藥物分析--吩噻嗪類(lèi)含量測(cè)定

1、精選課件第十一章第十一章 吩噻嗪類(lèi)抗精神病藥吩噻嗪類(lèi)抗精神病藥物的分析物的分析第四節(jié)第四節(jié) 含含 量量 測(cè)測(cè) 定定精選課件 性質(zhì)性質(zhì)：弱堿性、紫外光吸收特性、金屬離子配合呈色 測(cè)定方法測(cè)定方法：酸堿滴定法、分光光度法、高效液相色譜法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)精選課件一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法( (一一) )非水溶液滴定法非水溶液滴定法結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)：母核上：母核上1010位取代基的位取代基的烴胺烴胺-NR2-NR2、哌嗪基及哌、哌嗪基及哌啶基啶基具有具有堿性堿性 1. HClO1. HClO4 4非水溶液滴定法基本原理非水溶液滴定法基本原理當(dāng)當(dāng)HAHA酸性較強(qiáng)酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量時(shí)，反應(yīng)不能定量

2、完成，必須完成，必須除去或降低除去或降低HAHA的酸性的酸性，使反應(yīng)順利地完成。使反應(yīng)順利地完成。BH+ A-+HClO4BH+ ClO4+HA游離堿類(lèi)鹽游離堿類(lèi)鹽被置換出的弱酸被置換出的弱酸因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。精選課件10ml30ml若供試品為若供試品為氫鹵酸氫鹵酸鹽鹽再加再加5%5%醋酸汞醋酸汞的的冰醋酸液冰醋酸液3ml5ml供供試試品品+ +冰冰醋醋酸酸結(jié)結(jié)果果HClO4滴定滴定空白試空白試驗(yàn)校正驗(yàn)校正指示劑堿性溶液堿性溶液pKpKb b1010，冰醋，冰醋酸中滴定突躍不明顯，酸中滴定突躍不明顯，需加入需加入醋酐醋酐，使堿性增，使堿

3、性增強(qiáng)，突躍更明顯強(qiáng)，突躍更明顯精選課件 2. 2.一般方法一般方法 供試品：以消耗標(biāo)準(zhǔn)液體積計(jì)算供試品：以消耗標(biāo)準(zhǔn)液體積計(jì)算 溶劑：溶劑： HAc，一般用量，一般用量1030ml 滴定劑：滴定劑：0.1mol/L HClO4 無(wú)水無(wú)水HAc溶液溶液 指示劑：電位法指示劑：電位法精選課件 HClO4在冰醋酸溶液中，具強(qiáng)氧化性，可氧化吩噻在冰醋酸溶液中，具強(qiáng)氧化性，可氧化吩噻嗪類(lèi)藥物產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾指示劑終點(diǎn)的嗪類(lèi)藥物產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾指示劑終點(diǎn)的觀察。排除方法：觀察。排除方法： （1）改用中性溶劑改用中性溶劑（2）加抗壞血酸加抗壞血酸（3）電位法指示終點(diǎn)電位法指示終點(diǎn) 精選課件 4

4、4、適用范圍、適用范圍 主要主要用于用于K Kb b1010-8-8的有機(jī)堿鹽的含量測(cè)定的有機(jī)堿鹽的含量測(cè)定。對(duì)堿性較。對(duì)堿性較弱的雜環(huán)類(lèi)藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終弱的雜環(huán)類(lèi)藥物，只要選擇合適的溶劑、滴定劑和終點(diǎn)指示的方法，可使點(diǎn)指示的方法，可使pKpKb b為為8 81313的弱堿性藥物采用本的弱堿性藥物采用本法滴定。法滴定。 K Kb b為為1010-8-81010-10-10時(shí)，宜選時(shí)，宜選冰醋酸冰醋酸作為溶劑；作為溶劑；K Kb b為為1010-10-101010-12-12時(shí)，宜選時(shí)，宜選冰醋酸與醋酐冰醋酸與醋酐的混合溶的混合溶液；液； K Kb b1010-12-12時(shí)，

5、應(yīng)用時(shí)，應(yīng)用醋酐醋酐作為溶劑。作為溶劑。 冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突躍顯著增大。增大。精選課件【示例【示例11-3111-31】鹽酸氯丙嗪測(cè)定】鹽酸氯丙嗪測(cè)定ChPChP（20102010） 取本品約取本品約0.2g ，精密稱(chēng)定，加冰醋酸，精密稱(chēng)定，加冰醋酸10ml與醋與醋酐酐30ml，溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴，溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每驗(yàn)校正。每1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于35.53mg 的的C1

6、7H19N2ClS.HCl。 精選課件 提取后提取后HClO4非水滴定法：非水滴定法：取本品約取本品約0.15g置置分液漏斗分液漏斗,加氨水堿化加氨水堿化乙醚提取乙醚提取6次，合并次，合并水浴加熱揮干乙醚水浴加熱揮干乙醚殘?jiān)鼩堅(jiān)芙獗芙釮ClO4非水滴定法非水滴定法溴甲酚綠溴甲酚綠-結(jié)晶紫指示液結(jié)晶紫指示液紫紅色紫紅色藍(lán)紫色藍(lán)紫色【示例【示例11-3211-32】鹽酸氯丙嗪注射液測(cè)定】鹽酸氯丙嗪注射液測(cè)定JPJP（1515）每每1ml高氯酸滴定液高氯酸滴定液(0.05mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于17.77mg 的的C17H19N2ClS.HCl。精選課件（二）乙醇水溶液的氫氧化鈉滴定法（二

7、）乙醇水溶液的氫氧化鈉滴定法 本類(lèi)藥物的鹽酸鹽的水溶液顯本類(lèi)藥物的鹽酸鹽的水溶液顯酸性酸性，在，在乙醇乙醇- -水溶液水溶液中，可用中，可用NaOHNaOH滴定劑滴定劑滴定，電位法指示滴滴定，電位法指示滴定終點(diǎn)。定終點(diǎn)。20NaOHHClNaClH2.0B HClNaOHBNaClH V1 V2 等當(dāng)點(diǎn)等當(dāng)點(diǎn)突躍體積突躍體積滴定體積滴定體積V= V1-V2 精選課件二、分光光度法二、分光光度法（一）直接分光光度法（一）直接分光光度法在在254nm254nm的波長(zhǎng)處，的波長(zhǎng)處，C C1717H H1919ClNClN2 2S.HClS.HCl的吸收系數(shù)的吸收系數(shù)（ ）為）為915915計(jì)算。計(jì)算

8、。1%1cmE精選課件（二）提取后分光光度法（二）提取后分光光度法- -排除輔料干擾排除輔料干擾 【示例【示例11-3611-36】鹽酸氯丙嗪口服液】鹽酸氯丙嗪口服液USP32-NF27USP32-NF27對(duì)照品：對(duì)照品：50 同法測(cè)定同法測(cè)定As。/g ml246H SOmaxV510 =298A 氨水堿化三氯甲烷提取 次蒸氣浴空氣流蒸干溶解定容量取鹽酸氯丙嗪適量 ml氯丙嗪合并三氯甲烷提取液濃縮提取液至 ml硫酸氯丙嗪測(cè)定 。精選課件A(/)500VAsxscc mg ml 萃取萃取除去抗氧劑的干擾除去抗氧劑的干擾精選課件（三）提取后雙波長(zhǎng)分光光度法（三）提取后雙波長(zhǎng)分光光度法 提取后分光

9、光度法能夠除去一些干擾物提取后分光光度法能夠除去一些干擾物質(zhì)，但卻質(zhì)，但卻不能不能除去吩噻嗪類(lèi)藥物的除去吩噻嗪類(lèi)藥物的氧化物氧化物。提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測(cè)定提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測(cè)定時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，氧化物氧化物在吩噻嗪類(lèi)藥物的在吩噻嗪類(lèi)藥物的測(cè)定波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收測(cè)定波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收，干擾測(cè)定。，干擾測(cè)定。 精選課件 定量依據(jù)定量依據(jù) 樣品在二波長(zhǎng)下吸收度差值（ A A）：）： 121122121212121%1%1cm()1cm()()()()=(EE) a ba bababaaaabbaAAAAAAAAAC lC lAAAC即，吸收度差值（即，吸收度差值

10、（ A A）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，）僅與待測(cè)組分的濃度有關(guān)，而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。而與干擾組分無(wú)關(guān)，干擾組分的干擾被消除。 精選課件【示例【示例11-3711-37】 鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定 （ USP32-NF27USP32-NF27）測(cè)定波長(zhǎng)：測(cè)定波長(zhǎng)：254nm（最大吸收波長(zhǎng)）最大吸收波長(zhǎng)）277nm（等吸收波長(zhǎng)）（等吸收波長(zhǎng)） 空白對(duì)照液：空白對(duì)照液：0.1mol/L鹽酸溶液鹽酸溶液 計(jì)算公式：計(jì)算公式：25427725427712.5 () / ()USCAAV AA式中：式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；為對(duì)照品溶液的濃度；

11、 V(ml)為所取供試品的體積；為所取供試品的體積； 括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液(U)和對(duì)照和對(duì)照品溶液品溶液(S)在下標(biāo)所示波長(zhǎng)處的吸光度差。在下標(biāo)所示波長(zhǎng)處的吸光度差。精選課件250D=500=125001012121%2541cm(254)254( )1%1cm(254)277(s)1%1cm(277)1%1%1cm()1cm()1%1%1cm()1cm()254277254277254277A=EAE=AE=(EE)(EE)AA()(AA)(AA) ssssxxxsssxxssC lCCAC lACACCCC254277254277(AA)12500/=V

12、 1000(AA)xssmg mlC含量（）精選課件（五）鈀離子比色法（五）鈀離子比色法 吩噻嗪類(lèi)藥物在吩噻嗪類(lèi)藥物在pH 2pH 20.10.1的緩沖溶液中，與的緩沖溶液中，與鈀離子鈀離子(Pd(Pd2+2+) )形成紅色配合物，在形成紅色配合物，在500nm500nm波長(zhǎng)附近波長(zhǎng)附近具有最大吸收具有最大吸收 由于由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色，消除了消除了藥物中藥物中氧化物氧化物對(duì)測(cè)定對(duì)測(cè)定的干擾的干擾。 比色液的濃度比色液的濃度：50 250 g/mL 顯色穩(wěn)定性：顯色穩(wěn)定性：1010分鐘后可穩(wěn)定約分鐘后可穩(wěn)定約2 2小時(shí)小時(shí) 精選課件【示例【示

13、例11-3811-38】鹽酸異丙嗪注射液】鹽酸異丙嗪注射液USP32-NF27USP32-NF27精密稱(chēng)取適量置精密稱(chēng)取適量置分液漏斗分液漏斗依次加氯化鉀依次加氯化鉀氫氧化鈉堿化氫氧化鈉堿化甲醇甲醇合并正庚合并正庚烷提取液烷提取液正庚烷提正庚烷提取取3次次鹽酸酸化鹽酸酸化合并鹽酸提取液合并鹽酸提取液并定容至并定容至50ml對(duì)照品對(duì)照品0.124mg/ml稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品溶液各稱(chēng)取標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品溶液各2ml +PdCl2顯色，顯色，測(cè)測(cè)A470A/=50Axssmg mlC含量（）精選課件三、高效液相色譜法三、高效液相色譜法（一）反相高效液相色譜法（一）反相高效液相色譜法(RP-HPLC)固定

14、相：固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠（十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODSODS）流動(dòng)相：流動(dòng)相：水甲醇或水乙腈系統(tǒng)，極性較強(qiáng)水甲醇或水乙腈系統(tǒng)，極性較強(qiáng)極性較強(qiáng)極性較強(qiáng)的組分在分離時(shí)的組分在分離時(shí)先先流出柱子，流出柱子，極性較極性較弱弱的組分的組分后后流出柱子，適合于共存組分極性差異較流出柱子，適合于共存組分極性差異較大樣品的分析。雜環(huán)類(lèi)藥物分析一般大樣品的分析。雜環(huán)類(lèi)藥物分析一般在流動(dòng)相中加在流動(dòng)相中加入含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑入含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑(掃尾劑掃尾劑: :醋酸銨、三乙胺、二乙醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈胺、乙腈等等), ,以以抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作用用。精選

15、課件（二）離子對(duì)高效液相色譜法（二）離子對(duì)高效液相色譜法(Ion-RP-HPLC) 常用的離子對(duì)試劑：常用的離子對(duì)試劑：烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。 影響離子對(duì)形成的條件影響離子對(duì)形成的條件 反離子的性質(zhì)與濃度反離子的性質(zhì)與濃度流動(dòng)相的組成流動(dòng)相的組成pHpH離子強(qiáng)度等離子強(qiáng)度等影響待測(cè)組分的保留影響待測(cè)組分的保留 pH3.5BH+C7H15SO2O-BH+C7H15SO2O-精選課件四、液相色譜四、液相色譜- -質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) 液相色譜液相色譜- -質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)集HPLCHPLC的高分離效能和的高分離效能和MSMS的高專(zhuān)屬性及高靈敏度于一體，已經(jīng)成為目前測(cè)的高專(zhuān)屬性及高靈敏度于一體，已經(jīng)成為目前測(cè)定復(fù)雜生物樣本中微量藥物的首選方法，同時(shí)也是定復(fù)雜生物樣本中微量藥物的首選方法，同時(shí)也是進(jìn)行藥物及有關(guān)物質(zhì)定性分析的常用方法。進(jìn)行藥物及有關(guān)物質(zhì)定性分析的常用方法。精選課件色譜圖：色譜圖：圖圖11-