國(guó)內(nèi)外多肽合成儀主要品牌及選購(gòu)指南

1、【精品文檔】如有侵權(quán)，請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除，僅供學(xué)習(xí)與交流國(guó)內(nèi)外多肽合成儀主要品牌及選購(gòu)指南.精品文檔.國(guó)內(nèi)外多肽合成儀主要品牌及選購(gòu)指南一、基本概念1.多肽    是一種與生物體內(nèi)各種細(xì)胞功能都相關(guān)的生物活性物質(zhì)，它的分子結(jié)構(gòu)介于氨基酸和蛋白質(zhì)之間，是由多種氨基酸按照一定的排列順序通過(guò)肽鍵結(jié)合而成的化合物。2.多肽合成    是一個(gè)重復(fù)添加氨基酸的過(guò)程，固相合成順序一般從C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。過(guò)去的多肽合成是在溶液中進(jìn)行的稱為液相合成法。從1963年Merrifield發(fā)展成功了固相多肽合成方法以來(lái)，經(jīng)過(guò)不斷的改進(jìn)和完善，

2、到今天固相法已成為多肽和蛋白質(zhì)合成中的一個(gè)常用技術(shù)，表現(xiàn)出了經(jīng)典液相合成法無(wú)法比擬的優(yōu)點(diǎn)，從而大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。多肽合成總的來(lái)說(shuō)分成兩種：固相合成和液相多肽合成。3.多肽合成儀    多肽合成是一個(gè)以樹脂（人工合成的固相介質(zhì)）為載體，在一定的反應(yīng)條件下重復(fù)添加氨基酸，經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)后合成多肽的過(guò)程，多肽合成儀即是用來(lái)合成多肽的儀器。一般情況下，多肽合成儀整體由主體、傳輸設(shè)備、動(dòng)力裝置以及軟件系統(tǒng)組成。二、歷史背景1 固相合成法的誕生    多肽合成研究已經(jīng)走過(guò)了一百多年的光輝歷程。1902年，Emil Fischer首先開

3、始關(guān)注多肽合成，由于當(dāng)時(shí)在多肽合成方面的知識(shí)太少，進(jìn)展也相當(dāng)緩慢，直到1932年，Max Bergmann等人開始使用芐氧羰基(Z來(lái)保護(hù)-氨基，多肽合成才開始有了一定的發(fā)展。    到了20世紀(jì)50年代，有機(jī)化學(xué)家們合成了大量的生物活性多肽，包括催產(chǎn)素，胰島素等，同時(shí)在多肽合成方法以及氨基酸保護(hù)基上面也取得了不少成績(jī)，這為后來(lái)的固相合成方法的出現(xiàn)提供了實(shí)驗(yàn)和理論基礎(chǔ)。    1963年，Merrifield首次提出了固相多肽合成方法(SPPS)，這個(gè)在多肽化學(xué)上具有里程碑意義的合成方法，一出現(xiàn)就由于其合成方便，迅速，成為多肽合成的首選

4、方法，而且?guī)?lái)了多肽有機(jī)合成上的一次革命，并成為了一支獨(dú)立的學(xué)科固相有機(jī)合成(SPOS)。因此，Merrifield榮獲了1984年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。Merrifield經(jīng)過(guò)了反復(fù)的篩選，最終屏棄了芐氧羰基(Z)在固相上的使用，首先將叔丁氧羰基(BOC)用于保護(hù)-氨基并在固相多肽合成上使用，同時(shí)，Merrifield在60年代末發(fā)明了第一臺(tái)多肽合成儀，并首次合成生物蛋白酶，核糖核酸酶(124個(gè)氨基酸)。    1972年，Lou Carpino首先將9-芴甲氧羰基(FMOC)用于保護(hù)-氨基，其在堿性條件下可以迅速脫除，10min就可以反應(yīng)完全，而且由于其反應(yīng)條件溫和

5、，迅速得到廣泛使用，以BOC和FMOC這兩種方法為基礎(chǔ)的各種肽自動(dòng)合成儀也相繼出現(xiàn)和發(fā)展，并仍在不斷得到改造和完善。同時(shí)，固相合成樹脂，多肽縮合試劑以及氨基酸保護(hù)基，包括合成環(huán)肽的氨基酸正交保護(hù)上也取得了豐碩的成果。2 多肽合成儀的誕生    雖然Merrifield在發(fā)明固相多肽合成科學(xué)并取得巨大成功的同時(shí)，使用了自主研發(fā)的合成設(shè)備，但卻沒(méi)因此將多肽合成儀引入市場(chǎng)。1970年，Beckman公司開發(fā)的全自動(dòng)多肽合成儀Beckman 990 Peptide Synthesizer 作為第一臺(tái)投入市場(chǎng)的科研用多肽合成儀，被美國(guó)多所大學(xué)的實(shí)驗(yàn)室采用。幾乎同一時(shí)間，Ve

6、ga Biotechnologies, Inc.公司開發(fā)出兩款經(jīng)濟(jì)型多肽合成儀：Vegas Coupler 1000與Vegas Coupler 250 (不久又推出Vegas Coupler 296),其將多肽合成后續(xù)的在線切割理念結(jié)合到設(shè)備中，所有反應(yīng)器采用防爆玻璃材質(zhì)，防止TFA的腐蝕。被當(dāng)時(shí)的肽化學(xué)界稱為最經(jīng)濟(jì)適用的多肽合成儀。    而今，Beckman與Vegas兩家公司均停止的多肽合成儀的研發(fā)與制造，而轉(zhuǎn)向到更多面的化學(xué)合成、分離、檢測(cè)技術(shù)設(shè)備的研制產(chǎn)業(yè)中。3 多肽合成儀的發(fā)展a) 第一代多肽合成儀    第一代多肽合成

7、儀是以Beckman公司推出的Beckman 990 Peptide Synthesizer以及Vegas Biotechnologies公司推出的Vegas 296 Peptide Synthesizer為代表的，誕生在上世紀(jì)七十年代。    雖然隨著生產(chǎn)工藝的改進(jìn)和發(fā)展，如今第一代多肽合成儀已全部退出了市場(chǎng)。但1990年以前的眾多肽化學(xué)文獻(xiàn)都是在此實(shí)驗(yàn)設(shè)備上運(yùn)行研發(fā)而來(lái)，第一代的多肽合成儀為之后的合成儀研發(fā)與制造產(chǎn)生了重大意義。b) 第二代多肽合成儀    第二代多肽合成儀是以Protein Technologies公司推出的PS

8、3 Peptide Synthesizer以及Advanced ChemTech公司推出的ACT peptide synthesizer Model 90為代表的，誕生在上世紀(jì)八十年代。此兩款設(shè)備也是目前市場(chǎng)上仍在銷售的最早的多肽合成儀。    PS3 的設(shè)計(jì)原理是采用氮?dú)夤呐莸姆磻?yīng)方式來(lái)對(duì)反應(yīng)物進(jìn)行攪拌，即合成儀上反應(yīng)器是固定的，氮?dú)鈴姆磻?yīng)器的下方通過(guò)反應(yīng)器到上部排出，在這一過(guò)程中產(chǎn)生的汽泡把固相和液相混合起來(lái)。這樣設(shè)計(jì)的好處是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，成本低，但反應(yīng)相對(duì)溫和：1）有時(shí)候多肽-固相載體在靜電作用下會(huì)“抱團(tuán)”，使其不能與液相充分混合，在這種情況下需要調(diào)高氮?dú)獾膲毫?/p>

9、以消除靜電作用；而在靜電作用消除后要把壓力立刻調(diào)低，不然的話較高的壓力會(huì)把多肽-固相載體“吹”到反應(yīng)器液面上方。由于多肽-固相載體具有較強(qiáng)的粘壁性，一旦被粘到反應(yīng)器液面上方就再也無(wú)法下來(lái)，也就是無(wú)法再參加反應(yīng)。顯然第一代機(jī)器是無(wú)法自動(dòng)作這樣的壓力調(diào)整的，這就是造成反應(yīng)“死角”的重要原因。反應(yīng)死角會(huì)降低多肽合成的效率和多肽的純度，有的甚至造成合成的失敗。2）長(zhǎng)時(shí)間氮?dú)夤呐輹?huì)使溶液揮發(fā)，液面降低后一部分多肽-固相載體就粘在液面上方，也無(wú)法再參加反應(yīng)。3）氮?dú)庀牧看?，運(yùn)行成本增大。    ACT90的設(shè)計(jì)原理是反應(yīng)器在直立下圍繞原點(diǎn)作左右擺動(dòng)，或者圓周運(yùn)動(dòng)。ACT的多

10、肽合成儀同樣具有反應(yīng)溫和的特點(diǎn)，即轉(zhuǎn)動(dòng)角度與速度都不能夠完全達(dá)到氨基酸耦合的極限，反應(yīng)往往需要更長(zhǎng)的時(shí)間。c) 第三代多肽合成儀    第三代多肽合成儀是以Applied Biosystems公司的ABI 433 peptide synthesizer 與C S Bio公司的CS336為代表的無(wú)死角多肽合成儀為代表的，誕生在上世紀(jì)九十年代。    ABI433的設(shè)計(jì)原理是反應(yīng)器上方相對(duì)固定，而下方作圓周360度快速旋轉(zhuǎn)，帶動(dòng)反應(yīng)器里的固液兩相從底部向上作螺旋運(yùn)動(dòng)，一直達(dá)到反應(yīng)器的最上方。換句話說(shuō)，溶液可以達(dá)到反應(yīng)器內(nèi)部的任意點(diǎn)，真正做

11、到了無(wú)死角。由于攪拌速率可達(dá)每分鐘1800轉(zhuǎn)的高速，反應(yīng)得以充分完全。由于無(wú)死角的攪拌方式保證的肽的合成純度，ABI433型多肽合成儀（其退出多肽合成儀市場(chǎng)后最后一款儀器）至今在世界上還占有著很大的比例。當(dāng)然，ABI產(chǎn)品的售價(jià)也是最高的。由于部件使用頻率高，電磁閥會(huì)經(jīng)常損壞，而ABI將7個(gè)電磁閥做成模塊化的設(shè)計(jì)，壞掉一個(gè)電磁閥必須要更換整個(gè)模塊，無(wú)形中增加了維修成本。    CS336的設(shè)計(jì)原理是反應(yīng)器中點(diǎn)為圓心，上下做180度旋轉(zhuǎn)攪拌，攪拌速度可達(dá)180rpm，同時(shí)其采用了氮?dú)夤呐莘磻?yīng)方式的優(yōu)越性，將氮?dú)獯祫?dòng)作為可選反應(yīng)方式融入反應(yīng)方法中，多肽合成儀在科研領(lǐng)域的

12、高耦合率效果得到充分體現(xiàn)。4 多肽合成儀的現(xiàn)狀    進(jìn)入二十世紀(jì)以來(lái)，各大合成儀制造公司相繼推出了升級(jí)產(chǎn)品和新產(chǎn)品，如Protein Technologies公司推出Tribute雙通道多肽合成儀，將“短信通知”功能融入產(chǎn)品，增添了用戶與設(shè)備之間的緊密感，更加人性化；C S Bio公司對(duì)其從研發(fā)型到生產(chǎn)型設(shè)備的UV Online Monitor系統(tǒng)配置統(tǒng)一升級(jí)，用戶可直觀看到每一部氨基酸偶聯(lián)反應(yīng)的狀態(tài)并可根據(jù)數(shù)據(jù)調(diào)整出最佳合成效果與工藝；Advanced ChemTech公司自2005年破產(chǎn)重組后分裂為兩家新公司，其中Aapptec延續(xù)了其前身的生產(chǎn)步驟，推出F

13、ocus XC三通道合成儀。美國(guó)另一家公司CEM以蛋白質(zhì)有機(jī)反應(yīng)設(shè)備的制造著稱，推出了微波多肽合成儀同樣可以合成簡(jiǎn)單的小分子多肽。其采用微波加熱方式，大大提高了反應(yīng)速度，將反應(yīng)的速率增加到之前多肽合成儀的幾倍甚至十幾倍。可惜的是在加熱的情況下副反應(yīng)也相應(yīng)增多，多肽純度不能與之前的第三代甚至第二代產(chǎn)品媲美。另外，微波加熱方法無(wú)法放大，故不適合用作多肽藥物的研發(fā)。三、功能研究1 運(yùn)行原理    多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理，在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序（序列，一般從C端-羧基端 向 N端-氨基端）不斷添加、反應(yīng)、合成，操作最終得到多肽載體。固相合成法

14、，大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。為了防止副反應(yīng)的發(fā)生，參加反應(yīng)的氨基酸的側(cè)鏈都是保護(hù)的。羧基端是游離的，并且在反應(yīng)之前必須活化。固相合成方法有兩種，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)在大多采用Fmoc法合成，但對(duì)于某些短肽，tBoc因其產(chǎn)率高的優(yōu)勢(shì)仍然被很多企業(yè)所采用。    具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成： 1） 去保護(hù)：Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑（piperidine）去 除氨基的保護(hù)基團(tuán)。 2） 激活和交聯(lián)：下一個(gè)氨基酸的羧基被一種活化劑所活化。活化的單體與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián)，形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使

15、反應(yīng)完成。循環(huán)：這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成。 3） 洗脫和脫保護(hù)：多肽從柱上洗脫下來(lái)，其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑（TFA） 洗脫和脫保護(hù)。2 基本元件a) 反應(yīng)器 Reaction Vessel    數(shù)百年來(lái)，制藥業(yè)的反應(yīng)器/反應(yīng)釜 設(shè)備以玻璃材質(zhì)最為常見，因其完全透明且耐腐蝕，而被眾多化學(xué)、生物學(xué)專家沿用。多肽合成的過(guò)程需要操作人員直觀監(jiān)測(cè)，同時(shí)合成后可進(jìn)行在線切割（切割試劑TFA的強(qiáng)腐蝕性對(duì)反應(yīng)器材質(zhì)有了極大限制），這些要求限制反應(yīng)器以玻璃材質(zhì)最為適用。    而玻璃材質(zhì)的反應(yīng)器在制造工藝上有極大的難度限制：燒制工藝：磨口精度

16、要求極高，正如很多國(guó)產(chǎn)設(shè)備都無(wú)法達(dá)到要求出現(xiàn)漏液漏氣現(xiàn)象，玻璃壁均勻程度等。配合攪拌柄以及密封裝置的成套加工工藝防爆處理b) 氨基酸儲(chǔ)罐 Amino Acid Reservoirsc) 溶劑儲(chǔ)罐 Solvent Reservoirsd) 量筒 Metering Vessele) 轉(zhuǎn)液瓶 Transfer Vesself) 感應(yīng)器 Sensor    多端觸發(fā)器自感應(yīng)定量量取法，直觀、科學(xué)、相對(duì)誤差最低。g) 廢液桶 Waste Carboy    廢液桶通常選擇容積較大的HDPE桶，保證通風(fēng)良好，同時(shí)需安裝感應(yīng)器裝置時(shí)刻檢測(cè)廢液情況，

17、避免溢出。3 控制配件a) 電磁閥 Valves    多肽合成儀中的電磁閥屬于敏感配件，其控制液路的串聯(lián)與閉路，在氨基酸轉(zhuǎn)移與量取，溶劑轉(zhuǎn)移與量取兩步驟中起到至關(guān)重要的作用。不同品牌的合成儀對(duì)電磁閥的設(shè)計(jì)與排布也略有不同。如PTI合成儀中，電磁閥成矩陣式排列，便于觀察，但若發(fā)生堵塞情況則又有維修的不便，一個(gè)電磁閥堵塞則可能造成整塊矩陣式電磁閥全部更換；CSBio合成儀中電磁閥采取Normally Close 方式，在非溶液轉(zhuǎn)移操作過(guò)程中，電磁閥閉合，減少了污染與堵塞的發(fā)生，整體呈管路式排布；ABI433合成儀的電磁閥為7位組合，萬(wàn)一出現(xiàn)堵塞情況則整組更換，查找檢

18、修時(shí)非常方便，但成本也相對(duì)高了6倍。b) 控制面板 Control Box    控制面板內(nèi)往往含有光敏組建，部分控制電磁閥以及感應(yīng)器控制組。與電腦主機(jī)的控制系統(tǒng)、合成儀統(tǒng)一的鏈接在一起，完成多肽合成的全過(guò)程。c) 軟件系統(tǒng) Operating Software    多肽合成儀的操作軟件。不同品牌合成儀所注冊(cè)的軟件也不同。4 檢測(cè)方法a) UV Monitor    在多肽合成儀中，在線檢測(cè)耦合效果的裝置，如UV Monitor往往是選配裝置，客戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要選購(gòu)。其功能是讓操作者直觀的看到多肽合成

19、的每一部氨基酸偶聯(lián)效果，從而針對(duì)特定的序列做合成設(shè)置的調(diào)整，最終達(dá)到最佳合成效果。    對(duì)于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來(lái)說(shuō)，UV Monitor是相當(dāng)重要的。b) 試劑檢測(cè)：沒(méi)有選購(gòu)在線檢測(cè)附件的多肽合成儀用戶，也可以采用試劑檢測(cè)方法做基本的耦合效果測(cè)定實(shí)驗(yàn)。    固相多肽合成中，主要是通過(guò)檢測(cè)樹脂上游離氨基來(lái)判斷連接效率，檢測(cè)方法稱為Kaiser方法，其檢測(cè)結(jié)果，如果有游離氨基的時(shí)候，顯示蘭色，或紅褐色（pro，ser，His）。    Kaiser試劑包括：A，6% 茚三酮的乙醇溶液；B

20、，80% 苯酚的乙醇溶液；C，2% 0.001M KCN的吡啶溶液    配制中的吡啶需要經(jīng)過(guò)茚三酮處理后，重蒸后再使用。檢測(cè)過(guò)程，取少量樹脂，加入A，B，C各2-3滴，100下加熱1-2min，如果溶液有蘭色，或樹脂出現(xiàn)蘭色，紅褐色，表明還有游離氨基，否則說(shuō)明連接完全。c) 其它檢測(cè)游離氨基的方法：三硝基苯磺酸法，苦味酸法，溴芬蘭法等四、品牌介紹1國(guó)際主要多肽合成儀制造商Applied Biosystems Inc. (ABI)    美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司是全球唯一的將個(gè)體識(shí)別應(yīng)用相關(guān)的儀器試劑數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行整體設(shè)計(jì)和驗(yàn)證的整體解

21、決方案公司。自從1989年以來(lái)， AB公司已經(jīng)發(fā)展成為DNA分析技術(shù)的“領(lǐng)頭羊”。其經(jīng)典產(chǎn)品ABI433多肽合成系統(tǒng)在上世紀(jì)九十年代就暢銷全球，成為眾多多肽實(shí)驗(yàn)室的首選設(shè)備，后繼CSBio公司推出的CS336與其功能與效果類似，統(tǒng)稱為第三代產(chǎn)品。ABI 433型多肽合成系統(tǒng)AAPPTec    美國(guó)AAPPTec（advanced automated peptide protein technologies）公司成立于2005年3月，公司的前身是ACT（Advanced ChemTech）公司的儀器部。公司購(gòu)買了前ACT公司儀器的全部資產(chǎn)，包括生產(chǎn)線，專利權(quán)以及在

22、生產(chǎn)、促銷和服務(wù)等方面的獨(dú)家特權(quán)。由知名的多肽科學(xué)家，前ACT公司總裁Hossain Saneii博士管理，Hossain Saneii博士早在80年代早期就獲得了他的第一個(gè)多肽合成儀的專利。在過(guò)去的20多年，AAPPTEC的全自動(dòng)多肽合成儀已經(jīng)成為了市場(chǎng)上最靈活和可靠的儀器?？勺鯞oc-,Fmoc-和其他化學(xué)方法，自動(dòng)切割A(yù)APPTec公司投入了充足的資源去提升和改進(jìn)設(shè)備生產(chǎn)線，與此同時(shí)為藥學(xué)界和生物領(lǐng)域提供了眾多創(chuàng)新性新產(chǎn)品。其總部設(shè)在美國(guó)肯塔吉州的路易斯維爾。AAPPTec 400 多肽合成儀C S Bio Co.    誕生于上世紀(jì)90年代的美國(guó)CSBio

23、公司，工廠位于加州的Menlo Park 工業(yè)園區(qū)。CSBio大樓占地面積約60,000ft2。內(nèi)部分別建有定制合成實(shí)驗(yàn)室，GMP車間以及多肽合成儀制造車間等。 CSBio最初的生產(chǎn)線是一個(gè)完整系列的自動(dòng)化合成器的生產(chǎn)和工藝的開發(fā)，其擁有專業(yè)化學(xué)專家與機(jī)械工程師組成的合成儀設(shè)計(jì)、研發(fā)、制造以及改良工程團(tuán)隊(duì)，而今已經(jīng)發(fā)展成為以多肽合成儀、多肽原料藥、客戶肽定制合成以及工藝開發(fā)等多項(xiàng)業(yè)務(wù)的多肽專業(yè)化頂尖企業(yè)。20多年來(lái)，CSBio為世界各地的多肽制藥廠和實(shí)驗(yàn)室提供合成效果優(yōu)秀、堅(jiān)固耐用的多肽合成設(shè)備以及相關(guān)服務(wù)。 始終致力于多肽合成儀的生產(chǎn)以及客戶肽、原料藥的生產(chǎn)定制等產(chǎn)業(yè)，CSBio公司是全球擁

24、有從研發(fā)到制藥級(jí)別客戶范圍最寬、用戶數(shù)量最多、最有影響力的多肽合成儀制造商之一。CS多肽合成儀幾乎出現(xiàn)在世界任何一個(gè)生物化學(xué)制藥的園區(qū)。C S Bio也是全球唯一擁有GMP生產(chǎn)證書的多肽合成儀制造企業(yè)。CS936X多肽合成儀Protein Technologies Inc. (PTI)    公司位于美國(guó)西部風(fēng)景秀美的度假勝地圖森，是由美國(guó)亞利桑那大學(xué)幾名科研人員在1985年成立的。經(jīng)過(guò)20多年創(chuàng)業(yè)歷程，PTI已經(jīng)將其生產(chǎn)的科研型多肽合成儀銷售至全球多個(gè)高校。最早的PS3于1985年就設(shè)計(jì)出來(lái)了，而最新的一款帶有UV在線監(jiān)測(cè)功能的Tribute于2009年才上市，

25、目前亞洲還沒(méi)有用戶反饋。PTI Tribute Benchtop Peptide Synthesizer  2. 國(guó)際其他固相有機(jī)合成設(shè)備及其供應(yīng)商Activotec    Activotec公司推出的Activo-P14半自動(dòng)多肽合成儀是目前世界最小的多肽合成儀。該儀器能夠自動(dòng)完成多肽合成中繁瑣的樹脂清洗和去保護(hù)基步驟。用戶友好的觸摸式操作鍵盤界面每次都會(huì)自動(dòng)提示操作者需要添加的氨基酸。Activo-P14半自動(dòng)多肽合成儀Biotage    瑞典公司Biotage推出的多肽合成系統(tǒng)，目前有三個(gè)型號(hào)可供選擇，不僅

26、可以使用微波合成，也可以進(jìn)行常溫的平行合成。系統(tǒng)采用全自動(dòng)的電腦控制，并且配有單臂或者雙臂機(jī)械手。24位，48位和96位可選，反應(yīng)器大小為2,5,10ml可選，合成規(guī)模在5mol-300mol之間，可以滿足不同用戶的需求。Biotage 多肽合成儀CEM    美國(guó)CEM公司是全球知名的微波化學(xué)儀器生產(chǎn)商，其設(shè)在北卡羅萊納州的科研機(jī)構(gòu)，集中了世界一流的微波化學(xué)專家，不斷研究和探索微波化學(xué)機(jī)理，開拓主頻2.45G-18GHz之間的微波技術(shù)科研應(yīng)用，取得了大量的成果和專利，歷史上由CEM專家推出的各種微波樣品處理方法，被權(quán)威機(jī)構(gòu)USEPA、AOAC、NCAT、ASTM

27、等認(rèn)可作為通用標(biāo)準(zhǔn)方法，如 USEPA3015/3051，UOP 方法等。其于后來(lái)推出的Liberty微波合成系統(tǒng)，同樣可以用于多肽的固相合成，在常溫下采取氮?dú)夤呐莘绞綍?huì)存在一定的反應(yīng)死角，對(duì)于非敏感性的氨基酸，微波加熱方式可加快反應(yīng)速率。CEM 12通道多肽合成儀Intavis AG (Autospot SL)    Intavis生物分析公司生產(chǎn)的AutoSpot多肽合成儀能夠在膜片上平行合成多肽。每個(gè)肽的合成成本低。INTAVIS-AG 全自動(dòng)多肽合成儀Shimadzu（PSSM-8）    日本島津公司早年推出的多肽合成裝置，

28、可同時(shí)進(jìn)行8道合成相同或不同的高純度多肽，實(shí)現(xiàn)日常的和經(jīng)濟(jì)的多肽合成。PSSM-8 多肽合成儀ACT    美國(guó)ACT公司（ADVANCED CHEMTECH），在2007年推出了106通道多肽合成儀，是全球唯一一款全自動(dòng)多通道異步多肽合成儀，相比其它公司的多通道多肽合成儀，這款合成儀添加氨基酸和各種試劑不需要任何管路和電磁閥，儀器設(shè)計(jì)更加簡(jiǎn)單合理，是目前多肽藥物研發(fā)篩選的主要合成儀之一。ACT多肽合成儀3.二十世紀(jì)以來(lái)的國(guó)產(chǎn)多肽合成儀JBP 海南建邦    海南建邦制藥科技有限公司成立于2006年2月，是一家集制藥設(shè)備生產(chǎn)、科研、銷

29、售一體的高技術(shù)企業(yè)，同時(shí)也是一家從事多肽藥物的新藥開發(fā)、生產(chǎn)工藝研究、生產(chǎn)廠房方案設(shè)計(jì)的專業(yè)化公司。海南建邦多肽合成儀秉承了國(guó)際通用的防爆玻璃反應(yīng)器系統(tǒng)(tBoc與Fmoc方式均可操作)以及置頂攪拌槳的反應(yīng)方式，但由于仿制美國(guó)CSBio合成儀受到專利保護(hù)限制，其部分功能配件不可正常使用。該品牌開創(chuàng)了國(guó)產(chǎn)合成儀的先河，然而設(shè)備加工稍顯簡(jiǎn)陋，部分用戶使用幾個(gè)月后即發(fā)現(xiàn)通路堵塞、密閉性缺陷、整機(jī)震蕩等問(wèn)題，在長(zhǎng)久使用上還需進(jìn)一步改進(jìn)。海南建邦多通道合成儀PSI    美國(guó)多肽科技有限公司（Peptide Scientific Inc .，簡(jiǎn)

30、稱PSI公司）是一家專業(yè)多肽合成儀生產(chǎn)廠商。PSI的多肽合成儀全部采用180-270度無(wú)死角的機(jī)械攪拌模式，PSI多肽合成儀與CS Bio多肽合成儀的180度相比有了質(zhì)的突破，PSI合成儀攪拌系統(tǒng)采用電子伺服馬達(dá)，攪拌速度可調(diào)整到在0至120轉(zhuǎn)/分鐘之間的最符合實(shí)驗(yàn)需要的轉(zhuǎn)速攪拌。PSI 多肽合成儀五、專利文件    對(duì)于大學(xué)、實(shí)驗(yàn)室等科研用戶以及需要申報(bào)新藥的生產(chǎn)企業(yè)來(lái)講，使用的合成設(shè)備的國(guó)際專利號(hào)以及規(guī)定內(nèi)容是非常有用的信息。1.ACT多肽合成儀專利：United States Patent 47464902.Activotec合成應(yīng)用技術(shù)專利： I

31、PC8 Class: AC07K104FI USPC Class: 525 54113.CEM合成技術(shù)專利：US 7,582,7284.C S Bio多肽合成儀專利：US Patent 5,380,495 & 5,453,487.5.C S Bio多肽合成儀反應(yīng)器專利：US Patent 63200256.PTI多肽合成儀設(shè)備專利： U.S. Patent No. 5,203,368 (Symphony). No. 5,064,940(PS3).7.PTI多肽合成儀反應(yīng)器專利：U.S. Patent No. 5,980,839.8.Shimadzu多肽合成儀專利：United Stat

32、es Patent 5344613六、選購(gòu)指南1 科研單位考慮因素a) 設(shè)備本身對(duì)實(shí)驗(yàn)研究的幫助對(duì)于多肽合成化學(xué)反應(yīng)，使用設(shè)備可避免人手工操作對(duì)人體的傷害(試劑腐蝕)由于程序化設(shè)定，可保證每步驟偶合反應(yīng)的充分性以及實(shí)驗(yàn)整體的穩(wěn)定性可以合成難肽以及超長(zhǎng)肽(可提供其使用研究型多肽合成儀合成多肽的檢測(cè)報(bào)告)在休息時(shí)間可以不間斷合成工作    研究型多肽合成儀需滿足循環(huán)式氨基酸添加位置多于20個(gè)，在夜間以及周末，預(yù)先配好的保護(hù)氨基酸可根據(jù)程序設(shè)置自動(dòng)偶聯(lián)并替換新的位置，保證了實(shí)驗(yàn)的效率，完全實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)！即使實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了很多年，更換了很多研究人員，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)還可以保存在電腦中。

33、b) 國(guó)際國(guó)內(nèi)相關(guān)研究人員使用該多肽合成儀進(jìn)行的有效研究結(jié)果    多肽合成儀的制造商應(yīng)提供其公開發(fā)表的研究性論文多篇。 為進(jìn)行多肽合成實(shí)驗(yàn)的學(xué)生們提供研究數(shù)據(jù)并使其模擬合成過(guò)程，更好的體驗(yàn)機(jī)械操作多肽合成的全步驟，檢測(cè)自己的合成結(jié)果。c) 多肽合成儀設(shè)備的專利保護(hù)對(duì)今后研究結(jié)果的影響    考慮到高等院校實(shí)驗(yàn)研究的嚴(yán)密性，結(jié)合對(duì)后期研發(fā)成果的保護(hù)機(jī)制，通常采購(gòu)的設(shè)備需要具有其國(guó)際專利許可，以確保實(shí)驗(yàn)研究項(xiàng)目的順利申報(bào)。d) 制造商的生產(chǎn)規(guī)模    制造商的品牌、生產(chǎn)規(guī)模以及其所擁有的生產(chǎn)資格認(rèn)證，都從側(cè)

34、面反映了其供應(yīng)設(shè)備的質(zhì)量、信譽(yù)以及對(duì)客戶的服務(wù)保證。2 生產(chǎn)企業(yè)考慮因素    參考科研單位選購(gòu)小型設(shè)備的考慮因素，對(duì)于生產(chǎn)型企業(yè)，使用不同品牌的多肽合成儀往往還應(yīng)考慮其連貫完整的設(shè)備生產(chǎn)線，從小型合成規(guī)模至生產(chǎn)型合成規(guī)模的各種設(shè)備齊全。通常大型設(shè)備可根據(jù)反應(yīng)器大小判斷其合成規(guī)模，通?？稍诰€切割的玻璃材質(zhì)反應(yīng)器/反應(yīng)釜需達(dá)100L，可保證批量產(chǎn)數(shù)十公斤的多肽產(chǎn)品。七、學(xué)術(shù)文獻(xiàn)1. “ß-Amino Acid Analogs of an Insect Neuropeptide Feature Potent Bioactivity and Resistanc

35、e to Peptidase Hydrolysis”(Applied Biosystems I-Inc.Multipep automated peptide synthesizer 433)2. “Fast conventional Fmoc solid-phase peptide synthesis with HCTU”(Applied Biosystems I-Inc.Multipep automated peptide synthesizer 433A)3. “Synthesis and Primary Characterization of Self-Assembled Peptide-Based Hydrogels” (Applied Biosystems I-Inc.Multipep automated peptide synthesizer 433)4. “Inclusion Volume Solid-phase Synthesis”(AAPPTec Multipep automated peptidesynthesizer Apex 396)5. “Synthesis of an isotopically labelled analog of the a