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1、【精品文檔】如有侵權(quán),請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除,僅供學(xué)習(xí)與交流微生物第7-9章作業(yè).精品文檔.第七章 微生物的生長(zhǎng)及其控制1 獲得目標(biāo)微生物的純培養(yǎng)分離技術(shù)有哪些? 答:1稀釋法 (1)平皿傾注法 (2)平板涂布法 預(yù)先制備平板。然后制備并吸取適度稀釋的菌液,滴于各平板中央(每皿一滴,約0.05ml),用無(wú)菌刮刀將菌液均勻涂布于平板表面。2平板劃線法 劃線的方式很多,其目的都是使平板上菌體逐漸變稀,最終形成單菌落。劃線用平板也要預(yù)先制備。常用的是以下兩種方式: (1)針尖稍彎的接種針火焰滅菌并冷卻后,取樣;在靠近平皿邊緣處的平板上,將針尖的彎曲部位接觸平板,接種棒與平板面成30°40°
2、;角,劃3條4條平行線;轉(zhuǎn)動(dòng)平皿約50°角,灼燒接種針,冷卻后,通過(guò)前一區(qū)劃2條3條平行線,并繼續(xù)劃2條3條不通過(guò)前一區(qū)的平行線;再轉(zhuǎn)動(dòng)平皿如此劃4區(qū)5區(qū)(圖35A)。此種方法適用于分離純化固體培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物。 (2)灼燒并冷卻的接種環(huán)取樣后,在平板上作連續(xù)劃線。此適用于液體樣品。3單細(xì)胞挑取法 把一滴菌懸液置于載玻片上,用安裝在顯微鏡挑取器上的極細(xì)的毛細(xì)吸管,在顯微鏡下對(duì)準(zhǔn)某一個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞吸取,再接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng)。此法限于高度專業(yè)化的科研。4利用選擇培養(yǎng)基分離法 (1)采用選擇性高的培養(yǎng)基 例如,以纖維素為唯一碳源,分離分解纖維素的微生物;用無(wú)氮培養(yǎng)基分離自生固氮菌;在15ml
3、培養(yǎng)基中加25乳酸1滴2滴以抑制細(xì)菌生長(zhǎng),把受細(xì)菌污染的霉菌分離出來(lái)。 (2)培養(yǎng)基中加抑制劑 例如,結(jié)晶紫10mg/L可抑制G+細(xì)菌生長(zhǎng),利于分離G-細(xì)菌;KMnO4100mg/L抑制細(xì)菌和霉菌生長(zhǎng),利于分離放線菌;制霉菌素50mg/L或放線酮50mg/L利于分離純化放線菌;分離純化霉菌或放線菌時(shí),加鏈霉素30mg/L、金霉素2mg/L可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。5其他 如,高溫處理(80 15min或100 10min)分離芽孢桿菌;4KOH處理痰液,分離結(jié)核桿菌等等。2 試分析影響微生物生長(zhǎng)的主要因素及它們影響微生物生長(zhǎng)繁殖的機(jī)制。 答:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足導(dǎo)致微生物生長(zhǎng)所需要的能量、碳源、氮源、
4、無(wú)機(jī)鹽等成分的不足,此時(shí),機(jī)體一方面降低或停止細(xì)胞物質(zhì)合成,一方面對(duì)細(xì)胞某些非必需或失效的成分進(jìn)行降解以重新利用) 水(對(duì)培養(yǎng)基的水活度有要求,每種微生物的生長(zhǎng)都有最適的活度,會(huì)通過(guò)影響培養(yǎng)基的滲透壓力變化而影響微生物的生長(zhǎng)速率)溫度(影響酶活性、影響細(xì)胞質(zhì)膜的流動(dòng)性、影響物質(zhì)的溶解度)、PH(影響酶活性、通過(guò)影響細(xì)胞質(zhì)膜的透性、膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和物質(zhì)的溶解性或電離性來(lái)影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收,從而影響微生物的生長(zhǎng)速率)氧(好氧菌20、微好氧菌210、耐氧厭氧菌2以下、兼性厭氧菌有氧或無(wú)氧、專性厭氧菌不需要氧,有氧時(shí)死亡)3 測(cè)定微生物群體生長(zhǎng)有哪些方法?各有何特點(diǎn)和適用范圍。答: 1)直接測(cè)量:a.
5、測(cè)體積法:粗放型,在刻度離心管中測(cè)沉降量; B.稱干重法:精確法,離心法和過(guò)濾法獲得菌體細(xì)胞,微生物的干重一般為其濕重的10%20% 測(cè)定多細(xì)胞及絲狀真菌生長(zhǎng)情況的有效方法 2)間接測(cè)量:a.比濁法:用分光光度法對(duì)無(wú)色的微生物懸浮液進(jìn)行測(cè)定,一般選用450650nm波段; B.生理指標(biāo)法:微生物的生理指標(biāo),如氮、碳、DNA、ATP等物質(zhì)的含量,呼吸強(qiáng)度、耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。 常用于對(duì)微生物的快速鑒定與檢測(cè)。4什么是抗生素?磺胺類藥物的作用機(jī)理是什么? (或:試述抗生素抑菌和殺菌機(jī)制及細(xì)菌耐藥性機(jī)制。如何避免細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生?) 1)抗生素是由微生物(包括細(xì)菌、真菌、
6、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過(guò)程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物,能干擾其他生活細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)。 2)細(xì)菌不能直接利用其生長(zhǎng)環(huán)境中的葉酸,而是利用環(huán)境中的對(duì)氨苯甲酸(PABA)和二氫喋啶、谷氨酸在菌體內(nèi)的二氫葉酸合成酶催化下合成二氫葉酸。二氫葉酸在二氫葉酸還原酶的作用下形成四氫葉酸,四氫葉酸作為一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶,參與核酸前體物(嘌呤、嘧啶)的合成。而核酸是細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所必須的成分?;前匪幍幕瘜W(xué)結(jié)構(gòu)與PABA類似,能與PABA競(jìng)爭(zhēng)二氫葉酸合成酶,影響了二氫葉酸的合成,因而使細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖受到抑制。5常用的消毒滅菌的方法有那些?各種方法適用那些物品的滅菌?(或:下列物
7、品各選用什么方法消毒或滅菌?說(shuō)明理由。室內(nèi)空氣、培養(yǎng)基、玻璃器皿、酶溶液、動(dòng)物血清) 答“(1)天然消毒法:利用日光等天然條件殺滅致病微生物,達(dá)到消毒目的,稱為天然消毒法。 日光曝曬法:日光由于其熱、干燥和紫外線的作用,而具有一定的殺菌力。日光殺菌作用的大小受地區(qū)、季節(jié)、時(shí)間等因素影響,日光越強(qiáng),照射時(shí)間越長(zhǎng),殺菌效果越好。日光中的紫外線由于通過(guò)大氣層時(shí),因散熱和吸收而減弱,而且不能全部透過(guò)玻璃,因此,必須直接在陽(yáng)光下曝曬,才能取得殺菌效力。日光曝曬法常用于書(shū)籍、床墊、被褥、毛毯及衣服等的消毒。曝曬時(shí)應(yīng)經(jīng)常將被曬物翻動(dòng),使物品各面都能與日光直接接觸,一般在日光曝曬下46小時(shí)可達(dá)到消毒目的。 通
8、風(fēng):通風(fēng)雖然不能殺滅微生物,但可在短時(shí)間內(nèi)使室內(nèi)外空氣交換,減少室內(nèi)致病微生物。通風(fēng)的方法有多種,如用門(mén)、窗或氣窗換氣,也可用換氣扇通風(fēng)。居室內(nèi)應(yīng)定時(shí)通風(fēng)換氣,通風(fēng)時(shí)間一般每次不少于30分鐘。 (2)物理滅菌法:利用熱力等物理作用,使微生物的蛋白質(zhì)及酶變性凝固,以達(dá)到消毒、滅菌目的,稱為物理滅菌法。 燃燒法:是一種簡(jiǎn)單易行、迅速?gòu)氐子行У臏缇椒?,但?duì)物品的破壞性大,多用于耐高熱,或已帶致病菌而又無(wú)保留價(jià)值的物品,如被某些細(xì)菌或病毒污染的紙張、敷料,搪瓷類物品如坐浴盆,也可以用火焰燃燒消毒滅菌,應(yīng)先將盆洗凈擦干,再倒人少許90酒精,點(diǎn)燃后慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)浴盆,使其內(nèi)面完全被火焰燒到。應(yīng)用此法時(shí),要注意
9、安全,須遠(yuǎn)離易燃或易爆物品,以免引起火災(zāi)。 煮沸法:是一種經(jīng)濟(jì)方便的滅菌法,一般等水開(kāi)后計(jì)時(shí),煮沸1015分鐘可殺死無(wú)芽胞的細(xì)菌??捎糜谑尘?、毛巾、手絹等不怕濕而耐高溫的物品的消毒滅菌。 高壓蒸汽滅菌法:利用高壓鍋內(nèi)的高壓和高熱釋放的潛能進(jìn)行滅菌,此法殺菌力強(qiáng),是最有效的物理滅菌法。待高壓鍋上汽后,加閥再蒸15分鐘,適合消毒棉花、敷料等物品。 (3)化學(xué)消毒滅菌法:化學(xué)消毒滅菌法是利用化學(xué)藥物滲透細(xì)菌體內(nèi),破壞其生理功能,抑制細(xì)菌代謝生長(zhǎng),從而起到消毒的作用。家庭常用化學(xué)消毒滅菌方法有以下三種。 擦拭法:用化學(xué)藥液擦拭被污染的物體表面,常用于地面、家具、陳列物品的消毒。如用05-3漂白粉澄清液
10、、84消毒液等含氯消毒劑(現(xiàn)市場(chǎng)都出售,要看好有效期及使用方法),擦拭墻壁、床、桌椅地面及廁所。 浸泡法:將被消毒物品浸泡在消毒液中,常用于不能或不便蒸煮的生活用具。浸泡時(shí)間的長(zhǎng)短因物品及溶液的性質(zhì)而有不同。如用1-3漂白粉澄清液浸泡餐具、便器需1小時(shí),用0.5“84”消毒液浸泡需15分鐘,而用0.02高效消毒片浸泡只需5分鐘,就可以達(dá)到目的。若浸泡嘔吐物及排泄物,不但消毒液濃度要加倍,而且浸泡時(shí)間也要加倍。 熏蒸法:是利用消毒藥品所產(chǎn)生的氣體進(jìn)行消毒。常用于傳染病人居住過(guò)的房間空氣及室內(nèi)表面消毒。 福爾馬林(甲醛)+高錳酸鉀:每立方米加入福爾馬林2540毫升,高錳酸鉀1530克,兩種藥放置在
11、一起即產(chǎn)生氣體,可達(dá)到消毒目的。消毒時(shí),必須將門(mén)窗緊閉12-24小時(shí),消毒后再打開(kāi)門(mén)窗進(jìn)行通風(fēng),此法對(duì)各種細(xì)菌、病毒引起的傳染病均有效。 食醋:每立方米用3-10毫升食醋,加水23倍加熱熏蒸,用于室內(nèi)空氣消毒,對(duì)于預(yù)防流感等呼吸道傳染病有效。 6名詞:滅菌、消毒、防腐、同步培養(yǎng) 滅菌:指用物理或化學(xué)的方法殺滅全部微生物,包括致病和非致病微生物以及芽孢,使之達(dá)到無(wú)菌保障水平 消毒:指殺死病原微生物、但不一定能殺死細(xì)菌芽孢的方法 防腐:利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長(zhǎng)繁殖,即通過(guò)制菌作用防止食品、生物制品等對(duì)象發(fā)生霉腐的措施 同步培養(yǎng):指使細(xì)胞的分裂周期為同步的培養(yǎng)方法。第八章 微生物的遺
12、傳與變異1 試述歷史上證明核酸是遺傳物質(zhì)的3個(gè)著名實(shí)驗(yàn),為何均選擇了微生物作為研究對(duì)象?答:所用的材料是細(xì)菌或病毒,遺傳物質(zhì)都是裸露的,沒(méi)有和蛋白質(zhì)結(jié)合,這樣就可以直接觀察DNA的作用,而愛(ài)受蛋白質(zhì)的影響。2抗藥性突變是如何產(chǎn)生的?藥物對(duì)抗藥性突變體的產(chǎn)生起什么作用? 答:抗藥性突變和其他突變一樣是不定向的基因突變.不是藥物導(dǎo)致的(除非是引起突變的藥物 達(dá)爾文四項(xiàng)中的過(guò)度繁殖就是指這個(gè);提供大量可遺傳變異(突變) 藥物對(duì)抗藥性突變體的產(chǎn)生起選擇作用,就是“自然選擇”3試述篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的方法。 答:誘變 常用紫外線等物理方法和化學(xué)誘變劑等誘變形成大量營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株.用15W或20W紫外燈
13、管,距離15cm30cm,照射10sec20min.在照射受試菌前,燈管須預(yù)熱20min,使燈光穩(wěn)定.菌懸液要磁力攪拌,使所有單細(xì)胞或單孢子均勻受到照射.特別要注意,應(yīng)在黑暗或紅外光下操作,接種后器皿用黑布包嚴(yán),防止發(fā)生可見(jiàn)光的修復(fù)作用. 淘汰野生型 a)抗生素法 某些抗生素能殺死生長(zhǎng)繁殖著的微生物,而對(duì)處于休止?fàn)顟B(tài)的微生物無(wú)殺傷作用.如青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的生物合成,制霉菌素可損傷真菌細(xì)胞膜,二者可分別殺死生長(zhǎng)繁殖著的細(xì)菌、真菌. b)菌絲過(guò)濾法 適用于放線菌、霉菌等絲狀微生物.在基本培養(yǎng)基中野生型孢子能萌發(fā)長(zhǎng)成菌絲體,而營(yíng)養(yǎng)缺陷型孢子則不生長(zhǎng).將經(jīng)誘變處理的孢子接種于液態(tài)基本培養(yǎng)基
14、中,振蕩培養(yǎng)10h12h,使原養(yǎng)型萌發(fā)(以肉眼剛能看見(jiàn)菌絲為度),然后以濾紙、棉花或玻璃過(guò)濾漏斗過(guò)濾,菌絲被濾除,未萌發(fā)的缺陷型孢子能順利通過(guò),從而達(dá)到富集營(yíng)養(yǎng)缺陷型的目的. 檢出缺陷型的常用方法 a)逐個(gè)測(cè)定法(點(diǎn)種法)把經(jīng)誘變處理并淘汰野生型后的菌液在完全培養(yǎng)基上涂布分離,將培養(yǎng)后長(zhǎng)出的每一個(gè)菌落分別點(diǎn)種在基本培養(yǎng)基和另一個(gè)完全培養(yǎng)基上,凡在基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)而在完全培養(yǎng)基的相應(yīng)位置上能生長(zhǎng)的菌落,表明其為營(yíng)養(yǎng)缺陷型. b)夾層培養(yǎng)法經(jīng)誘變處理后的菌液,稀釋后與基本培養(yǎng)基混勻并傾入平皿中,待凝固后,再加上一薄層不含菌的基本培養(yǎng)基.培養(yǎng)后在皿底將長(zhǎng)出的菌落做上標(biāo)記.然后加上一層完全培養(yǎng)基,
15、再經(jīng)培養(yǎng)后,新出現(xiàn)的菌落多數(shù)是營(yíng)養(yǎng)缺陷型。此法適用于兼性厭氧的細(xì)菌. c)影印法 將絲絨包在直徑小于平皿的圓柱臺(tái)上,固定,作為影印接種工具,滅菌備用.將經(jīng)誘變處理并淘汰野生型的菌液涂布于完全培養(yǎng)基表面上,培養(yǎng),待長(zhǎng)出菌落后,用影印接種工具在此平板上輕按一下,然后在另一基本培養(yǎng)基平板上按一下.經(jīng)培養(yǎng)后在基本培養(yǎng)基上不長(zhǎng)而在完全培養(yǎng)基的相應(yīng)部位上生長(zhǎng)的菌落,為營(yíng)養(yǎng)缺陷型. 鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型生長(zhǎng)譜法 將檢出的缺陷型菌株接種在完全培養(yǎng)基上培養(yǎng),把生長(zhǎng)的菌體或孢子洗下,離心清洗后制成濃度為107個(gè)ml108個(gè)ml的菌懸液.取0.1ml該懸液與基本培養(yǎng)基混勻倒皿,冷凝并稍干燥后,分區(qū)加沾有各種營(yíng)養(yǎng)物的圓濾紙
16、片,培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)反應(yīng).在篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型的過(guò)程中必須注意表型延遲現(xiàn)象.由于誘變劑一般僅作用于DNA的某一單鏈,故突變無(wú)法反映在當(dāng)代的表型上,需經(jīng)DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂后,才使表型發(fā)生變異,此即表型延遲現(xiàn)象。4. 比較轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合的異同。 答:1)異:a.轉(zhuǎn)化是細(xì)菌吸收外源DNA片段. b.轉(zhuǎn)導(dǎo)是以噬菌體為載體來(lái)傳遞DNA c.接合則是兩個(gè)細(xì)菌之間通過(guò)性菌毛直接交換DNA. 2)同:實(shí)現(xiàn)了外源基因的導(dǎo)入,并獲得了新的穩(wěn)定重組子,表現(xiàn)出若干新遺傳性狀。5 試比較大腸桿菌中F質(zhì)粒存在的幾種方式及幾種常見(jiàn)的雜交結(jié)果。 答: 1)三種存在方式: A.F+細(xì)胞:以染色體外環(huán)形雙鏈質(zhì)粒DNA形式存在,其上
17、不帶有任何來(lái)自寄主染色體的基因或DNA區(qū)段; B.F細(xì)胞:以染色體外環(huán)形雙鏈質(zhì)粒DNA形式存在,同時(shí)在其上還攜帶著細(xì)菌的染色體基因或DNA區(qū)段; C.Hfr細(xì)胞(高頻重組細(xì)胞):以線性DNA形式從不同位點(diǎn)整合到寄主染色體。 2)常見(jiàn)的雜交結(jié)果:A. F+ ()與核染色體組整合形成Hfr();Hfr()脫離形成F+ ()B.F-()與F+ 接合,形成F+ ();F+ ()分離或消除形成F-() C.F()分離或消除形成F-();F-()與F接合形成F()D.Hfr()不正常脫離形成F();F因子與染色體組整合形成Hfr()6何謂菌種的退化和復(fù)壯? 答: 1)所謂菌種退化是指生產(chǎn)菌種和優(yōu)良菌種由于
18、傳代或保藏之后,群體中的某些生理特征或形態(tài)特征逐漸減退或消失,如生產(chǎn)菌株生產(chǎn)性狀的劣化、遺傳標(biāo)記的丟失、典型性狀變得不典型等。 2)復(fù)壯是指對(duì)已經(jīng)退化的菌種,設(shè)法淘汰衰退的個(gè)體,使其恢復(fù)原來(lái)的優(yōu)良特性。7試述菌種保藏的基本原理及主要的菌種保藏方法。 答:1)基本原理微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過(guò)程中,必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài),才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。 低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖多,但都是根據(jù)這三個(gè)因素而設(shè)計(jì)的。 2)保藏方法大致可分為以下幾種: a傳代培養(yǎng)保藏法 又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰
19、肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧細(xì)菌用),培養(yǎng)后于46冰箱內(nèi)保存。b液體石蠟覆蓋保藏法 是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。c.載體保藏法 是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。 d.寄主保藏法 用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法
20、如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。 e.冷凍保藏法 可分低溫冰箱(-20-30,-50-80)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70)和液氮(-196)等保藏法。 f.冷凍干燥保藏法 先使微生物在極低溫度(-70左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。 有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。8名詞:營(yíng)養(yǎng)缺陷型、感受態(tài)、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)導(dǎo)子、普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)、流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)、高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)、
21、完全或部分缺陷噬菌體、接合、F質(zhì)粒 準(zhǔn)性生殖 營(yíng)養(yǎng)缺陷型:指微生物等不能在無(wú)機(jī)鹽類和碳源組成的基本培養(yǎng)基中增殖,必須補(bǔ)充一種或一種以上的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)才能生長(zhǎng)。 感受態(tài):細(xì)胞處于能夠吸收DNA的狀態(tài)稱感受態(tài) 轉(zhuǎn)化:是某一基因型的細(xì)胞從周圍介質(zhì)中吸收來(lái)自另一基因型的細(xì)胞的DNA而使它的基因型和表現(xiàn)型發(fā)生相應(yīng)變化的現(xiàn)象。 轉(zhuǎn)導(dǎo):由噬菌體將一個(gè)細(xì)胞的基因傳遞給另一細(xì)胞的過(guò)程。 轉(zhuǎn)導(dǎo)子:被轉(zhuǎn)導(dǎo)的宿主細(xì)胞基因稱為轉(zhuǎn)基因、導(dǎo)基因或轉(zhuǎn)導(dǎo)子 普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo):以噬菌體為載體,將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi),使受體菌獲得新的性狀,如轉(zhuǎn)移的DNA是供體菌染色體上的任何部分,則稱為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)·而不同染色體片段中各
22、個(gè)標(biāo)記基因轉(zhuǎn)導(dǎo)頻率大致相同的轉(zhuǎn)導(dǎo)則稱為普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo):轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA不整合到受體的細(xì)胞的染色體上,雖然不能繼續(xù)復(fù)制,但仍能表達(dá)基因的功能的轉(zhuǎn)導(dǎo),最終將隨細(xì)胞分裂而丟失,也可能出現(xiàn)單線遺傳。 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo):在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中,如所轉(zhuǎn)導(dǎo)的只限于供體菌染色體上特定的基因,則稱為局限性或特異性轉(zhuǎn)導(dǎo);也可以說(shuō)只能使供體的一個(gè)或少數(shù)幾個(gè)基因以噬菌體為媒介轉(zhuǎn)移到受體的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。 高頻轉(zhuǎn)導(dǎo):由雙重溶源菌所產(chǎn)生的裂解物中,含有等量的和dga1粒子,這就稱HFT(高頻轉(zhuǎn)導(dǎo))裂解物。如果用低moi(感染復(fù)數(shù))的HFT裂解物去感染另一個(gè)Ecoligal-受體菌(不能發(fā)酵半乳糖的受體菌)的話,則可高頻率地把
23、它轉(zhuǎn)化為能發(fā)酵半乳糖的Ecoligal+轉(zhuǎn)導(dǎo)子。這種方式的轉(zhuǎn)導(dǎo),就稱高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)。 完全或部分缺陷噬菌體:完全缺陷噬菌體:指僅僅含有供體菌DNA的噬菌體 接合:使用指粘合、接合、貼膠帶,或以釘子或扣眼處理,亦指影片交疊或接合的部分。 F質(zhì)粒:又稱F因子、致育因子或性因子,是大腸桿菌等細(xì)菌決定性別并有轉(zhuǎn)移能力的質(zhì)粒。 準(zhǔn)性生殖:指異核體(單個(gè)生物個(gè)體中含有兩種或兩種以上基因型)細(xì)胞中兩個(gè)遺傳物質(zhì)不同的細(xì)胞核可以結(jié)合成雜合二倍體的細(xì)胞核。第九章 微生物的生態(tài)學(xué)1為什么說(shuō)土壤是微生物的“天然培養(yǎng)基”? 答: 1)土壤提供了良好的基質(zhì) 富含植物生長(zhǎng)所需的各種礦物質(zhì)和養(yǎng)分; 2)土壤中還存在大量的多種微生物
24、群,對(duì)植物水分礦物質(zhì)的吸收起到很大的作用; 3)土壤之間存在空隙也有利于植物的呼吸和生長(zhǎng)。2什么是正常菌群?試分析腸道正常菌群與人體的關(guān)系。 答: 1)正常人體的體表及與外界相通的腔道中,都存在著不同種類和數(shù)量的微生物。在正常情況下,這些微生物對(duì)人類無(wú)害,稱為正常菌群。 2)正常微生物菌群對(duì)人體的健康起重要作用,可以說(shuō)是我們保持健康,增強(qiáng)體質(zhì),益壽延年及防御疾病的一個(gè)重要組成部分。 a.維持人體組織器官的正常結(jié)構(gòu)和功能: 腸道菌群是人體內(nèi)環(huán)境的重要組成部分,腸粘膜有巨大的表面與微生物接觸,既是保護(hù)機(jī)體抵抗微生物的屏障,又是微生物選擇侵入機(jī)體的入口。腸道微生物在數(shù)量、位置和代謝活性上的變動(dòng),可以
25、改變腸粘膜的表面組成與功能。研究無(wú)菌動(dòng)物對(duì)了解正常微生物菌群的作用是有用。缺少正常腸道菌群的無(wú)菌動(dòng)物常表現(xiàn)為:盲腸明顯增大,小腸壁變薄,重量減輕;腸組織水分比正常動(dòng)物少10;粘膜固有層少15,并缺乏細(xì)胞;粘膜總面積比正常動(dòng)物少33,因此吸收面積也減少。這些無(wú)菌動(dòng)物特有的組織結(jié)構(gòu),在輸入正常菌群后二周即行消失,其結(jié)構(gòu)功能變?yōu)榕c正常動(dòng)物相似。因此,由此可知,細(xì)菌對(duì)腸道的正常發(fā)育是必不可少的。 b.抵御、拮抗外襲菌群的作用: 首先,各種正常菌群在人體皮膚粘膜表面特定部位粘附和繁殖,形成一層自然的菌膜,是非特異性的局部保護(hù)膜,可抵御致病菌的侵襲。其次,正常微生物菌群的存在與人體免疫系統(tǒng)的完善是密切相關(guān)
26、的。實(shí)驗(yàn)證明無(wú)菌動(dòng)物抗感染能力遠(yuǎn)比正常動(dòng)物低。無(wú)菌動(dòng)物淋巴系統(tǒng)衰退,淋巴組織縮小,免疫活性細(xì)胞減少,對(duì)細(xì)菌感染的敏感性比一般動(dòng)物高得多。正常菌群的生態(tài)平衡對(duì)清除外襲菌方面有很大作用。實(shí)驗(yàn)表示,在腸道安全無(wú)菌情況下,由外界輸入的致病菌可迅速增殖;而在有正常菌群存在腸道中,由于競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),使得致病菌增殖速度明顯下降,存活于腸道內(nèi)的致病菌數(shù)量只有無(wú)菌動(dòng)物的0.01l%。正常菌群對(duì)外襲菌的持抗作用可歸納如下:競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生存空間;降低pH值;產(chǎn)生抗菌物質(zhì),如乳桿菌產(chǎn)生過(guò)氧化氫,嗜酸乳桿菌產(chǎn)生乳酸鹽,有的細(xì)菌產(chǎn)生低分子肽,腸道內(nèi)的厭氧菌產(chǎn)生未分解的揮發(fā)性脂肪酸,戊酮,異丁酸,丁酸及醋酸都有很大抗菌力。
27、c.產(chǎn)生生理活性物質(zhì): 腸道微生物菌群對(duì)人體具有重大影響,它們可以完成多種代謝反應(yīng)。如分解食物中的氨基酸,由酪氨酸生成酪胺能使血管收縮,血壓升高;產(chǎn)生的組胺具有刺激胃酸分泌的功能。由色氨酸衍生的吲哚和糞臭素使大便有令人厭惡的氣味。正常微生物菌群能向人體提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如維生素B1、B2、B12、K、生物素、葉酸,氨基酸等。它們和人體結(jié)成了休戚與共的互生關(guān)系。初生嬰兒的腸道中無(wú)微生物,在嬰兒的血液中缺少由微生物供給的維生素K,血液就不易凝結(jié),一旦出血就會(huì)暢流不止,新生兒在三天以后微生物在腸道中才繁殖起來(lái)。為了使初生嬰兒度過(guò)危險(xiǎn)期,醫(yī)生往往給新生兒注射維生素K。實(shí)驗(yàn)證明,無(wú)菌動(dòng)物即使很好的喂養(yǎng),仍然
28、十分嬌弱,而且必須給它們服用維生素和氨基酸才勉強(qiáng)地活下去。此外,正常菌群還影響人體對(duì)糖、蛋白質(zhì)、脂肪和維生素的吸收,也能改變?nèi)梭w消化酶的活性,糞便內(nèi)胰蛋白酶,糜旦白酶與轉(zhuǎn)化酶的活性在無(wú)菌動(dòng)物比正常動(dòng)物顯著地高。當(dāng)然,人體某些正常菌(如大腸桿菌)產(chǎn)生的脂多糖(即內(nèi)毒素)對(duì)人本身是有害的。 由此得出結(jié)論:雖然正常菌群能引起一些有害的效應(yīng),但人體卻能從正常微生物菌群中獲得巨大益處。正常菌群對(duì)人體發(fā)揮起有益或有害的生理作用是有條件的,這個(gè)條件就是微生物、人體和環(huán)境必須保持動(dòng)態(tài)的生態(tài)平衡,三者保持生態(tài)平衡,正常微生物菌群才能有益于人體的健康,否則將導(dǎo)致疾病。3從原理及優(yōu)缺點(diǎn)去歸納污水處理的幾種方法。答:(1) 生物法。所謂生物法就是利用活性污泥中的好氧細(xì)菌及其原生動(dòng)物對(duì)污水中的有機(jī)物進(jìn)行吸附、氧化、分解,最終把這些有機(jī)物變成二氧化碳和水的方法。生物污水處理法的主要處理模式有:活性污泥法、生物膜法、氧化塘法、厭氧生物處理法以及 土地處理法。生物法的主要特點(diǎn)是反應(yīng)迅速、 處理速度快,但是同時(shí)對(duì)于溫度、ph值等周圍環(huán)境的要求較高。 (2) 物理法。所謂物理法是指經(jīng)過(guò)物理變化的方法,比如 用活性炭吸附,用網(wǎng)吸附固體物質(zhì)的污水處理方法。 物理污水處理法的主要處理模式有:調(diào)節(jié)勻和法、格柵法、沉淀法、過(guò)濾法、氣浮法以及離心分離法。物理法的主
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