生物技術(shù)制藥試題(打印版)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上生物技術(shù)制藥試題1. 生物技術(shù)制藥:生物技術(shù)制藥是指運用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進行藥物制造的技術(shù)。2. 基因表達:基因表達(gene expression)是指細胞在生命過程中,把儲存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子.生物體內(nèi)的各種功能蛋白質(zhì)和酶都是同相應(yīng)的結(jié)構(gòu)基因編碼的。3. 質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定:通常將質(zhì)粒不穩(wěn)定性分為兩類:一類是結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性,也就是質(zhì)粒由于堿基突變、缺失、插入等引起的遺傳信息變化;另一類是分離

2、不穩(wěn)定性,指在細胞分裂過程中質(zhì)粒不能分配到子代細胞中,從而使部分子代細胞不帶質(zhì)粒(即P-細胞)。在連續(xù)和分批培養(yǎng)過程中均能觀察到此兩類現(xiàn)象發(fā)生。一般情況下具有質(zhì)粒的細胞(即P細胞)需要合成較多的DNA、RNA和蛋白質(zhì),因此其比生長速率低于P-細胞,從而P-細胞一旦形成能較快速地生長繁殖并占據(jù)培養(yǎng)物中的大多數(shù)。4. 補料分批培養(yǎng):發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長，達到一定的菌絲濃度，又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此，發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外，還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總

3、的碳源、氮源、磷源等的濃度太高，或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時，則可考慮培養(yǎng)基用分批補料來加以滿足。5. 人-鼠嵌合抗體:嵌合抗體（ chimeric atibody ）是最早制備成功的基因工程抗體。它是由鼠源性抗體的 V 區(qū)基因與人抗體的 C 區(qū)基因拼接為嵌合基因，然后插入載體，轉(zhuǎn)染骨髓瘤組織表達的抗體分子。因其減少了鼠源成分，從而降低了鼠源性抗體引起的不良反應(yīng)，并有助于提高療效。6. 懸浮培養(yǎng):非貼壁依賴性細胞的一種培養(yǎng)方式。細胞懸浮于培養(yǎng)基中生長或維持。某些貼壁依賴性細胞經(jīng)過適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng)。增加懸浮培養(yǎng)規(guī)模相對比較簡單，只要增加體積就可以子。深度超過5mm，需要攪

4、動培養(yǎng)基，超過10cm，還需要深層通入CO2和空氣，以保證足夠的氣體交換。通過振蕩或轉(zhuǎn)動裝置使細胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)的培養(yǎng)方法。7. 貼壁培養(yǎng):也稱為細胞貼壁，貼壁后的細胞呈單層生長，所以此法又叫單層細胞培養(yǎng)。大多數(shù)哺乳動物細胞的培養(yǎng)必須采用這種方法。8. 固定化酶:不溶于水的酶。是用物理的或化學(xué)的方法使酶與水不溶性大分子載體結(jié)合或把酶包埋在水不溶性凝膠或半透膜的微囊體中制成的。酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應(yīng)系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復(fù)多次使用。便于運輸和貯存，有利于自動化生產(chǎn)。9. 雙功能抗體:將識別效應(yīng)細胞的抗體和識別靶細胞的抗體聯(lián)結(jié)在一起，制成雙功能性抗體，稱為雙特異性抗體

5、。如由識別腫瘤抗原的抗體和識別細胞毒性免疫效應(yīng)細胞（ CTL 細胞、 NK 細胞、 LAK 細胞）表面分子的抗體（ CD3 抗體或 CD16 抗體）制成的雙特異性抗體，有利于免疫效應(yīng)細胞發(fā)揮抗腫瘤作用。10. 組織工程:應(yīng)用生命科學(xué)與工程學(xué)的原理與技術(shù)，在正確認識哺乳動物的正常及病理兩種狀態(tài)下的組織結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的基礎(chǔ)上，研究、開發(fā)用于修復(fù)、維護、促進人體各種組織或器官損傷后的功能和形態(tài)的生物替代物的一門新興學(xué)科。11.生物藥物:指包括生物制品在內(nèi)的生物體的初級和次極代謝產(chǎn)物或生物體的某一組成部分，甚至整個生物體用作診斷和治療疾病的醫(yī)藥品。12.生物制品:指用細菌疫苗制成的供預(yù)防、治療和診斷特

6、定傳染病的藥品。13.生物技術(shù)藥物:采用DNA重組技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)或其它生物新技術(shù)研制的蛋白質(zhì)、治療性抗體或核酸類藥物。14、抗體酶:具催化能力的免疫球蛋白稱為催化抗體，即抗體酶。15. 單克隆抗體:只識別一種表位(抗原決定簇)的高純度抗體，一般來自單個淋巴細胞的克隆或一個雜交瘤細胞的克隆。16. 細胞因子:在體內(nèi)或體外對效應(yīng)細胞的生長、增殖和分化起調(diào)節(jié)控制作用的一類物質(zhì)?；瘜W(xué)本質(zhì)主要是蛋白質(zhì)和多肽，許多生長因子在靶細胞上有特異性受體，如細胞生長因子和細胞生長抑制因子。17.微生物的生物轉(zhuǎn)化:指微生物對有機化合物某一特定部位（基團）的作用，使它轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)上相類似的另一種化合物。轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物不

7、是由營養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物細胞的一系列代謝過程后產(chǎn)生的，而是利用微生物細胞的酶系對底物某一特定部位進行化學(xué)反應(yīng)形成的。18. 拷貝法 主要根據(jù)抗體生成過程中抗原- 抗體互補性來設(shè)計的。19.引入法 則借助基因工程和蛋白質(zhì)工程將催化基因引入到特異抗體的抗原結(jié)合位點上，使其獲得催化功能。移動基因（movable gene）又叫轉(zhuǎn)位因子（transposable elements），可以在染色體基因組上移動，甚至可在不同染色體間躍遷，故又稱跳躍基因（jumping gene），后來稱其為insertion sequences（現(xiàn)在一般叫IS elements）?，F(xiàn)在已發(fā)現(xiàn)在細菌中存在著三種類型的轉(zhuǎn)位因子，

8、相對分子質(zhì)量小于2000bp的一般叫插入序列（IS），大于2000bp的稱為轉(zhuǎn)位子（Transposon，Tn），第三種類型為噬菌體Mu和D108。20.化學(xué)修飾法 對抗體進行化學(xué)修飾，使抗體與催化基團相連。21.誘導(dǎo)法 是利用反應(yīng)過渡態(tài)類似物為半抗原制作單克隆抗體，篩選出具高催化活性的單抗即抗體酶。22.分生組織培養(yǎng)（meristem culture）又稱生長錐培養(yǎng)，是指在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)莖端分生組織細胞。23.無性繁殖系（clone）又叫克隆，是指使用母體培養(yǎng)物反復(fù)進行繼代培養(yǎng)時，通過同種外植體而獲得越來越多的無性繁殖后代而言，如根無性系、組織無性系、懸浮培養(yǎng)物無性系等。24.突變體 細胞

9、本身發(fā)生遺傳變異或應(yīng)用誘變處理發(fā)生的遺傳變異所得的新細胞，即為突變體（mutant）。25.植物抗毒素（phytoalexins）是指在植物防御系統(tǒng)內(nèi)能對抗微生物進攻的某些次級代謝產(chǎn)物（根據(jù)其功能又稱為“后感染防御物質(zhì)”）。26.原代細胞：是直接取自動物組織、器官，經(jīng)過粉碎、消化而獲得的細胞懸液。27.二倍體細胞系：原代細胞經(jīng)過傳代、篩選、克隆，從而從多種細胞成分的組織中挑選并純化出某種具有一定特征的細胞株。28.轉(zhuǎn)化細胞系：失去了正常細胞的特點，可以無限增殖。29.天然培養(yǎng)基：在細胞培養(yǎng)的早期階段使用的培養(yǎng)基，主要為來自天然的材料如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸液以及羊水、腹水等。30.編碼

10、區(qū)是基因功能發(fā)揮的結(jié)構(gòu)基因（或稱功能基因），調(diào)控序列和啟動子起調(diào)控啟動作用，終止的非編碼區(qū)屬于調(diào)控基因。31.限制性核酸內(nèi)切酶是一類能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并由此切割雙鏈DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的核酸內(nèi)切酶。它們主要是從原核生物中分離純化出來的。32. 反義核酶 作為一種基因下向調(diào)節(jié)作用因子，在抑制一些有害基因的表達和失控基因的過度表達上發(fā)揮著重要作用。33.DNA疫苗:是指將編碼某種蛋白質(zhì)抗原的重組真核表達載體直接注射到動物體內(nèi)，使外源基因在活體內(nèi)表達，產(chǎn)生的抗原激活機體的免疫系統(tǒng)，從而誘導(dǎo)特異性的體液免疫和細胞免疫應(yīng)答。二、問答題1.、生物藥物的藥理學(xué)特性（1）、治療的針對性強

11、 細胞色素c用于治療組織缺氧所引起的一系列疾病。（2）、藥理活性高 注射用的純ATP可以直接供給機體能量。（3）、毒副作用小、營養(yǎng)價值高 蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類等生物藥物本身就直接取自體內(nèi)。（4）、生理副作用時有發(fā)生 生物體之間的種屬差異或同種生物體之間的個體差異都很大，所以用藥時會發(fā)生免疫反應(yīng)和過敏反應(yīng)。2.、生物藥物在生產(chǎn)、制備中的特殊性有哪些？（1）、原料中的有效物質(zhì)含量低：激素、酶在體內(nèi)含量極低。（2）、穩(wěn)定性差：生物藥物的分子結(jié)構(gòu)中具有特定的活性部位，該部位有嚴格的空間結(jié)構(gòu)，一旦結(jié)構(gòu)破壞，生物活性也就隨著消失。酶，很多理化因素使其失活。（3）、易腐?。荷锼幬餇I養(yǎng)價值高，易染菌、腐

12、敗。生產(chǎn)過程中應(yīng)低溫、無菌。（4）、注射用藥有特殊要求：生物藥物易被腸道中的酶所分解所以多采用注射給藥，注射藥比口服藥要求更嚴格，均一性、安全性、穩(wěn)定性、有效性。理化性質(zhì)、檢驗方法、劑型、劑量、處方、儲存方式。填空題A克隆真核基因常用的方法有逆轉(zhuǎn)錄法 和化學(xué)合成法 。A將抗體轉(zhuǎn)變?yōu)槊缚赏ㄟ^誘導(dǎo)法、拷貝法、引入法 和化學(xué)修飾法 等途徑。B酶固定法中的包埋法可分為網(wǎng)格型 和 微囊型 2種A噬菌體抗體庫的表達載體系統(tǒng)為 噬菌體 、 單鏈絲狀噬菌體 和噬菌粒 。 A細胞培養(yǎng)基的三類：天然培養(yǎng)基 、 合成培養(yǎng)基 和 無血清培養(yǎng)基。鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗

13、體B微生物轉(zhuǎn)化中常用微生物有 細菌 、放線菌 和霉菌 。、 啟始復(fù)制子、多克隆位點 和標記基因。、透析 、層析 和離心 。B鼠源性單克隆抗體改造后的小分子抗體類型 人鼠嵌合抗體、改形抗體 、Fab抗體 、單鏈抗體、單域抗體 和分子識別單位 。4、蛋白質(zhì)類藥物分離提取方法有：沉淀法（鹽析、有機溶劑、等電點）；按分子大小分離（超濾、透析、層析、離心）；電荷（離子交換、層析、電泳、等電聚焦）；親和層析法（酶與底物、抗原與抗體、激素與受體）。5、氨基酸類藥物的分離純化方法 氨基酸的生產(chǎn)：蛋白質(zhì)水解，鹽酸水解迅速、完全，色氨酸被破壞，絲氨酸部分破壞；堿水解易產(chǎn)生消旋作用；酶水解不完全。發(fā)酵法，從發(fā)酵液中

14、提取。和學(xué)合成與酶促合成法，化學(xué)合成產(chǎn)物混旋需拆分，酶促合成效果較好。分離方法：沉淀法（溶解度差異），吸附法（吸附能力差異），離子交換法（所帶電荷不同）。6、動物核酸類藥物主要種類和用途 DNA：能改善機體虛弱疲勞、與細胞毒藥物合用可提高細胞毒藥物對癌細胞的選擇性作用，與紅霉素合用，可降低毒性、提高療效；RNA：口服可用于精神遲緩、記憶衰退、動脈硬化性癡呆、靜注用于刺激造血和促進白細胞生成、治療慢性肝炎、肝硬化和初期癌癥；輔酶A用于動脈硬化、白細胞、血小板減少，肝、腎病等；ATP：用于心力衰竭、心肌炎、心肌梗死、腦動脈和冠狀動脈硬化、急性脊髓灰質(zhì)炎、肌肉萎縮、慢性肝炎等。7、試述微生物的生物轉(zhuǎn)

15、化及其特點 微生物的生物轉(zhuǎn)化是指微生物對有機化合物某一特定部位（基團）的作用，使它轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)上相類似的另一種化合物。轉(zhuǎn)化的產(chǎn)物不是由營養(yǎng)物質(zhì)經(jīng)微生物細胞的一系列代謝過程后產(chǎn)生的，而是利用微生物細胞的酶系對底物某一特定部位進行化學(xué)反應(yīng)形成的。 生物轉(zhuǎn)化的特點：專一性，底物及產(chǎn)物空間結(jié)構(gòu)專一；產(chǎn)量高，一個酶促反應(yīng)可代替幾個化學(xué)反應(yīng)，收率高；反應(yīng)條件溫和，常溫常壓，可改善工人勞動條件，避免減少使用強酸、強堿或有毒物質(zhì)；可進行化學(xué)法難以進行的反應(yīng)。8、基因工程技術(shù)生產(chǎn)藥物的優(yōu)點是什么？1、大量生產(chǎn)過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽，為臨床使用提供有效的保障；2、可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質(zhì)，以便對其生

16、理、生化和結(jié)構(gòu)進行深入的研究，從而擴大這些物質(zhì)的應(yīng)用范圍；3、可以發(fā)現(xiàn)、挖掘更多的內(nèi)源性生理活性物質(zhì)；4、內(nèi)源生理活性物質(zhì)在作為藥物使用時存在的不足之處，可通過基因工程和蛋白質(zhì)工程進行改造和去除；5、可獲得新型化合物，擴大藥物篩選來源。9、基因工程藥物生產(chǎn)的基本過程是什么？基因工程技術(shù)就是將重組對象的目的基因插入載體，拼接后轉(zhuǎn)入新的宿主細胞，構(gòu)建成工程菌，實現(xiàn)遺傳物質(zhì)的重新組合，并使目的基因在工程菌內(nèi)進行復(fù)制和表達的技術(shù)?；蚬こ趟幬镏圃斓闹饕绦蚴牵耗康幕虻目寺?；構(gòu)建DNA重組體；將DNA重組體轉(zhuǎn)入宿主菌構(gòu)建工程菌；工程菌的發(fā)酵；外源基因表達產(chǎn)物的分離純化；產(chǎn)品的檢驗等。 通常將基因工程藥

17、物的生產(chǎn)分為上游和下游技術(shù)。上游階段是研究開發(fā)必不可少的基礎(chǔ)，它主要是分離目的基因，構(gòu)建工程菌，主要在實驗室完成。下游階段是從工程菌的大規(guī)模培養(yǎng)到產(chǎn)品的分離純化、質(zhì)量控制，該階段是將實驗室成果產(chǎn)業(yè)化、商品化。10、克隆真核基因常用的方法有哪幾種？克隆真核基因常用的方法有逆轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。一、逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法就是先分離純化目的基因的mRNA，再反轉(zhuǎn)錄成互補DNA，然后進行互補DNA的克隆表達。從產(chǎn)生該蛋白質(zhì)的真核細胞中提取mRNA，以其為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下，反轉(zhuǎn)錄合成該蛋白質(zhì)mRNA的互補DNA，再以互補DNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶或DNA聚合酶作用下，最終合成編碼該蛋白質(zhì)的雙鏈DNA序列

18、，該序列不含內(nèi)含子。1、mRNA的純化 細胞內(nèi)含有三種RNA，mRNA占RNA總量的2%-5%，相對分子量大小不一致，分離也有很大的困難，但是mRNA的3末端常含有一多聚腺苷酸組成的末端，長達20-250個腺苷酸，足以吸附于寡聚胸苷酸-纖維素上，從而可以用親和層析法將mRNA從細胞總RNA上分離出來，可得到純度較高的mRNA。2、互補DNA第一鏈的合成 mRNA的3末端常含有一多聚腺苷酸序列，可用寡聚脫氧胸苷酸為引物，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，開始互補DNA的合成。在合成反應(yīng)體系中加入一種放射性標記的dNTP，在反應(yīng)中以及反應(yīng)后可通過測定放射性標記的dNTP摻入量，計算出互補DNA的合成效率，在凝膠

19、電泳后，進行放射自顯影分析產(chǎn)物的分子大小，探索最佳反應(yīng)條件。3、互補DNA第二條鏈的合成 先用堿解或核酸酶酶解的方法除去互補DNA-mRNA雜交鏈中的mRNA鏈，然后以互補DNA第一鏈為模板合成第二鏈，并用核酸酶S1專一性切除單鏈DNA。4、互補DNA克隆 載體有兩種質(zhì)粒和噬菌體，根據(jù)重組后插入的互補DNA是否能夠表達、能否經(jīng)轉(zhuǎn)錄和翻譯合成蛋白質(zhì)，又將載體分為表達型載體和非表達型載體?；パaDNA插入片段小于10千堿基對，可選用質(zhì)粒載體，如大于10千堿基對則選用噬菌體作為載體。二、化學(xué)合成法 較小的蛋白質(zhì)或多肽的編碼基因可以采用人工化學(xué)合成法合成，其先決條件是已知目的基因的核苷酸序列，或已知蛋白

20、質(zhì)的氨基酸序列，按相應(yīng)的密碼子推導(dǎo)出DNA的堿基序列。用化學(xué)方法合成目的基因不同部位的兩條鏈的寡核苷酸短片段，再退火成為兩端形成粘末端的DNA雙鏈片段，然后將這些雙鏈片段按正確的次序進行退火使連接成較長的DNA片段，再用連接酶連接成完整的基因。 人工化學(xué)合成的限制：1、不能合成太長的基因，50-60個堿基對；2、人工合成堿基對時，遺傳密碼的簡并會為選擇密碼子帶來很大的困難；3、費用較高。11、固定化酶及固定化酶的特點：酶類可粗分為天然酶和修飾酶，固定化酶屬于修飾酶，修飾酶類還包括經(jīng)過化學(xué)修飾的酶和用分子生物學(xué)方法在分子水平上進行改良的酶等。固定化酶最大特點是既具有生物催化劑的功能，又具有固相催

21、化劑的特性。固相酶還具有以下優(yōu)點：可多次使用，而且在多數(shù)情況下，酶的穩(wěn)定性提高。如固定化的葡萄糖異構(gòu)酶可以在6065條件下連續(xù)使用超過1000h；反應(yīng)后，酶與底物和產(chǎn)物易于分開，產(chǎn)物中無殘留酶，易于純化，產(chǎn)品質(zhì)量高；反應(yīng)條件易于控制，可實現(xiàn)轉(zhuǎn)化反應(yīng)的連續(xù)化和自動控制；酶的利用效率高，單位酶催化的底物量增加，用酶量減少；比水溶性酶更適合于多酶反應(yīng)。12、酶反應(yīng)器操作條件及應(yīng)用的注意事項酶操作條件底物濃度 、酶濃度、溫度、PH、反應(yīng)液的混合與流動.注意事項酶 保持酶反應(yīng)器操作的穩(wěn)定性 保持反應(yīng)器中流體的流動方式和狀態(tài) 防止酶的變性失活 防止微生物的污染13、兩相法培養(yǎng)系統(tǒng)必須滿足如下條件：添加的固

22、相（如樹脂）或液相對細胞無毒害作用，不影響細胞生長和產(chǎn)物的合成； 產(chǎn)物易被固相吸附或被有機相溶解；兩相易分離；如為固相，不可吸附培養(yǎng)基中的添加成分，如植物生長調(diào)節(jié)劑、有機成分等。14、體外培養(yǎng)細胞培養(yǎng)的基本條件：（1）絕對無菌操作；（2）足夠的營養(yǎng)供應(yīng)，排除有害物質(zhì)包括極其微量的離子摻入；（3）適量氧氣供應(yīng)；（4）隨時清除細胞代謝中產(chǎn)生的有害產(chǎn)物；（5）有良好的適于生存外界環(huán)境，包括pH、滲透壓和離子濃度等；（6）及時分種，保持合適的細胞密度。15、無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點如下：提高了細胞培養(yǎng)的可重復(fù)性，避免，避免了由于血清批之間差異的影響；減少了由血清帶來的病毒、真菌和支原體等微生物污染的危險；供

23、應(yīng)充足、穩(wěn)定；細胞產(chǎn)品容易純化；避免了血清中某些因素對有些細胞的毒性；減少了血清中蛋白對某些生物測定的干擾，便于實驗結(jié)果的分析。核酸藥物可分為1反義核酸、2核酶、3脫氧核酶、4抗基因寡核苷酸5裸DNA疫苗6基因藥物。10.抗體藥物的特點1 2多樣性3 定向性11.動物細胞培養(yǎng)的條件2PH值3通氧量4防止污染 質(zhì)粒以三種形式存在： 和 線狀雙螺旋。2動物細胞對生長基質(zhì)的依賴性，可分為貼壁依賴性細胞 非貼壁依賴性細胞 兼性貼壁細胞生物藥物的結(jié)構(gòu)分類不包括( )A氨基酸及其衍生物類藥物 B細胞生長因子 C 化學(xué)合成制品 D酶和輔酶類藥物 生物藥物的結(jié)構(gòu)分類不包括( ) 。A糖類藥物 B多肽和蛋白質(zhì)類

24、藥物 C脂類藥物 D 化學(xué)合成制品不屬于抗體酶的催化反應(yīng)類型的是（ ）。A 轉(zhuǎn)?；磻?yīng) B 聚合反應(yīng) C Claisen重排反應(yīng) D 水解反應(yīng)不屬于抗體酶的催化反應(yīng)類型的是（ ）。A 聚合反應(yīng) B 氧化還原反應(yīng) C 順反異構(gòu)化反應(yīng) D 光誘導(dǎo)反應(yīng)不屬于基因來源抗體文庫的是（ ）。A天然抗體文庫 B免疫后抗體文庫 C半合成抗體文庫 D修飾抗體庫基因工程的單元操作順序是（ ）。酶切，連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗證 酶切，轉(zhuǎn)化，連接，篩選，驗證連接，轉(zhuǎn)化，篩選，驗證，酶切 驗證，酶切，連接，篩選，轉(zhuǎn)化cDNA第一鏈合成所需的引物是（ ）。PolyA PolyC PolyG PolyT鳥槍法克隆目的基因的戰(zhàn)略

25、適用于（ ）。原核細菌 酵母菌 絲狀真菌 植物cDNA法獲得目的基因的優(yōu)點是（ ）。成功率高 不含內(nèi)含子 能糾正密碼子的偏愛性 表達產(chǎn)物可以分泌 分子雜交的化學(xué)原理是形成（ ）。共價鍵 離子鍵 氫鍵 配位鍵若某質(zhì)粒帶有l(wèi)acZ標記基因，那么與之相匹配的篩選方法是在篩選培養(yǎng)基中加入( )。 半乳糖 葡萄糖 蔗糖 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）。 為了減輕工程菌的代謝負荷，提高外源基因的表達水平，可以采取的措施有（ ）。A將宿主細胞生長和外源基因的表達分成兩個階段。B在宿主細胞快速生長的同時誘導(dǎo)基因表達。C降低培養(yǎng)基中的PH值。D當宿主細胞快速生長時誘導(dǎo)重組質(zhì)粒的復(fù)制不

26、能進行微生物轉(zhuǎn)化的是( )。A 細菌 B 病毒 C霉菌 D放線菌菌體生長所需能量（ ）菌體有氧代謝所能提供的能量時，菌體往往會產(chǎn)生代謝副產(chǎn)物乙酸。A大于 B等于 C小于 D 未知促紅細胞生長素（EPO）基因能在大腸桿菌中表達，但卻不能用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細胞生長素，這是因為（ ）人的促紅細胞生長素對大腸桿菌有毒性作用人的促紅細胞生長素基因在大腸桿菌中極不穩(wěn)定大腸桿菌內(nèi)毒素與人的促紅細胞生長素特異性結(jié)合并使其滅活大腸桿菌不能使人的促紅細胞生長素糖基化三、判斷對錯PCR是聚合酶鏈式反應(yīng)法的縮寫（ ）電刺激不能使細胞融合（ ）質(zhì)粒不具有自主復(fù)制能力。（ ）單克隆抗體就是單鏈抗體（ ）外

27、源基因的高效表達會影響宿主細胞正常的生長代謝。（ ）熒光素可以作為免疫診斷試劑的標記物（ ）抗體中結(jié)合抗原的部位分布在恒定區(qū)（ ）透析時，若樣品液中鹽濃度較高，透析袋所留空隙要大一些，防止透析袋脹破。（ ） 酶的固定化過程中需要使用載體.（ ）因為毒素毒性較大，所以免疫毒素不能用來治療疾?。?）生物技術(shù)制藥試卷C答案1. 生物技術(shù)制藥:生物技術(shù)制藥是指運用微生物學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)等的研究成果，從生物體、生物組織、細胞、體液等，綜合利用微生物學(xué)、化學(xué)、生物化學(xué)、生物技術(shù)、藥學(xué)等科學(xué)的原理和方法進行藥物制造的技術(shù)。2. 基因表達:基因表達(gene expression)是指細胞在生命過程

28、中,把儲存在DNA順序中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯,轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子.生物體內(nèi)的各種功能蛋白質(zhì)和酶都是同相應(yīng)的結(jié)構(gòu)基因編碼的。3. 質(zhì)粒的分裂不穩(wěn)定:通常將質(zhì)粒不穩(wěn)定性分為兩類:一類是結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定性,也就是質(zhì)粒由于堿基突變、缺失、插入等引起的遺傳信息變化;另一類是分離不穩(wěn)定性,指在細胞分裂過程中質(zhì)粒不能分配到子代細胞中,從而使部分子代細胞不帶質(zhì)粒(即P-細胞)。在連續(xù)和分批培養(yǎng)過程中均能觀察到此兩類現(xiàn)象發(fā)生。一般情況下具有質(zhì)粒的細胞(即P細胞)需要合成較多的DNA、RNA和蛋白質(zhì),因此其比生長速率低于P-細胞,從而P-細胞一旦形成能較快速地生長繁殖并占據(jù)培養(yǎng)物中的大多數(shù)。4. 補料分批培養(yǎng):發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)基是供菌種生長、繁殖和合成產(chǎn)物之用。它既要使種子接種后能迅速生長，達到一定的菌絲濃度，又要使長好的菌體能迅速合成需產(chǎn)物。因此，發(fā)酵培養(yǎng)基的組成除有菌體生長所必需的元素和化合物外，還要有產(chǎn)物所需的特定元素、前體和促進劑等。但若因生長和生物合成產(chǎn)物需要的總的碳源、氮源、磷源等的濃度太高，或生長和合成兩階段各需的最佳條件要求不同時，則可考慮培養(yǎng)基用分批補料來加以滿足。5. 人-鼠嵌合抗體:嵌合抗體（ chimeric atibody ）是最早制備成功