骨代謝異常生物化學(xué)的檢驗

1、骨代謝異常生物化學(xué)的檢驗教學(xué)內(nèi)容教學(xué)內(nèi)容A.A.骨組織組成骨組織組成 骨主要由骨礦物質(zhì)（無機質(zhì)）、有機質(zhì)和骨主要由骨礦物質(zhì)（無機質(zhì)）、有機質(zhì)和骨組織細胞組成。骨組織細胞組成?；A(chǔ)概要基礎(chǔ)概要B.B.骨的正常代謝骨的正常代謝 骨礦物質(zhì)（鈣、磷、鈉、鎂、鐵、氟等）和骨鹽維持骨骨礦物質(zhì)（鈣、磷、鈉、鎂、鐵、氟等）和骨鹽維持骨密度。密度。骨的有機物質(zhì)骨的有機物質(zhì)( (蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)、I I型膠原、脂類和糖蛋白復(fù)合型膠原、脂類和糖蛋白復(fù)合體等體等) ) 參與了骨小梁和骨基質(zhì)的形成，促進骨的生長、修參與了骨小梁和骨基質(zhì)的形成，促進骨的生長、修復(fù)，參與骨骼的新陳代謝。復(fù)，參與骨骼的新陳代謝。骨的組織細胞（骨

2、細胞、成骨細胞和破骨細胞）在相關(guān)激骨的組織細胞（骨細胞、成骨細胞和破骨細胞）在相關(guān)激素（甲狀旁腺素、降鈣素、活性維生素素（甲狀旁腺素、降鈣素、活性維生素D D）的作用下，相）的作用下，相互協(xié)調(diào)，共同維護骨的正常代謝，實現(xiàn)骨骼發(fā)育、生長?；f(xié)調(diào)，共同維護骨的正常代謝，實現(xiàn)骨骼發(fā)育、生長。C.C.骨代謝性疾病骨代謝性疾病 骨代謝疾病是指由多種因素引起骨組織中鈣、磷等骨代謝疾病是指由多種因素引起骨組織中鈣、磷等礦物質(zhì)、成骨細胞和礦物質(zhì)、成骨細胞和/ /或破骨細胞功能異常，引起的或破骨細胞功能異常，引起的骨基質(zhì)、骨細胞代謝紊亂。包括骨質(zhì)疏松癥、骨軟化骨基質(zhì)、骨細胞代謝紊亂。包括骨質(zhì)疏松癥、骨軟化病、佝

3、僂病等。病、佝僂病等。血中存在形式血中存在形式占總量的百分比占總量的百分比鈣鈣磷磷鎂鎂游離（離子化）游離（離子化）505055555555蛋白結(jié)合蛋白結(jié)合404010103030復(fù)合物復(fù)合物101035351515總濃度總濃度(mmol/L)(mmol/L)2.152.152.572.570.810.811.451.450.70.70.990.99 第一節(jié)第一節(jié) 一、鈣代謝及其異常一、鈣代謝及其異常一、鈣代謝一、鈣代謝 紅細胞內(nèi)鈣含量較少，絕大多數(shù)存在于血紅細胞內(nèi)鈣含量較少，絕大多數(shù)存在于血漿中，故血鈣通常指血漿鈣，正常值為漿中，故血鈣通常指血漿鈣，正常值為2.252.252.75mmol/l

4、2.75mmol/l，其中用，其中用ISEISE測得的離子鈣僅為測得的離子鈣僅為0.960.961.24mmol/l1.24mmol/l。人體中鈣的人體中鈣的存在狀態(tài)存在狀態(tài)骨鹽骨鹽體液鈣體液鈣羥磷灰石結(jié)晶羥磷灰石結(jié)晶無定形磷酸鈣沉淀無定形磷酸鈣沉淀不擴散鈣：與蛋白質(zhì)結(jié)合不擴散鈣：與蛋白質(zhì)結(jié)合可擴散鈣可擴散鈣游離游離CaCa2 2難解離化合物難解離化合物乳酸鈣、檸檬酸鈣等乳酸鈣、檸檬酸鈣等人體內(nèi)鈣的存在狀態(tài)人體內(nèi)鈣的存在狀態(tài) 離子鈣離子鈣45% 45% 血鈣血鈣 復(fù)合鈣復(fù)合鈣1515 結(jié)合鈣結(jié)合鈣 與血漿蛋白結(jié)合的鈣與血漿蛋白結(jié)合的鈣40% 40% 血漿中發(fā)揮生理作用的是離子鈣，離子鈣與非擴散

5、鈣可血漿中發(fā)揮生理作用的是離子鈣，離子鈣與非擴散鈣可相互轉(zhuǎn)換，但受相互轉(zhuǎn)換，但受PHPH影響。影響。血漿蛋白結(jié)合鈣血漿蛋白結(jié)合鈣 血漿蛋白血漿蛋白+ Ca+ Ca2+ 2+ 當當HH+ + 升高時，蛋白結(jié)合體向離子鈣轉(zhuǎn)移升高時，蛋白結(jié)合體向離子鈣轉(zhuǎn)移當當HH+ + 降低時，血漿離子鈣降低，而血漿總鈣量可無變降低時，血漿離子鈣降低，而血漿總鈣量可無變化，此時可出現(xiàn)低鈣抽搐現(xiàn)象。化，此時可出現(xiàn)低鈣抽搐現(xiàn)象。pHpH每改變每改變0.10.1單位單位, ,血清游離鈣濃度改變血清游離鈣濃度改變0.05mmol/l0.05mmol/lH+HCO3- 總鈣的異?？傗}的異常表現(xiàn)為表現(xiàn)為 游離鈣的異常游離鈣的異

6、常 總鈣和游離鈣的異?？傗}和游離鈣的異常 二、鈣代謝異常二、鈣代謝異常1.1.高鈣血癥（高鈣血癥（HypercalcemiaHypercalcemia）定義：血鈣濃度高于定義：血鈣濃度高于2.75mmol/l2.75mmol/l常見病因常見病因: :鈣溢出進入細胞外液鈣溢出進入細胞外液腎對鈣的重吸收增加腎對鈣的重吸收增加腸道對鈣吸收增強腸道對鈣吸收增強骨髓的重吸收增加骨髓的重吸收增加原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和PTHPTH過度分泌過度分泌2.2.低鈣血癥（低鈣血癥（hypocalcemiahypocalcemia）定義：血鈣濃度低于定義：血鈣濃度低于2.25mmol/l2.

7、25mmol/l常見病因：常見病因：低清蛋白血癥：血清總鈣降低低清蛋白血癥：血清總鈣降低慢性腎功能衰竭慢性腎功能衰竭甲狀旁腺功能減退甲狀旁腺功能減退,PTH,PTH分泌不足分泌不足維生素維生素D D缺乏缺乏電解質(zhì)代謝紊亂電解質(zhì)代謝紊亂 第一節(jié)第一節(jié) 二、磷代謝及其異常二、磷代謝及其異常1.1.高磷血癥高磷血癥 定義定義: : 指血清無機磷濃度高于指血清無機磷濃度高于1.45mmol/l1.45mmol/l。 常見病因常見病因: :常因腎臟排泌磷酸鹽的能力不足而致常因腎臟排泌磷酸鹽的能力不足而致, ,其他引起的因素與增加磷酸鹽從組織進入到細其他引起的因素與增加磷酸鹽從組織進入到細胞外液等有關(guān)。胞

8、外液等有關(guān)。 腎排泌磷酸鹽能力下降腎排泌磷酸鹽能力下降 磷酸鹽攝入過多磷酸鹽攝入過多 細胞內(nèi)磷酸鹽大量轉(zhuǎn)運出細胞內(nèi)磷酸鹽大量轉(zhuǎn)運出 2.2.低磷血癥低磷血癥 定義：血清無機磷濃度低于定義：血清無機磷濃度低于0.81mmol/l0.81mmol/l。 常見病因常見病因: : 磷向細胞內(nèi)轉(zhuǎn)移磷向細胞內(nèi)轉(zhuǎn)移 腎磷酸鹽閾值降低腎磷酸鹽閾值降低 腸道磷酸鹽的吸收減少腸道磷酸鹽的吸收減少 細胞外磷酸鹽丟失細胞外磷酸鹽丟失鎂代謝鎂代謝血液中的鎂主要以磷酸鎂及碳酸鎂的形式存在。血液中的鎂主要以磷酸鎂及碳酸鎂的形式存在。 血漿中鎂的濃度約為血漿中鎂的濃度約為0.750.751.00mmol/l1.00mmol/

9、l，主要以，主要以三種形式存在：三種形式存在：55%55%是游離的、是游離的、30%30%與蛋白結(jié)合、與蛋白結(jié)合、15%15%與陰離子形成復(fù)合物。體內(nèi)鎂分為細胞內(nèi)和細胞外。與陰離子形成復(fù)合物。體內(nèi)鎂分為細胞內(nèi)和細胞外。 第一節(jié)第一節(jié) 三、鎂代謝及其異常三、鎂代謝及其異常鎂存在于除脂肪以外的所有動物組織及植物鎂存在于除脂肪以外的所有動物組織及植物性食品中，日攝入量為性食品中，日攝入量為250mg250mg。 1.1.吸收吸收 部位：主要在回腸部位：主要在回腸 方式：主動轉(zhuǎn)運過程方式：主動轉(zhuǎn)運過程 2.2.排泄排泄 消化道排泄消化道排泄 腎排泄（主要途徑）腎排泄（主要途徑） 3.3.對骨代謝的調(diào)節(jié)

10、對骨代謝的調(diào)節(jié) （1 1）鎂能從羥磷灰石中置換出鈣，故鎂能夠影響骨的）鎂能從羥磷灰石中置換出鈣，故鎂能夠影響骨的代謝。代謝。 （2 2）高鎂可影響成骨作用，骨鎂升高，礦化過程減）高鎂可影響成骨作用，骨鎂升高，礦化過程減慢，可能發(fā)生骨營養(yǎng)不良。慢，可能發(fā)生骨營養(yǎng)不良。1. 1. 低鎂血癥低鎂血癥 血鎂血鎂0.75mmol/l1.10mmol/l1.10mmol/l 鎂攝入過多鎂攝入過多 排鎂過少排鎂過少 內(nèi)分泌紊內(nèi)分泌紊亂亂 鎂代謝異常鎂代謝異常 第二節(jié)第二節(jié) 骨代謝激素調(diào)節(jié)及其異常骨代謝激素調(diào)節(jié)及其異常 激素調(diào)節(jié)：主要是甲狀旁腺激素、激素調(diào)節(jié)：主要是甲狀旁腺激素、1 1，25-25-二羥維生素

11、二羥維生素D D3 3、降鈣素降鈣素1.1.甲狀旁腺激素甲狀旁腺激素(parathyroid hormone PTH)(parathyroid hormone PTH)（1 1）合成：甲狀旁腺主細胞）合成：甲狀旁腺主細胞（2 2）合成調(diào)節(jié)）合成調(diào)節(jié) 血鈣負反饋調(diào)節(jié)血鈣負反饋調(diào)節(jié) 1.251.25（OH)OH)2 2D D3 3的影響的影響 降鈣素的影響降鈣素的影響 一、甲狀旁腺激素一、甲狀旁腺激素（3 3）調(diào)節(jié)骨代謝：靶器官為腎臟、骨骼、小腸。）調(diào)節(jié)骨代謝：靶器官為腎臟、骨骼、小腸。對小腸的作用對小腸的作用對骨的作用對骨的作用對腎的作用對腎的作用總效應(yīng)總效應(yīng)2.2.甲狀旁腺激素功能異常甲狀旁腺

12、激素功能異常 （1 1）甲狀旁腺功能亢進）甲狀旁腺功能亢進 原發(fā)性甲旁亢：腺瘤或增生引起原發(fā)性甲旁亢：腺瘤或增生引起 繼發(fā)性甲旁亢：維生素繼發(fā)性甲旁亢：維生素D D缺乏缺乏 、及慢性腎臟疾病患、及慢性腎臟疾病患兒兒 。 表現(xiàn)為：甲狀旁腺激素增高，高血鈣低血磷表現(xiàn)為：甲狀旁腺激素增高，高血鈣低血磷 ，尿結(jié)，尿結(jié)石或腎鈣鹽沉著癥石或腎鈣鹽沉著癥 ，腎機能常遭受嚴重損害，腎機能常遭受嚴重損害 ，骨骼，骨骼的脫鈣畸形。的脫鈣畸形。（2 2）甲狀旁腺功能減退）甲狀旁腺功能減退繼發(fā)性甲旁減：最多見甲狀腺手術(shù)時誤將甲狀旁腺切除或繼發(fā)性甲旁減：最多見甲狀腺手術(shù)時誤將甲狀旁腺切除或損傷所致?lián)p傷所致 特發(fā)性甲旁減

13、：系自身免疫性疾病。特發(fā)性甲旁減：系自身免疫性疾病。假性甲旁減：假性甲旁減： 表現(xiàn)為：表現(xiàn)為：PTHPTH減少，血鈣降低，尿磷減少，血磷濃度減少，血鈣降低，尿磷減少，血磷濃度增高增高 。手足搐搦，尿鈣顯著減少，皮膚、毛發(fā)、指甲等。手足搐搦，尿鈣顯著減少，皮膚、毛發(fā)、指甲等外胚層組織病變，小兒牙齒發(fā)育不全。外胚層組織病變，小兒牙齒發(fā)育不全。1. 1. 代謝代謝 天然的維生素天然的維生素D D有兩種：有兩種： VitDVitD2 2（麥角鈣化醇）、（麥角鈣化醇）、VitDVitD3 3（膽（膽鈣化醇）。鈣化醇）。（1 1）合成）合成活性活性D D3 3活性是維生素活性是維生素D D3 3的的101

14、01515倍倍 二、維生素二、維生素D D（2 2）骨代謝調(diào)節(jié)）骨代謝調(diào)節(jié): : 靶器官是小腸、骨、腎臟。靶器官是小腸、骨、腎臟。對小腸的作用對小腸的作用(+)(+)小腸對鈣、磷的吸收小腸對鈣、磷的吸收對骨的作用對骨的作用(+)(+)骨骼的更新骨骼的更新 ( (先溶骨再成骨，溶骨先溶骨再成骨，溶骨 成骨成骨) ) 對腎的作用對腎的作用(+)(+)腎遠曲小管及集合管合成鈣結(jié)合腎遠曲小管及集合管合成鈣結(jié)合蛋白，促進鈣的重吸收蛋白，促進鈣的重吸收總效應(yīng)總效應(yīng)升高血鈣與血磷升高血鈣與血磷2. 2. 維生素維生素D D缺乏與代謝性骨病缺乏與代謝性骨?。? 1）維生素）維生素D D 攝入不足佝僂病和骨軟化

15、癥攝入不足佝僂病和骨軟化癥 （2 2）肝性佝僂病和腎性佝僂?。└涡载E病和腎性佝僂?。? 3）維生素）維生素D D 依賴性佝僂病依賴性佝僂病 表現(xiàn)為表現(xiàn)為1 1，25-25-二羥維生素二羥維生素D D3 3降低，血清磷降低，降低，血清磷降低，血清鈣含量低或正常，血清鈣含量低或正常， 血清骨堿性磷酸酶增高。血清骨堿性磷酸酶增高。發(fā)生佝僂病和骨軟化病，同時肌肉松弛、非特異發(fā)生佝僂病和骨軟化病，同時肌肉松弛、非特異性神經(jīng)精神癥狀、生長遲緩、免疫力低下等表現(xiàn)。性神經(jīng)精神癥狀、生長遲緩、免疫力低下等表現(xiàn)。（1 1）合成）合成 由甲狀旁腺濾泡細胞合成、分泌的一種單鏈多由甲狀旁腺濾泡細胞合成、分泌的一種單鏈

16、多肽激素。肽激素。（2 2）合成調(diào)節(jié)）合成調(diào)節(jié) 受血漿中的鈣離子的影響，受血漿中的鈣離子的影響，CTCT的分泌隨血鈣升高而的分泌隨血鈣升高而增加，兩者呈正相關(guān)。增加，兩者呈正相關(guān)。 三、降鈣素三、降鈣素（3 3）骨代謝調(diào)節(jié)）骨代謝調(diào)節(jié) 靶器官主要是骨和腎，對小腸間接影響。靶器官主要是骨和腎，對小腸間接影響。對小腸的作用對小腸的作用 對骨的作用對骨的作用對腎的作用對腎的作用總效應(yīng)總效應(yīng)（4 4）降鈣素分泌異常）降鈣素分泌異常 升高見于：孕婦、兒童、甲狀旁腺功能亢進、腎衰、升高見于：孕婦、兒童、甲狀旁腺功能亢進、腎衰、慢性炎癥、甲狀腺降鈣素分泌細胞癌、白血病、骨髓外慢性炎癥、甲狀腺降鈣素分泌細胞癌

17、、白血病、骨髓外骨髓增殖癥、骨髓增殖癥、肺癌肺癌等。等。 降低見于：甲狀腺先天發(fā)育不全、甲狀腺全切患者、降低見于：甲狀腺先天發(fā)育不全、甲狀腺全切患者、低血鈣、老年性低血鈣、老年性骨質(zhì)疏松骨質(zhì)疏松等。等。 PTHPTH、 CTCT、活性、活性D D3 3與血鈣、血磷的恒定與血鈣、血磷的恒定三種激素對鈣磷代謝的影響三種激素對鈣磷代謝的影響 第三節(jié)第三節(jié) 骨轉(zhuǎn)換相關(guān)標志物骨轉(zhuǎn)換相關(guān)標志物 一、骨形成標志物一、骨形成標志物1.1.骨鈣素測定（骨鈣素測定（OCOC或或BGPBGP）（1 1）概述：）概述： 骨鈣素是人骨中主要的和最多的非膠原蛋白。骨鈣素在骨鈣素是人骨中主要的和最多的非膠原蛋白。骨鈣素在1

18、.25-(OH)1.25-(OH)2 2-D-D3 3刺激下由成骨細胞合成。刺激下由成骨細胞合成。 主要生理功能是抑制異常的羥基磷灰石結(jié)晶的形主要生理功能是抑制異常的羥基磷灰石結(jié)晶的形成，維持骨的正常礦化速率。可反映成骨細胞活性和成，維持骨的正常礦化速率?？煞从吵晒羌毎钚院凸切纬汕闆r。骨形成情況。 骨鈣素釋放入血循環(huán)后，被腎迅速地清除，循環(huán)中骨鈣素釋放入血循環(huán)后，被腎迅速地清除，循環(huán)中的骨鈣素半壽期僅為的骨鈣素半壽期僅為5 5分鐘左右，故血清骨鈣素水平基分鐘左右，故血清骨鈣素水平基本上能夠反映本上能夠反映近期近期骨細胞合成骨鈣素和骨細胞合成骨鈣素和骨形成骨形成的情的情況。況。（2 2）臨床意

19、義：）臨床意義：BGPBGP是反映骨形成的指標。是反映骨形成的指標。 骨鈣素升高見于：兒童生長期、腎性骨營養(yǎng)不良骨鈣素升高見于：兒童生長期、腎性骨營養(yǎng)不良、 畸形性骨炎、甲狀旁腺功能亢進、骨折、骨轉(zhuǎn)移癌畸形性骨炎、甲狀旁腺功能亢進、骨折、骨轉(zhuǎn)移癌、腎功能不全等。、腎功能不全等。 骨鈣素降低見于：甲狀旁腺功能減退、甲狀腺骨鈣素降低見于：甲狀旁腺功能減退、甲狀腺功能減退、肝病、長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素治療等功能減退、肝病、長期應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素治療等。2.2.骨性堿性磷酸酶（骨性堿性磷酸酶（B-ALPB-ALP） （1 1）概述：）概述： 堿性磷酸酶存在于骨、肝腸、腎和胎盤等許多組織。堿性磷酸酶存在

20、于骨、肝腸、腎和胎盤等許多組織。成骨細胞中成骨細胞中ALPALP活性高，當成骨細胞活躍，可見血清活性高，當成骨細胞活躍，可見血清BALPBALP活性增高。故活性增高。故BALPBALP活性可作為骨更新的指標活性可作為骨更新的指標。 B-ALP B-ALP在血清中比骨鈣素更穩(wěn)定，血清中的半壽期為在血清中比骨鈣素更穩(wěn)定，血清中的半壽期為1 12 2天，并且不受晝夜變化的影響，標本不需特殊天，并且不受晝夜變化的影響，標本不需特殊處理。因此血清處理。因此血清B-ALPB-ALP在反映成骨細胞活性和骨形成在反映成骨細胞活性和骨形成上則有較高特異性，優(yōu)于骨鈣素。上則有較高特異性，優(yōu)于骨鈣素。（2 2）臨床

21、意義：）臨床意義： B-ALPB-ALP增高見于：增高見于：PagetPaget病、修復(fù)活躍的骨質(zhì)疏松、病、修復(fù)活躍的骨質(zhì)疏松、甲狀腺毒癥、甲狀腺功能亢進、骨質(zhì)軟化癥、佝僂病、甲狀腺毒癥、甲狀腺功能亢進、骨質(zhì)軟化癥、佝僂病、骨營養(yǎng)障礙、骨質(zhì)溶解轉(zhuǎn)移、指端肥大癥以及其他增加骨營養(yǎng)障礙、骨質(zhì)溶解轉(zhuǎn)移、指端肥大癥以及其他增加骨形成的病癥。骨形成的病癥。 3.I 3.I型型前膠原肽前膠原肽 I I 型前膠原羧基端前肽型前膠原羧基端前肽 （PICPPICP） I I 型前膠原氨基端前肽型前膠原氨基端前肽 （PINPPINP） （1 1）概述：）概述： 骨膠原的合成是由成骨細胞合成的，占骨基質(zhì)骨膠原的合成

22、是由成骨細胞合成的，占骨基質(zhì)有機質(zhì)成分的有機質(zhì)成分的90%90%95%95%，且絕大多數(shù)為，且絕大多數(shù)為I I型膠原。型膠原。I I型型膠原是由兩個膠原是由兩個1 1鏈及一個鏈及一個2 2鏈組成，鏈組成， 3 3條鏈互相左旋條鏈互相左旋卷曲而形成一個三股螺旋構(gòu)型的纖維狀蛋白質(zhì)。卷曲而形成一個三股螺旋構(gòu)型的纖維狀蛋白質(zhì)。 型膠原是由成骨細胞的前體細胞合成，含型膠原是由成骨細胞的前體細胞合成，含N N端和端和C C端端延伸段延伸段( (又稱又稱I I 型前膠原羧基端前肽型前膠原羧基端前肽 PICPPICP和和I I 型前膠原型前膠原氨基端前肽氨基端前肽 PINP)PINP)。在形成纖維和釋放入血時

23、從。在形成纖維和釋放入血時從型膠型膠原上斷裂下來，并以等摩爾濃度釋入血中原上斷裂下來，并以等摩爾濃度釋入血中，它們均可它們均可作為評價骨形成的指標?，F(xiàn)多檢測作為評價骨形成的指標?，F(xiàn)多檢測PICPPICP 。 型膠原也是其他組織的主要基質(zhì)，故敏感性和特型膠原也是其他組織的主要基質(zhì)，故敏感性和特異性不如骨鈣素和異性不如骨鈣素和B-ALPB-ALP。（2 2）臨床意義：）臨床意義： 增高見于：增高見于： 兒童發(fā)育期平均為正常成人的兒童發(fā)育期平均為正常成人的2 2倍。妊娠最后倍。妊娠最后3 3個月個月增高。骨腫瘤和其他腫瘤的骨轉(zhuǎn)移、酒精性肝炎、肺增高。骨腫瘤和其他腫瘤的骨轉(zhuǎn)移、酒精性肝炎、肺纖維化等。

24、纖維化等。 降低見于：降低見于： 絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松患者經(jīng)雌激素治療絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松患者經(jīng)雌激素治療6 6個月后個月后PICPPICP可可降低降低3030，降低的機制尚不清楚。，降低的機制尚不清楚。1.1.吡啶酚（吡啶酚（PYDPYD）和脫氧吡啶酚（）和脫氧吡啶酚（DPDDPD）（1 1）概述：）概述： 骨的有機基質(zhì)中膠原交聯(lián)骨的有機基質(zhì)中膠原交聯(lián)90%90%為為型膠原。型膠原。 PYDPYD和和DPDDPD是是型膠原分子之間構(gòu)成膠原纖維的交聯(lián)物。型膠原分子之間構(gòu)成膠原纖維的交聯(lián)物。 脫氧吡啶酚脫氧吡啶酚吡啶酚吡啶酚兩個天然的不能被兩個天然的不能被還原的交聯(lián)還原的交聯(lián) 骨吸收期間骨吸收期間型膠原

25、被水解，羥基吡啶酚交聯(lián)釋型膠原被水解，羥基吡啶酚交聯(lián)釋放入血并從尿中排除。故可作為反映骨吸收的指標。放入血并從尿中排除。故可作為反映骨吸收的指標。（2 2）臨床意義：）臨床意義： 吡啶酚水平可用于骨質(zhì)疏松、吡啶酚水平可用于骨質(zhì)疏松、PagetPaget S S病、其他病、其他代謝性骨病、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和甲狀腺功代謝性骨病、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進和甲狀腺功能亢進以及其他伴有骨吸收增加性疾病的診斷或病能亢進以及其他伴有骨吸收增加性疾病的診斷或病情評價。情評價。 二、骨吸收標志物二、骨吸收標志物2. I I 型膠原型膠原C C端肽和端肽和N N端肽測定端肽測定 （1 1）概述：）概述：型膠原

26、交聯(lián)區(qū)的型膠原交聯(lián)區(qū)的C C端和端和N N端肽也是一種端肽也是一種骨吸收的指標，與脫氧吡啶酚和吡啶酚一樣具有較好特骨吸收的指標，與脫氧吡啶酚和吡啶酚一樣具有較好特異性，不受飲食等干擾。異性，不受飲食等干擾。（2 2）臨床意義：）臨床意義： 與吡啶酚相同，用于骨質(zhì)疏松、與吡啶酚相同，用于骨質(zhì)疏松、PagetPagets s病、甲病、甲旁亢等伴有骨吸收增加性疾病的診斷或評價。旁亢等伴有骨吸收增加性疾病的診斷或評價。3.3.耐酒石酸酸性磷酸酶耐酒石酸酸性磷酸酶 （1 1）概述：）概述： 骨吸收期間，破骨細胞產(chǎn)生和分泌一種耐酒石酸酸性骨吸收期間，破骨細胞產(chǎn)生和分泌一種耐酒石酸酸性磷酸酶進入破骨細胞與骨

27、細胞表面之間的間隙，并能在血磷酸酶進入破骨細胞與骨細胞表面之間的間隙，并能在血清中測得，清中測得，能反映破骨細胞活性和骨吸收情況能反映破骨細胞活性和骨吸收情況。（2 2）臨床意義：）臨床意義： 增高見于：增高見于： 原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進、慢性腎功能不全、畸形原發(fā)性甲狀旁腺機能亢進、慢性腎功能不全、畸形性骨炎、骨轉(zhuǎn)移癌、卵巢切除術(shù)后、高轉(zhuǎn)換率的骨質(zhì)疏性骨炎、骨轉(zhuǎn)移癌、卵巢切除術(shù)后、高轉(zhuǎn)換率的骨質(zhì)疏松患者。松患者。 降低見于：降低見于： 甲狀旁腺功能降低。老年性骨質(zhì)疏松癥患者增高甲狀旁腺功能降低。老年性骨質(zhì)疏松癥患者增高耐耐酒酒石酸酸性磷酸酶不顯著。石酸酸性磷酸酶不顯著。4.4.尿羥脯氨酸檢測（

28、尿羥脯氨酸檢測（HOPHOP）（1 1）概述：）概述： HOPHOP主要存在于膠原，由脯氨酸羥化而成。大約主要存在于膠原，由脯氨酸羥化而成。大約10%10%的羥脯氨酸在膠原分解時被釋放從尿排出。由于受的羥脯氨酸在膠原分解時被釋放從尿排出。由于受各種疾病或其他因素包括飲食的干擾，并且人體其他各種疾病或其他因素包括飲食的干擾，并且人體其他組織包括肌肉和皮膚也含有一定比例的膠原，所以尿組織包括肌肉和皮膚也含有一定比例的膠原，所以尿羥脯氨酸對骨更新或骨吸收不特異。羥脯氨酸對骨更新或骨吸收不特異。（2 2）臨床意義：）臨床意義： 增加見于增加見于 各種骨代謝性疾病，如各種骨代謝性疾病，如PagetPag

29、et病、骨軟化癥，骨腫病、骨軟化癥，骨腫瘤等。兒童生長期、嚴重骨折、甲狀旁腺功能亢進、瘤等。兒童生長期、嚴重骨折、甲狀旁腺功能亢進、甲亢、骨轉(zhuǎn)移癌、慢性腎功能不全、畸形性骨炎、佝甲亢、骨轉(zhuǎn)移癌、慢性腎功能不全、畸形性骨炎、佝僂病和軟骨病，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥僂病和軟骨病，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥HOP HOP 升高。升高。 降低見于：降低見于： 甲狀腺機能低下、侏儒癥甲狀腺機能低下、侏儒癥HOPHOP顯著降低。顯著降低。 第四節(jié)第四節(jié) 骨代謝異常的生物化學(xué)檢測指標骨代謝異常的生物化學(xué)檢測指標（一）血清鈣的測定（一）血清鈣的測定 1.1.血清總鈣（血清總鈣（TCaTCa2+2+）的測定）的測定滴定法（氧化還

30、原滴定法、絡(luò)合滴定法）滴定法（氧化還原滴定法、絡(luò)合滴定法）比色法比色法鄰甲酚酞絡(luò)合酮法鄰甲酚酞絡(luò)合酮法 WHOWHO和我國推薦的常規(guī)方法和我國推薦的常規(guī)方法甲基麝香草酚藍法甲基麝香草酚藍法偶氮胂偶氮胂法法火焰光度法火焰光度法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 IFCCIFCC推薦的參考方法推薦的參考方法同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法 IFCCIFCC推薦的決定性方法推薦的決定性方法一、血清鈣、磷、鎂檢測一、血清鈣、磷、鎂檢測2.2.血清游離（離子）鈣測定血清游離（離子）鈣測定 生物學(xué)法生物學(xué)法透析法透析法超濾法超濾法金屬指示劑法金屬指示劑法離子選擇性電極法離子選擇性電極法(ISE) (IS

31、E) 目前應(yīng)用最多，此方法簡便、快速、重復(fù)性好目前應(yīng)用最多，此方法簡便、快速、重復(fù)性好，正確和敏感性高，已成為鈣離子測定的參考，正確和敏感性高，已成為鈣離子測定的參考方法。方法。 （二）血清磷測定（二）血清磷測定磷鉬酸還原法磷鉬酸還原法 我國推薦的常規(guī)方法我國推薦的常規(guī)方法非還原法非還原法染料結(jié)合法染料結(jié)合法紫外分光光度法紫外分光光度法黃嘌呤氧化酶法黃嘌呤氧化酶法 WHOWHO推薦的常規(guī)方法推薦的常規(guī)方法CVCV多元絡(luò)合超微量測定法多元絡(luò)合超微量測定法同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法 決定性方法決定性方法原子吸收分光光度法等原子吸收分光光度法等（三）血清鎂測定（三）血清鎂測定比色法比色法 我國

32、推薦我國推薦MTBMTB法鈣鎂試劑法作為常規(guī)方法鈣鎂試劑法作為常規(guī)方法法熒光法熒光法離子層析法離子層析法離子選擇性電極法離子選擇性電極法(ISE)(ISE)酶法酶法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法(AAS) (AAS) 參考方法參考方法同位素稀釋質(zhì)譜法同位素稀釋質(zhì)譜法(ID-MS)(ID-MS)等等 決定性方法決定性方法 血清鎂測定血清鎂測定鈣鎂試劑是一種金屬色原指示劑，在堿性溶液中與鈣鎂試劑是一種金屬色原指示劑，在堿性溶液中與鎂結(jié)合形成紫色復(fù)合物檢測。鎂結(jié)合形成紫色復(fù)合物檢測。加入鈣螯合劑加入鈣螯合劑EGTAEGTA可減少鈣的干擾，減少蛋白質(zhì)及血可減少鈣的干擾，減少蛋白質(zhì)及血脂的干擾。脂

33、的干擾。甲基麝香草酚藍法：甲基麝香草酚藍法：MTBMTB與鎂形成藍色復(fù)合物，加入與鎂形成藍色復(fù)合物，加入EGTAEGTA可減少鈣的干擾?？蓽p少鈣的干擾。（一）甲狀旁腺激素測定（一）甲狀旁腺激素測定放射免疫法放射免疫法酶聯(lián)免疫法酶聯(lián)免疫法免疫化學(xué)發(fā)光法免疫化學(xué)發(fā)光法 ELISAELISA法是新近發(fā)展起來的方法，具有快速、靈法是新近發(fā)展起來的方法，具有快速、靈敏、無同位素污染的優(yōu)點敏、無同位素污染的優(yōu)點, , 該法最小檢測量為該法最小檢測量為2pg2pgmlml，批內(nèi)及批間，批內(nèi)及批間CVCV分別為分別為2.72.72.92.9和和7.97.98.68.6。回收率為?；厥章蕿?3939494。 二

34、、骨代謝相關(guān)激素檢測二、骨代謝相關(guān)激素檢測（二）（二）1,25- (OH)1,25- (OH)2 2-D-D3 3的測定的測定放射競爭性結(jié)合法（放射競爭性結(jié)合法（CPBCPB）放射受體測定法（放射受體測定法（RRARRA）放射免疫法（放射免疫法（RIARIA）高效液相色譜法（高效液相色譜法（HPLCHPLC） 由于由于1,25- (OH)1,25- (OH)2 2-D-D3 3是血清中維生素是血清中維生素D D的主要活性形的主要活性形式式, ,故是反映維生素故是反映維生素D D狀況的最佳指標。狀況的最佳指標。（三）血清降鈣素測定（三）血清降鈣素測定RIARIA：不同來源抗血清靈敏度和特異性不同

35、，不同：不同來源抗血清靈敏度和特異性不同，不同方法和試劑盒間差異較大，使臨床正常水平在實驗室方法和試劑盒間差異較大，使臨床正常水平在實驗室之間難以統(tǒng)一。之間難以統(tǒng)一。兩點免疫法（兩點免疫法（EIAEIA和和IRMAIRMA）：測出正常人降鈣素）：測出正常人降鈣素的基礎(chǔ)水平低于的基礎(chǔ)水平低于10 ng/L10 ng/L20ng/L20ng/L，其檢出限可小于，其檢出限可小于2ng/L2ng/L。 兩點法在診斷甲狀腺髓樣癌（兩點法在診斷甲狀腺髓樣癌（medullary thyroid medullary thyroid carcinoma MICcarcinoma MIC）要比大多數(shù)競爭性）要比大

36、多數(shù)競爭性RIARIA顯現(xiàn)出良好的靈顯現(xiàn)出良好的靈敏度和特異性。敏度和特異性。 三、骨轉(zhuǎn)換相關(guān)標志物檢測三、骨轉(zhuǎn)換相關(guān)標志物檢測1.1.骨鈣素測定骨鈣素測定 放射免疫法（放射免疫法（ RIARIA法）法）酶聯(lián)免疫法（酶聯(lián)免疫法（ ELISAELISA法）法）親和素親和素- -生物素酶免疫測定法生物素酶免疫測定法(BAEIA)(BAEIA)化學(xué)發(fā)光免疫分析法化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)(CLIA)免疫熒光分析法免疫熒光分析法(FIA)(FIA)等等 目前應(yīng)用最多的是目前應(yīng)用最多的是RIARIA法和法和ELISAELISA法法（一）（一）骨形成標志物的檢測骨形成標志物的檢測2.2.骨性堿性磷酸酶

37、測定骨性堿性磷酸酶測定 （1 1）化學(xué)法：先識別或分離出）化學(xué)法：先識別或分離出BALPBALP，再測定其堿性磷酸酶，再測定其堿性磷酸酶的活性。的活性。 （2 2）免疫放射法）免疫放射法(IRMA)(IRMA)測定測定BALPBALP：IRMAIRMA法定量檢測骨法定量檢測骨ALPALP可作為篩選試驗，高值標本須用電泳法證實除去肝可作為篩選試驗，高值標本須用電泳法證實除去肝ALPALP干擾，檢干擾，檢測骨測骨ALPALP過低標本時，以電泳法為首選。過低標本時，以電泳法為首選。 （3 3）化學(xué)發(fā)光免疫分析法：具有高度的特異性和敏感性，）化學(xué)發(fā)光免疫分析法：具有高度的特異性和敏感性，而且操作簡便，

38、被認為是目前鑒別和定量分析而且操作簡便，被認為是目前鑒別和定量分析BALPBALP的最佳方的最佳方法。法。3. I3. I型前膠原肽型前膠原肽 I I 型前膠原羧基端前肽型前膠原羧基端前肽 （PICPPICP） I I 型前膠原氨基端前肽型前膠原氨基端前肽 （PINPPINP） 檢測方法：檢測方法：放射免疫法（放射免疫法（ RIARIA法）法）酶聯(lián)免疫法（酶聯(lián)免疫法（ ELISAELISA法）法） 制備抗制備抗PINPPINP1 1鏈的抗體建立的免疫標記法是測定鏈的抗體建立的免疫標記法是測定PINPPINP的主要方法。的主要方法。1.1.吡啶酚（吡啶酚（PYDPYD）和脫氧吡啶酚（）和脫氧吡啶

39、酚（DPDDPD）測定方法：測定方法： HPLCHPLC法：用法：用HPLC-HPLC-熒光檢測法測定。熒光檢測法測定。ELISAELISA法：用競爭性單克隆抗體測定脫氧吡啶酚。法：用競爭性單克隆抗體測定脫氧吡啶酚。RIA RIA 法法 ：用用同位素標記抗體檢測吡啶酚。用用同位素標記抗體檢測吡啶酚。（二）骨吸收標志物檢測（二）骨吸收標志物檢測2.I 2.I 型膠原型膠原C C端肽和端肽和N N端肽測定端肽測定 測定方法：測定方法：HPLCHPLC法：用法：用HPLC-HPLC-熒光檢測法測定。熒光檢測法測定。ELISAELISA法：用競爭性單克隆抗體測定法：用競爭性單克隆抗體測定型膠原交聯(lián)區(qū)的

40、型膠原交聯(lián)區(qū)的C C端和端和N N端肽是目前主要采用的方法。端肽是目前主要采用的方法。RIA RIA 法法 ：用同位素標記抗體檢測吡啶酚。：用同位素標記抗體檢測吡啶酚。3.3.耐酒石酸酸性磷酸酶耐酒石酸酸性磷酸酶 檢測方法檢測方法 酶動力學(xué)法酶動力學(xué)法 電泳法電泳法 放射免疫法放射免疫法 酶聯(lián)免疫法酶聯(lián)免疫法 4.4.尿羥脯氨酸檢測（尿羥脯氨酸檢測（HOPHOP） 測定方法：測定方法： （1 1） 化學(xué)試劑法：尿總化學(xué)試劑法：尿總HOPHOP測定采用酸性環(huán)境中將膠原肽鏈測定采用酸性環(huán)境中將膠原肽鏈上的上的HOPHOP水解下來，再氧化生成吡咯，用水解下來，再氧化生成吡咯，用EhrlichEhrl

41、ich試劑（酸性試劑（酸性對二甲氨基苯甲醛試劑）顯色。對二甲氨基苯甲醛試劑）顯色。 （2 2）離子交換色譜反向）離子交換色譜反向HPLCHPLC法。法。 第五節(jié)第五節(jié) 骨代謝異常檢測的臨床應(yīng)用骨代謝異常檢測的臨床應(yīng)用 代謝性骨病是一種伴有鈣、磷、鎂、維生素代謝性骨病是一種伴有鈣、磷、鎂、維生素D D代謝和甲狀旁腺功能異常的全身骨骼病。代謝和甲狀旁腺功能異常的全身骨骼病。 臨床上以骨重建紊亂所致的骨轉(zhuǎn)換率異常、骨痛、臨床上以骨重建紊亂所致的骨轉(zhuǎn)換率異常、骨痛、骨畸形和骨折為主要特征。骨畸形和骨折為主要特征。 常見疾病是骨質(zhì)疏松癥和骨軟化癥和佝僂病。常見疾病是骨質(zhì)疏松癥和骨軟化癥和佝僂病。 骨質(zhì)疏

42、松癥（骨質(zhì)疏松癥（osteoporosisosteoporosis）是以骨組織顯微結(jié)構(gòu)）是以骨組織顯微結(jié)構(gòu)退化為特征，骨礦成分和骨基質(zhì)等比例地不斷減少，退化為特征，骨礦成分和骨基質(zhì)等比例地不斷減少，骨質(zhì)變薄，骨小梁數(shù)量減少，骨脆性增加和骨折危險骨質(zhì)變薄，骨小梁數(shù)量減少，骨脆性增加和骨折危險度升高的一種全身骨代謝障礙的疾病。度升高的一種全身骨代謝障礙的疾病。常見原因：常見原因：1. 1. 生長期骨形成缺陷。生長期骨形成缺陷。2. 2. 成骨細胞骨形成受損。成骨細胞骨形成受損。3. 3. 增加骨吸收的其他病理生理過程。增加骨吸收的其他病理生理過程。 一、骨質(zhì)疏松癥一、骨質(zhì)疏松癥年齡、年齡、 種族（

43、白色人種種族（白色人種 黑色人種黑色人種 黃色人種）黃色人種）長期低鈣飲食長期低鈣飲食 PTHPTH增加增加絕經(jīng)或卵巢切除絕經(jīng)或卵巢切除 長期臥床長期臥床營養(yǎng)缺乏營養(yǎng)缺乏 糖尿病糖尿病腎功能不全性別腎功能不全性別 胃腸切除胃腸切除脂肪瀉脂肪瀉 類風(fēng)濕類風(fēng)濕慢性肝炎慢性肝炎骨質(zhì)疏松癥的危險因素骨質(zhì)疏松癥的危險因素雌激素雌激素 （EstrogenEstrogen）甲狀旁腺激素甲狀旁腺激素 （parathyroid hormone , PTHparathyroid hormone , PTH）降鈣素降鈣素 （Calcitionin , CTCalcitionin , CT）活性維生素活性維生素D D

44、 （1-251-25（OHOH）2 2D D3 3) )甲狀腺素甲狀腺素 ( Thyroxine )( Thyroxine )雄激素雄激素 ( Androgenic hormone )( Androgenic hormone )皮質(zhì)類固醇激素皮質(zhì)類固醇激素 (Corticosteroid hormone) (Corticosteroid hormone) 生長激素生長激素 (Growth hormone , GH)(Growth hormone , GH)與骨質(zhì)疏松癥與骨質(zhì)疏松癥有關(guān)的激素有關(guān)的激素原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥 （primary osteoporosisprimary os

45、teoporosis）占）占90% 90% 停經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（停經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥（I I型）型） 老年性骨質(zhì)疏松癥（老年性骨質(zhì)疏松癥（IIII型）型）繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥 （secondary osteoporosissecondary osteoporosis）占）占10%10%分型分型（一）原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥（一）原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥（primary osteoporosisprimary osteoporosis） 包括二型：包括二型： I I 型骨質(zhì)疏松癥（絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥）型骨質(zhì)疏松癥（絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥） 型骨質(zhì)疏松癥（老年性骨質(zhì)疏松癥）型骨質(zhì)疏松癥（老年性骨質(zhì)疏松癥）I I型骨

46、質(zhì)疏松癥型骨質(zhì)疏松癥 （1 1）發(fā)病機制：雌激素分泌不足，使破骨細胞過于活躍，）發(fā)病機制：雌激素分泌不足，使破骨細胞過于活躍，影響骨膠原的成熟、轉(zhuǎn)換和骨礦化。同時雌激素抑制影響骨膠原的成熟、轉(zhuǎn)換和骨礦化。同時雌激素抑制PTH PTH 的分泌，使腎臟的分泌，使腎臟11羥化酶的活化發(fā)生障礙，造成羥化酶的活化發(fā)生障礙，造成1 1，25-(OH)25-(OH)2 2D D3 3 合成減少，腸吸收鈣減少合成減少，腸吸收鈣減少 ，骨礦含量減少，骨礦含量減少，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松。導(dǎo)致骨質(zhì)疏松。（2 2）臨床表現(xiàn)：）臨床表現(xiàn)： 主要為腰背疼痛，身高縮短、駝背，易發(fā)生骨折，主要為腰背疼痛，身高縮短、駝背，易發(fā)生骨折，以脊椎壓縮性骨折和橈骨遠端骨折為主。以脊椎壓縮性骨折和橈骨遠端骨折為主。 （3 3）實驗室檢查：）實驗室檢查：血清鈣、磷、血清鈣、磷、ALPALP一般均在正常范圍。一般均在正常范圍。血清骨鈣素（血清骨鈣素（BGPBGP）、總堿性磷酸酶（）、總堿性磷酸酶（TALPTALP）、抗酒石酸酸性磷）、抗酒石酸酸性磷酸酶（酸酶（TRAPTRAP）及）及25-(OH)D25-(OH)D3 3、尿、尿NTX/Cr NTX/Cr 明顯增高。明顯增高。血清甲狀腺素和血清甲狀腺素和1 1，25-(OH)25-(OH)2 2D D3 3 降低。降低。性激素中血清性激素中血清E E2 2明顯低于絕經(jīng)前