古方黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效研究

1、古方黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效研究2010-11-2 7:44:44論文代寫作者：胡惠蘭 王姿媛【摘要】 目的 觀察黃連香薷飲有效部位不同配比的藥效。方法 采用相應(yīng)的動物模型，觀察黃連香薷飲不同配比混合提取物的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等作用。結(jié)果 不同比例的黃連香薷飲提取物可明顯抑制甲型流感病毒FM1株引起的小鼠肺部病變、降低肺指數(shù)，有體內(nèi)抗流感病毒作用，對酵母所致發(fā)熱大鼠有退熱作用，對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有抗急性炎癥的作用，有減少冰乙酸致小鼠疼痛扭體次數(shù)和提高熱板致痛小鼠痛閾值的作用。結(jié)論 黃連香薷飲有效部位不同配比均有一定的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等藥理作用。 【關(guān)鍵詞】 黃連香薷

2、飲 藥理作用 抗病毒 抗炎古方黃連香薷飲1出自類證活人書，由黃連、香薷、厚樸三味藥材組成，功效清暑化濕，治療暑濕癥即現(xiàn)代臨床常見的暑濕感冒、空調(diào)病、胃腸型感冒等，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、出汗、鼻塞頭痛、頭昏重脹、身重倦怠。方中藥材黃連的主要有效成分是以小檗堿為主的生物學(xué)堿類成分，黃連提取物對革蘭陽性和陰性細(xì)菌、各型流感病毒均有一定的抑制作用，小檗堿具有抗急慢性炎癥的作用2。嚴(yán)銀芳等3采用柱層析法從香薷的揮發(fā)油中分離到了抗流感病毒的活性成分，厚樸提取物也具有明顯的抗菌、抗病毒、鎮(zhèn)靜抗炎作用4。本實驗對黃連、香薷、厚樸提取物不同配比的抗病毒、清熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用進(jìn)行了實驗研究，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。1 實驗材

3、料1.1 動物 NIH小鼠，雌雄兼有，1822 g，廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，符合清潔級實驗標(biāo)準(zhǔn)，許可證號SCXK(粵)20050002；SD大鼠，雌雄兼有，180220 g，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK（粵）20050001。1.2 藥物與試劑 黃連、香薷、厚樸三位藥材的有效部位不同比例配比混合物（由廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院提供），比例如下：111（A）、233(B)、122(C)；甲型流感病毒FM1株，由中國藥品生物檢定所提供，經(jīng)小鼠增強毒力后，于雞胚尿囊腔傳代2次；病毒唑，山東齊魯制藥有限公司出品，批號080206；阿司匹林，北京華豐制藥公司生產(chǎn)，批號20071005

4、；面包酵母，Yung Cheng Industries LTD出品；地塞米松片，通化東寶藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號070763；二甲苯：廣州化學(xué)試劑廠，批號200604032；乙醚，天津化學(xué)試劑有限公司；生理鹽水，廣州市宏祥醫(yī)藥科技有限公司；冰乙酸，分析純，進(jìn)口分裝，廣東醫(yī)藥站化學(xué)公司；嗎啡注射液，沈陽第一制藥廠出品，批號865354。1.3 儀器 YJ875醫(yī)用凈化工作臺，蘇州凈化設(shè)備公司；壓力蒸汽滅菌器，上海南華醫(yī)療器械廠；超純水器，Millipore；超低溫冰箱，Sanyo 日本；精密電子分析天平，上海良平儀器儀表有限公司； LRH800GS型人工氣候箱，廣東省醫(yī)療器械廠出品。2 方法與結(jié)果

5、2.1 對甲型流感病毒FM1株的體內(nèi)抑制作用5 模型的建立：取甲型流感病毒FM1株用流水沖浸融化，以無菌鹽水稀釋成每0.05 mL含15個LD50(半數(shù)致死量)，放冰水中保存。在乙醚輕度麻醉下，用已滴定的流感病毒液滴鼻感染，每鼠4滴約0.05 mL，同時設(shè)正常小鼠對照組。 取小鼠60只，雌雄各半，隨機分成6組，每組10只：正常小鼠對照組、模型組、陽性藥物組（病毒唑）、 A配比組、 B配比組、 C配比組。藥物在病毒攻擊后2 h開始給藥。共給藥4 d，每天1次，灌胃給藥。感染4 d后，禁食禁水4 h以上，稱小鼠體質(zhì)量，處死小鼠，取出鼠肺，記錄病變程度。 將肺放在盛有生理鹽水的平碟中洗滌2次，用吸水

6、紙吸干表面水分，稱出肺重。按下式計算出肺指數(shù)與抑制率：肺指數(shù)=小鼠肺重（g）/小鼠體質(zhì)量（g）100%，肺指數(shù)抑制率=（模型組平均肺指數(shù)-給藥組平均肺指數(shù)）/模型組平均肺指數(shù)100%。肺實變程度從“病變-”到“+”程度逐漸加深：-：雙側(cè)肺無病變出現(xiàn)；+：肺實變少于整個肺表面積的25%；+：肺實變占整個肺表面積的25%50%；+:肺實變占整個肺表面積的50%75%；+：肺實變占整個肺表面積的75%以上。結(jié)果見表1，2。表1 不同配比對流感病毒感染小鼠肺炎抑制作用（略）Table 1 Inhibitory action on mouse pneumonia infected with influe

7、nza virus與模型組比較: *P0.05,*P0.01 （t檢驗）表2 不同配比對流感病毒感染小鼠肺實變程度的影響（略）Table 1 Influence on mouse lung consolidation infected with influenza virus由表1可見，正常組與模型組肺指數(shù)比較，P0.01，提示造模成功。黃連香薷飲不同配比組平均肺指數(shù)與模型組比較差異有顯著性。不同配比的黃連香薷飲均能減輕病毒感染后小鼠肺實質(zhì)病變的程度，其中C配比的作用略強。2.2 對酵母所致發(fā)熱大鼠的退熱作用6 取大鼠50只，雌雄各半，在安靜狀態(tài)下測量基礎(chǔ)體溫，然后按照基礎(chǔ)體溫隨機分成5組，每

8、組10只：蒸餾水組、阿司匹林組、 A配比組、 B配比組、 C配比組。每組大鼠分2次給藥，第1次灌胃給各組藥物一半劑量后，每只大鼠腹部皮下注射9%酵母混懸液，造模4 h后，第2次灌胃給另一半劑量。于造模后4 h、6 h、8 h、10 h時，分別測大鼠肛溫1次，以造模后各時間點的肛溫減去基礎(chǔ)體溫，作為退熱效果進(jìn)行統(tǒng)計。結(jié)果見表3。表3 不同配比對酵母致大鼠發(fā)熱的影響實驗（略）Table 3 Influence on rat fever caused by yeast與蒸餾水組比較： *P0.05, *P0.01表3結(jié)果表明，黃連香薷飲不同配比組在10 h時大鼠肛溫與蒸餾水組比較有下降，差異有顯著性

9、，不同配比組間的差異不明顯。2.3 對二甲苯所致小鼠急性炎癥的影響 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、地塞米松組、 A配比組、 B配比組、 C配比組。灌胃給藥3 d（地塞米松組灌蒸餾水，于第3天灌胃地塞米松），末次給藥1 h后，將50 L的二甲苯均勻涂于小鼠右耳兩面致炎，左耳作對照，20 min后處死小鼠，用直徑6 mm的打孔器將雙耳同部位等面積切下，用電子天平分別稱重，以左右耳片重量之差為腫脹程度。結(jié)果見表4。表4 不同配比對二甲苯致小鼠耳腫脹影響的實驗（略）Table 4 Influence on ear swelling of mice caused by pa

10、raxylene與蒸餾水組比較：*P0.01 表4結(jié)果表明，黃連香薷飲不同配比組腫脹程度小于蒸餾水組，差異有顯著性，提示對二甲苯所致小鼠有抗急性炎癥作用。2.4 小鼠冰乙酸致痛扭體實驗7 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、嗎啡組、 A配比組、B配比組、 C配比組。分別灌胃給藥（嗎啡組腹腔注射），1 h后（嗎啡半小時后），每只小鼠腹腔注射0.6%冰乙酸0.2 mL，記錄注射后20 min內(nèi)小鼠因疼痛扭體的次數(shù)。結(jié)果見表5。表5 不同配比對冰乙酸致小鼠疼痛扭體影響的實驗（略）Table 5 Influence on mouse pain stretching caused

11、 by glacial acetic acid蒸餾水組比較：*P0.05;*P0.01 結(jié)果表明，黃連香薷飲不同配比組小鼠扭體次數(shù)都少于蒸餾水組，差異有顯著性，提示對冰乙酸致小鼠疼痛有抑制作用。2.5小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗 取雌性小鼠，將水浴箱調(diào)節(jié)恒溫（551），放一個大燒杯于水中，將小鼠投入燒杯，記錄小鼠從投入燒杯至受熱疼痛舔后足的時間，作為該鼠的痛閾值。篩選痛閾值在1030 s的小鼠，按痛閾值分層隨機分成5組，每組10只：蒸餾水組、嗎啡組、 A配比組、 B配比組、 C配比組，分別灌藥，記錄各組給藥后30、60、90和120 min時的痛閾值。結(jié)果見表6。表6 不同配比對小鼠熱板實驗鎮(zhèn)痛作用的影響

12、（略）Table 6 Influence on analgesic effect of mice caused by hot plate與蒸餾水組比較：*P0.05,*P0.01表6結(jié)果表明，黃連香薷飲不同配比組在不同時間點的痛閾值均大于蒸餾水組,差異有顯著性，提示對熱板致痛小鼠有鎮(zhèn)痛作用。3 討論3.1 黃連香薷飲原方為黃連6 g、香薷9 g、厚樸9 g，傳統(tǒng)服用方法多采用水煎煮的方式，本研究中各藥材有效部位是分別根據(jù)有效成分的理化性質(zhì)采用水提酸堿處理、超臨界萃取等方法得到，由于與傳統(tǒng)工藝差異較大，因此所提化學(xué)成分的種類和數(shù)量也大不相同。對于有效部位的配比組方必須通過試驗研究才能確定。本實驗

13、對3種不同配比的藥效進(jìn)行了初步的比較研究。其中A配比為等比例混合，B配比根據(jù)原處方量結(jié)合藥材的提取率確定，C配比是根據(jù)各藥材有效部位的急性毒性試驗及初步藥效試驗結(jié)果而定。3.2 研究結(jié)果顯示黃連香薷飲有效部位不同配比均有顯著的抗病毒、退熱、抗炎、鎮(zhèn)痛作用，其中對甲型流感病毒FM1株的體內(nèi)抑制試驗、二甲苯所致小鼠急性炎癥試驗、小鼠冰乙酸致痛扭體實驗、小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗從數(shù)據(jù)趨勢上來看，C配比的藥效可能強于A配比和B配比。3.3 本實驗對黃連香薷飲3種有效部位的配比進(jìn)行了藥效比較研究，初步得出了結(jié)論。但對于有效部位配伍的最佳比例還應(yīng)采用更科學(xué)的試驗方法如正交設(shè)計、均勻設(shè)計等來確定，筆者將在本實驗的基礎(chǔ)上進(jìn)行進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 魏敏. 黃連香薷飲加味治療小兒夏季熱15例J. 實用中醫(yī)藥雜志， 2005，21（10）：602.2 舒華，向麗華. 黃連藥理作用及臨床應(yīng)用J. 甘肅中醫(yī), 2004，17（12）：5-6.3 嚴(yán)銀芳，陳曉，楊小清，等. 石香薷揮發(fā)油抗流感病毒活性成分的初步研究J. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2002，38（2）：155-157.4 陳芨，王伯初. 厚樸的藥理研究進(jìn)展J. 重慶