藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)講義

1、生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí) 驗(yàn) 講 義湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)技能教學(xué)實(shí)驗(yàn)中心二O一O年五月目 錄1前言-2頁(yè)2. 實(shí)驗(yàn)一 固體制劑體外溶出度測(cè)定-34頁(yè)3. 實(shí)驗(yàn)二 血藥濃度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的生物利用度等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)-57頁(yè)前 言 生物藥劑學(xué)與藥代動(dòng)力學(xué)是藥學(xué)專業(yè)的一門專業(yè)課程，主要研究藥物制劑的評(píng)價(jià)方法及藥物的體內(nèi)過(guò)程。生物藥劑學(xué)與藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)是本課程的重要組成部分，實(shí)驗(yàn)中不僅將應(yīng)用到本課程的理論知識(shí)，而且將貫通藥動(dòng)學(xué)、藥劑學(xué)、分析化學(xué)、體內(nèi)藥物分析等課程，并使用UV、HPLC等現(xiàn)代分析儀器。 為了達(dá)到本實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的，要求學(xué)生上實(shí)驗(yàn)課前，必須認(rèn)真預(yù)習(xí)，明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，了解?shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法，并結(jié)合課

2、堂教學(xué)明白實(shí)驗(yàn)的基本原理。實(shí)驗(yàn)中要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和實(shí)事求是的作風(fēng)，嚴(yán)格操作，正確使用儀器，詳細(xì)做好實(shí)驗(yàn)記錄。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不得任意涂改，實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求書(shū)寫正確整潔。實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度，注意安全，保持實(shí)驗(yàn)臺(tái)面整潔及室內(nèi)衛(wèi)生。本實(shí)驗(yàn)講義主要參考華西醫(yī)科大學(xué)臨床藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)講義、中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系生物藥劑學(xué)與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)講義及北京醫(yī)科大學(xué)生物藥劑與藥物動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)講義編寫，在此對(duì)兩所學(xué)校的老師們表示感謝。由于時(shí)間倉(cāng)促，錯(cuò)誤及遺漏之處在所難免敬請(qǐng)批評(píng)指正。實(shí)驗(yàn)一 固體制劑體外溶出度測(cè)定一目的要求1掌握固體制劑（片劑 丸劑 膠囊劑等）溶出度的測(cè)定原理、方法與數(shù)據(jù)處理。2熟悉溶出度測(cè)定的意義，

3、溶出度測(cè)定儀的使用方法。3了解溶出儀的基本構(gòu)造與性能。二實(shí)驗(yàn)提要1 溶出度系指在規(guī)定介質(zhì)中藥物從片劑或膠囊等固體制劑中溶出的速度和程度。崩解（或溶散）度無(wú)法反映崩散后微細(xì)顆粒的再分散和溶解過(guò)程。當(dāng)溶解過(guò)程為影響吸收的主要限速過(guò)程時(shí)，崩解（或溶散）時(shí)限往往不能作為判斷藥物制劑的吸收的指標(biāo)。固體制劑的溶出度測(cè)定法是一種較簡(jiǎn)便的體外試驗(yàn)法，對(duì)主藥成分不易從制劑中釋放，久貯后變?yōu)殡y溶物，在消化液中溶解緩慢，與其他成分共存易發(fā)生化學(xué)變化的藥物，以及治療劑量與中毒劑量接近的藥物，均應(yīng)作溶出度檢查。凡檢查溶出度的制劑，不再進(jìn)行崩解（或容散）時(shí)限檢查。2 溶出度的測(cè)定原理為Noyes-Whitney方程：dc

4、/dt=ks(Cs-Ct) 式中：dc/dt為溶出速度；k為溶出速度常數(shù)；s為固體藥物表面積；Cs為藥物的飽和溶液濃度；Ct為t時(shí)的藥物濃度。試驗(yàn)中，溶出介質(zhì)的量必須遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)使藥物飽和的介質(zhì)所需要的量。一般至少為使藥物飽和時(shí)介質(zhì)用量的510倍?，F(xiàn)行中國(guó)藥典溶出度測(cè)定方法有轉(zhuǎn)藍(lán)法和槳法，并對(duì)裝置的結(jié)構(gòu)和要求作了具體的規(guī)定。通常以固體制劑中主藥溶出一定量所需時(shí)間或規(guī)定時(shí)間內(nèi)主藥溶出百分?jǐn)?shù)作為制劑質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)。中國(guó)藥典規(guī)定，除有特殊規(guī)定外，固體制劑在45分鐘時(shí)的溶出度必須達(dá)到70%。3. 本實(shí)驗(yàn)以阿斯匹林片為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用槳法測(cè)定阿司匹林的溶出度。三實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1 比較E值的測(cè)定 取阿司匹林10片，精密

5、稱定，計(jì)算出平均片重（）。將稱定的片劑研細(xì)，再精密取相當(dāng)于的量，置1000ml容量瓶中，加入人工胃液（0.1mol/L鹽酸）至刻度，混勻，于水浴上37放置1小時(shí)，每隔10分鐘振搖1次。冷至室溫，濾過(guò)。精密吸取濾液4ml置10ml容量瓶中加0.5mol/L氫氧化鈉液0.7ml，加蒸餾水3ml置沸水浴中煮沸5分鐘，取出冷卻，加0.25mol/L鹽酸6滴，搖勻，加三氯化鐵試液（人工胃液配制）0.3ml，加蒸餾水至刻度，搖勻，于UV-9200分光光度計(jì)上540nm波長(zhǎng)處測(cè)吸收度E值。 (已經(jīng)測(cè)得藥片平均片重= 0.365g E=0.262 )2 樣品Ei值的測(cè)定 取人工胃液（0.1mol/L鹽酸）10

6、00ml，經(jīng)15分鐘超聲脫氣后，倒入貯液杯中，調(diào)節(jié)溫度在370.5，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速每分鐘100轉(zhuǎn)，將精密稱定的藥片一片（W）放入貯液杯內(nèi)，從人工胃液接觸藥片開(kāi)始計(jì)時(shí)，在45分鐘時(shí)取樣5ml置于10ml小量筒中，再將所取樣液用移液管精密量取4ml置于10ml容量瓶中，余按比較值測(cè)定項(xiàng)下，自“加0.5mol/L氫氧化鈉液0.7ml”起依法測(cè)定，得藥片溶出的Ei值。四實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理1 計(jì)算：E=W/×E 溶出百分率=Ei/E×100%2 結(jié)論：根據(jù)結(jié)果判斷該藥片的溶出是否符合規(guī)定？五思考題1固體制劑進(jìn)行溶出度測(cè)定有和意義？哪些藥物應(yīng)進(jìn)行溶出度測(cè)定？2影響溶出度測(cè)定結(jié)果的因素有哪些？實(shí)驗(yàn)二

7、 血藥濃度法測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚片的生物利用度等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)并掌握血藥濃度法測(cè)定片劑生物利用度等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的方法。實(shí)驗(yàn)材料 1儀器： 2十萬(wàn)分之一分析天平，紫外分光光度計(jì)，離心機(jī)。 容量瓶1000ml 1個(gè)；具塞離心管10ml10支；20ml 24支：刻度吸管0.5ml 1支；lml 12支；5ml 3支；玻璃漏斗(直徑34cm)10個(gè)。 其他：濾紙、試管架、刀片、塑料夾、酒精棉球、脫脂棉、注射器、注射針頭、兔盒等。 2試劑： 對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品。 0.06mol/L氫氧化鋇溶液：取分析純或化學(xué)純氫氧化鋇19克，加新鮮煮沸放冷的蒸餾水溶解成1000ml。靜置過(guò)夜，過(guò)濾即得。 2硫酸鋅溶

8、液：取分析純硫酸鋅20克，加蒸餾水溶解成1000ml即得。 3藥品： 對(duì)乙酰氨基酚片實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1家兔空白血的采集 取體重3kg左右家兔一只，耳緣動(dòng)脈取血或心臟取血2080ml，于20 ml具塞離心管中，室溫靜置四小時(shí)以上或37水浴中保溫12小時(shí)。離心(2500轉(zhuǎn)/分)15分，取血清供標(biāo)準(zhǔn)曲線制備用。 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密稱取對(duì)乙酰氨基酚對(duì)照品50mg，置100ml容量瓶中，以蒸餾水溶解，并添加至刻度，搖勻，精密吸取10ml于50m1溶量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，即成100ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別吸取下表所列體積置于20ml具塞試管中，分別加適量蒸餾水使成10ml，然后各加上述血清1ml

9、混勻，再各加0.06mol/L氫氧化鋇4.5ml混勻，放置2分鐘，再分別加2硫酸鋅溶液4.5ml，即出現(xiàn)明顯乳狀渾濁，用雙層濾紙過(guò)濾。去初濾液，收集續(xù)濾液于20 ml干燥具塞試管中，以試藥加空白血清作空白對(duì)照，在紫外分光光度計(jì)上于245nm處測(cè)定吸收度(A)，以吸收度(A)對(duì)血清藥物濃度(C)進(jìn)行線性回歸，結(jié)果記錄于表1。表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果管 號(hào)空白123456標(biāo)準(zhǔn)液取量（ml）00.51.01.52.02.53.0含藥量（g）050100150200250300H2O（ml）109.59.08.58.07.57.0血清（ml）1.01.01.01.01.01.01.00.06mol/LB

10、a（OH）2（ml）4.54.54.54.54.54.54.52%ZnSO4（ml）4.54.54.54.54.54.54.5A值0.0000.1690.3330.4950.6400.8061.006線性回歸方程A=0.003285C-0.000035713家兔體內(nèi)血藥濃度的測(cè)定血樣品的采集：取體重3kg左右的健康家兔一只，實(shí)驗(yàn)先天下午禁食，實(shí)驗(yàn)當(dāng)日晨耳靜脈取血4ml，作為空白，然后即喂食對(duì)乙酰氨基酚片，劑量為500mg/3kg，在給藥后0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、10小時(shí)耳靜脈采血4ml，供測(cè)定血藥濃度用，喂藥四小時(shí)后可以給食，采血時(shí)間見(jiàn)表2。血藥濃度測(cè)定：將采用的血樣按前空白

11、血處理方法處理后，小心吸取血清1ml，加蒸餾水10ml，余下按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備中“再各加0.06mol/L氫氧化鋇溶液4.5ml”起進(jìn)行操作，將吸收值A(chǔ)代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算出血藥濃度。結(jié)果記于表2。表2 血藥濃度測(cè)定結(jié)果兔重： kg 給藥量： mg 給藥時(shí)間：8:00編號(hào)空白123456789時(shí)間（hr）00.250.511.523457采血時(shí)間測(cè)定結(jié)果A值00.1010.3960.6490.6360.5160.4630.3380.2100.092血藥濃度（g/ml）LgC實(shí)驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)處理1藥時(shí)曲線的繪制：用表2的濃度C對(duì)時(shí)間t作圖，即得藥時(shí)曲線圖。2消除速率常數(shù)K的求算：文獻(xiàn)報(bào)道對(duì)乙酰氨基酚的體內(nèi)過(guò)程系一室模型，血管外給藥一室模型動(dòng)力學(xué)方程為：C=A（e-kt-e-kat）這里A=通常Ka>K，當(dāng)t充分大的式中e-Kat<<e-kt而可忽略，故式可改寫為：式兩端取對(duì)數(shù)：C=Ae-kt lgC=lgA-0.4343kt 用藥時(shí)曲線中尾部近似于直線上的3點(diǎn)，即尾數(shù)數(shù)據(jù)，代入式作直線回歸，求出系數(shù)：a、b，則： K=-2.303b