Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀

1、Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀 Amaxa公司簡介Amaxa公司成立于1998年，是德國一只處于快速發(fā)展中的生物技術團隊，他們致力于一種高效率、非病毒基因轉(zhuǎn)染技術Nucleofector 的開發(fā)。在Nucleofector 技術和成功融資的基礎上，Amaxa公司從最初的兩個人迅速發(fā)展到現(xiàn)在的80多位技術人員的隊伍，并迅速成為非病毒基因轉(zhuǎn)染技術領域里最主要的公司之一。Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀是將傳統(tǒng)地電穿孔技術和專用地轉(zhuǎn)染試劑結(jié)合起來的產(chǎn)物，針對不同的細胞類型，采用一套最理想的轉(zhuǎn)染試劑和轉(zhuǎn)染程序，以達到最理想的轉(zhuǎn)染效率。Nucleofecto

2、r 核酸轉(zhuǎn)染儀特別適用于轉(zhuǎn)染原代細胞和難以轉(zhuǎn)染的細胞系，如T細胞及PC-12細胞系等。Nucleofector 技術是獨一無二的，因為它可以直接將DNA轉(zhuǎn)染到細胞核內(nèi)，因此實現(xiàn)了因受到細胞分裂限制而一直困擾人們的原代細胞的高效率轉(zhuǎn)染。在Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀的幫助下，您可以在腫瘤研究、免疫學、組織工程學及心血管疾病研究領域中輕而易舉地獲得大于90的高效率基因轉(zhuǎn)染率。 Nucleofector 技術由兩部分組成Nucleofector Solution轉(zhuǎn)染溶液轉(zhuǎn)染過程中，細胞首先懸浮在轉(zhuǎn)染試劑中，選擇相應地過程，僅需幾秒鐘，轉(zhuǎn)染結(jié)束，將細胞轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基中培養(yǎng)、觀察。針對不同的轉(zhuǎn)染細

3、胞都有相應地轉(zhuǎn)染試劑，配合相應地Amaxa轉(zhuǎn)染儀過程，使DNA直接轉(zhuǎn)入細胞核內(nèi)，轉(zhuǎn)染效率高，易操作，實驗周期短Nucleofector Device轉(zhuǎn)染儀Nucleofector 轉(zhuǎn)染儀的原理使電穿孔技術，但它有一般的電穿孔無法比擬地優(yōu)點，它具有獨特地電子參數(shù)，每一套電子參數(shù)是作為一種程序去適應不同的細胞類型。由于電子參數(shù)是預先精心設計好的，因此操作者不用進行電子參數(shù)的優(yōu)化、轉(zhuǎn)染條件的摸索等繁瑣的工作，您只需按動按鈕選用規(guī)定的程序即可。Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀的整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。特點 轉(zhuǎn)染效率高因為DNA是直接轉(zhuǎn)入細胞核中，很容易得到高轉(zhuǎn)染效率。如大多數(shù)細胞系核

4、原代細胞地轉(zhuǎn)染效率位50-70；某些原代細胞，如人表皮纖維原細胞轉(zhuǎn)染效率超過90。 轉(zhuǎn)染速度快由于基因轉(zhuǎn)染不依賴細胞分裂，在大多數(shù)細胞類型轉(zhuǎn)染地基因2-4小時就能檢測表達，這大大縮短了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法必須24-48小時才能表達地時間。這樣加快了實驗進程，這個實驗只需一天就能完成。 操作簡單方便Nucleofector 轉(zhuǎn)染技術操作不到1小時就能完成。應用免疫學/血液學Amaxa公司的細胞轉(zhuǎn)染儀不僅可以轉(zhuǎn)染原代T、B細胞，而且對免疫細胞系如，K562，JURKAT或白血病細胞如CLL或AML等細胞都能進行高效率轉(zhuǎn)染。單核細胞、巨噬細胞或郎格罕氏細胞、單核細胞派生或CD34陽性細胞派生的樹突狀細胞的實

5、驗方案也已開發(fā)出來。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：Human B Cells、Human T Cells、Human CD34 Cells、K562 CellsDMSZ）、JURKAT Cells。心血管研究過去，繁瑣的優(yōu)化步驟和缺乏重復性嚴重地阻礙了心血管轉(zhuǎn)染地的研究，現(xiàn)在，借助于Nucleofector 技術，已能成功進行成體干細胞、CD34陽性細胞、CD34陽性細胞派生的干細胞和間葉干細胞（MSC）等的轉(zhuǎn)染。近來，關于這些干細胞分化成內(nèi)皮細胞或心肌細胞以及他們在適宜組織的定位的文獻已經(jīng)發(fā)表，這些資料顯示了Nucleofector 技術在干細胞治療心血管病的潛力。Amaxa公司

6、現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：HUVECs（Human Umbilical Vein Endothelial Cell）、HCAECs、Human AoSMCs、Human CD34 Cells。皮膚醫(yī)學和組織工程Nucleofector 轉(zhuǎn)染技術對于人的皮膚纖維原細胞或人的表皮黑色素細胞獲得高轉(zhuǎn)染效率，為皮膚學在基礎和臨床研究提供了很多新的機會，如研究纖維癥和傷口愈合，軟骨細胞基因的過度表達會加深對骨關節(jié)炎機理的理解?？傊?，Nucleofector 轉(zhuǎn)染技術大大促進了皮膚很軟骨細胞治療操作的進展，在將來的基因治療中充滿前景。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：Human Dermal F

7、ibroblasts（轉(zhuǎn)染率>70）、NHEMs。腫瘤研究惡性癌變是基因紊亂導致的不可調(diào)控的細胞無限生長。Nucleofector 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染法主要針對正常的原代細胞和其他惡性細胞系等，因此，它可以用于腫瘤分析中基因突變的分析。并且和其他方法相比，轉(zhuǎn)染基因的表達僅在2-4小時就能檢測到（如，肝細胞瘤細胞系HepG2的轉(zhuǎn)染），而其他方法需要等到24-48小花似，所以，Nucleofector 加速了實驗的進程。在惡性疾病的治療中，基因轉(zhuǎn)染將有助于高效的、有針對性的和安全抗癌的治療方法的產(chǎn)生。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：HUVECs、NHEms、Human Dendritic C

8、ells、Commonly used cellline（CHO-K1（ATCC）、CHO-K1（DSMZ）、COS-7（DSMZ）、HEK293（ATCC）、293HEK（DSMZ）、HeLa（DSMZ）、HepG2（ATCC）、NIH3T3（DSMZ）。神經(jīng)生物學在大多數(shù)情況下，將基因轉(zhuǎn)染進入有絲分裂后期的神經(jīng)細胞（如原核腦皮層核海馬趾神經(jīng)細胞）被證實是無效的。其他轉(zhuǎn)染方法如磷脂鈣/DNA共沉淀法、陽離子脂質(zhì)體法或顯微注射法等對神經(jīng)細胞都是有毒的，他們通常導致被轉(zhuǎn)染的細胞存活率不到10。經(jīng)改良后的病毒轉(zhuǎn)染法，如腺病毒核Semilki forest病毒具有較高的轉(zhuǎn)染率，單病毒載體的構建是耗時的、并且伴有不安全的擔憂，病毒感染有可能感染蛋白質(zhì)的合成，更有甚者，由于病毒轉(zhuǎn)導后蛋白表達的水平太高，可能導致不正常的蛋白定位等錯誤的信息出現(xiàn)。應用Nucleofector 技術，質(zhì)?；蚬押塑针目梢杂行У剞D(zhuǎn)移到原代神經(jīng)細胞和細胞系中，轉(zhuǎn)染后在很短時間內(nèi)就有蛋白質(zhì)地表達。更重要的是，蛋白質(zhì)表達的水平受轉(zhuǎn)入的DNA量的影響。目前，神經(jīng)干細胞和星細胞等的實驗方案正在開發(fā)中。Nucleofecor 技術高轉(zhuǎn)染率和高