聚維酮碘口服液萬金水對大腸桿菌和沙門氏菌的體外抑菌作用研究

1、聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌和沙門氏菌的體外抑菌作用研究試驗(yàn)單位（蓋章）：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)地 址：江蘇省南京市衛(wèi)崗1號委托單位及地址：深圳市安多福動物藥業(yè)有限公司；深圳市鹽田區(qū)鹽田北山工業(yè)區(qū)首席專家（簽名）：江善祥試驗(yàn)負(fù)責(zé)人（簽名）：季輝試驗(yàn)參與人（簽名）：張冠軍試驗(yàn)日期：2014年3月聯(lián)系人：季輝聯(lián)系電話始資料保存地點(diǎn)：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院藥理組聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌和沙門氏菌的體外抑菌作用研究一、目的意義本試驗(yàn)?zāi)康氖茄芯烤劬S酮碘口服液（萬金水）在體外條件下，對大腸桿菌和沙門氏菌的抑菌作用，為其在獸醫(yī)生產(chǎn)中的合理使用提供理論依據(jù)。二、試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

2、2014年3月，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院藥理實(shí)驗(yàn)室。三、試驗(yàn)人員試驗(yàn)負(fù)責(zé)人：季輝，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)獸醫(yī)系，郵箱jihui1019。試驗(yàn)設(shè)計(jì)人：季輝。參加者：張冠軍，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)獸醫(yī)系。四、試驗(yàn)菌株豬大腸桿菌2株： ED115、ED117，南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院藥理組保存；禽沙門氏菌2株： F3、F5，安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院饋贈。五、試驗(yàn)藥物：獸藥名稱：聚維酮碘口服液（萬金水）生產(chǎn)廠家：深圳市安多福動物藥業(yè)有限公司提供規(guī)格：0.5%，500 mL/瓶生產(chǎn)日期：2013-01-10生產(chǎn)批號：13011004六、試驗(yàn)試劑MH培養(yǎng)基：上海盛思生化科技有限公司，130101；LB

3、肉湯培養(yǎng)基：上海盛思生化科技有限公司，130801；LB瓊脂培養(yǎng)基：上海盛思生化科技有限公司，130901。七、試驗(yàn)方案 本試驗(yàn)應(yīng)用試管稀釋法進(jìn)行聚維酮合碘口服液（萬金水）的實(shí)驗(yàn)室微生物殺滅試驗(yàn)，測定聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌和沙門氏菌的殺滅作用。7.1細(xì)菌繁殖體懸液制備：以無菌操作方式開啟菌種管，用毛細(xì)吸管加入適量營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含 5.0mL10.0mL 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置 37 培養(yǎng)18h24h。用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，置 37 培養(yǎng) 18h24h。挑取上述第 2 代培養(yǎng)物中典型菌落，接種

4、于營養(yǎng)營養(yǎng)肉湯，置 37 培養(yǎng) 18h24h，即為第 3 代培養(yǎng)物。 7.2 聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌和沙門氏菌的殺滅作用測定試驗(yàn)采用試管稀釋法測定( 3 重復(fù))。試驗(yàn)時(shí)，取對數(shù)生長期的細(xì)菌（109cfu/mL）用生理鹽水稀釋到106cfu/mL供試驗(yàn)用，取10支滅菌試管編號，每管加入1mL稀釋后的菌液，然后取濃度為80、40、20mg/L的聚維酮碘溶液1mL各加入三支試管中混勻，則試驗(yàn)濃度分別為40、20、10mg/L，另一只試管中加入1mL生理鹽水作為陽性對照。作用10min后，每管分別取0.1mL用生理鹽水按10倍比稀釋，再取稀釋后樣品0.1mL進(jìn)行平板計(jì)數(shù)，計(jì)算聚維酮碘口服液

5、（萬金水）的殺菌率。八 結(jié)果體外抗菌活性通過試驗(yàn)分別測定了聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌、沙門氏菌的殺菌作用，具體結(jié)果見表1、2。由表可見，聚維酮碘口服液（萬金水）三個(gè)濃度（40、20、10mg/L）分別與大腸桿菌、沙門氏菌作用10min后即可將細(xì)菌全部殺滅，細(xì)菌計(jì)數(shù)結(jié)果為0。 表1 聚維酮碘口服液（萬金水）與大腸桿菌作用10min后細(xì)菌數(shù)（cfu/mL）濃度（mg/L）菌株號ED115ED117400020001000陽性對照2.64×1067.7×105表2聚維酮碘口服液（萬金水）與沙門氏菌作用10min后細(xì)菌數(shù)（cfu/mL）濃度（mg/L）菌株號F3F54000

6、20001000陽性對照2.4×1061.2×106九 討論 聚維酮碘口服液（萬金水）對大腸桿菌和沙門氏菌的抗菌活性本試驗(yàn)采用試管稀釋法，每管加入1mL稀釋后的菌液，然后分別加入不同濃度的聚維酮碘溶液1mL，混勻后作用10min進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)，測定聚維酮碘口服液（萬金水）的殺菌性能。結(jié)果顯示分別在40、20、10mg/L的濃度下聚維酮碘與大腸桿菌和沙門氏菌作用10min，可將其全部殺滅。文獻(xiàn)報(bào)道各種碘制劑（碘伏、聚維酮碘等）的殺菌效果差別較大，分析原因主要為試驗(yàn)方法上的差異。不同試驗(yàn)方法得到的聚維酮碘的MIC或MBC為4.69mg/L625mg/L?？梢姳驹囼?yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)基本一

7、致。十 試驗(yàn)綜合評估綜合上述試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)，試驗(yàn)方法對該藥的體外抗菌活性影響較大。在本試驗(yàn)方法的條件下，聚維酮碘口服液（萬金水）在40、20、10mg/L時(shí)對臨床常見的細(xì)菌（大腸桿菌、沙門氏菌、）能夠迅速殺滅。主要參考文獻(xiàn)1 李繼昌，魯成武，符春燕，等.聚維酮碘消毒劑抑菌作用研究J.黑龍江畜牧獸醫(yī)，1998，（4）：272 劉全離.聚維酮碘體外抑菌效果試驗(yàn)觀察J.中國消毒學(xué)雜志，2008，25（1）：28-293 王玲，徐燕，陳越英，等.一種聚維酮碘消毒液對微生物殺滅效果的實(shí)驗(yàn)研究J.中國消毒學(xué)雜志，2007，24（2）：135-1374 陳祖毅，林立旺，周游，等.聚維酮碘殺菌性能及影響因素實(shí)驗(yàn)研究J.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（2）：309-311附：部分試驗(yàn)照片圖1 樣品配制圖2 萬金水與細(xì)菌作用10min后倒平板圖3 萬金水與大腸桿菌作用10min后細(xì)菌計(jì)數(shù)平板（0為陽性對照、1為10mg/L、2為20mg/L、4為40mg/L）圖4 萬金水與大腸桿菌作用10min后細(xì)菌計(jì)數(shù)平