)別有關(guān)。酸性鞘糖脂: 糖基部分含有唾液酸或硫酸基的鞘糖脂稱為酸性鞘糖脂。 糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂常稱神經(jīng)節(jié)苷脂,是最復(fù)雜的一類甘油鞘脂,由神經(jīng)酰胺與結(jié)構(gòu)復(fù)雜的寡糖結(jié)合而成,是大腦灰質(zhì)細(xì)胞膜的組分之一,也存在于脾、腎及其他器官中。(2) 甘油糖脂是糖基二酰甘油, 它是二酰甘油分子sn-3 位上的羥基與糖基以糖苷鍵連接而成。甘油糖脂主要存在于植物和微生物中。植物的葉綠體和微生物的質(zhì)膜含有大量的甘油糖脂。它可能在神經(jīng)髓鞘形成中起作用。m.固醇類也稱管類,所有固醇類化合物都是以環(huán)戊烷多氫菲為核心結(jié)構(gòu),因羥基的構(gòu)型

49、不同,可有a及3兩型。膽固醇 ( 也稱膽甾醇) 是一種重要的甾醇類物質(zhì), 一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物。 是動(dòng)物組織中含量最豐富的固醇類化合物, 有游離型和酯型兩種形式。 存在于一切動(dòng)物細(xì)胞中, 以腦、神經(jīng)組織及腎上腺中含量特別豐富,其次為肝、腎、脾和皮膚及脂肪組織。4生物膜由哪些脂質(zhì)化合物組成的?各有何理化性質(zhì)?解答:組成生物膜的脂質(zhì)主要包括磷脂、固醇及糖脂。( 1)磷脂:甘油磷脂,是生物膜的主要成分。是由 sn-甘油-3-磷酸分子中甘油的兩個(gè)醇羥基與脂肪酸成酯, 第三個(gè)醇羥基與磷酸成酯或磷酸再與其他含羥基的物質(zhì)( 如膽堿、 乙醇胺、 絲氨酸等醇類衍生物 )結(jié)合成酯。物理性質(zhì):純的甘油磷脂是白色

50、蠟狀固體,大多溶于含少量水的非極性溶劑中。用氯仿-甲醇混合溶劑很容易將甘油磷脂從組織中提取出來(lái)。這類化合物又稱為兩性脂質(zhì)或稱極性脂質(zhì),具有極性頭和非極性尾兩個(gè)部分?;瘜W(xué)性質(zhì): a.? 水解作用: 在弱堿溶液中, 甘油磷脂水解產(chǎn)生脂肪酸的金屬鹽。 強(qiáng)堿水解,生成脂肪酸鹽、醇(X OH和磷酸甘油。b.?氧化作用:甘油磷脂中所含的不飽和脂肪酸在空氣中能被氧化生成過(guò)氧化物, 最終形成黑色過(guò)氧化物的聚合物。 c.? 酶解作用: 甘油磷脂可被各種磷脂酶(PLA)專一水解。鞘磷脂(SM :鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸和磷脂酰膽堿(少數(shù)為磷脂酰乙醇胺)組成。鞘磷脂為白色晶體,性質(zhì)穩(wěn)定,不溶于丙酮和乙醚,而溶于熱乙醇

51、中,具兩性解離性質(zhì)。( 2) 固醇: 高等植物的固醇主要為谷甾醇和豆甾醇。 動(dòng)物細(xì)胞膜的固醇最多的是膽固醇。膽固醇分子的一端有一極性頭部基團(tuán)羥基因而親水,分子的另一端具有羥鏈及固醇的環(huán)狀結(jié)構(gòu)而疏水。因此固醇與磷脂類化合物相似也屬于兩性分子。物理性質(zhì):膽固醇為白色斜方晶體,無(wú)味、無(wú)臭,熔點(diǎn)為 148.5 ,高度真空條件下能被蒸餾。膽固醇不溶于水,易溶于乙醚、氯仿、苯、丙酮、熱乙醇、醋酸乙酯及膽汁酸鹽溶液中。介電常數(shù)高,不導(dǎo)電?;瘜W(xué)性質(zhì):膽固醇C3上的羥基易與高級(jí)脂肪酸(如軟脂酸、硬脂酸及油酸等)結(jié)合形成膽固醇酯。膽固醇的雙鍵可與氫、溴、碘等發(fā)生加成反應(yīng)。膽固醇可被氧化成一系列衍生物。膽固醇易與毛

52、地黃糖苷結(jié)合而沉淀,這一特性可以用于膽固醇的定量測(cè)定。膽固醇的氯仿溶液與醋酸酐和濃硫酸反應(yīng),產(chǎn)生藍(lán)綠色(Liebermann Burchard 反應(yīng) ) 。( 3)糖脂:是指糖基通過(guò)其半縮醛羥基以糖苷鍵與脂質(zhì)連接的化合物。鞘糖脂和甘油糖脂是膜脂的主要成分。鞘糖脂:依據(jù)糖基是否含有唾液酸或硫酸基成分,鞘糖脂又可分為中性鞘糖脂和酸性鞘糖脂。中性鞘糖脂,是非極性的。鞘糖脂的疏水尾部伸入膜的脂雙層,極性糖基露在細(xì)胞表面,它們不僅是血型抗原,而且與組織和器官的特異性,細(xì)胞之間的識(shí)別有關(guān)。中性鞘糖脂一般為白色粉狀物,不溶于水、乙醚溶于熱乙醇、熱丙酮、吡啶及苯等,性質(zhì)穩(wěn)定,不被皂化。酸性鞘糖脂,糖基部分含有

53、唾液酸或硫酸基的鞘糖脂。糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂常稱神經(jīng)節(jié)苷脂,不溶于乙醚、丙酮,微溶于乙醇,易溶于氯仿和乙醇的混合液。甘油糖脂: 是糖基二酰甘油, 它是二酰甘油分子sn-3 位上的羥基與糖基以糖苷鍵連接而成。甘油糖脂主要存在于植物和微生物中。植物的葉綠體和微生物的質(zhì)膜含有大量的甘油糖脂。在哺乳動(dòng)物組織中也檢測(cè)出了半乳糖基甘油酯,可能在神經(jīng)髓鞘形成中起作用。5何為必需脂肪酸?哺乳動(dòng)物體內(nèi)所需的必需脂肪酸都有哪些?解答: 哺乳動(dòng)物體內(nèi)能夠自身合成飽和及單不飽和脂肪酸, 但不能合成機(jī)體必需的亞油酸、亞麻酸和花生四烯酸等多不飽和脂肪酸。我們將這些機(jī)體生長(zhǎng)必需的而自身不能合成,必須由膳食提供的脂肪酸

54、稱為必需脂肪酸。6何為生物膜?主要組成是什么?各有何作用?解答: 任何細(xì)胞都以一層薄膜將其內(nèi)容物與環(huán)境分開(kāi), 這層薄膜稱為細(xì)胞的質(zhì)膜。 此外大多數(shù)細(xì)胞中還有許多內(nèi)膜系統(tǒng), 它們組成具有各種特定功能的亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器如細(xì)胞核、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體、高爾基體、過(guò)氧化酶體等,在植物細(xì)胞中還有葉綠體。所有這些膜雖然組分和功能不同,但在電鏡下卻表現(xiàn)出大體相同的形態(tài)、厚度 69nm的3片層結(jié)構(gòu)。這樣細(xì)胞的外周膜和內(nèi)膜系統(tǒng)稱為 " 生物膜 " 。( 1) 膜脂:其中磷脂、糖脂、固醇等脂質(zhì)物質(zhì)都屬于兩性分子。當(dāng)磷脂分散于水相時(shí),分子的疏水尾部?jī)A向于聚集在一起,避開(kāi)水相,而親水頭部暴露在

55、水相,形成具有雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊泡,通稱為脂質(zhì)體。脂質(zhì)體的形成將細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境分開(kāi)。膜脂不但是構(gòu)成生物膜的重要物質(zhì)。而且與細(xì)胞識(shí)別、種的特異性、組織免疫性等有密切的關(guān)系。( 2) 膜蛋白:對(duì)物質(zhì)代謝(酶蛋白) 、物質(zhì)傳送、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、信息的接受與傳遞、支持與保護(hù)均有重要意義。7 一些藥物必須在進(jìn)入活細(xì)胞后才能發(fā)揮藥效, 但它們中大多是帶電荷或有極性的, 因 此不能靠被動(dòng)擴(kuò)散跨膜。人們發(fā)現(xiàn)利用脂質(zhì)體運(yùn)輸某些藥物進(jìn)入細(xì)胞是很有效的辦法,試解釋脂質(zhì)體是如何發(fā)揮作用的。解答:脂質(zhì)體是脂雙層膜組成的封閉的、內(nèi)部有空間的囊泡。離子和極性水溶性分子(包括許多藥物)被包裹在脂質(zhì)體的水溶性的內(nèi)部空間,負(fù)載有藥物的

56、脂質(zhì)體可以通過(guò)血液運(yùn)輸,然后與細(xì)胞的質(zhì)膜相融合將藥物釋放入細(xì)胞內(nèi)部。6 酶1 作為生物催化劑,酶最重要的特點(diǎn)是什么?解答:作為生物催化劑,酶最重要的特點(diǎn)是具有很高的催化效率以及高度專一性。2 酶分為哪幾大類?每一大類酶催化的化學(xué)反應(yīng)的特點(diǎn)是什么?請(qǐng)指出以下幾種酶分別屬于哪一大類酶:( 磷酸葡糖異構(gòu)酶( phosphoglucose isomerase )( 堿性磷酸酶( alkaline phosphatase )( 肌酸激酶( creatine kinase )( 甘油醛一3一磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase )(琥珀酰CoA合成酶(succinyl-CoA synthetase )( 檸檬酸合酶( citrate synthase )( 葡萄糖氧化酶( glucose oxidase )( 谷丙轉(zhuǎn)氨酶( glutamic-

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