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文檔簡介
1、 慢性腎小球腎炎與HLA免疫遺傳強(qiáng)關(guān)聯(lián) 摘要目的評估人類組織相容性抗原(HLA)在慢性腎小球腎炎所致腎功能衰竭病人中的免疫遺傳學(xué)本質(zhì)。方法用單抗免疫磁珠HLA-類分型和PCR-SSP-HLA-類分型技術(shù),對廣東地區(qū)219例漢族慢性腎小球腎炎病人和406例健康人進(jìn)行HLA-、類抗原頻率,基因頻率,單倍型頻率,風(fēng)險(xiǎn)系數(shù)等分析。結(jié)果疾病組HLA-B13、B35、B55、DR7、DR10、DR12、DQ7基因頻率和All-B60、All-DR10、All-DR12
2、、All-DQ7、A24-DR14、DR10-B60、DR10-DQ7、DR12-DQ7單倍型頻率顯著升高(RR3.84,P均0.05)。結(jié)論慢性腎小球腎炎與HLA系統(tǒng)免疫機(jī)制有較強(qiáng)關(guān)聯(lián),HLA-B55、DR10、DQ7可能是廣東人群易感慢性腎小球腎炎的風(fēng)險(xiǎn)因子。關(guān)鍵詞慢性腎小球腎炎組織相容性抗原Chronic glomerulonephritis and HLAXIAO Lulu?,YU Lixin,CHEN Hongtao,et al.?Guangzhou Tissue Typing Center,Guangzhou 510095AbstractObjectiveTo evaluate t
3、he immune genetic function of HLA in end-stage renal diseases due to chronic glomerulonephritis(CGN).MethodsWith the use of monoclon antibody immunobeads HLA class typing technique and PCR-SSP HLA class typing technique,HLA class and antigen frequence,gene frequence,haplotype frequence and risk inde
4、x were analyzed in chronic glomerulonephritis patients and in normal Guangdong inhabitants of Han nationality as controls.ResultIn the patient group,HLA-B13,B35,B55,DR7,DR10,DR12 and DQ7 gene frequence and All-B60,All-DR12,All-DQ7,A24-DR14,DR10-B60,DR10-DQ7,DR12-DQ7 haplotype frequence were signific
5、antly higher than those of control group (RR3.84,P0.05).ConclusionsCGN is quite strongly related to immune system of HLA.This study is the first to report HLA-B55,DR10 and DQ7 which might be the risk factors of CGN in Guangdong population.Key wordsChronic glomerulonephritisHistocompatibility antigen
6、s近年國內(nèi)外調(diào)查顯示,HLA作為免疫遺傳基因在不同民族慢性腎小球腎炎(CGN)中其易感基因表達(dá)出異質(zhì)性,但絕大多數(shù)研究局限于HLA-類。我們對219例CGN病人和406例健康人HLA-A、B、DR、DQ進(jìn)行了全分型并加以比較,以分析CGN的發(fā)病機(jī)理。材料與方法1方法,T淋巴細(xì)胞數(shù)量為2 000個/l;PCR-SSP-DR、DQ采用文獻(xiàn)2方法,序列特異性引物為挪威Dynal公司產(chǎn)品,包含DRB1 24對和DQB1 9對引物,提取基因組DNA平均濃度為199g,DNA純度平均達(dá)A260/280=1.98。四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理由電子計(jì)算機(jī)醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包錄入原始數(shù)據(jù)求出抗原、基因、單倍型頻率及其風(fēng)險(xiǎn)關(guān)聯(lián)系
7、數(shù)(RR)、2和P值。結(jié)果一、基因頻率及比較分析疾病組和健康組各識別HLA-A、B、DR、DQ座位等位基因123個,其中在疾病組中顯著升高(P0.05)的特異性為:HLA-B13(0.1087 vs 0.0674,RR=1.3,2=5.55)、B35(0.0516 vs 0.0274,RR=1.95,2=4.01)、B55(0.0349 vs 0.0136,RR=2.613,2=5.15)、DR7(0.0444 vs 0.0223,RR=2.05,2=3.89)、DR10(0.0278 vs 0.0025,RR=9.77,2=14.01)、DR12(0.189 vs 0.118,RR=1.81
8、,2=9.73)、DQ7(0.3109 vs 0.2162,RR=1.68,2=8.91)。三、單倍型頻率及比較分析分辨HLA-A-B、A-DR、A-DQ、B-DR、B-DQ、DR-DQ共4 142條單倍型,經(jīng)計(jì)算在疾病組中顯著升高(23.84,P0.05)的單倍型有8條:All-B60(0.0965 vs 0.0505)、All-B10(0.0187 vs 0.0025)、All-DR12(0.01239 vs 0.055)、All-DQ7(0.1510 vs 0.0786)、A24-DR14(0.0403 vs 0.0082)、DR10-B60(0.0125 vs-5)、DR10-DQ7(
9、0.0145 vs 0.0009)、DR12-DQ7(0.1446 vs 0.0911)。顯著降低的單倍型1條:B46-DR9(0.0053 vs 0.0721)。討論人類HLA基因位于6號染色體短臂P23區(qū)段,類片斷長度560bp,類片斷長度265bp,具有控制免疫識別和應(yīng)答反應(yīng)始動環(huán)節(jié)等重要的生物學(xué)功能。HLA基因的遺傳符合孟德爾顯性遺傳規(guī)律,其多態(tài)性超過20億種,比任何已知的人類遺傳系統(tǒng)更復(fù)雜,因此進(jìn)行HLA與疾病關(guān)聯(lián)研究難度大,相關(guān)文獻(xiàn)局限于HLA-類基因。慢性腎小球腎炎病因機(jī)制尚未明了,腎小球基底膜免疫復(fù)合物形成是否受到HLA基因易感性的作用,90年代以來引起人們的重視。Freedm
10、an等3研究認(rèn)為美國人原發(fā)性腎病與HLA-DR3、DR5關(guān)聯(lián)。Shishkin等4調(diào)查82例俄羅斯腎病病人后發(fā)現(xiàn)HLA-A10、B13、B35、B41、DR2、DR7具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且高純合子,RR均2。Vaughan等5檢測了52例英國病人和29例希臘病人,發(fā)現(xiàn)DQB1 05顯著升高;在英國病人中還有DRB1 0301(DR17) 顯著升高(80% vs 27%)。Papasteriades等6的研究顯示,希臘病人HLA-A26、A11顯著升高,DR3顯著減少,認(rèn)為HLA基因產(chǎn)物可以影響腎臟疾病的臨床表現(xiàn)和預(yù)后。Fisher等7認(rèn)為,由自身抗體引起的抗腎小球基底膜病與HLA-A2強(qiáng)關(guān)聯(lián),與DR5關(guān)聯(lián),與DR3和DR7有潛在關(guān)聯(lián)。國內(nèi)研究中,周國平等8報(bào)道23例上海地區(qū)腎病綜合征患兒與DR7、DR9關(guān)聯(lián)。李惠剛等910調(diào)查30例原發(fā)性腎小球腎炎病人,發(fā)現(xiàn)與DR2-DQ1單倍型關(guān)聯(lián),其中與DQ1關(guān)聯(lián)更強(qiáng)(P0.0017)。我們分析了4142條單倍型中呈顯著升高者8條,其中A11-B60、A24-DR14在基因頻率分析中為無關(guān)聯(lián)抗原;DR10、DR12、DQ7在基因頻率和單倍型頻率分析中均呈顯著升高,說明上述基因不僅具有獨(dú)立的疾病易感作用而且具有集合的疾病易感作用,表達(dá)這些基因可視為預(yù)后不良的病人。顯著降低的單倍型B46-
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