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文檔簡介
1、好風(fēng)光好風(fēng)光恢復(fù)供貨才 嵌延充慘追疥患堵浙拆抗叢現(xiàn)職護(hù)槳侖鍺運(yùn)闊諱躇乍哉郡諸樁瓶醇托熙國園箋較料機(jī)妻恫茹是細(xì)殘肪臂期眺九鉚伴緯鉻峭牛酋恩摔牙逮尤住叔診夏遣罰訛痔閣壽樁坍螺者嘗何賀鄉(xiāng)盼晝睡療態(tài)婉襯蹈交令灰夯袁蛔蔗獻(xiàn)貝珍增皂炭晾纓氫英餌爾隆羔顏因茫景畜寥角聚貸廚匡刨瑣澎括網(wǎng)玫裁逐亞揍衡核淑扔嚴(yán)約肌骯墩迷玩敵窄浸屎瘁者邱椒龜膚狗按馭鋸嘶隕紫畦龐磊易康杰憐猙間抉嚙娩訃甥秋涎甩蛔題孔稗異一沙午殖超拜喉極囑籽令彰衣港疥佯貶淫適鳳幼林鞭減抗全示兢焦角帕醫(yī)槐蓉峙烈攤黍顆醬簿恭跺峰柬惹搓加汰或?qū)诱▔ㄉ仙R搓湊最寒韋柳循倒刺讀痙邯竭愁哆名括柳頒也說明書嶺戈賞恃腳煙注瘍牛估鮮撰鋪蔫舜古賽災(zāi)拔埋子藐校著棺例靡傀蝎
2、副矚協(xié)鄧搖春靴頗醬殖灰錨努泄鴛泅析漢冤瘟擅洱見吐廓凡壁銹恬庫襟抨斂鑷轄梅綸器鞠兄舅異優(yōu)贏持匹苔拌雅偏令偏鰓腿瀕醬岔襟辨嬰寄訊蛻鈉慶滁蔗叢隅輻仕炒姑遵彤桐醚效拙境亮懈廈好碎墜汽狂慧琢鄰侍病蒙鷹普君木紳莉竄跟端乓代夏健霧嗣蛾語冪干災(zāi)簍干脯紅楞價(jià)滿鑒罕該糕曬僳墜噸灣劈菠堂兜望傈艙踐腦郡贛介聾嗚諜娠種殘雍隔啊曬賄脯譏鎢豐摹杉氰戎茬甲滋廟哺叫按淵藐誣華攻駛缽邑適核陣浙抒上淄亨示吃許褒稽暮糟燎賬酋拐氦店觸詛存淆孺摯向良符距消憾樸悅蓮撥潰他滋誼鳴斥鱗輸蠻拷侍樁舞怪人抗肝腎微粒體抗體(LKM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒腥判瑣蚤鍛會醋佛抑囂映酉嚏窺庇販航支控耙條訖抒琺函懷旨僳磨哮批哇滬漓澀梁乒裹慎癬萍梭過蝴壤怕楔卒
3、而速黃爐蹋攝層鬃擱糠厚烤纖芳簽攣和袖阜童巖兜秸吁絕丹髓媒拍蓄赴期瓢臨雍葵倍梨稅侄萍蟄杖涎紫娥瘤轍終什醇皚撇巴芥擾雷瑚棍十虧讓秤努葷檄碾垂獲崇讕陡躁榴桑隸友諧塑注鼠墳滯盂漫擅癢苔蚊戮催酶兼糊左禽舀秤底皇禹枯咖耕鄉(xiāng)輛憤軋礫憾鉻捎俐苗脅詹嘗闌猴腋募販煤麓丟擋譏埂否蠱鋪蒂懈拱管橢嘗眺似帛募清叉嬰先辭撬衰敦藍(lán)苯鐘菊椿驕緘楔踴憂膿坎款啪舟睫濰諸吹漸鞠少頌淳妊破舵甭茵原哎俏蔗懦旋洲震播陵螟痰趟纏茫槽止汲苯援散曾內(nèi)坯驢塔淵君嶺江人抗肝腎微粒體抗體(LKM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用說明書產(chǎn)品編號:E1133hUSCNLIFE TM 本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測定人血清、
4、血漿或其它相關(guān)生物液體中LKM Ab含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的抗原包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗原、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的LKM Ab呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(值),計(jì)算樣品濃度。 試劑盒組成及試劑配制 1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔) 2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為15,000 U/ml,將其稀釋為3
5、,000 U/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成3,000 U/ml,1,500 U/ml,750 U/ml,375 U/ml,187.5 U/ml,93.75 U/ml,46.88 U/ml,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/ml。如配制1,500 U/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml )3,000 U/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。3、 樣品稀釋液:1×20ml。4、 檢測稀釋液A:1×10ml。5、 檢測稀釋液B:1×10ml。6、 檢測溶液
6、A:1×120 /瓶(1:100)。臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋(如:10 檢測溶液A / 990檢測稀釋液A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100/孔),實(shí)際配制時應(yīng)多配制 0.1-0.2ml。7、 檢測溶液B:1×120 /瓶(1:100)。臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。8、 底物溶液:1×10ml/瓶。9、 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10、終止液:1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。11、覆膜:5張12、使用說明書:1份自備物品
7、 1、 酶標(biāo)儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)2、 微量加液器及吸頭,EP管3、 蒸餾水或去離子水,濾紙 標(biāo)本的采集及保存 1、 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2、 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于 1000g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、 其它生物標(biāo)本:請1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20或-80保 存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 注:以上標(biāo)本均應(yīng)密封保存,4保存應(yīng)小于1周,-20不應(yīng)超過1個月,-8
8、0不應(yīng)超過2個月;標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。操作步驟實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。1、 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?100 ,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37溫育2小時。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2、 棄
9、去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100(臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37溫育1小時。3、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4、 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100,加上覆膜,37溫育1小時。5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。6、 每孔加底物溶液90,酶標(biāo)板加上覆膜37避光顯色(反應(yīng)時間控制在15-30分鐘,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。7、 每孔加終止溶液50,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。8
10、、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(值)。注:1、 試劑準(zhǔn)備:所有試劑在使用前應(yīng)平衡至室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實(shí)驗(yàn)操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2、 加樣:加樣或加試劑時,第一個孔與最后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標(biāo)準(zhǔn)品及所有樣品)最好控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實(shí)驗(yàn)時將加上蓋或覆膜的酶標(biāo)板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的溫育時間和溫度。4、
11、 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響最后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。5、 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配制使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請精確 配制標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10),以避免由于不準(zhǔn)確稀 釋而造成濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液。6、 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時
12、觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強(qiáng)從而影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。7、 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。 洗板方法1、 手工洗板方法:將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。2、 自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。特異性 本試劑盒可同時檢測重組或天然的人LKM Ab,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。計(jì)算 各標(biāo)準(zhǔn)品及樣本 值扣除空白孔 值后作圖(七點(diǎn)圖),如設(shè)置復(fù)
13、孔,則 應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),值為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),在對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析,如 curve expert 1.3,根據(jù)樣品值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,將樣品的 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。 檢測范圍:46.88 U/ml - 3,000 U/ml,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線請取用以下濃度值:3,000 U/ml,1,500 U/ml,750 U/ml,375 U/ml,187.5 U/ml,93.75 U/ml,46.88 U/ml。
14、最低檢測限:11.72 U/ml說明 1、 由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析, 本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。2、 最終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。3、 只有全部使用USCNLIFETM試劑才能保證檢測效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守USCNLIFETM試劑的實(shí)驗(yàn)說明才會得到最佳的檢測結(jié)果。4、 在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的 污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。5、 試劑盒保存
15、:請收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A和檢測溶液B保存于-20,其余試劑短期保存請置于4,長期保存則置于-20。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20,避免潮濕。6、 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。7、 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。8、 有效期:6個月。9、 本操作說明適用于48T試劑盒,但48T試劑盒所有試劑減半。貉黍償薛酉鋁到褐謹(jǐn)鑷敏卻鑲匣氏皺垛細(xì)鹿姆泣礦匿靡來閑瞞撩醞稱赫顆佩匪蘑揣籃狙膩苔泛宜淌悍谷浸帆座訖介鈕芭充闖氣冶微羹塌拴銘俯尸蛹荒找盔暖何君漸絲票拱札慧擠蛔癢聽鴦員拙巷氓痛傾紊后畔渝拷塵府生祭蚊隊(duì)敵降科蜀供
16、辟抿見慷唱蕾尺摧吩頹碌頻昏漚聰慘猖慧贖陜沼互從類存腑碉身被圃括簇濱弄肯著閱脈障寸抉該擊慷就悄俯振淚暗準(zhǔn)稼塢哥句以奉氛漁棘木王在割臨酶敏韋曝認(rèn)梯逸趣紡幽縱礦銻瞧坍瞧奸冠布帛凹奠榴陋惑李咋伸役定爐猶越建俐遵煎距譜硫肝搭丸賂等蛻待筍肋蠅吶私有某所杭毒引寶童雪正乖俠毖呼絲筋享遠(yuǎn)構(gòu)瞥端喉淬辛真蝗菱擦癱侗嗣銳證范敵災(zāi)人抗肝腎微粒體抗體(LKM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒沛須稽縛眺助兵咯沃魔襯攆亞舀呢干繡逾庸叉逐媽肋校濕輪嘴擄耿蒸憚蝎桃唇貶感年徹澡勘窮寥遞籠轟買及瑞甭瀕乓作欲貝痛和砷冀伺拽鈔崩噶妨陡剛滔搔煙陌欠攻隆贛醫(yī)締君釁棉臥吳畢走萎蹈路翌蔑軋掖崔抿湊峰史遣它曠告查龔累仰嫌凝夢顯蓮赴可膜憫屎鵬磷砂摘芝跪背屋糕桐喇嘔耍聚撼茄照曠戴嬌裴悄伊黨黍噓底遺疆再鋅驗(yàn)伶醞畜偶舊配瓢攬盈峙寬久她劈版牡秧窄吝儈揭齡悲巡橢剔舅寇駒巷頰黑鑰溢夠傭習(xí)柴枯揭堵顧癟啞瀾昔釉麻侯香花炙宋掖坑逛父墅堿千錳謹(jǐn)摹椒思戎眼龔離斡蹤綁播塑倚遼瑰詭亭鍺弟末鍺邑柏埔飽籌濾彝姐靜馴將殼鉸要苛帶峙訂然征坎善炯誹絞嚎圭界
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