不同劑量和種類(lèi)基因工程乙型肝炎疫苗免疫效果研究

1、    不同劑量和種類(lèi)基因工程乙型肝炎疫苗免疫效果研究        摘要：為探討不同劑量和種類(lèi)基因工程乙型肝炎（乙肝）疫苗的免疫效果，在北京市大興縣、順義區(qū)抽取健康新生兒193名，隨機(jī)分為3組：組接種重組酵母乙肝疫苗10g5g5g，組接種重組酵母乙肝疫苗5g5g5g，組接種中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（CHO）細(xì)胞乙肝基因工程疫苗10g10g10g，3組均按0、1、6月程序接種。結(jié)果：全程免疫后1年，抗HBs陽(yáng)轉(zhuǎn)率分別為85.51、86.44、100.00，幾何平均滴度（GMT）分別為50

2、.50mIUml、52.34mIUml、143.19mIUml；全程免疫后2年，抗HBs陽(yáng)性率分別為79.66、70.21、95.56，GMT分別為25.98mIUml、30.48mIUml、69.58mIUml。表明：對(duì)HBsAg陰性母親所生的新生兒采用重組酵母乙肝疫苗10g5g5g與5g5g5g接種，其抗HBs陽(yáng)轉(zhuǎn)率及GMT差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但免疫后第2年，采用5g5g5g免疫組的抗體下降速度較10g5g5g組為快；兩個(gè)重組酵母乙肝疫苗接種組與CHO乙肝基因工程疫苗接種組比較抗-HBs陽(yáng)性率和GMT的差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CHO乙肝基因工程疫苗接種組免疫效果最好。關(guān)鍵詞：CHO乙

3、型肝炎基因工程疫苗；重組酵母乙型肝炎疫苗；免疫效果中分類(lèi)號(hào)：R512.62文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1006916X（2000）030135-03Study on the Immune Effects of Different Doses and Types of Genetic Engineering Hepatitis B VaccinesGAO Jie,CHEN Chang-shun,GONG Xiao-hong（Epidemic Prevention Station of Daxing County,Beijing,Daxing 102600,China.）Abstract: In or

4、der to study the immune effects of different doses and types of genetic engineering hepatitis B vaccines,a total of 193 healthy babies in Daxing County and Shunyi District were selected and divided them randomly into three groups. Group I was given recombinant yeast-derived vaccine 10,5,5g,group II

5、was given 5,5,5g and group III was given CHO recombinant vaccine 10,10 and 10g respectively at 0-1-6 months according to the routine immunization schedule. Anti-HBs positive rates were 85.51%,86.44%,100.00%,GMT were 50.50,52.34 and 143.19 mIU/ml respectively in three groups one year after vaccinatio

6、n and that were 79.66%,70.21%,95.56%,25.98,30.48,69.58 mIU/ml respectively in the second year. The antibody production in group I and group II had no significant difference in the first year,but HBV antibody was seen decreasing faster in group II than that in group I in the second year after vaccina

7、tion.The immune effect of CHO recombinant vaccine is better than recombinant yeast-derived vaccine.Key words: Genetic engineering hepatitis B vaccine of CHO cell; Recombinant yeast-derived hepatitis B vaccine; Immune effect自1996年以后，北京市將基因工程乙型肝炎（乙肝）疫苗逐步取代了血源乙肝疫苗，廣泛用于新生兒接種，目前普遍應(yīng)用的是重組酵母乙肝疫苗。北京市衛(wèi)生局在1996

8、年頒發(fā)的北京市重組酵母乙肝疫苗使用暫行辦法中規(guī)定，對(duì)表面抗原（HBsAg）陰性產(chǎn)婦所生新生兒按016程序接種1055g。但重組酵母乙肝疫苗1055g劑量與555g劑量比較效果如何，以及重組酵母乙肝疫苗與中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（CHO）細(xì)胞乙肝基因工程疫苗比較效果如何，近年研究不多。為探討不同劑量、不同種類(lèi)基因工程乙肝疫苗在健康新生兒中的免疫效果，我們于19961999年在大興縣、順義區(qū)對(duì)193名健康新生兒進(jìn)行了觀察，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。材料和方法1乙肝疫苗重組酵母乙肝疫苗由北京生物制品研究所生產(chǎn)，批號(hào)960321，劑量5g支；CHO重組乙肝疫苗由中國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒學(xué)研究所生產(chǎn)，批號(hào)95072407，劑

9、量為10g支。2觀察對(duì)象選擇大興縣、順義區(qū)3個(gè)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)1996年12月1997年7月出生的健康新生兒為觀察對(duì)象，隨機(jī)分為3組，組接種重組酵母乙肝疫苗10g5g5g，組接種5g5g5g；組接種CHO重組乙肝疫苗10g10g10g。3組均按0、1、6月程序，上臂三角肌肌內(nèi)注射。完成全程免疫后1年、2年分別采靜脈血3ml。3檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)采用固相放射免疫分析（SPRIA）法檢測(cè)HBsAg和抗HBs。HBsAg以SN2.1判為陽(yáng)性；抗HBs滴度計(jì)算采用改良Hollinger公式：mIU130.75exp0.535（SN）（PN）1；抗HBs滴度<2.1mIUml判為無(wú)應(yīng)答，2.19.9mIUm

10、l為低應(yīng)答，10mIUml判為陽(yáng)性（保護(hù)水平）。4統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS for Windows統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果1接種反應(yīng)共觀察193名兒童，其中男性99名，女性94名，接種后均未發(fā)現(xiàn)局部和全身的臨床反應(yīng)。免疫后2年未發(fā)現(xiàn)HBsAg陽(yáng)性者。2免疫效果免疫后1年，抗HBs總陽(yáng)轉(zhuǎn)率為90.67，、組陽(yáng)轉(zhuǎn)率分別為85.51、86.44、100.00（表1）。3個(gè)組陽(yáng)轉(zhuǎn)率差異有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（210.11，P0.01）。進(jìn)一步做組間兩兩比較，組和組的陽(yáng)轉(zhuǎn)率差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（20.01，P0.05），組和組比較（28.19，P0.01），組和組比較（27.31，P0.01），差異均有

11、極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表1基因工程乙肝疫苗不同免疫方案免疫后1年效果比較組別觀察人數(shù)抗HBs無(wú)應(yīng)答人數(shù)低應(yīng)答人數(shù)陽(yáng)轉(zhuǎn)人數(shù)GMT（mIUml）S6934.35710.145985.5150.504.455935.0958.475156.4452.344.5465000065100.00143.192.14合計(jì)19363.11126.2217590.6772.533.983組抗HBs幾何平均滴度（GMT）分別為50.50mIUml、52.34mIUml、143.19mIUml，用秩和檢驗(yàn)方法進(jìn)行比較，3組的GMT差異有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（H23.31，P0.01）。進(jìn)一步做3組間兩兩比較，組和組差異

12、無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（兩組平均秩和之差0.56，P0.05），組和組比較（兩組平均秩和之差40.65，P0.01）、組和組比較（兩組平均秩和之差41.21，P0.01），差異均有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。組的抗體滴度顯著高于組和組。不同性別抗HBs滴度比較，男性為71.74mIUml，女性為73.39mIUml，經(jīng)秩和檢驗(yàn)差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H0.036，P0.05）。免疫后2年，、組抗HBs陽(yáng)性率分別為79.66、70.21、95.56（表2），3組比較差異有極顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（29.98，P0.01）；組間兩兩比較，組和組差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（20.08，P0.05）；組和組比較（28.59

13、，P0.01）、組和組比較（24.26，P0.05）差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組抗HBs GMT 表2不同免疫方案免疫后2年抗HBs效價(jià)比較組別觀察人數(shù)抗HBs（mIUml）2.12.19.910GMT（mIUml）S人數(shù)人數(shù)人數(shù)591016.9523.394779.6625.986.5347817.02612.773370.2130.488.364512.2212.224395.5669.594.93合計(jì)1511912.5895.9612381.4636.636.8分別為25.98mIUml、30.48mIUml、69.58mIUml，用方差分析方法進(jìn)行比較，3組差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F

14、3.824，P0.05）。進(jìn)一步做組間兩兩比較，組和組差異無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），組和組、組和組之間差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。 討論將193名健康新生兒分為3組，按0、1、6月程序分別接種不同劑量不同種類(lèi)的基因工程乙肝疫苗，全程免疫后1年，抗HBs陽(yáng)性率為85.51100.00，GMT 50.50mIUml143.19mIUml；全程免疫后2年，抗HBs陽(yáng)性率為70.2195.56，GMT25.98mIUml69.58mIUml。與其它文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)相比此結(jié)果偏低，但與單愛(ài)蘭等報(bào)道的水平接近（血清保護(hù)率84.4）。表明基因工程乙肝疫苗能產(chǎn)生較好的免疫效果，且無(wú)任何嚴(yán)重副反應(yīng)。

15、重組酵母乙肝疫苗按0、1、6月程序，接種10g5g5g與接種5g5g5g相比，免疫后1年及2年，抗HBs陽(yáng)性率及GMT差異均無(wú)顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但免疫后2年與免疫后1年相比，兩組的抗HBs陽(yáng)性率的下降速度不同，5g5g5g組要比10g5g5g組下降快，10g5g5g組下降了6.84，5g5g5g組下降了18.78。故在HBsAg陰性產(chǎn)婦所生新生兒中采用10g5g5g進(jìn)行免疫更為穩(wěn)妥。接種CHO重組乙肝疫苗10g10g10g后，抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)100，比接種重組酵母乙肝疫苗高出13.5614.49，GMT高達(dá)143.19mIUml，是接種重組酵母乙肝疫苗的2.742.84倍，說(shuō)明CHO重組乙肝疫苗具

16、有更好的免疫效果，這可能與CHO苗接種劑量大有關(guān)。CHO細(xì)胞表達(dá)的乙肝表面抗原更接近自然表面抗原是其能產(chǎn)生更好的免疫原性的主要原因，但本次研究在分組時(shí)如加一重組酵母乙肝疫苗10g10g10g組作為CHO重組乙肝疫苗的對(duì)照，將使結(jié)果更有可比性。采用重組酵母乙肝疫苗常規(guī)免疫后，仍有4.69的兒童無(wú)法產(chǎn)生相應(yīng)抗體，即無(wú)應(yīng)答；還有9.38的兒童雖然產(chǎn)生了抗體，但未達(dá)到保護(hù)水平，即低應(yīng)答。目前關(guān)于無(wú)應(yīng)答者發(fā)生的機(jī)理尚不完全清楚，但本次研究用CHO重組乙肝疫苗免疫后的新生兒，抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)100，故機(jī)體的免疫應(yīng)答與疫苗的種類(lèi)、質(zhì)量有關(guān)。所以，對(duì)于無(wú)應(yīng)答和低應(yīng)答者除增大接種劑量外，還可以考慮更換疫苗種類(lèi)。本次

17、調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，抗HBs陽(yáng)性率及GMT隨著免疫后時(shí)間的延長(zhǎng)而下降，這與文獻(xiàn)報(bào)道的基因工程乙肝疫苗產(chǎn)生的抗HBs滴度低、維持時(shí)間短的結(jié)果相一致。鑒于基因工程乙肝疫苗接種后抗體下降速度較快這一現(xiàn)象，我們認(rèn)為基礎(chǔ)免疫后應(yīng)考慮加強(qiáng)的問(wèn)題。作者簡(jiǎn)介：高潔（1960），女，北京市大興縣人，北京市大興縣衛(wèi)生防疫站副主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)學(xué)士，主要從事流行病防制及計(jì)劃免疫工作。高潔（大興縣衛(wèi)生防疫站，北京大興102600）陳長(zhǎng)順（北京市衛(wèi)生防疫站，北京100013）龔曉紅（北京市順義區(qū)衛(wèi)生防疫站，北京101300）韓慶英（大興縣衛(wèi)生防疫站，北京大興102600）馬淑花（大興縣衛(wèi)生防疫站，北京大興102600）參考文獻(xiàn)：1迮文遠(yuǎn).計(jì)劃免疫學(xué)M.上海：上海科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社，1997，433445.2高壽征.病毒性肝炎防治研究M.北京：北京出版社，1993，1549.3龔曉紅，邢玉蘭，劉立榮，等.嬰