食品中維生素C含量的測定實驗

1、實驗 3食品中維生素C 含量的測定（ 2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、實驗原理維生素 C又稱抗壞血酸， 還原型抗壞血酸能還原染料2，6- 二氯酚靛酚鈉鹽， 本身則氧化成脫氫抗壞血酸。2，6- 二氯酚靛酚的鈉鹽水溶液呈藍色，在酸性溶液中呈玫瑰紅色，當(dāng)其被還原時就變?yōu)闊o色，因此，可用 2， 6- 二氯酚靛酚滴定樣品中的還原型抗壞血酸。當(dāng)抗壞血酸完全被氧化后，稍多加一點染料，使滴定液呈淡紅色，即為終點。如無其他雜質(zhì)干擾，樣品提取液所還原的標準染料量與樣品中所含的還原型抗壞血酸量成正比。二、試劑和器材偏磷酸醋酸溶液：取15g（用時研細）溶于40mL醋酸及 20mL水的混合液中，然后用水稀釋至 500mL

2、，過濾后儲入試劑瓶中。標準 2，6- 二氯酚靛酚溶液：取， 6- 二氯酚靛酚溶于 700mL蒸餾水中（用力攪動），加入 300mL磷酸緩沖液（預(yù)先配制L L Na 2HPO4·2HO水溶液，用時以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4： 6 的比率將其混合， pH 值為），翌日過濾，濾液儲于棕色瓶中，臨用時，以抗壞血酸溶液標定。標準維生素 C 溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解維生素C 于 100mL容量瓶中，再以該液稀釋至刻度。2，6- 二氯酚靛酚液的標定：在3 個 100mL錐形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再各加 2mL標準維生素 C溶液，搖勻。用上面所制的標準 2，

3、6- 二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰紅色保持 30s 不褪色為止。記下所用 2，6- 二氯酚靛酚溶液體積平均值，再以同樣方法做一空白實驗，取 7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相當(dāng)于以上所用的 2，6- 二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用 2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定。將第一次滴定的量減去空白實驗的量，即為標準維生素的反應(yīng)量，求出1mL 2，6- 二氯酚靛酚對應(yīng)于維生素C的質(zhì)量（ mg）。研缽、容量瓶、剪刀、錐形瓶、微量滴定管三、實驗步驟1、用自來水沖洗果蔬樣品，再以蒸餾水清洗，用紗布或吸水紙吸干表面水分，然后稱取 25g，剪碎，在研缽中研呈漿狀。 加入 20mL3%偏磷酸醋酸液， 攪動，抽提。過濾液經(jīng)漏

4、斗流入 100mL容量瓶中，殘渣再以 30mL偏磷酸醋酸液提取 3 次，濾液及洗滌液皆流入該容量瓶中，以蒸餾水稀釋至刻度，加塞搖勻。如濾液顏色較深，可用白陶土脫色。2、吸取 10mL提取液于錐形瓶中，加5mL偏磷酸醋酸液，混合均勻，以2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定，并不斷搖動，至溶液呈玫瑰紅色保持30s 不褪色為止。3、吸取 15mL 偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相當(dāng)于以上樣品實驗滴定所用2，6-二氯酚靛酚溶液的量）做一空白實驗，用同樣方法，以 2，6- 二氯酚靛酚溶液滴定。4、結(jié)果計算維生素 C的含量（ mg/100g）按下式計算：（v1）維生素 C的含量v2 * c* 10010* m100式中 v1 樣品用 2，6- 二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mLV2 空白用 2，6- 二氯酚靛酚溶液的滴定體積，mLC 1 mL 2 ，6- 二氯酚靛酚相當(dāng)于維生素 C的含量， mg/mL m 樣品質(zhì)量。四、注意事項1、樣品中某些雜質(zhì)也能還原2，6- 二氯酚靛酚，但速率均較抗壞血酸慢，故終點以淡色存在 30s 為準。2、維生素 C還可以用 2%草酸溶液來提取， 2%草酸和偏磷酸同樣具有抑制抗壞血酸氧化酶的功效。3、若樣品中含有大量Fe