HTK液對(duì)未成熟兔心肌保護(hù)作用的研究

1、HTK液對(duì)未成熟兔心肌保護(hù)作用的研究鄭宏茹 薛玉良 薛玉良 天津泰達(dá)國(guó)際心血管醫(yī)院 麻醉科 中文摘要 目的：由于未成熟心肌在結(jié)構(gòu)、功能等多方面不同于成熟心肌，因此一些對(duì)成熟心肌有良好保護(hù)作用的心臟停搏液在嬰幼兒未成熟心肌是否適宜值得探討。因目前國(guó)內(nèi)臨床上兒科心臟手術(shù)仍以傳統(tǒng)的St.ThomasII冷晶體停搏液為主，本實(shí)驗(yàn)采用離體灌注兔心模型，改良的Langendorff灌注裝置，觀察在25停跳2時(shí)條件下，St.ThomasII（STH）停搏液與Histidine- Tryptophan- Ketoglutarate（HTK）停搏液對(duì)未成熟兔心的心肌保護(hù)效果。探討長(zhǎng)時(shí)間停跳下適合于未成熟心肌的心

2、肌保護(hù)方法，為完善嬰幼兒圍術(shù)期的心肌保護(hù)提供理論依據(jù)。方法：選用24只純種新西蘭白兔，隨機(jī)分為兩組:A組(HTK幼兔組，n=12)；B組(STH幼兔組n=12)。麻醉后取出心臟，先浸入37 KreAs-Henseleit重碳酸鹽緩沖液（KH液），主動(dòng)脈略加修剪，立即連于改良Langendorff灌注裝置，以37 KH液從主動(dòng)脈開(kāi)始灌注，灌注液通以混合氣（O2:BO2=95%:5%），主動(dòng)脈灌注壓為60 cmH2O，剪開(kāi)肺動(dòng)脈根部以保證冠脈回流液通暢引流，心臟置于37保溫缸內(nèi)。剪開(kāi)左心耳，插入測(cè)壓乳膠小囊至左心室，連接測(cè)壓儀，調(diào)整舒張壓在810 mmHg。穩(wěn)定后觀測(cè)左室收縮峰壓(LVPSP)，左

3、室舒張末壓(LVEDP)，心率(HR)，并收集冠狀動(dòng)脈引流液(CF)記錄分鐘流量，于穩(wěn)定灌注30分鐘時(shí)留取冠狀動(dòng)脈引流液2 ml，測(cè)定心肌酶CK、CK-MB的基礎(chǔ)值。然后，于各組隨機(jī)選取2只兔心，停止KH液的灌注，快速取下心臟，濾紙吸凈心臟表面水分，取左室心尖部組織（每次取材部位盡量相同），以4電鏡保存液保存（保存液由天津醫(yī)大電鏡室提供）做電鏡觀察，作為各組觀察電鏡超微結(jié)構(gòu)的自身對(duì)照(這兩只兔心僅做單純灌注，不觀察心功能指標(biāo))。各組其余兔心在心搏穩(wěn)定30分鐘后，停止KH液的灌注，經(jīng)主動(dòng)脈根部灌注4的STH液(B組)或HTK液（A組），STH液劑量15 ml/kg ，以4的STH液每30分鐘重復(fù)

4、灌注一次。HTK液的劑量為30 ml/kg,停搏液灌注壓力同主動(dòng)脈灌注壓。心臟停搏后，各組分別浸入25相應(yīng)的停搏液中，維持25恒溫下心臟停搏120分鐘，然后灌注裝置復(fù)溫至37，心臟重新置于37保溫缸內(nèi)，由主動(dòng)脈以37的KH液復(fù)灌30分鐘，灌注壓力同前。收集冠脈回流液記錄分鐘流量。分別于再灌注15、30分鐘時(shí)留取冠狀動(dòng)脈引流液2 ml測(cè)定心肌酶CK、CK-MB值，觀測(cè)心功能指標(biāo)（同缺血前）。再灌注畢，快速取下心臟，濾紙吸凈心臟表面水分，取左室心尖部組織，部分以4電鏡保存液保存，做電鏡觀察，部分置于液氮中保存，用于測(cè)定心肌丙二醛含量。剩余心肌組織用分析天平稱重后，于110烤箱中烘干24小時(shí)，測(cè)定干

5、濕重。結(jié)果：血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)：停搏前血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)基礎(chǔ)值， A組&B組的組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。復(fù)灌30分鐘后，心功能恢復(fù)百分比： A組LVPSP、LVEDP恢復(fù)百分比高于B組（p<0.05），而HR恢復(fù)百分比與B組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。冠脈流出液CF：停搏前基礎(chǔ)值組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。復(fù)灌30分鐘后， BF恢復(fù)百分比組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。冠脈流出液心肌酶CK、CK-MB漏出量：基礎(chǔ)值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。復(fù)灌30分鐘后， A組CK、CK-MB均明顯低于B組（p<0.01）。

6、心肌含水量： A組86.59±2.58，B組85.18±0.83 ， A組&B組的組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。 心肌丙二醛含量（umol/g）： A組433.33±6.85，B組534.00±14.90， A組明顯低于B組（p<0.01）。透射電鏡結(jié)果：A組的心肌細(xì)胞損傷情況好于B組，但即使B組的細(xì)胞損傷較為嚴(yán)重也仍屬于可逆性損傷。 結(jié)論：對(duì)于幼兔離體兔心，單次灌注4 HTK液或多次灌注4 STH液在25條件下停搏2小時(shí)，· 復(fù)灌30分鐘后，LVPSP恢復(fù)百分比、LVEDP恢復(fù)百分比HTK液組好于STH液組；· 冠脈流出液心肌酶CK、CK-MB漏出量及心肌丙二醛含量HTK液組低于STH液