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文檔簡介
1、試驗一:使用高倍顯微鏡觀看幾種細(xì)胞一、試驗?zāi)康模?、學(xué)會如何使用顯微鏡觀看細(xì)胞;2、了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu);3、學(xué)會制作臨時裝片。二、試驗原理1.人眼、光學(xué)顯微鏡以及電子顯微鏡成像原理、辨別率及其影響因素l 人眼自然界各種物體在光線的照射下,不同顏色可以反射出明暗不同的光線,這些光線透過角膜、晶狀體、玻璃體的折射,眼球中的角膜和晶狀體的共同作用,相當(dāng)于一個“凸透鏡”,在視網(wǎng)膜上形成倒立、縮小的實像,構(gòu)成光刺激。視網(wǎng)膜上的感光細(xì)胞(圓錐和桿狀細(xì)胞)受光的刺激后,經(jīng)過一系列的物理化學(xué)變化,轉(zhuǎn)換成神經(jīng)沖動,由視神經(jīng)傳入大腦層的視覺中樞,然后我們就能觀察物體了,經(jīng)過大腦皮層的綜合分析,產(chǎn)生視覺,人就看清了正立
2、的立體像。人的眼睛是個簡單的成像系統(tǒng),而人的大腦像CPU處理這些圖像,讓人能在視覺上感知到圖像。人眼成像最主要的是晶狀體和視網(wǎng)膜。晶狀體調(diào)整眼睛的焦距是光束集中到富有視錐細(xì)胞和視柱細(xì)胞的視網(wǎng)膜上,在進行光電(生物電)變化,由視覺神經(jīng)把信號傳至大腦生成圖像。人類的目標(biāo)就是能制造出能過可以和眼睛相媲美的視覺系統(tǒng),這是機器智能化的關(guān)鍵部分。說及人眼辨別率首先需要知道如下幾個概念:(1)視角:觀看物體時,人眼對該物體所張的角度。(2)辨別角:人眼的辨別角:指剛能看出兩黑點時,兩黑點對人眼的張角。(3)辨別力:人眼辨別圖像細(xì)節(jié)的力量稱為辨別力,可用辨別角來衡量,辨別角的倒數(shù)為辨別力。它也反映了人眼的視力
3、。辨別力還與照度及景物相對對比度有關(guān)。人眼辨別率指的是人眼能夠辨別兩個相鄰的點或者線的力量,通常以剛能被分開的兩點或兩線與眼睛瞳孔中心所成的張角表示。其最小辨別的距離在0.2mm左右。l 光學(xué)顯微鏡近代的光學(xué)顯微鏡通常接受兩級放大,分別由物鏡和目鏡完成。被觀看物體位于物鏡的前方,被物鏡作第一級放大后成一倒立的實象,然后此實像再被目鏡作其次級放大,成一虛象,人眼看到的就是虛像。而顯微鏡的總放大倍率就是物鏡放大倍率和目鏡放大倍率的乘積。放大倍率是指直線尺寸的放大比。光學(xué)顯微鏡最大辨別率200nm光學(xué)顯微鏡下觀看的結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)l 電子顯微鏡電子顯微鏡中有一個電子槍,電子在槍集束射出,正像光學(xué)顯
4、微鏡中利用光學(xué)透鏡的成像作用得到顯微的放大像一樣,在電子顯微鏡中用磁透鏡,使電子束會聚成像。我們把一片待觀看的物體,例如一片很薄的晶體,放在電子顯微鏡中,電子束就會射向這片物體上,在一塊熒光幕上就會得到一個放大的影像。假如在電子顯微鏡中用感光的底片代替熒幕的話就可以得到一張微觀世界的貴重圖片。而一些特殊好的電子顯微鏡,甚至可以觀看到一些巨分子的結(jié)構(gòu)! 電子顯微鏡辨別率0.2nm電子顯微鏡下觀看到的結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)三、四、材料用具顯微鏡、載玻片,蓋玻片、鑷子、刀片、毛筆、培育皿、碘液、清水、膠頭滴管、洋蔥、綠葉,永久裝片觀看洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞臨時裝片1. 擦片:用潔凈紗布將載玻片和蓋玻片擦拭潔
5、凈;2. 滴水:在載玻片中心滴一滴清水(要適量,水滴太小簡潔產(chǎn)生氣泡或干枯,水滴太大簡潔溢出載玻片而污染顯微鏡);3. 取材、展平:用鑷子撕取一小塊洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮薄膜(可以用刀片縱橫劃數(shù)刀,形成0.5cm×0.5cm大小的正方形),將撕下的薄膜放在載玻片中心的水滴中,并用鑷子展平;4. 蓋片:用鑷子夾起蓋玻片,輕輕蓋在表皮上。蓋時,讓蓋玻片一邊先接觸載玻片上水滴的邊沿,然后漸漸放下,以免產(chǎn)生氣泡;5. 染色:在蓋玻片一側(cè)滴12滴碘液;6. 吸水:在蓋玻片另一側(cè)用吸水紙吸引碘液;(步驟16為裝片制作)7.觀看:參照顯微鏡使用;8.繪圖:先用鉛筆,依據(jù)觀看到的圖像(不能抄書,看到什么畫
6、什么),輕輕畫出輪廓。經(jīng)修改,再正式畫好,務(wù)必使圖形真實。圖中比較暗的地方,用鉛筆點上細(xì)點表示(越暗的地方細(xì)點越多,不能用陰影、涂黑表示暗處)。字盡量注在圖右側(cè),用尺引出水平指示線,然后注字;在圖下方寫上所畫圖形名稱。擦、滴、撕、展、蓋、染、吸觀看人口腔上皮細(xì)胞臨時裝片1.擦片:用潔凈紗布將載玻片和蓋玻片擦拭潔凈;2.滴水:在載玻片中心滴一滴生理鹽水;3.取材:用牙簽在口腔內(nèi)側(cè)輕刮幾下(操作前請漱口),并將之涂抹在生理鹽水滴中;48步驟:參照制作洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞臨時裝片擦、滴、刮、涂、蓋、染、吸顯微鏡的使用取鏡、安放:a.打開顯微鏡箱,右手握鏡臂,左手托鏡座,把顯微鏡放在試驗臺的前方偏左;對
7、 光:b.安裝好目鏡(10×或16×);c.轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使低倍物鏡對準(zhǔn)同光孔;d.轉(zhuǎn)動遮光器,使最大光圈對準(zhǔn)通光孔,左眼向目鏡內(nèi)凝視(右眼也要睜開),同時轉(zhuǎn)動反光鏡,使其朝向光源,使視野內(nèi)亮度均勻合適;低倍鏡觀看:e.將裝片放在載物臺上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對通光孔中心;f.轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,同時兩眼從側(cè)面凝視物鏡鏡頭,當(dāng)物鏡與玻片相距23mm時停止;g.用左眼向目鏡內(nèi)凝視,并轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物象為止。若不清楚,可調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使物象更加清楚;收 鏡:h.轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,上升鏡筒,取出玻片;再轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,把2個物鏡偏到兩旁(3個物鏡時
8、低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔),將鏡筒下降至最低,然后將顯微鏡放回顯微鏡箱。高倍物鏡的使用:使用高倍物鏡之前,必需先用低倍物鏡找到觀看的物象,并調(diào)到視野的正中心,然后轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。換用高倍鏡后,視野內(nèi)亮度變暗,因此一般選用較大的光圈并使用反光鏡的凹面,然后調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。觀看的物體數(shù)目變少,但是體積變大。反光鏡的使用:反光鏡通常與遮光器(或光圈)協(xié)作使用,以調(diào)整視野內(nèi)的亮度。反光鏡有平面和凹面。對光時,假如視野光線太強,則使用反光鏡的平面,假如光線照舊太強,則同時使用較小的光圈;反之,假如視野內(nèi)光線較弱,則使用較大的光圈或使用反光鏡的凹面。相關(guān)重要學(xué)問1. 顯微鏡放大倍數(shù)=目鏡×物鏡2
9、. 顯微鏡放大的是長度或?qū)挾?,而不是面積3. 放大倍數(shù)變大(即低倍鏡換高倍鏡):視野內(nèi)細(xì)胞數(shù)目削減,體積變大,視野變暗4. 目鏡越短,物鏡越長,物鏡與玻片距離越近,放大倍數(shù)越大5. 視野中污點推斷:轉(zhuǎn)動目鏡/物鏡,污點移動則污點在目鏡/物鏡上;玻片移動,則污點移動在玻片上;若以上操作污點均不移動,則污點在目鏡中心。6. 換上高倍鏡后禁止向下轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋僅供參考,繪圖不要照抄7. 氣泡辨別:氣泡往往有粗而黑的邊緣,外形呈圓形或橢圓形,里面往往一片空白,用鑷子尖輕輕壓一下蓋玻片,氣泡就會變形和移動。一般光學(xué)顯微鏡可能看不到葉綠體,細(xì)胞質(zhì)用稀疏的細(xì)點表示;細(xì)胞核用黑圈表示,其中用密集的細(xì)點填充。植
10、物細(xì)胞人或動物細(xì)胞試驗一:使用高倍顯微鏡觀看幾種細(xì)胞1.制作人口腔上皮細(xì)胞的臨時裝片時,在載玻片中心滴一滴0.9%的生理鹽水的作用是( ) A為細(xì)胞供應(yīng)養(yǎng)分 B避開細(xì)胞死亡 C保持細(xì)胞形態(tài)2用從洋蔥鱗片葉上撕下的表皮制成的玻片標(biāo)本叫 ( ) A.切片 B.裝片 C.涂片3在顯微鏡下觀看到的人口腔上皮細(xì)胞物像是 ( )A B C4右圖是某同學(xué)做的洋蔥表皮細(xì)胞裝片在顯微鏡視野中的圖解,圖中哪個結(jié)構(gòu)是氣泡?分析產(chǎn)生產(chǎn)生氣泡的緣由是: ( ) Aa;沒有對光 Bb;沒有用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋Ca;蓋蓋玻片時,沒按規(guī)定操作Db;蓋蓋玻片時,沒按規(guī)定操作5用低倍鏡觀看某一細(xì)胞時,如要換上高倍鏡觀看,首先需要調(diào)整(
11、)A裝片的位置 B粗準(zhǔn)焦螺旋 C轉(zhuǎn)換器 D細(xì)準(zhǔn)焦螺旋6用低倍鏡觀看根尖細(xì)胞分裂圖像時,發(fā)覺某分裂細(xì)胞處在視野的右上方,要把它移到視野中心,裝片移動方向是( ) A左上方 B左下方 C右上方 D右下方7用顯微鏡觀看葫蘆蘚葉的裝片時,為使視野內(nèi)看到的細(xì)胞數(shù)目最多,應(yīng)選用( ) A目鏡5× 物鏡40× B.目鏡10× 物鏡15×C目鏡5× 物鏡10× D目鏡10×物鏡40×8一架光學(xué)顯微鏡的鏡盒里有4個鏡頭,甲、乙一端有螺紋,甲較長;丙、丁無螺紋,丙較長。若要在視野中看到較大的細(xì)胞,宜選用 A甲與丙 B甲與丁 C乙與丙
12、D乙與丁9換用高倍鏡觀看洋蔥表皮細(xì)胞時,錯誤的操作是( ) A調(diào)整粗準(zhǔn)焦螺旋 B調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 C用凹面鏡 D轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器10用高倍鏡觀看沒有染色的人的口腔上皮細(xì)胞時,正確的操作是( ) 用平面鏡 用凹面鏡 縮小光圈 放大光圈A B. C. D. 11. 某同學(xué)在顯微鏡下觀看落花生子葉的切片,當(dāng)調(diào)整細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時,有一部分細(xì)胞看得清楚,另一部分細(xì)胞較模糊,這是由于( ) A反光鏡未調(diào)整好B標(biāo)本切得厚薄不均C細(xì)準(zhǔn)焦螺旋未調(diào)整好D顯微鏡物鏡損壞12觀看玻片標(biāo)本時,若發(fā)覺視野上方較暗,下方較亮,應(yīng)調(diào)整( ) A目鏡 B物鏡 C光圈 D反光鏡13在一般光學(xué)顯微鏡下觀看水綿細(xì)胞,不易觀看到的結(jié)構(gòu)是( ) A
13、細(xì)胞膜 B細(xì)胞壁 C葉綠體 D細(xì)胞核14用高倍鏡觀看葉的保衛(wèi)細(xì)胞和洋蔥細(xì)胞,發(fā)覺保衛(wèi)細(xì)胞特有( )A細(xì)胞壁 B細(xì)胞核 C紫色液泡 D葉綠體15用顯微鏡觀看植物葉片細(xì)胞,低倍顯微鏡視野與高倍顯微鏡視野相比,其特點是()A亮,細(xì)胞數(shù)目多,形體小B暗,細(xì)胞數(shù)目多,形體小C亮,細(xì)胞數(shù)目多,形體大D暗,細(xì)胞數(shù)目多,形體大16在低倍鏡下觀看標(biāo)本時視野光明,物像清楚,但換用高倍鏡后物像模糊,此時應(yīng)()A移動裝片B調(diào)整反光鏡C用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)整焦距D用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)整焦距17用顯微鏡觀看某標(biāo)本時,已知目鏡的放大倍數(shù)為10×,物鏡的放大倍數(shù)為40×,則此顯微鏡的放大倍數(shù)為()A長度、寬度均放大4
14、00倍 B面積放大了400倍C長度或?qū)挾确糯?0倍 D標(biāo)本的體積放大400倍18下列關(guān)于高倍鏡使用的敘述中,正確的是()A由于苔蘚類的葉片大,在高倍鏡下簡潔找到,所以可以直接使用高倍物鏡B在低倍鏡下找到葉肉細(xì)胞,即可換高倍物鏡C換高倍物鏡后,必需先用粗準(zhǔn)焦螺旋調(diào)焦,再用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)至物像最清楚D為了使高倍物鏡下的視野亮一些,可使用最大的光圈或凹面反光鏡19試驗中用同一顯微鏡觀看了同一裝片4次,每次僅調(diào)整目鏡或物鏡、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,結(jié)果如圖所示。請問其中視野最暗的是()20下列有關(guān)生物學(xué)試驗的敘述,正確的是()A在使用顯微鏡觀看細(xì)胞的試驗中,若在50×的視野中均勻分布有大小全都的20個細(xì)胞,則換用100×后,視野中的細(xì)胞數(shù)目是5個B用顯微鏡觀看細(xì)胞,我們會發(fā)覺原核細(xì)胞比真核細(xì)胞結(jié)構(gòu)簡潔,但體積差不多C顯微鏡所成的是倒像,“p”在顯微鏡下應(yīng)當(dāng)是“b”D在顯微鏡下觀看透亮材料時,應(yīng)當(dāng)增加光照,用較大的光圈21用顯微鏡的一個目鏡分別與4個不同倍數(shù)的物鏡組合來觀看血細(xì)胞涂片。當(dāng)成像清楚時,每一物鏡與載玻片的距離如下圖所示,假如載玻片的位置不變,用哪一物鏡在一個視野中看到的細(xì)胞最多()Aa BbCc Dd22如圖所示:甲圖中表示目鏡,表示物鏡,表示物鏡與載玻片之間的距離,乙和丙分別表示不同物鏡下觀看
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