結(jié)締組織病相關(guān)自身抗體的解讀

1、自身免疫性疾病相關(guān)抗體的解讀趙久良北京協(xié)和醫(yī)院風(fēng)濕免疫科彌漫性結(jié)締組織病的特點(diǎn)自身免疫應(yīng)答反應(yīng)強(qiáng)度與病情密切相關(guān)組織器官病理性損傷和相應(yīng)的功能障礙產(chǎn)生高滴度的自身抗體或與自身組織起反應(yīng)的T細(xì)胞自身抗體臨床意義與病情活動(dòng)相關(guān)與病情活動(dòng)相關(guān)抗ds-DNA抗體cANCAACL診斷特異性診斷特異性抗Sm抗體抗CCP抗體抗SSA/SSB預(yù)測預(yù)后臨床亞型預(yù)測預(yù)后臨床亞型抗Jo-1抗Scl-70抗rRNP器官特異性器官特異性CNS：抗rRNP抗體肺臟：抗Scl-70kDa 抗Jo-1抗體z臨床上具有多種常用自身抗體提供治療依提供治療依據(jù)據(jù)抗體陽性，抗體陽性，無臨床表現(xiàn)無臨床表現(xiàn)抗體陽性與抗體陽性與特定的臨床

2、事特定的臨床事件件常用實(shí)驗(yàn)室檢查方法間接免疫熒光法間接免疫熒光下不同核型ANA染色模型分析（25種）z均質(zhì)型均質(zhì)型H：抗DNP，dsDNA，組蛋白，核小體z斑點(diǎn)型斑點(diǎn)型S：ENAz核仁型核仁型N：SSc相關(guān)抗體，RNA多聚酶I，PM-SCl,u3nRNPz核模型核模型M：y抗核包膜蛋白抗體（gp210，板層素），部分dsDNAz著絲點(diǎn)型：著絲點(diǎn)型：ACA陽性z胞漿型：胞漿型：分裂間期細(xì)胞細(xì)胞漿顏色陽性，線粒體型，核糖體型，Jo-1型，細(xì)顆粒型z混合型抗dsDNA抗體臨床意義z致病作用y在SLE患者的腎臟病變處發(fā)現(xiàn)了抗DNA抗體y在具有抗dsDNA抗體的人中，85%會(huì)在約5年內(nèi)發(fā)展成為SLEzS

3、LE中陽性率60-90%y對(duì)于未治療SLE患者，Sp 90%，Se 70%z抗體水平與疾病活動(dòng)度相關(guān)y活動(dòng)期陽性率80-100%，非活動(dòng)期30%抗ENA抗體抗ENA抗體z可提取性核抗原，為核中一類蛋白質(zhì)，均不含有DNA、組蛋白z可以被鹽水提取zENA抗原可以從多種組織中獲得，無種屬間差異，但有明顯的組織不均一性免疫對(duì)流電泳CIEAb Ag O | O O O O O O O O | O O | O 陽極陽極+ - 陰極 免疫雙擴(kuò)散(ID)已知已知Ab1:16已知已知Ab Ag1:1待測血清待測血清1:41:64 U1-RNP Sm SSA SSB雙擴(kuò)散法解讀z免疫雙擴(kuò)散(ID)檢測結(jié)果判斷z上

4、圖為抗Sm、U1-RNP抗體陽性y滴度均為1:4z下圖為抗SSA、SSB抗體陽性y抗SSA抗體滴度1:64y抗SSB抗體滴度1:16免疫印跡法(WB法)與抗ENA抗體特異性結(jié)合多肽抗原表位z 抗Sm 28/29、13.5KDz 抗U1RNP 73、32、17.5KDz 抗SSA 52、60KDz 抗SSB 45、47、48KDz 抗rRNP 38、16.5、15KDz 抗Jo-1 55KDz 抗ScL-70 86、70KD免疫印跡法解讀抗ENA及其臨床意義z抗RNPCTD 、 MCTD、SLEz抗SmSLE 30%z抗SSA(Ro)pSS 75%、SLE 25%z抗SSB(La)pSS 40%

5、、SLE 10%z抗rRNPSLEz抗Scl-70SSc 2030%z抗Jo-1PM 30%抗ENA抗體臨床意義z標(biāo)記抗體y抗Sm 系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）y抗Scl-70系統(tǒng)性硬化癥y抗SSA/SSB干燥綜合征z病情活動(dòng)度相關(guān)y細(xì)胞漿抗原JO-1z預(yù)測疾病預(yù)后和臨床亞型y抗Jo-1皮肌炎合并肺間質(zhì)病變y抗rRNP狼瘡腦病特殊問題ANA18項(xiàng)z除外性診斷除外性診斷y對(duì)于臨床不考慮CTD患者z增加項(xiàng)目增加項(xiàng)目y抗抗CENP-B抗體：抗體：ACA共包括4型，以B型為主y抗核小體抗體：抗核小體抗體：多見于活動(dòng)性SLE，尤其是狼瘡腎炎，可能是SLE的特異性抗體，Se 58-71%，Sp 97-99%z

6、初步篩查初步篩查y臨床考慮CTD，但具體分型未明類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎相關(guān)抗體譜z類風(fēng)濕因子y靈敏度高，特異度差（63%）z抗環(huán)瓜氨酸多肽抗體CCPyELISA，79%，陽性預(yù)測值84%z抗角蛋白抗體（AKA）：IFz抗核周因子抗體（APF）：IFzMCV類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎多關(guān)節(jié)炎-關(guān)節(jié)變形-偶見臟器累及 (肺纖維化,胸膜炎, 心包炎, 鞏膜炎, 類風(fēng)濕結(jié)節(jié), 血管炎)- 30-50% RA患者在發(fā)病第一年可見關(guān)節(jié)損壞- 40%RA患者5年內(nèi)病情發(fā)展導(dǎo)致喪失勞動(dòng)力- 根據(jù)病情的嚴(yán)重程度，壽命縮短3 到14 年類風(fēng)濕的關(guān)節(jié)損害類風(fēng)濕的關(guān)節(jié)損害致畸的根源致畸的根源z 在疾病發(fā)生2年內(nèi)即可發(fā)生的關(guān)節(jié)損壞，致殘率高y

7、19661971 at Middlesex Hospital, London,UK. y94例病程10個(gè)5RF和抗CCP抗體均陰性（）0RF或抗CCP抗體低滴度陽性（）2RF或抗CCP抗體高滴度陽性（）3（正常上限3倍） 6周 06周 1CRP和ESR均正常 0CRP或ESR升高 1中華風(fēng)濕病學(xué)雜志中華風(fēng)濕病學(xué)雜志2010年年4月第月第14卷第卷第4期期類風(fēng)濕關(guān)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷及治療指南節(jié)炎診斷及治療指南RARA新新四項(xiàng)四項(xiàng)抗抗CCPCCP抗體抗體類風(fēng)類風(fēng)濕因濕因子子C C反反應(yīng)蛋應(yīng)蛋白白血沉血沉結(jié)果比類風(fēng)濕因子更可結(jié)果比類風(fēng)濕因子更可靠靠早于影像學(xué)診斷早于影像學(xué)診斷持續(xù)陽性提示骨破壞持持續(xù)陽

8、性提示骨破壞持續(xù)加重續(xù)加重持續(xù)陽性致殘率極高持續(xù)陽性致殘率極高（兩年內(nèi)（兩年內(nèi)70%70%）抗磷脂抗體譜z廣義抗磷脂抗體譜包括：y抗心磷脂抗體：ACLy抗磷脂結(jié)合血漿蛋白抗體：x2GP1x凝血酶原（PT），蛋白C，蛋白Sx膜聯(lián)蛋白 Annexin A2和A5y抗磷脂-蛋白復(fù)合物抗體x磷脂酰肌醇 anti-PI，x磷脂酰乙醇胺 anti-PEx磷脂酰絲氨酸/凝血酶原（anti-PS/PT）x波形蛋白/心磷脂復(fù)合物：anti-vimentiny狼瘡抗凝物：功能性抗體，1952年發(fā)現(xiàn)，1972年命名狼瘡抗凝物（LAC） 一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，阻斷活化的凝血因子V與凝血

9、酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時(shí)間延長 初篩試驗(yàn)： 活化部分凝血酶原時(shí)間(APTT) 白陶土凝血時(shí)間(KCT) 稀釋蛇毒凝血時(shí)間(dRVVT) 稀釋凝血酶原時(shí)間(dPT) 通過糾正試驗(yàn)確診：通過糾正試驗(yàn)確診：若有LA，缺乏血小板正常血清不能糾正凝血時(shí)間，只有加入過量磷脂或血小板溶解物后，延長的APTT可被糾正 需排除其他原因，如肝素、因子復(fù)合物等抗心磷脂抗體（ACL） 最先發(fā)現(xiàn)的抗磷脂自身抗體之一，和血小板減少有明顯相關(guān)性 ACL陽性者，血小板減少3倍于ACL陰性者 習(xí)慣性流產(chǎn)與IgG型ACL關(guān)系密切，并可能和抗體的滴定度有關(guān) 檢測方法：ELISA 目前尚無金標(biāo)準(zhǔn) 兩種類型：38ACL

10、Ig類型類型與血栓形成與血栓形成常見疾病常見疾病2-GP1依賴高滴度IgG型密切相關(guān)自身免疫病、APS非2-GP1依賴低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病抗2GP1抗體抗B2GP1抗體：特異度高（94.5%），靈敏度低24%結(jié)構(gòu)域1=Domain I與臨床價(jià)值更相關(guān) ANCA熒光染色模型對(duì)應(yīng)對(duì)應(yīng)抗原抗原主要抗原:蛋白酶3 (PR3)其它抗原:BPI, AZU等主要抗原:髓過氧化物酶 (MPO) 其它抗原:HLE, LF, CG等相關(guān)疾病相關(guān)疾病 肉芽腫伴多血管炎肉芽腫伴多血管炎(GPA): (GPA): 敏感性: 73 %特異性: 99 %感染等顯微鏡下多血管炎顯微鏡下多血管炎(

11、MPA):(MPA): 敏感性: 67 %特異性: 99 %IBD, RA, SLE等ANCA陽性患者的疾病譜余潔等，中華全科醫(yī)師雜志2010；9:26-30 xCTD患者如患者如RA、SLE和肌炎，和肌炎，偶可表現(xiàn)出偶可表現(xiàn)出ANCA陽性，但大多陽性，但大多是非是非MPO-ANCA, 和非和非PR3-ANCAx感染性心內(nèi)膜炎、感染性心內(nèi)膜炎、HIV感染，感染，偶爾會(huì)出現(xiàn)偶爾會(huì)出現(xiàn)ANCA陽性。陽性。 這有特這有特殊的臨床意義，感染可以出現(xiàn)酷殊的臨床意義，感染可以出現(xiàn)酷似血管炎的癥狀似血管炎的癥狀A(yù)NCA的臨床意義z結(jié)合臨床特征，ANCA陽性有助于診斷z單純免疫熒光陽性意義有限zANCA陰性不能排除ANCA-相關(guān)的血管炎zANCA與疾病活動(dòng)度的關(guān)