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1、Diversity of Structure and Function of ProteinX-射線衍射法(射線衍射法(X-ray diffraction method)核磁共振(核磁共振(NMR)電子顯微技術(shù)電子顯微技術(shù) 質(zhì)譜法質(zhì)譜法熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù) 光譜法(紅外光譜、紫外差光譜、熒光光譜)光譜法(紅外光譜、紫外差光譜、熒光光譜)旋光色散法(旋光色散法(optical rotatory dispersion, ORD)園二色性(園二色性(circular dichroism, CD)X-X-射線衍射法射線衍射法 簡(jiǎn)單原理簡(jiǎn)單原理 基本原理基本原理質(zhì)譜技術(shù)質(zhì)譜技術(shù) MS
2、 是將帶電原子、分子或分子碎片按其質(zhì)荷比的大小順序排是將帶電原子、分子或分子碎片按其質(zhì)荷比的大小順序排 列而形成的圖譜列而形成的圖譜 經(jīng)過(guò)空間編碼技術(shù),把在磁共振過(guò)程中所發(fā)出的電磁波以及與之經(jīng)過(guò)空間編碼技術(shù),把在磁共振過(guò)程中所發(fā)出的電磁波以及與之有關(guān)的各種信息參數(shù)等,通過(guò)計(jì)算機(jī)處理,最后形成圖像。醫(yī)生通過(guò)有關(guān)的各種信息參數(shù)等,通過(guò)計(jì)算機(jī)處理,最后形成圖像。醫(yī)生通過(guò)分析圖像中的具體情況做出診斷分析圖像中的具體情況做出診斷 對(duì)樣品的要求對(duì)樣品的要求質(zhì)譜質(zhì)譜 樣品必須先轉(zhuǎn)化為氣態(tài)樣品必須先轉(zhuǎn)化為氣態(tài)核磁共振核磁共振 樣品通常都配制溶液,在配制溶液應(yīng)注意幾個(gè)問(wèn)題樣品通常都配制溶液,在配制溶液應(yīng)注意幾個(gè)
3、問(wèn)題: 溶劑不應(yīng)含被檢測(cè)的原子溶劑不應(yīng)含被檢測(cè)的原子 如:常用的氫譜,其溶劑不應(yīng)含質(zhì)子,常用的有如:常用的氫譜,其溶劑不應(yīng)含質(zhì)子,常用的有 CCl4、CS2 樣品溶液的濃度一般為樣品溶液的濃度一般為2-10 化學(xué)位移基準(zhǔn)物質(zhì)化學(xué)位移基準(zhǔn)物質(zhì)(TMS)的濃度一般為的濃度一般為0.2左右左右譜圖提供的主要信息譜圖提供的主要信息 共振吸收峰的組數(shù)共振吸收峰的組數(shù) 一般表明有幾種帶氫一般表明有幾種帶氫基團(tuán)基團(tuán)各組吸收峰的位置各組吸收峰的位置 提供各類(lèi)型氫核提供各類(lèi)型氫核(各基團(tuán)各基團(tuán))所處化學(xué)環(huán)境的信息,用所處化學(xué)環(huán)境的信息,用化學(xué)化學(xué) 位移位移表示表示各組峰的分裂情況及分裂峰的數(shù)目各組峰的分裂情況及
4、分裂峰的數(shù)目 提供各類(lèi)型提供各類(lèi)型(各基團(tuán)各基團(tuán))的的相互作用情況相互作用情況,用磁核的自旋偶,用磁核的自旋偶 合和裂分表示合和裂分表示 各組峰的相對(duì)強(qiáng)度各組峰的相對(duì)強(qiáng)度 提供各類(lèi)型氫核提供各類(lèi)型氫核(各基團(tuán)各基團(tuán))的的數(shù)量比數(shù)量比。在。在NMR譜圖中用峰譜圖中用峰 面積的積分階梯線高度表示面積的積分階梯線高度表示橫坐標(biāo)為化學(xué)位移,說(shuō)明在不同分子或同一分子的不同基團(tuán)中,氫核所處的化學(xué)橫坐標(biāo)為化學(xué)位移,說(shuō)明在不同分子或同一分子的不同基團(tuán)中,氫核所處的化學(xué)環(huán)境不同,產(chǎn)生核磁共振所吸收的頻率也不一樣,這種由于核周?chē)肿迎h(huán)境不同環(huán)境不同,產(chǎn)生核磁共振所吸收的頻率也不一樣,這種由于核周?chē)肿迎h(huán)境不同引起
5、共振吸收頻率位移的現(xiàn)象叫化學(xué)位移引起共振吸收頻率位移的現(xiàn)象叫化學(xué)位移核磁共振波譜法的特點(diǎn)核磁共振波譜法的特點(diǎn)核磁共振波譜法是結(jié)構(gòu)分析最強(qiáng)有力的手段之一,因?yàn)樗押舜殴舱癫ㄗV法是結(jié)構(gòu)分析最強(qiáng)有力的手段之一,因?yàn)樗?有機(jī)化合物最常見(jiàn)的組成元素氫有機(jī)化合物最常見(jiàn)的組成元素氫(氫譜氫譜)或碳或碳(碳譜碳譜)等作為等作為“生生 色團(tuán)色團(tuán)”來(lái)使用的,因此它可能確定幾乎所有常見(jiàn)官能團(tuán)的環(huán)來(lái)使用的,因此它可能確定幾乎所有常見(jiàn)官能團(tuán)的環(huán) 境,有的是其它光譜或分析法所不能判斷的環(huán)境,境,有的是其它光譜或分析法所不能判斷的環(huán)境,NMR法譜法譜 圖的直觀性強(qiáng),特別是碳譜能直接反映出分子的骨架,譜圖圖的直觀性強(qiáng),特別是碳譜能直接反映出分子的骨架,譜圖 解釋較為容易。解釋較為容易。 有多種原子核的共振波譜有多種原子核的共振波譜(除了常用的氫譜外,還有碳譜,除了常用的氫譜外,還有碳譜, 氟譜,磷譜等氟譜,磷譜等),因此,擴(kuò)大了應(yīng)用范圍,各種譜之間還可以,因此,擴(kuò)大了應(yīng)用范圍,各種譜之間還可以 互相印證?;ハ嘤∽C。 可以進(jìn)行定量測(cè)定,研究反應(yīng)機(jī)理,還可以求得某些化學(xué)過(guò)可以進(jìn)行定量測(cè)定,研究反應(yīng)機(jī)理,還可以求得某些化學(xué)過(guò) 程的動(dòng)力和熱力學(xué)的參數(shù)。程的動(dòng)力和熱力學(xué)的參數(shù)。 該法的缺
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