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1、高二生物選修三第二章第三節(jié)細(xì)胞融合技術(shù) 班級(jí): 姓名: 小組:【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1. 掌握動(dòng)物細(xì)胞融合的概念、方法及單克隆抗體的制備與應(yīng)用。2.掌握植物體細(xì)胞雜交的過程、原理?!局R(shí)梳理】一、動(dòng)物細(xì)胞融合1.動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,指 。2.結(jié)果: 形成單核的雜交細(xì)胞。3.原理: 。 4.誘導(dǎo)方式:物理法: 。 化學(xué)法: 。 生物法: 。思考討論:為什么細(xì)胞融合過程中使用的病毒需要滅活?不滅活行嗎?5.過程: 6.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。 應(yīng)用:成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段,特別是
2、利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體。二、單克隆抗體1.什么是抗體?由什么細(xì)胞分泌?2.單克隆抗體:由單一B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性生殖形成的細(xì)胞所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。3.B淋巴細(xì)胞與抗體的關(guān)系:(1)B淋巴細(xì)胞受抗原刺激后,可以產(chǎn)生抗體。(2)動(dòng)物體內(nèi)的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬種以上的抗體,每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。(3)每一個(gè)淋巴細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體。4.單克隆抗體制備設(shè)計(jì)方案: 。利用效應(yīng)B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生 的功能;利用腫瘤細(xì)胞 的特性;利用 的技術(shù)將兩種細(xì)胞融合獲得具有淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞特性的雜交瘤細(xì)胞;利用 技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 制備過程:第一步:將 注射到小鼠體內(nèi)進(jìn)
3、行免疫;第二步:從該小鼠脾臟中獲得能夠產(chǎn)生抗體的細(xì)胞,與小鼠的細(xì)胞在,或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合;第三步:在特定的培養(yǎng)基中,篩選出細(xì)胞;第四步:培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從中挑選出 的細(xì)胞群,繼續(xù)培養(yǎng);第五步:將該雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠 內(nèi)增殖,然后再分離純化單克隆抗體;思考:(1)本過程利用了哪些原理?(2)為什么選用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與B細(xì)胞融合?5.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn): 。單克隆抗體的特點(diǎn): 。6.應(yīng)用主要有: 作為診斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。 用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,
4、也有少量用于治療其它疾病。3. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù) 1、定義:植物體細(xì)胞雜交就是將 的植物體細(xì)胞,在一定條件下融合成 ,并把雜種細(xì)胞培育成 技術(shù)。優(yōu)點(diǎn)是 2、方法: 物理法: 、 化學(xué)法: 3、與動(dòng)物體細(xì)胞雜交不同的是在雜交之前需要先用 和 去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的 ,此方法稱為 4.植物體細(xì)胞雜交過程示意圖:5.植物體細(xì)胞雜交的優(yōu)勢(shì):打破不同種生物間的生殖隔離限制,在一定程度上克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合范圍。4、 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較:比較項(xiàng)目細(xì)胞融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合課堂檢測(cè):1.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技
5、術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案(1)該實(shí)驗(yàn)方案的目的是 。(2)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?為什么?(3)A是從小鼠脾臟中取得 ,該細(xì)胞能產(chǎn)生 。(4)圖中B為_過程,常用_作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能_(5)C過程指細(xì)胞培養(yǎng),該過程包括_培養(yǎng)和_培養(yǎng)兩個(gè)階段,其中_代以內(nèi)的的細(xì)胞屬于細(xì)胞株。2下列不是細(xì)胞融合常用方法的是()A細(xì)胞培養(yǎng)B滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)C電刺激 D聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑3動(dòng)物細(xì)胞融合的目的中,最重要的是( )A克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B制備單克隆抗體C培育新物種D生產(chǎn)雜交細(xì)胞4. 單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩
6、選出雜交瘤細(xì)胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是( ) 淋巴細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞A BC D 5科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()A經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞C經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 6用動(dòng)物細(xì)胞工程獲得單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟錯(cuò)誤的是()A將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑,使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體7單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣
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