蛹蟲草（Cordycepsmilitaris）生物學特性及發(fā)酵研究

1、蛹蟲草（Cordyceps militaris）生物學特性及發(fā)酵研究    英文題名 Biological Characteristics and Fermentation Research of Cordyceps Militaris  關(guān)鍵詞 蛹蟲草; 液體發(fā)酵; 生物學特性; 雙向固體發(fā)酵; 英文關(guān)鍵詞 Cordyceps militaris; submerged fermentation; biological characteristics; new solid cultivation; 中文摘要 冬蟲夏草是著名的傳統(tǒng)中藥和保健品,從

2、17世紀開始就作為一種滋補藥在東西方國家得到廣泛應(yīng)用。蛹蟲草作為我國傳統(tǒng)的民間藥食兩用真菌,由于其活性成分和藥理作用與冬蟲夏草相似,因此具有很高的開發(fā)利用價值。但生長條件的特殊性決定了蛹蟲草野生資源稀少,再加上人們的過度采挖,造成了野生蛹蟲草資源短缺、價格昂貴,不能滿足巨大的市場需求。因而,探討蛹蟲草的高效人工培養(yǎng)方式成為藥用真菌研究領(lǐng)域的一大熱點。 該論文在本實驗室原有研究的基礎(chǔ)上對蛹蟲草Cordyceps militaris Link.的鑒定、性質(zhì)及人工培養(yǎng)條件進行了研究。根據(jù)供試菌株菌絲的顯微結(jié)構(gòu)、子實體形態(tài)特征并結(jié)合ITS序列明確了其分類地位;以胞外多糖和蟲草素為考察指標,對該菌的液體

3、發(fā)酵條件(營養(yǎng)因素、環(huán)境因子)進行了優(yōu)化;此外,還對蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵進行了初步探討。 通過觀察蛹蟲草菌絲和子實體的顯微結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)野生和人工培養(yǎng)的蛹蟲草子實體在外觀形態(tài)上差別較大;菌絲為有隔菌絲,在菌絲體頂端可形成分生孢子梗,孢子梗頂端不膨大,無分枝,分生孢子呈球狀或橢圓狀,成串地著生于孢子梗上,這些特征與青霉極為相似;蛹蟲草子囊殼呈瓶狀,子囊線形、細長,平行排列在子. 英文摘要 Cordyceps sinensis as a well-known traditional Chinese medicine and health product was widely used in easte

4、rn and western countries since 17th century. Cordyceps militaris is a traditional folk medicinal and edible fungus, and it possesses very utilizational value, because of the similar components and pharmacological activity to Cordyceps sinensis. The fact of the particularity of the living conditions

5、and peoples over-excavation lead to the shortage of fungi s resources, and the high price; 摘要 8-9 Abstract 9-10 前言 11-12 第一章 蛹蟲草的研究進展 12-26     1 引言 12-13     2 蛹蟲草的研究進展 13-20         2.1 命名與分類地位 13-14      

6、60;  2.2 寄主與資源分布 14-15         2.3 生物學特性 15-16         2.4 人工栽培 16-17         2.5 化學成分 17-19         2.6 藥理活性 19-20     3 結(jié)語 20-21  

7、60;  參考文獻 21-26 第二章 蛹蟲草的形態(tài)觀察和ITS序列測定 26-34     1 引言 26     2 材料與方法 26-28         2.1 實驗材料 26-27         2.2 供試培養(yǎng)基 27         2.3 試驗方法 27     

8、;    2.4 ITS序列測定 27-28     3 結(jié)果 28-32         3.1 野生和人工培養(yǎng)子實體形態(tài)比較 28-29         3.2 蛹蟲草菌絲結(jié)構(gòu)及產(chǎn)孢類型 29-30         3.3 子囊殼、子囊、子囊孢子及其萌發(fā)產(chǎn)生的菌絲、菌落的形態(tài) 30    

9、60;    3.4 ITS序列測定 30-32     4 結(jié)論 32     參考文獻 32-34 第三章 蛹蟲草菌絲的生長特性 34-41     1 引言 34     2 材料與方法 34-36         2.1 實驗材料 34         2.2 供試培養(yǎng)基 34-35  &#

10、160;      2.3 試驗方法 35-36         2.4 數(shù)據(jù)處理 36     3 結(jié)果 36-39         3.1 碳源對菌絲生長的影響 36         3.2 氮源對菌絲生長的影響 36-37       

11、0; 3.3 pH值對菌絲生長的影響 37-38         3.4 光照條件對菌絲生長的影響 38-39         3.5 不同培養(yǎng)基對菌絲生長的影響 39     4 討論 39-40     參考文獻 40-41 第四章 蛹蟲草多糖的提取分離 41-48     1 引言 41     2 材料與方法 41-43 

12、0;       2.1 實驗材料 41         2.2 蟲草多糖提取工藝研究 41-42         2.3 蟲草多糖的提取及分離純化 42-43         2.4 苯酚-硫酸法測定蟲草多糖含量的方法 43     3 結(jié)果 43-46    

13、60;    3.1 蟲草多糖最佳提取工藝 43-44         3.2 蟲草多糖提取得率和粗多糖CP-1的柱層析分離 44-45         3.3 蟲草多糖含量測定方法 45-46     4 討論 46     參考文獻 46-48 第五章 蟲草素含量測定方法 48-54     1 引言 48   &

14、#160; 2 材料與方法 48-50         2.1 實驗材料 48-49         2.2 蟲草素含量測定 49         2.3 液相色譜法的考察 49-50     3 結(jié)果 50-52         3.1 線性關(guān)系 50    

15、;     3.2 精密度、重復性、穩(wěn)定性及加樣回收率 50-51         3.3 樣品中蟲草素的含量 51-52     4 討論 52     參考文獻 52-54 第六章 蛹蟲草液體發(fā)酵培養(yǎng)條件的優(yōu)化 54-62     1 引言 54     2 材料與方法 54-57        

16、; 2.1 實驗材料 54-55         2.2 供試培養(yǎng)基 55         2.3 固體菌種平板培養(yǎng) 55         2.4 液體菌種培養(yǎng) 55         2.5 液體發(fā)酵 55-56         2.6 液體發(fā)酵主要

17、指標測定方法 56-57     3 結(jié)果 57-60         3.1 搖瓶培養(yǎng)過程中菌絲體生長量和胞外多糖產(chǎn)量的變化 57-58         3.2 碳源對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 58         3.3 氮源對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 58-59       

18、60; 3.4 起始pH值對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 59-60         3.5 溫度對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 60     4 結(jié)論 60-61     參考文獻 61-62 第七章 NH_4+對發(fā)酵菌絲體中蟲草素含量的影響 62-71     1 引言 62     2 材料與方法 62-64         2

19、.1 實驗材料 62-63         2.2 搖瓶培養(yǎng) 63         2.3 添加銨根離子實驗 63         2.4 干燥菌絲體生物量及發(fā)酵液的酸堿度測定 63-64         2.5 菌絲中蟲草素含量的測定 64       &#

20、160; 2.6 發(fā)酵液中胞外多糖含量測定 64     3 結(jié)果 64-68         3.1 NH_4+對菌絲生物量和蟲草素含量的影響 64-65         3.2 NH_4+及酸度對菌絲產(chǎn)量的影響和發(fā)酵液pH值變化 65-66         3.3 NH_4+及pH對蟲草素和胞外多糖產(chǎn)量的影響 66-68   

21、0; 4 討論 68-69     參考文獻 69-71 第八章 蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料與方法 71-73         2.1 實驗材料 71         2.2 培養(yǎng)基 71-72         2.3 蛹蟲草固體發(fā)酵培養(yǎng) 72 &

22、#160;       2.4 樣品中多糖及蟲草素測定方法 72         2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 72-73     3 結(jié)果 73-76         3.1 不同培養(yǎng)基中子實體產(chǎn)量的變化 73-74         3.2 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的多糖含量變化 74  &

23、#160;      3.3 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的蟲草素含量變化 74-76     4 討論 76-77     參考文獻 77-78 第九章 結(jié)論 78-80         3.5 溫度對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 60     4 結(jié)論 60-61     參考文獻 61-62 第七章 NH_4+對發(fā)酵菌絲體中蟲草素含量的影響 62-7

24、1     1 引言 62     2 材料與方法 62-64         2.1 實驗材料 62-63         2.2 搖瓶培養(yǎng) 63         2.3 添加銨根離子實驗 63         2.4 干燥菌絲體生物量及發(fā)酵液的酸堿度測定

25、63-64         2.5 菌絲中蟲草素含量的測定 64         2.6 發(fā)酵液中胞外多糖含量測定 64     3 結(jié)果 64-68         3.1 NH_4+對菌絲生物量和蟲草素含量的影響 64-65         3.2 NH_4+及酸度對菌絲產(chǎn)量的影響和發(fā)

26、酵液pH值變化 65-66         3.3 NH_4+及pH對蟲草素和胞外多糖產(chǎn)量的影響 66-68     4 討論 68-69     參考文獻 69-71 第八章 蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料與方法 71-73         2.1 實驗材料 71   

27、      2.2 培養(yǎng)基 71-72         2.3 蛹蟲草固體發(fā)酵培養(yǎng) 72         2.4 樣品中多糖及蟲草素測定方法 72         2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 72-73     3 結(jié)果 73-76        

28、; 3.1 不同培養(yǎng)基中子實體產(chǎn)量的變化 73-74         3.2 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的多糖含量變化 74         3.3 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的蟲草素含量變化 74-76     4 討論 76-77     參考文獻 77-78 第九章 結(jié)論 78-80         3.5 溫度對菌絲

29、生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 60     4 結(jié)論 60-61     參考文獻 61-62 第七章 NH_4+對發(fā)酵菌絲體中蟲草素含量的影響 62-71     1 引言 62     2 材料與方法 62-64         2.1 實驗材料 62-63         2.2 搖瓶培養(yǎng) 63    &

30、#160;    2.3 添加銨根離子實驗 63         2.4 干燥菌絲體生物量及發(fā)酵液的酸堿度測定 63-64         2.5 菌絲中蟲草素含量的測定 64         2.6 發(fā)酵液中胞外多糖含量測定 64     3 結(jié)果 64-68      

31、60;  3.1 NH_4+對菌絲生物量和蟲草素含量的影響 64-65         3.2 NH_4+及酸度對菌絲產(chǎn)量的影響和發(fā)酵液pH值變化 65-66         3.3 NH_4+及pH對蟲草素和胞外多糖產(chǎn)量的影響 66-68     4 討論 68-69     參考文獻 69-71 第八章 蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵初探 71-78     1

32、引言 71     2 材料與方法 71-73         2.1 實驗材料 71         2.2 培養(yǎng)基 71-72         2.3 蛹蟲草固體發(fā)酵培養(yǎng) 72         2.4 樣品中多糖及蟲草素測定方法 72     &

33、#160;   2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 72-73     3 結(jié)果 73-76         3.1 不同培養(yǎng)基中子實體產(chǎn)量的變化 73-74         3.2 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的多糖含量變化 74         3.3 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的蟲草素含量變化 74-76    

34、4 討論 76-77     參考文獻 77-78 第九章 結(jié)論 78-80         3.5 溫度對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 60     4 結(jié)論 60-61     參考文獻 61-62 第七章 NH_4+對發(fā)酵菌絲體中蟲草素含量的影響 62-71     1 引言 62     2 材料與方法 62-64     &#

35、160;   2.1 實驗材料 62-63         2.2 搖瓶培養(yǎng) 63         2.3 添加銨根離子實驗 63         2.4 干燥菌絲體生物量及發(fā)酵液的酸堿度測定 63-64         2.5 菌絲中蟲草素含量的測定 64    &#

36、160;    2.6 發(fā)酵液中胞外多糖含量測定 64     3 結(jié)果 64-68         3.1 NH_4+對菌絲生物量和蟲草素含量的影響 64-65         3.2 NH_4+及酸度對菌絲產(chǎn)量的影響和發(fā)酵液pH值變化 65-66         3.3 NH_4+及pH對蟲草素和胞外多糖產(chǎn)量的影響 66-6

37、8     4 討論 68-69     參考文獻 69-71 第八章 蛹蟲草的雙向固體發(fā)酵初探 71-78     1 引言 71     2 材料與方法 71-73         2.1 實驗材料 71         2.2 培養(yǎng)基 71-72        

38、2.3 蛹蟲草固體發(fā)酵培養(yǎng) 72         2.4 樣品中多糖及蟲草素測定方法 72         2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 72-73     3 結(jié)果 73-76         3.1 不同培養(yǎng)基中子實體產(chǎn)量的變化 73-74         3.2 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)

39、的多糖含量變化 74         3.3 不同培養(yǎng)基中子實體及發(fā)酵菌質(zhì)的蟲草素含量變化 74-76     4 討論 76-77     參考文獻 77-78 第九章 結(jié)論 78-80         3.5 溫度對菌絲生物量和胞外多糖產(chǎn)量的影響 60     4 結(jié)論 60-61     參考文獻 61-62 第七章 NH_4+對發(fā)酵菌絲體中蟲草素含量的影響 62-71     1 引言 62     2 材料與方法 62-64         2.1 實驗材料 62-63