實(shí)驗(yàn)四、五 蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備與肌肉收縮

1、華南師范大學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告學(xué)生姓名 學(xué)號(hào) 專 業(yè) 生物科學(xué) 年級(jí)、班級(jí) 課程名稱 生理學(xué)實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)類型 驗(yàn)證 設(shè)計(jì) 綜合 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 2013 年4 月 11日實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師 實(shí)驗(yàn)評(píng)分 實(shí)驗(yàn)四、五 蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備與肌肉收縮特性的分析實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.1學(xué)習(xí)蛙類動(dòng)物雙毀髓的方法。1.2學(xué)習(xí)并掌握坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本及其制備方法。1.3學(xué)習(xí)電刺激方法及肌肉收縮的記錄方法。1.4觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系。1.5觀察骨骼肌單收縮、肌肉收縮的總和、不完全強(qiáng)直收縮和完全強(qiáng)直收縮的現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)原理2.1腓腸肌由許多肌纖維組成，刺激腓腸肌時(shí)，不同的刺激強(qiáng)度會(huì)引起肌肉的不同反應(yīng)2.2閾下刺激：強(qiáng)

2、度過(guò)小不引起肌肉收縮反應(yīng)的刺激。閾刺激：能引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度。最大的收縮反應(yīng)：全部肌纖維同時(shí)收縮。最適刺激強(qiáng)度：引起肌肉發(fā)生最大收縮反應(yīng)的最小刺激強(qiáng)度。2.3單收縮：肌肉組織對(duì)于一個(gè)閾上強(qiáng)度的刺激，發(fā)生一次迅速的收縮反應(yīng)。分為三個(gè)時(shí)期：潛伏期（從刺激開始到收縮開始這一段無(wú)明顯外部表現(xiàn)的時(shí)間）、收縮期（由潛伏期末到肌肉開始收縮至收縮達(dá)到高峰的時(shí)間）和舒張期（從收縮高峰開始，曲線較緩慢地下降至基線的時(shí)間）。2.4兩個(gè)同等強(qiáng)度的閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)-肌肉標(biāo)本，如果刺激間隔大于單收縮的過(guò)程，肌肉出現(xiàn)兩個(gè)分離的單收縮；如果刺激間隔小于單收縮的時(shí)程而大于不應(yīng)期，則出現(xiàn)兩個(gè)單收縮反應(yīng)的重

3、疊，即收縮的總和；但如果第二個(gè)刺激在第一個(gè)收縮反應(yīng)的不應(yīng)期內(nèi)，則第二個(gè)刺激不產(chǎn)生收縮反應(yīng)。2.5強(qiáng)直收縮：當(dāng)同等強(qiáng)度的連續(xù)閾上刺激作用于標(biāo)本時(shí)，則出現(xiàn)多個(gè)收縮反應(yīng)疊加的現(xiàn)象。不完全強(qiáng)直收縮：當(dāng)同等強(qiáng)度的連續(xù)閾上刺激作用于標(biāo)本時(shí)，后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期。完全強(qiáng)直收縮：當(dāng)同等強(qiáng)度的連續(xù)閾上刺激作用于標(biāo)本時(shí)，后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時(shí)，各自的收縮完全融合，肌肉出現(xiàn)持續(xù)的收縮狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)材料3.1材料：蛙3.2試劑：任氏夜3.3器材：張力傳感器，常用手術(shù)器械（手術(shù)剪、手術(shù)鑷、手術(shù)刀、金冠剪、眼科剪、毀髓針），蛙板，固定針，培養(yǎng)皿，滴管，紗布，棉線實(shí)驗(yàn)步驟4.1坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備洗干

4、凈實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雙毀髓 剝離后肢 分離兩后肢 分離坐骨神經(jīng) 游離腓腸肌 分離股骨頭 標(biāo)本檢驗(yàn)4.2電刺激把標(biāo)本通過(guò)張力傳感器與生理信號(hào)采集系統(tǒng)相連 觀察刺激強(qiáng)度與肌肉收縮反應(yīng)的關(guān)系 確定閾上刺激 以閾上刺激給予標(biāo)本的神經(jīng)單刺激、連續(xù)刺激觀察單收縮的時(shí)程、總和的過(guò)程以及強(qiáng)直收縮產(chǎn)生的過(guò)程實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.1閾刺激強(qiáng)度下蛙的腓腸肌收縮情況圖1 蛙腓腸肌閾刺激的分析注：刺激強(qiáng)度為80mV；頻率為1Hz；單脈沖5.2最適刺激強(qiáng)度下蛙的腓腸肌收縮情況圖2 蛙腓腸肌單收縮的分析注：刺激強(qiáng)度為200mV；頻率為1Hz；潛伏期約為25ms，收縮期約為68ms，舒張期約為300 ms5.3蛙的腓腸肌不完全強(qiáng)直收縮情況圖3

5、 蛙腓腸肌不完全強(qiáng)直收縮的分析注：刺激強(qiáng)度為200mV ；頻率為15Hz5.4蛙的腓腸肌完全強(qiáng)直收縮情況圖4 蛙腓腸肌完全強(qiáng)直收縮的分析注：刺激強(qiáng)度為200mV ；頻率為50Hz分析討論當(dāng)用80mV的強(qiáng)度刺激本實(shí)驗(yàn)所得的腓腸肌標(biāo)本時(shí)，引起了肌肉發(fā)生收縮反應(yīng)（如圖1所示），而小于80mV的刺激強(qiáng)度均不能引起腓腸肌發(fā)生收縮反應(yīng)。因此80mV為本標(biāo)本的閾刺激強(qiáng)度。當(dāng)用200mV的強(qiáng)度刺激腓腸肌標(biāo)本時(shí)，引起全部肌纖維同時(shí)收縮，出現(xiàn)了最大的收縮反應(yīng)（如圖2所示）。此時(shí)，即使再增大刺激強(qiáng)度，肌肉收縮的強(qiáng)度也不再隨之加大。因此200mV為本標(biāo)本的最適刺激強(qiáng)度。其中，潛伏期約為25ms，收縮期約為68ms，舒張期約為300 ms。當(dāng)用最適刺激強(qiáng)度200mV按15 Hz的頻率刺激腓腸肌標(biāo)本6次時(shí)，刺激的間隔為約為67 ms。因此后一次收縮發(fā)生在前一次收縮的舒張期（如圖3所示），即不完全強(qiáng)直收縮。當(dāng)用最適刺激強(qiáng)度200mV按50 Hz的頻率刺激腓腸肌標(biāo)本6次時(shí)，刺激的間隔為約為20 ms。由于刺激間隔非常小，后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時(shí)，各自的收縮完全融合，肌肉出現(xiàn)持續(xù)的收縮狀態(tài)（如圖4所示），即完全強(qiáng)直