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文檔簡介

1、實驗一 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定教學(xué)目的初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。實驗原理 1可溶性還原糖+斐林試劑à(淺藍(lán)-棕-)磚紅色沉淀呈色反應(yīng) 2脂肪+蘇丹染液à橘黃色(+蘇丹染液à紅色) 3蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑à紫色反應(yīng)實驗程序一、可溶性還原糖的鑒定選材:含糖類較高、白色或近于白色的植物組織。 制漿 制備組織液 過濾(用一層紗布)取液呈色反應(yīng) (注:斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后使用)結(jié)論:可溶性還原糖與斐林試劑在加熱煮沸的過程中生成磚紅色沉淀。關(guān)鍵步驟:斐林試劑現(xiàn)用現(xiàn)配及用量。二、脂肪的鑒定取材:花生種子(浸

2、泡3-4小時)將子葉削成薄片 (1)最理想的薄片 (2)在薄片上滴2-3滴蘇丹染液(2-3min)制片 (3)去浮色(4)制成臨時裝片觀察:在低倍鏡下尋找已著色的圓形小顆粒,然后用高倍鏡觀察。結(jié)論:脂肪能被蘇丹染液染成橘黃色。關(guān)鍵步驟:子葉削成理想薄片。三、蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液:卵清或黃豆(浸泡1-2d)呈色反應(yīng)結(jié)論:蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。關(guān)鍵步驟:先加試劑A再加試劑B。實驗的注意事項1 還原性糖:分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麥芽糖。但是蔗糖不是。2 斐林試劑很不穩(wěn)定,幫應(yīng)將組成斐林試劑的甲液(01g/ml的NaOH溶液)和乙液(005g/ml的CuSO4溶液)分別

3、配制、儲存,使用時,再臨時配制,將4-5滴乙液滴入2ml甲液中,配完后立即使用。3 雙縮脲試劑的使用,應(yīng)先加試劑A(01g/ml的NaOH溶液),造成堿性的的反應(yīng)環(huán)境后,再加試劑B(001g/ml的CuSO4溶液)。否則,紫色會被Cu(OH)2的藍(lán)色遮蔽。【同類題庫】在還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中,最佳的一組實驗材料是(D)甘蔗的莖 油菜子 花生種子 梨 甜菜的塊根 豆?jié){ 雞蛋清A B C D從某生物體細(xì)胞中提取出物質(zhì)A和B,分析其化學(xué)元素組成:A中主要含有C、H、O、N等元素,B中主要含有C、H、O、N、P等元素。A與雙縮脲試劑會產(chǎn)生顏色反應(yīng),B則易被堿性染料染成深色。由此推斷:A物質(zhì)

4、是 ,B物質(zhì)是 。使用斐林試劑檢驗還原性糖的正確順序是(D)制組織樣液加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液加入0.01g/ml CuSO4溶液加入0.05g/ml CuSO4 溶液煮沸2 分鐘出現(xiàn)磚紅色沉淀A B(+)C D(+)用斐林試劑鑒定可溶性還原性糖時,溶液的顏色變化過程為(A)A淺藍(lán)色棕色磚紅色 B無色淺藍(lán)色棕色C磚紅色淺藍(lán)色棕色 D棕色綠色無色有關(guān)斐林試劑和雙縮脲試劑的說法正確的是(A)A兩者的NaOH濃度相同 B兩者的CuSO4濃度相同C實驗時只能采用課本中給定的濃度 D用兩者鑒定物質(zhì)時都不需要加熱在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中,對實驗材料的選擇,敘述錯誤

5、的是(A)A甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等,都含有較多的糖且近于白色,因此可以用于進(jìn)行可溶性還原糖的鑒定B花生種子含脂肪多且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的理想材料C大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D雞蛋清含蛋白質(zhì)多,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的動物材料鑒定脫脂奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,需用的化學(xué)試劑是(B)A斐林試劑 B蘇丹溶液 C雙縮脲試劑 D紅墨水(多選)鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,需用的化學(xué)試劑是(ABC)A斐林試劑 B蘇丹溶液 C雙縮脲試劑 D紅墨水下列能與斐林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀的是(D)葡萄糖 果糖 蔗糖 麥芽糖 淀粉 纖維素A B C D(多選)下列關(guān)于實驗操作步驟的操作

6、中,正確的是(BE)A用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B脂肪的鑒定實驗中,需用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴C鑒定可溶性還原糖時,要加入斐林試劑甲液后再加入乙液D用于蛋白質(zhì)鑒定的雙縮脲試劑A液和B液,要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,且現(xiàn)配現(xiàn)用E.實驗前最好檢測一下蔗糖溶液和葡萄糖溶液的純度下列物質(zhì)中,與雙縮脲試劑發(fā)生作用,產(chǎn)生紫色反應(yīng)最明顯的是(B)A蘋果組織樣液 B豆?jié){ C浸軟的油葵種子 D馬鈴薯組織樣液在使用斐林試劑和雙縮脲試劑來鑒定組織中還原糖和蛋白質(zhì)實驗中,兩種試劑的主要區(qū)別是(C)A 配制時所用的CuSO4NaOH溶液濃度都不相同,加入到組織樣

7、液的時間順序也不同B 配制時所用的CuSO4NaOH溶液濃度都相同,只是加入到組織樣液的時間順序不同C 配制時所用的CuSO4溶液濃度不相同,加入到組織樣液的時間順序也不同D配制時所用的NaOH溶液濃度不相同,加入到組織樣液的時間順序也不同在生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中,下列有關(guān)實驗操作步驟的敘述中,正確的是(B)A用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B脂肪的鑒定實驗中需要用顯微鏡才能看到被染成黃色的脂肪滴C鑒定可溶性還原糖時,要加入斐林試劑甲液搖勻后,再加入乙液D用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液和B液要混和均勻后,再加入含樣品的試管,且必須現(xiàn)用現(xiàn)

8、配實驗可知,在尿素溶液中加入雙縮脲試劑,也能產(chǎn)生紫色反應(yīng),根據(jù)鑒定蛋白質(zhì)的原理說明之。蛋白質(zhì)鑒定實驗中與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)的是蛋白質(zhì)分子中的肽鍵(-CO-NH-),在尿素分子中也有這樣的鍵(NH2-CO-NH2)。根據(jù)“生物組織中還原性糖的鑒定”的實驗原理,設(shè)計一個鑒定淀粉酶對淀粉具有消化作用的實驗。(實驗材料、用具俱全)(1)取兩支試管編號1、2,分別注入2ml可溶性淀粉溶液。(2)向1號試管內(nèi)加入2ml新鮮的淀粉酶溶液,2號試管內(nèi)加入2ml蒸餾水,搖勻,并恒溫水?。?7)10min。(3)分別向兩支試管中各加入2ml剛配制的斐林試劑,混勻,并沸水浴2 min,觀察溶液的顏色變化。結(jié)果:

9、1號試管內(nèi)有磚紅色沉淀,2號試管內(nèi)無磚紅色沉淀,說明淀粉酶對淀粉有消化作用。某商場所賣脫脂奶粉被壞疑為假冒偽劣產(chǎn)品。生物學(xué)研究性學(xué)習(xí)小組的同學(xué)想把調(diào)查脫脂奶粉的合格率作為研究課題,假如你是成員之一,請你鑒定真假脫脂奶粉。(1)資料收集:a全脂奶粉含有蛋白質(zhì)、脂肪和乳糖等成分,脫脂奶粉則具有高蛋白、低脂肪的特點。b假冒脫脂奶粉有兩種:一是用全脂奶粉冒充脫脂奶粉,二是用淀粉冒充。(2)鑒定是否用淀粉冒充: 。(3)鑒定是否用全脂奶粉冒充: 。(4)結(jié)果分析: 。(5)通過以上鑒定,我們并不能完全肯定是正宗的脫脂奶粉,還必須對其 含量進(jìn)行鑒定。(2)將采樣來的“脫脂奶粉”少許配成適當(dāng)濃度的溶液,向其

10、中滴加1-2滴碘液,觀察顏色變化。(3)將采樣來的“脫脂奶粉”和全脂奶粉各少許配成溶液,分別加入A、B兩試管中;向兩試管中各加入2-3滴蘇丹染液;比較A、B試管內(nèi)的顏色變化。(4)如果(2)中試管內(nèi)溶液變藍(lán)色,證明是用淀粉冒充的,不變藍(lán)則證明不是用淀粉冒充的;如果(3)中A、B兩試管橘黃色(或紅色)對比不明顯,證明是用全脂奶粉冒充;如果A試管顏色比B試管明顯淡了,則證明不是全脂奶粉冒充的。(5)蛋白質(zhì)某學(xué)生為了驗證唾液淀粉酶的特性,設(shè)計了以下6組實驗。6組試管振蕩混合后,都作了如下處理:恒溫(37)處理15分鐘;各加入2ml斐林試劑,并振蕩使之混合;再將6組試管放入沸水浴中加熱1分鐘。注:出現(xiàn)磚紅色氧化亞銅沉淀,證明有還原糖(麥芽糖、葡萄糖、果糖)存在。請回答:加入的物質(zhì) 試管號1234561%淀粉溶液2ml2ml2ml2ml2%蔗糖溶液2ml2ml稀釋的唾液1ml1ml1ml1ml蒸餾水1ml1ml1ml稀鹽酸1ml(1)幾號試管會有磚紅色沉淀出現(xiàn)?(2)1號和3號試管能否進(jìn)行對照實驗?實驗結(jié)果能證明什么?(3)若要證明唾液淀粉酶的催化活性受PH的影響,則最好選擇哪兩號試管作對照?(4)本實驗?zāi)茏C明唾液淀粉

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