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1、生物選修三知識(shí)點(diǎn)總結(jié)生物選修三知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 專題1 基因工程 基因工程:是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做DNA重組技術(shù)。 (一)基因工程的基本工具 1. “分子手術(shù)刀限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶) (1)來(lái)源:主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。 (2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。 (3)結(jié)果: 經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末

2、端和平末端。 2. “分子縫合針DNA連接酶 (1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較: 相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。 區(qū)別:E·coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái);而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。 (2)與DNA聚合酶作用的異同: DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。 3. “分子運(yùn)輸車載體 (1)載體具備的條件: 能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。 具有一至多

3、個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA片段插入。 具有標(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。 (2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。 (3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。 (二)基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的獲取 1. 目的基因是指: 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。 2. 原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。 3. PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 (1)PCR的含義:是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。 (2)目的:獲取大量的目的基因 (3)原理:DN

4、A雙鏈復(fù)制 (4)過(guò)程: 第一步:加熱至9095DNA解鏈為單鏈; 第二步:冷卻到5560,引物與兩條單鏈DNA結(jié)合; 第三步:加熱至7075,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。 (5)特點(diǎn):指數(shù)(2n)形式擴(kuò)增 第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建(核心) 1. 目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 2. 組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因 (1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。 (2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位

5、于基因的尾端。 (3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。 第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1. 轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程。 2. 常用的轉(zhuǎn)化方法: 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。 將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。方法的受體細(xì)胞多是受精卵。 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少 ,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌 ,其轉(zhuǎn)化方法是: 先用Ca2

6、+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞 ,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過(guò)程。 3. 重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。 第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá) 1. 首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交(DNA-DNA)技術(shù)。 2. 其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是采用分子雜交(DNA-RNA)技術(shù)。 3. 最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是采用抗原抗體雜交技術(shù)。 4. 有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如生物抗蟲或抗病的鑒定

7、等。 (三)基因工程的應(yīng)用 1. 植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。 2. 動(dòng)物基因工程:提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。 3. 基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。 4. 基因診斷:又稱為DNA診斷,是采用基因檢測(cè)的方法來(lái)判斷患者是否出現(xiàn)了基因異?;驍y帶病原體。 (四)蛋白質(zhì)工程的概念 蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過(guò)基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)) 蛋白質(zhì)工程

8、的基本途徑: 從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā) 設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) 推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列 找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因) 蛋白質(zhì)工程與基因工程區(qū)別 專題2 細(xì)胞工程 (一)植物細(xì)胞工程 1. 理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性 全能性表達(dá)的難易程度:受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞 2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù) (1)過(guò)程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織試管苗植物體 (2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。 (3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。 (二)動(dòng)物細(xì)胞工程 1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)

9、物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。 (2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組 織)剪碎用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。 (3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。 (4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加

10、一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。 營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。 溫度:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.5+0.5;pH:7.27.4。 氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。 (5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。 2. 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 (1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。 (2)選用去核卵

11、(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞細(xì)胞核全能性得到表達(dá)。 (3)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用: 加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育; 保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量; 生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白; 作為異種移植的供體; 用于組織器官的移植等。 (5)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問(wèn)題:克隆動(dòng)物存在著健康問(wèn)題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。 3. 動(dòng)物細(xì)胞融合 (1)動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。 (2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同

12、,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。 (3)動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。 4. 單克隆抗體 (1)抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。 (2)單克隆抗體的制備過(guò)程: 兩次篩選:第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞,第二次篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。 (3)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。 (4)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備。 (5)在腹腔內(nèi)增殖的優(yōu)點(diǎn):不需要特定

13、的培養(yǎng)基,不需要嚴(yán)格的外界條件。 (6)篩選的時(shí)候用:特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。 (5)單克隆抗體的作用: 作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈(借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用),也有少量用于治療其它疾病。 生物選修三學(xué)習(xí)方法 學(xué)習(xí)生物需要總結(jié)。當(dāng)然每一科的學(xué)習(xí)都需要總結(jié),但總結(jié)的方法不同。例如初中生物在七年級(jí)上冊(cè)會(huì)學(xué)習(xí)一些植物的有性生殖,七年級(jí)下冊(cè)會(huì)學(xué)習(xí)人類的生殖,八年級(jí)下冊(cè)還會(huì)學(xué)習(xí)動(dòng)物的生殖,需要對(duì)比記憶,總結(jié)區(qū)別與聯(lián)系。需要承認(rèn)生物與數(shù)理化相比沒(méi)有那種提綱攜領(lǐng)、一以貫之的公式,所以更需要進(jìn)行對(duì)比總結(jié)。應(yīng)當(dāng)注意“滾雪球的學(xué)習(xí)方法,同類知識(shí)學(xué)兩個(gè)就總結(jié)兩個(gè),學(xué)到第三個(gè)就再加進(jìn)來(lái)一起總結(jié),起到加深印象的效果。 生物選修三學(xué)習(xí)技巧 學(xué)習(xí)生物要弄清知識(shí)內(nèi)在聯(lián)系,在記住了基本的名詞、術(shù)語(yǔ)和概念之后,同學(xué)們就要把主要精力放在學(xué)習(xí)生物學(xué)規(guī)律上來(lái)了。這時(shí)大家要著重理解生物體各種結(jié)構(gòu)、群體之間的聯(lián)系,也就是

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