白及甘露聚糖抗胃潰瘍及抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實驗研究

1、白及甘露聚糖抗胃潰瘍及抗炎、鎮(zhèn)痛作用的實驗研究                 【摘要】 目的觀察白及甘露聚糖的抗炎、鎮(zhèn)痛及抗實驗性胃潰瘍作用。方法從白及中分離白及甘露聚糖。采用二甲苯誘導小鼠耳廓腫脹法、小鼠毛細血管通透性進行抗炎試驗；采用小鼠醋酸扭體法、熱板法進行鎮(zhèn)痛實驗觀察；采用冷水應激、幽門結扎等方法進行胃潰瘍試驗。結果白及甘露聚糖對小鼠耳廓腫脹有明顯對抗作用；對小鼠毛細血管通透性有一定對抗作用；白及甘露聚糖能明顯抑制熱板和醋酸所

2、致小鼠疼痛，減少熱板引起的小鼠疼痛反應和減少扭體次數(shù)。大鼠幽門結扎實驗顯示，白及甘露聚糖（3mg/只）能有效降低潰瘍指數(shù)（P<0.05）；大鼠應激性潰瘍實驗顯示，白及甘露聚糖（3mg/只）能有效降低潰瘍指數(shù)（P<0.01）。結論：白及甘露聚糖具有良好抗炎和一定鎮(zhèn)痛作用及對實驗性胃潰瘍有較好治療作用。 【關鍵詞】 白及甘露聚糖 抗炎 鎮(zhèn)痛 胃潰瘍白及為多年生草本植物，是常用的止血藥物，研究表明，白及塊莖中含大量粘膠類物質(zhì)，一般認為，自芨的止血作用正是與其所含粘膠類成分有關1?3。本文擬對白及甘露聚糖抗炎鎮(zhèn)痛及抗胃潰瘍藥理作用進行研究。1 材料 (1)藥品與試劑:白及購自浙江省中醫(yī)院。

3、雷尼替丁膠囊：由杭州民生藥廠生產(chǎn)，批號20070112，為本實驗西藥陽性對照藥。阿斯匹林：由無錫阿斯特拉公司產(chǎn)，批號20070318。(2) 動物:ICR種小鼠，雌雄各半，體重1822g。SD種大鼠，雌雄各半，體重200220 g。均由浙江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供。2 方法2.1 白及甘露聚糖的提取 白及塊莖烘干、破碎，用95%乙醇連續(xù)抽提兩次，殘渣干燥后，在殘渣中加入蒸餾水浸泡2h，不斷攪拌，水浴抽提2次，合并抽提液，離心除沉淀，上清液濃縮至小體積，加入三倍量95%乙醇，4靜置過夜，用Sevag 法除去蛋白質(zhì)，真空干燥得白及粗多糖。用甲醇分級沉淀和DEAE?纖維素柱層析得白色干燥甘露聚糖粉

4、末。2.2 白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛抗炎作用研究2.2.1 白及甘露聚糖對小鼠扭體的影響4 ICR小鼠，雌雄各半，隨機分成6組，按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只，阿斯匹林組8mg/只，空白對照組（等容積水）灌胃給藥15d，末次灌胃給藥1h后，腹腔注射0.6%醋酸（HAC），0.2ml/只，記錄15min內(nèi)動物扭體次數(shù)。2.2.2 白及甘露聚糖對小鼠熱板反應的影響4 ICR小鼠，雌雄各半，隨機分成6組，按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只，阿斯匹林組8mg/只，空白對照組（等容積水）灌胃給藥15d，末次給藥后15、30、60

5、min分別將小鼠放在（55±0.5）的熱板上，測定小鼠痛閾值。如60sec小鼠仍無反應，其痛閾以60sec計算，記錄實驗數(shù)據(jù)。2.2.3 白及甘露聚糖對小鼠耳廓腫脹的影響4 ICR小鼠，雌雄各半，隨機分成6組，按照白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只，阿斯匹林組8mg/只，空白對照組（等容積水）灌胃給藥15d，末次給藥0.5h后，將二甲苯20l滴涂于左耳，15min后將動物處死，用直徑8mm打孔器在左、右耳相同部位打孔，分別稱重，計算重量差值，記錄實驗數(shù)據(jù)。2.2.4 白及甘露聚糖對小鼠毛細血管通透性的影響4 ICR小鼠、雌雄各半，隨機分成6組，按照

6、白及甘露聚糖高劑量組4mg/只、中劑量組2mg/只、低劑量組1mg/只，阿斯匹林組8mg/只，空白對照組（等容積水）灌胃給藥15d，末次給藥后0.5h，尾靜脈注射10%伊文氏藍生理鹽水溶液0.2ml，再腹腔注射醋酸（HAC）1ml，30min后取腹腔液于620nm測光密度，以光密度值作組間統(tǒng)計學處理，記錄實驗數(shù)據(jù)。2.3 白及甘露聚糖對胃潰瘍的治療作用                     2.

7、3.1 白及甘露聚糖對幽門結扎性潰瘍的影響4 SD大鼠，雌雄各半，隨機分成5組，按照白及甘露聚糖高劑量組12mg/只、中劑量組6mg/只、低劑量組3mg/只，阿斯匹林組70mg/只，空白對照組（等容積水）連續(xù)灌胃15d，在末次給藥前48h禁食，自由飲水，末次給藥1h后，用乙醚麻醉動物，打開腹腔，結扎幽門。手術18h后，開腔取胃，向胃腔內(nèi)注入1%甲醛6ml，將胃浸入1%甲醛中，10min后沿胃大彎剪開胃，觀察胃部的潰瘍情況，記錄胃部潰瘍點數(shù)，以潰瘍點數(shù)為指數(shù)計算潰瘍抑制百分率和潰瘍發(fā)生百分率。2.3.2 白及甘露聚糖對應激性潰瘍的影響4 SD大鼠，雌雄各半，隨機分成5組，按照白及甘露聚糖高劑量組

8、12mg/只、中劑量組6mg/只、低劑量組3mg/只，雷尼替丁組6mg/只，空白對照組（等容積水），連續(xù)灌胃給藥15天，在末次給藥前25h禁食自由飲水，在禁食至24h，各組末次給藥，將動物垂直浸入25水中，深度至動物劍突，24h后取出處死，結扎幽門和賁門后取出胃。向胃內(nèi)注入1%甲醛10ml，再將胃浸泡于1%甲醛液中10min。沿胃大彎剖開，觀察潰瘍情況，拍照記錄，記錄胃粘膜損傷長度，并以胃粘膜損傷長度總和為潰瘍指數(shù)。2.4 統(tǒng)計學處理 采用t檢驗，所有數(shù)據(jù)以x±s表示。3 結果3.1 白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛作用研究 在小鼠扭體實驗和熱板疼痛反應實驗結果見表1。表1 白及甘露聚糖鎮(zhèn)痛作用（略

9、）與空白對照比較,*P<0.05,*P<0.013.2 白及甘露聚糖抗炎作用研究 小鼠耳闊腫脹實驗和小鼠毛細血管通透性實驗結果見表2。表2 復方蜂膠片對小鼠抗炎作用的影響（略）與空白對照比較,*P<0.05,*P<0.013.3 白及甘露聚糖對幽門結扎性潰瘍的影響 在幽門結扎性實驗中，以潰瘍點數(shù)為指數(shù)計算潰瘍抑制百分率，計算結果見表3。表3 白及甘露聚糖對大鼠幽門結扎潰瘍的影響（略）與空白對照比較,*P<0.05,*P<0.01 友情提醒：本文來自范文論文網(wǎng)收集與整理，感謝原作者。    3.4 白及甘露聚糖對應激性潰

10、瘍的影響 在應激性潰瘍實驗中，潰瘍指數(shù)計算結果見表4。表4 白及甘露聚糖對大鼠應激性潰瘍的影響（略）與空白對照比較,*P<0.05,*P<0.014 討論 目前治療 PU 的藥物取得很大進展，但因目前使用的藥物存在不同程度的毒副作用，使很多患者無法接受長期治療。因此，各國學者仍在努力尋找療效好、毒副作用小的新型抗?jié)兯幬?。多糖是一類天然高分子化合物具有多種生物活性，而且?guī)缀鯚o毒。近些年，學者們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)某些多糖具有明顯的抗?jié)兓钚?，為抗消化性潰瘍藥物的研發(fā)提供了一個廣闊的前景7。 白及 “生肌治瘡，胃中邪氣、痱緩不收”，局部應用即有止血收斂作用。臨床常用于創(chuàng)傷性治療，也廣泛應用于胃潰

11、瘍的臨床治療，但相關實驗研究甚少。白及中含豐富的白及膠質(zhì)，但對白及膠質(zhì)中富含的白及多糖的研究尚未見相關藥理報道。前期文獻報導，甘露聚糖臨床研究發(fā)現(xiàn)具有較好抗胃潰瘍作用8。本實驗再次確證白及甘露聚糖具有抗動物胃潰瘍作用。 白及可以提高創(chuàng)面羥脯氨酸的量，促進創(chuàng)面組織中纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞的增生，提高創(chuàng)傷巨噬細胞的量，這些均可以促進創(chuàng)面的愈合。在本研究中，白及甘露聚糖在鎮(zhèn)痛試驗中對于醋酸引起的扭體反應具有明顯的抑制作用，對于熱板引起的小鼠疼痛反應具有明顯的延后作用。這一藥理實驗結果明確顯示了白及甘露聚糖具有明顯的鎮(zhèn)痛作用。在抗炎試驗中，我們可以看到白及甘露聚糖能明顯抑制二甲苯引起的小鼠耳片腫脹，這

12、說明白及甘露聚糖同樣具有抗炎作用。白及甘露聚糖很可能也是通過抗炎鎮(zhèn)痛作用而起到抗胃潰瘍的作用。                     【參考文獻】 1 吳宗德,劉漢君,孫穎媛.白及粉治療消化性潰瘍60例療效觀察J.遵義醫(yī)學院學報,2004,27(3):255?256.2 陶振宇,蘭克濤,史春雷.白及和三七聯(lián)合奧美拉唑和克拉霉素治療胃潰瘍70例療效觀察J.河北醫(yī)學,2004,10(3):203?205.3 劉瑩,崔炯莫,李洪斌，等.白及超微粉對大鼠實驗性胃潰瘍的影響J.中草藥,2008,39(3):?397?400.4 陳奇.中藥藥理研究方法學M.北京：人民衛(wèi)生出版社,1994: 467.5 李兆申.應激性潰瘍發(fā)生機制及預防對策研究現(xiàn)狀J.解放軍醫(yī)學雜志，1999，24(6)：391?3.6 李兆申，湛先保，崔忠敏，等.應激對胃黏膜表面上皮層抗酸形態(tài)屏障及壁細胞超微結構的影響J.解放軍醫(yī)學雜志，1999，24(6)：401?3.7 王蕾,周四元,梅