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1、流式細胞術(shù)在許多研究生課題中常用到,但對其結(jié)果的分析卻不是很清楚。在此收集點相關(guān)資料并以實驗中的一張圖片為例,大家共同學(xué)習(xí)。圖中白色箭頭及尾部G1,G2,S是我用PS加上去的,方便討論。流式細胞術(shù)分析細胞周期結(jié)果示圖首先來認識下圖:1、縱坐標Cell Number:即計數(shù)到的有效細胞數(shù);2、橫坐標DNA Content:即DNA量,為什么用DNA量來區(qū)別各周期我們等下再講;3、G1、G2、S三期在上圖已經(jīng)用箭頭標示;4、右側(cè)數(shù)字含義:Mean G1=195.4即G1期DNA含量平均值為195.4;%G1=73.6即G1期細胞數(shù)占總數(shù)的73.6%;以此類推關(guān)于結(jié)果的具體分析我們會在接下來一起學(xué)習(xí)
2、討論。主要從細胞周期的角度看各參數(shù)的意義:1、細胞周期指由細胞分裂結(jié)束到下一次細胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程,所需的時間叫細胞周期時間。可分為四個階段(見圖): G1期(gap1),指從有絲分裂完成到期DNA復(fù)制之前的間隙時間; S期(synthesis phase),指DNA復(fù)制的時期; G2期(gap2),指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始之前的一段時間; M期又稱D期(mitosis or division),細胞分裂開始到結(jié)束。細胞周期圖示2、從增殖的角度來看,可將高等動物的細胞分為三類:連續(xù)分裂細胞,在細胞周期中連續(xù)運轉(zhuǎn)因而又稱為周期細胞,如表皮生發(fā)層細胞、部分骨髓細胞。休眠細胞暫不分裂,但在
3、適當?shù)拇碳は驴芍匦逻M入細胞周期,稱G0期細胞,如淋巴細胞、肝、腎細胞等。不分裂細胞,指不可逆地脫離細胞周期,不再分裂的細胞,又稱終端細胞,如神經(jīng)、肌肉、多形核細胞等等。細胞周期的時間長短與物種的細胞類型有關(guān),如:小鼠十二指腸上皮細胞的周期為10小時,人類胃上皮細胞24小時,骨髓細胞18小時,培養(yǎng)的人了成纖維 細胞18小時,CHO細胞14小時,HeLa細胞21小時。不同類型細胞的G1長短不同,是造成細胞周期差異的主要原因。3、流式細胞結(jié)果圖各參數(shù)的意義:常用的流式細胞術(shù)分析細胞周期的方法是依據(jù)細胞DNA含量(橫坐標)來分析的:G1期:細胞DNA復(fù)制還沒有開始,也是DNA含量最少的,即流式檢測結(jié)果圖的第一個峰;S 期:細胞開始復(fù)制,到完成復(fù)制,是一個一倍DNA到二倍DNA的過程,在流式結(jié)果圖中顯示期跨度特別大(第二個不高但很寬的峰);G2期:DNA復(fù)制完成至分裂的一段時間,此時細胞內(nèi)含二倍DNA,在流式結(jié)果圖中的第二個峰;M期:細胞分裂過程,此
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