老年癡呆動(dòng)物模型

1、.老年癡呆動(dòng)物模型老年癡呆動(dòng)物模型小組成員：*.老年癡呆癥簡(jiǎn)介老年癡呆癥簡(jiǎn)介 所謂老年癡呆癥，又稱阿爾茨海默(Alzheimers disease,AD)， 是發(fā)生在老年期及老年前期的一種原發(fā)性退行性腦病，指的是一種持續(xù)性高級(jí)神經(jīng)功能活動(dòng)障礙，即在沒(méi)有意識(shí)障礙的狀態(tài)下，記憶、思維、分析判斷、視空間辨認(rèn)、情緒等方面的障礙。 疾病類型：1、血管性癡呆癥，這類型的癡呆癥多為血管病變所導(dǎo)致 2、腦神經(jīng)細(xì)胞退化性的癡呆癥 .v其特征性病理變化：為大腦皮層萎縮，并伴有-淀粉樣蛋白 (-amyloid,-AP) 沉積，神經(jīng)原纖維纏結(jié) (neurofibrillary tangles , NFT) ，大量記憶

2、性神經(jīng)元數(shù)目減少，以及老年斑 (senileplaque,SP) 的形成。v以下介紹老年癡呆小 鼠模型.v建模目的：建立老年癡呆(AD)小鼠模型,用于AD及其治療藥物的研究。v所需材料：NIH小鼠，蛋白定量(雙縮脲法)測(cè)定試劑盒、乙酰膽堿酯酶(AchE)活性測(cè)定試劑盒和超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定試劑盒、D2半乳糖(生化試劑)、亞硝酸鈉(分析純)v建模方法：選用NIH小鼠,腹腔注射D2半乳糖120mg 和亞硝酸鈉90mg ,每天1次,連續(xù)60d,制備老年癡呆動(dòng)物模型。通過(guò)水迷宮試驗(yàn),腦組織勻漿蛋白質(zhì)含量、乙酰膽堿酯酶(AchE).v和超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定,腦組織病理切片HE染

3、色和剛果紅染色,比較老年癡呆模型小鼠和正常小鼠的差異。v 建模步驟：1、雌性NIH小鼠40只,2024g, 每組20只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組和AD模型組。造模方法為:小鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg/kg和亞硝酸鈉90mg/kg,連續(xù)60d;空白對(duì)照組腹腔注射等體積生理鹽水。.v2、水迷宮試驗(yàn)：自動(dòng)記錄水迷宮裝置為80cm50cm20cm的茶色有機(jī)玻璃槽(中國(guó)醫(yī)科院藥物所研制),內(nèi)設(shè)起點(diǎn)、終點(diǎn)(臺(tái)階)和多處盲端,水深9cm,水溫2427,記錄小鼠從起始點(diǎn)放入至找到臺(tái)階的時(shí)間(尋找潛伏期),若超過(guò)120s則以120s計(jì)。 給藥完畢后第1天,各組小鼠進(jìn)行訓(xùn)練,使其找到臺(tái)階;第24天加長(zhǎng)路程,記錄

4、各組小鼠的尋找潛伏期。 .v3、腦內(nèi)相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定：行為學(xué)試驗(yàn)結(jié)束后,每組取10只 小鼠禁食12h,斷頭處死,取全腦(嗅腦除外),置玻璃勻漿器 中,加入預(yù)冷生理鹽水制成10%(g/ml)腦勻漿,3000r/min離心10min,取上清液置冰浴中,測(cè)定蛋白含量和AchE、SOD活性,按試劑盒說(shuō)明書所述步驟操作,取樣量均為50mlv4、病理檢查：各組余下小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉60mg/kg麻醉,仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上,剪開胸腔,暴露心臟,用生理鹽 水和4%多聚甲醛進(jìn)行心臟灌注固定,至四肢僵直為止,取全腦和. 頰部皮膚組織置4%多聚甲醛溶液中固定24h,石蠟包埋切片,常規(guī)HE染色和剛果紅染色。 （統(tǒng)計(jì)方法：數(shù)據(jù)以平均值標(biāo)準(zhǔn)差表示,使用SPSS810 統(tǒng)計(jì)軟件處理,用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析) 預(yù)防措施：1、改善勞動(dòng)環(huán)境 2、忌酒和戒煙 3、保持精神愉快利于長(zhǎng)壽及精神健康 4、飲食調(diào)節(jié):既要防止高脂食物引起膽固醇升高，又要攝取必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 5、積極用腦，預(yù)防腦力衰退 6、避免過(guò)于深沉、消極、唉