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文檔簡介
1、 四 維 教 育生物選修3專題1 基因工程1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具-1.2 基因工程的基本操作程序一、與DNA分子相關(guān)的幾種酶及基因工程的其他工具1、與DNA分子相關(guān)的酶限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脫氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對(duì)間的氫鍵作用結(jié)果形成粘性末端或平末端形成重組DNA分子形成新的DNA分子形成單鏈DNA分子“分子手術(shù)刀”限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)(1)來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開
2、,因此具有專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端?!胺肿涌p合針”DNA連接酶(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。區(qū)別:E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種末端,但連接平末端的之間的效率較低。(2) 與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。2、載體(1)條件:
3、能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定保存下來并大量復(fù)制。 有一個(gè)至多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切割點(diǎn),以便與外源基因連接。具有特殊的標(biāo)記基因,便于篩選。(2)種類:質(zhì)粒(常用)、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。(3)作用:作為運(yùn)載工具,將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞內(nèi);利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。二、基因工程基本操作程序1、目的基因的獲取途徑(目的基因: 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。)(1)從基因文庫中獲取(2)人工合成目的基因,人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法。(原核基因采取直接分離獲得,真核基因是人工合成。)(3)PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因原理:DNA雙鏈復(fù)制過程:第一步:加熱至9095DNA解鏈;第
4、二步:冷卻到5560,引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈;第三步:加熱至7075,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建(1)目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。(2)組成:目的基因啟動(dòng)子終止子標(biāo)記基因啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段 ,位于基因的尾端。標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。3、將目的基因?qū)胧荏w
5、細(xì)胞生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法采用最多的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法其次還有 基因槍法和 花粉管通道法等顯微注射技術(shù)Ca2+ 處理法使其處于感受態(tài)受體細(xì)胞體細(xì)胞受體細(xì)胞多是 受精卵受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的TDNA上農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的DNA表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷眩ㄊ芫眩╋@微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動(dòng)物Ca2處理細(xì)胞微生物細(xì)胞壁的通透性增加重組質(zhì)粒與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子4、目的基因的檢測與鑒定(1)分子水平檢測導(dǎo)入檢測即轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因:DNA分子雜交技術(shù),即使用放射性同位素標(biāo)記的含目
6、的基因的DNA片段作探針。轉(zhuǎn)錄檢測即檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA:分子雜交法,即目的基因作探針與mRNA雜交翻譯檢測即檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì):抗原抗體雜交法(2)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定:對(duì)轉(zhuǎn)基因生物進(jìn)行抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)。1.3 基因工程的應(yīng)用-1.4 蛋白質(zhì)工程的崛起一、基因工程的成果1.植物基因工程:抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:提高動(dòng)物生長速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。3.基因治療:把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。二、蛋白質(zhì)工程與基因工程的比較蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)
7、構(gòu)推測應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列獲取目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測與鑒定實(shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可產(chǎn)生自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)結(jié)果(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)進(jìn)行修飾、改造專題2 細(xì)胞工程2.1 植物細(xì)胞工程一、植物細(xì)胞工程 1、原理:細(xì)胞全能性:細(xì)胞具有該生物的全部遺傳信息 并具有發(fā)育成完成個(gè)體的能力。全能性表達(dá)的難易程度:受精卵生殖細(xì)胞干細(xì)胞體細(xì)胞;植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞2、 植物組織培
8、養(yǎng)技術(shù) 概念:是指依據(jù)細(xì)胞全能性的原理,在無菌條件下,分離植物的器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體(稱為外植體),并在培養(yǎng)基上培養(yǎng),在適宜的條件下使其長成部分或完整植株的技術(shù)。(1)過程:離體的植物器官、組織或細(xì)胞 脫分化愈傷組織 再分化試管苗 植物體(2)用途:微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。l 愈傷組織:是一團(tuán)沒有特定結(jié)構(gòu)和功能并處于旺盛分裂狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。l 脫分化:由已分化的植物細(xì)胞形成愈傷組織的過程。l 再分化:愈傷組織生長一段時(shí)間后再移植到新的培養(yǎng)基(人教版:分化培養(yǎng)基)上繼續(xù)培
9、養(yǎng),重新誘導(dǎo)分化形成根、芽等器官的過程。(4)條件:首先用消毒劑除去外植體表面的微生物,在無菌條件下將其放到適宜的培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基一般有五類成分:(1)水(2)無機(jī)營養(yǎng):包括大量元素和微量元素。(3)有機(jī)營養(yǎng):主要有糖、維生素、氨基酸。(4)生長物質(zhì):指植物激素,常用的有生長素和細(xì)胞分裂素,離體培養(yǎng)物的根芽分化取決于激素間的比例。此外,赤霉素對(duì)刺激細(xì)胞的伸長也有一定的作用。(5)天然附加物:如椰子乳、酵母提取物等。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過程:(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等。化學(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。(3)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。二、植物細(xì)
10、胞工程的應(yīng)用1、植物繁殖的新途徑(1)微型繁殖:用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。特點(diǎn):保持優(yōu)良品種的遺傳特性;高效快速的實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。(2)作物脫毒:植物分生區(qū)附近,如莖尖、根尖,很少被病毒感染,甚至無病毒,因而被用來培育無病毒植株。(3)人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等為材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。2、作物新品種的培育:單倍體育種和突變體的利用。3、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):細(xì)胞產(chǎn)物有蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等?!疽c(diǎn)名師精解】植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較名稱植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的
11、全能性過程注意事項(xiàng)選材:選取根尖、莖尖、形成層部位、最容易誘導(dǎo)脫分化光照:脫分化過程不需光照,再分化過程一定要有光去細(xì)胞壁的方法:酶解法,所用的酶是纖維素酶和果膠酶人工誘導(dǎo)融合的方法:物理法:離心、振動(dòng) 電激化學(xué)法:用聚乙二醇誘導(dǎo)2.2 動(dòng)物細(xì)胞工程1、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 概念:就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。這項(xiàng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。用于培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞和組織大多取自動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織1、原理:細(xì)胞增殖2、過程:相關(guān)概念l 細(xì)胞貼壁:培養(yǎng)時(shí)懸液中分散的細(xì)胞很快就會(huì)貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。l 接觸抑制:
12、當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。l 原代培養(yǎng):是指從供體獲取組織或細(xì)胞后的初次培養(yǎng)。l 傳代培養(yǎng):將原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離稀釋后轉(zhuǎn)入新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。(一般情況下,傳代培養(yǎng)10-50次后,細(xì)胞增殖會(huì)明顯放緩,甚至完全停止,但有少部分細(xì)胞克服細(xì)胞壽命的自然極限,獲得不死性,這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生了突變,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展。)3、結(jié)果:獲得細(xì)胞群4、傳代培養(yǎng)的原因:培養(yǎng)到一定時(shí)期細(xì)胞密度過大和代謝消耗引起營養(yǎng)枯竭。5、條件:(1)無菌、無毒的環(huán)境 培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理 培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素 定期更換培養(yǎng)液(2)營養(yǎng) 葡萄
13、糖、氨基酸、維生素、無機(jī)鹽、微量元素、促生長因子等。 合成培養(yǎng)基中還需加入動(dòng)物血清、血漿等(3)溫度和PH 溫度:細(xì)胞體外培養(yǎng)的溫度一般與動(dòng)物的體溫相近,哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5為宜。 PH:多數(shù)細(xì)胞最適PH為7.2-7.4。(4)氣體環(huán)境 細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要是O2和CO2,O2 是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的PH。 進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱 中進(jìn)行培養(yǎng)。附:培養(yǎng)基的的種類(按來源分)天然培養(yǎng)基:主要取自動(dòng)物血清、動(dòng)物組織提取液和雞胚汁等,具有營養(yǎng)價(jià)值高、成分復(fù)雜的特點(diǎn)。合成培養(yǎng)基:是人工
14、配制的,具有成分明確、便于控制實(shí)驗(yàn)條件的特點(diǎn)。4、應(yīng)用:(1)許多有重要價(jià)值的生物制品,如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等,都可以借助動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來生產(chǎn)。(2)作為基因工程的受體細(xì)胞。(3)用于檢測有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)的毒性。(4)用于醫(yī)學(xué)研究二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植概念:將供體體細(xì)胞的細(xì)胞核與受體去核卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行人工組合,借助于卵細(xì)胞的發(fā)育能力,經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成胚胎,進(jìn)而形成個(gè)體的技術(shù)。1、不同細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同,如:受精卵胚胎干細(xì)胞多能干細(xì)胞單能干細(xì)胞體細(xì)胞。2、動(dòng)物細(xì)胞核的移植技術(shù)項(xiàng)目細(xì)胞核的移植概念利用一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核(供體核)來取代另一個(gè)細(xì)胞中的細(xì)胞核,形成一個(gè)重建的“
15、合子”原理動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性過程結(jié)果獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體意義有利于遺傳疾病的治療,優(yōu)良品種的培育對(duì)物種的優(yōu)化、瀕危動(dòng)物的保護(hù)和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的擴(kuò)群有重要意義降低畜牧業(yè)的成本,縮短育種年限,提高生產(chǎn)效率3、 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體制備概念:指在一定條件下將2個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞的過程。(融合成的細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞)1、原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖2、誘導(dǎo)融合的因素:聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。3、意義:制備單克隆抗體。4、單克隆抗體的制備:(1)過程(2)主要優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備?!疽c(diǎn)名師精解】動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的不同比較項(xiàng)目細(xì)胞
16、融合的原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)手段用法植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動(dòng),聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲得雜種植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外,再加滅活的病毒誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一專題3 胚胎工程概念:是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和技術(shù)處理,經(jīng)過處理后獲得的胚胎,還需移植到雌性動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生后代,以滿足人類的各種需求。技術(shù):體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)、胚胎干細(xì)胞移植技術(shù)、胚胎冷凍保存技術(shù)、性別控制技術(shù)等操作對(duì)象:生殖細(xì)胞、受精卵和早期胚胎細(xì)胞 3.1 動(dòng)物胚胎發(fā)
17、育的基本過程(一)精子的發(fā)生1、場所:睪丸2、時(shí)間:初情期3、過程:第一階段:位于曲細(xì)精管管壁的精原細(xì)胞進(jìn)行數(shù)次有絲分裂,產(chǎn)生多個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞。第二階段:初級(jí)精母細(xì)胞連續(xù)進(jìn)行兩次分裂(即減數(shù)分裂,包括M和M),第一次分裂產(chǎn)生2個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞,每個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞再分裂一次產(chǎn)生2個(gè)精子細(xì)胞。第三階段:圓形的精子細(xì)胞經(jīng)過變形成為精子。(二)卵子的發(fā)生1、場所:卵巢2、時(shí)間及過程:l 胎兒期動(dòng)物的胚胎在性別分化后以后,卵原細(xì)胞通過有絲分裂不斷增加數(shù)量,并進(jìn)一步演變?yōu)槌跫?jí)卵母細(xì)胞,這時(shí),它被卵泡細(xì)胞包圍,形成卵泡。l 初情期后減數(shù)第一次分裂:是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的,結(jié)果產(chǎn)生1個(gè)次級(jí)卵母細(xì)胞和1個(gè)第一極
18、體,進(jìn)入輸卵管,準(zhǔn)備與精子受精。減數(shù)第二次分裂:是在精子和次級(jí)卵母細(xì)胞(減中期)結(jié)合的過程中形成的,次級(jí)卵母細(xì)胞經(jīng)分裂產(chǎn)生1個(gè)卵子和1個(gè)第二極體。(當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙觀察到2個(gè)極體時(shí),說明卵子已經(jīng)完成了受精,這是判斷卵子是否受精的重要標(biāo)志)(三)受精準(zhǔn)備階段1精子獲能剛剛排出的精子,不能立即與卵子受精,必須在雌性動(dòng)物的生殖道(子宮和輸卵管)發(fā)生相應(yīng)的生理變化后,才能獲得受精的能力,這種現(xiàn)象稱為“精子獲能”。(蘇教版:卵泡液、輸卵管分泌物、血清等液體可使精子獲能)準(zhǔn)備階段2卵子的準(zhǔn)備 卵子在受精前也要經(jīng)歷類似精子獲能的過程。動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同,有的可能是次級(jí)卵母細(xì)胞,有的可能是初
19、級(jí)卵母細(xì)胞,它們都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟,當(dāng)達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí),才具備與精子受精的能力。受精階段(1)場所:輸卵管(2)主要過程(哺乳動(dòng)物):精子穿越放射冠和透明帶,進(jìn)入卵細(xì)胞膜,原核形成和配子結(jié)合。獲能后的精子與卵子相遇時(shí),首先發(fā)生頂體反應(yīng),使頂體內(nèi)的頂體酶釋放出來,以溶解透明帶外面的放射冠(由卵泡細(xì)胞構(gòu)成的放射狀結(jié)構(gòu)),形成精子穿越的通道。精子穿越透明帶后,在接觸卵細(xì)胞膜的瞬間,會(huì)產(chǎn)生阻止后來的精子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng),這個(gè)反應(yīng)稱作透明帶反應(yīng)。這是防止多精子入卵受精的第一道屏障。精子外膜與卵細(xì)胞膜相互融合,精子入卵。精子入卵后,卵黃膜會(huì)立即發(fā)生一種生理反應(yīng),拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi),這
20、種生理反應(yīng)稱作卵細(xì)胞膜反應(yīng)。這是防止多精子入卵受精的第二道屏障。精子入卵后的另一個(gè)變化,是尾部脫離,并且原有的核膜破裂;隨后,精子形成一個(gè)新的核膜,最后形成一個(gè)比原來精子核還大的雄原核。與此同時(shí),精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)第二次分裂,排出第二極體后,形成雌原核。 雄、雌原核充分發(fā)育后,相向移動(dòng),彼此接觸,二者體積縮小、合并,形成一個(gè)含二倍染色體的合子,即受精卵。受精過程至此結(jié)束,受精卵的發(fā)育也由此開始。注意:1、 一個(gè)卵泡中一般能形成一個(gè)成熟的卵子。2、排卵是指卵子從卵泡中排出而不是指卵泡從卵巢中排出。3、剛排出的卵子尚未完全成熟,一般僅完成減數(shù)第一次分裂,需要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟。4、成
21、熟的精子無受精能力,需要在生殖道內(nèi)獲能后方能受精2、 動(dòng)物排出的卵子并未成熟,只有達(dá)到減數(shù)第二次分裂中期時(shí),才具備受精能力。3、 受精卵的遺傳物質(zhì)中,核遺傳物質(zhì)一半來自精子,一半來自卵子,細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)幾乎全來自卵子。二、哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程1、胚胎發(fā)育概念:是指受精卵發(fā)育成幼體的過程,包括卵裂、囊胚、原腸胚、胚層分化等主要階段。(卵裂期細(xì)胞數(shù)目為32個(gè)左右時(shí)的胚胎,叫做桑椹胚)2、胚胎發(fā)育過程:蘇教版:胚胎發(fā)育分為3個(gè)階段胚卵期(受精卵第1周末)胚胎期(第2周第8周)胎兒期(第9周始)注意:1、 發(fā)育中的細(xì)胞分裂均為有絲分裂,原腸胚階段是個(gè)體發(fā)育中分化程度最高的階段,但要注意細(xì)胞分化貫
22、穿整個(gè)個(gè)體發(fā)育過程中。 3.3 胚胎干細(xì)胞的移植(一)干細(xì)胞1、概念:是動(dòng)物(包括人)胚胎及某些器官中具有自我復(fù)制和多向分化潛能的原始細(xì)胞,是重建、修復(fù)病損或衰老組織、器官功能的種子細(xì)胞。2、類型:專能干細(xì)胞:只能分化為一種或功能密切相關(guān)的兩種細(xì)胞。如上皮組織基底層的干細(xì)胞,肌肉中的成肌細(xì)胞。多能干細(xì)胞:能分化為多種細(xì)胞或組織。如造血干細(xì)胞。全能干細(xì)胞:能分化為各種細(xì)胞、組織或器官。如胚胎干細(xì)胞。(二)胚胎干細(xì)胞1、概念:是在人胚胎發(fā)育早期的囊胚(受精后約56d)中未分化的細(xì)胞。(人教版:是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞,簡稱ES或EK細(xì)胞。)2、特點(diǎn)(人教版)形態(tài)上:體積小,細(xì)胞核大
23、、核仁明顯。功能上:具有發(fā)育的全能性。3、胚胎干細(xì)胞的分離途徑:見下圖4、胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用(1)用于治療人類的某些頑癥。 人類的某些頑癥是由于細(xì)胞壞死、退化或功能異常引起的,如帕金森綜合癥、少年糖尿病和老年癡呆等。利用ES細(xì)胞可以被誘導(dǎo)分化形成新的組織細(xì)胞的特性,移植ES細(xì)胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)并恢復(fù)正常功能。目前,在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面,用ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化出的某些組織細(xì)胞已成功治愈糖尿病、肝衰竭等。也許將來當(dāng)我們身體某一類細(xì)胞功能出現(xiàn)異?;蛲嘶瘯r(shí),可以通過誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化來及時(shí)修補(bǔ)。(2)通過誘導(dǎo)ES細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化,可以培育出人造組織器官,解決目前臨床上供體器官不足和器官移植后免疫排斥
24、的問題。(3)ES細(xì)胞是研究體外細(xì)胞分化的理想材料 3.4 胚胎工程的應(yīng)用一、體外受精1、概念:是指哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術(shù)。主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲能和受精等幾個(gè)主要步驟。 人工模擬體內(nèi)環(huán)境,包括營養(yǎng)、溫度、PH等,使初級(jí)卵母細(xì)胞成熟,同時(shí)使精子獲能,最終完成受精作用,并有計(jì)劃地保存胚胎等。2、過程:見圖下3、意義:加快優(yōu)良家畜的繁殖速度。二、胚胎早期培養(yǎng)1、概念:精子與卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng),以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜階段時(shí),可將其取出向受體移植或冷凍保存。2、胚胎培養(yǎng)液:成分包括無機(jī)鹽、有機(jī)
25、鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,及血清等物質(zhì)。3、牛體外受精胚胎工程化生產(chǎn)流程:三、胚胎移植1、概念:是指將良種母畜(供體)配種后,從其生殖道取出受精卵或早期胚胎(人教版:或通過體外受精及其他方式得到的胚胎),移植到生理狀態(tài)相同的同種母畜(受體)體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育成為新個(gè)體的技術(shù)。2、過程:見右圖 【特別提示】用于移植的胚胎應(yīng)為桑葚胚或囊胚。胚胎移植的供體和受體必須是同種生物,同一物種的動(dòng)物才有可能具有相同的生理特征。作為供體的是優(yōu)良品種,受體的雌性動(dòng)物則是常見或存量大的品種。3、關(guān)鍵技術(shù):超數(shù)排卵(促性腺激素處理)、人工授精、同期發(fā)情、胚胎采集等。4、意義:大大縮短了供體本身的繁
26、殖周期,充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛能。 5、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)(1)排卵后,供、受體生殖器官的生理變化是相同的(2)哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后,在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系,而是處于游離狀態(tài),這就為胚胎的收集提供了可能。(3)受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。(4)供體胚胎可與子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但移入受體的供體胚胎的遺傳特性,在孕育過程中不受任何影響。四、胚胎分割1、概念:用顯微手術(shù)的方法將一枚胚胎分割成二分胚、四分胚甚至八分胚,經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)后植入受體,以得到同卵雙生或同卵多生后代的技術(shù)。這種方法可視為一種胚胎克
27、隆方法。2、材料:發(fā)育良好,形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。(注意:對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí),要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育)2、 意義:提高家畜的胚胎利用率。注意:桑椹胚以前的細(xì)胞均未分化,細(xì)胞全能性高,是胚胎分割的最佳時(shí)期桑椹胚到囊胚的發(fā)育過程中,細(xì)胞開始分化,但其全能性仍很高,也可用于胚胎分割(三)胚胎冷凍保存技術(shù)1、概念:將動(dòng)物的早期胚胎,通過特殊的保護(hù)劑和降溫措施,使其長期保存在超低溫環(huán)境下。2、意義:可以使胚胎移植不受時(shí)間和地域的限制,簡化引種過程。(五)性別控制技術(shù)1、概念:通過人為干預(yù),使動(dòng)物按照人們的愿望繁衍所需性別的后代的技術(shù)。2、應(yīng)用: 在臨床
28、上,避免與性別有關(guān)的遺傳病胎兒的出生; 在畜牧業(yè)生產(chǎn)上,按生產(chǎn)需要控制動(dòng)物性別以提高經(jīng)濟(jì)效益。3、牛胚胎性別鑒定和分割技術(shù):專題4 生物技術(shù)的安全性和倫理問題 一、轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題1、對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的擔(dān)憂:(1)食用是否安全: 轉(zhuǎn)基因生物可能產(chǎn)生毒性蛋白、新的過敏原,導(dǎo)致營養(yǎng)成分的改變。(2)對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的影響; 對(duì)生物多樣性的影響; 導(dǎo)入的目的基因是否會(huì)擴(kuò)散到其他物種而導(dǎo)致自然界的混亂; 轉(zhuǎn)基因植物的殘?bào)w分解物、根際分泌物等是否會(huì)對(duì)生態(tài)與環(huán)境造成大規(guī)模的負(fù)面效應(yīng)等。2、我們應(yīng)該采取的態(tài)度和措施(1)對(duì)于轉(zhuǎn)基因生物及其產(chǎn)品,我們應(yīng)該科學(xué)地認(rèn)識(shí)、評(píng)估和利用,保障公眾的知情權(quán);(2)國家應(yīng)
29、建立相應(yīng)的評(píng)估及預(yù)警機(jī)制,更加理性地利用轉(zhuǎn)基因生物。二、生物武器對(duì)人類的威脅1、生物武器的危害性(1)許多細(xì)菌和病毒具有強(qiáng)大的感染力和致病力;(2)利用轉(zhuǎn)基因技術(shù),在一些不致病的微生物體內(nèi)插入致病基因,或在一些致病的細(xì)菌或病毒中插入能對(duì)抗普通疫苗或藥物的基因;(3)人類基因組計(jì)劃的完成也為生物武器的研制創(chuàng)造了條件。如,不同種群基因組成的特性的闡明,就有可能被用于研制針對(duì)特定種群的生物武器。2、禁止生物武器的措施(1)1972年4月10日,蘇、美、英簽署了禁止生物武器公約,我國1984年加入。(2)全球刑警合作,共防生物襲擊。三、生物技術(shù)中的倫理問題1、熱點(diǎn)討論1克隆人(人教版)(1)爭論焦點(diǎn)
30、反對(duì)者認(rèn)為,克隆人嚴(yán)重違反了人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用,克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念,克隆人是在人為地制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人等;由于克隆技術(shù)尚不成熟,很有可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的孩子。 支持者認(rèn)為,克隆人是一項(xiàng)科學(xué)研究,既然是科學(xué),就應(yīng)該允許科學(xué)家研究克隆人;擔(dān)心可能孕育出有生理缺陷孩子的問題可以通過基因診斷、染色體檢查等方法得到解決,不成熟的技術(shù)只有通過實(shí)踐,才能使之成熟。(2)中國政府的態(tài)度: 禁止生殖性克隆人,不反對(duì)治療性克隆。 四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受。2、熱點(diǎn)討論2設(shè)計(jì)試管嬰兒(人教版)(1)設(shè)計(jì)試管嬰兒與為解決不孕夫
31、婦的生育問題的試管嬰兒區(qū)別:設(shè)計(jì)試管嬰兒需要對(duì)胚胎進(jìn)行基因檢測,選擇符合配型要求的胚胎,然后用其干細(xì)胞(如造血干細(xì)胞)進(jìn)行移植,從而治療白血病、貧血病等疾病。而為解決不孕夫婦的生育問題的試管嬰兒則不需要。(2)爭論焦點(diǎn)l 反對(duì)者認(rèn)為,把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對(duì)生命的不尊重,那些配型不合適的胚胎又將如何處理?l 大部分人則認(rèn)為,設(shè)計(jì)試管嬰兒是符合倫理道德的,因?yàn)檫@是父母出于強(qiáng)烈的愛子之心,千方百計(jì)救治自己孩子的行為。3、熱點(diǎn)討論3是否需要“基因身份證”(人教版)(1)基因身份證:記錄有個(gè)人某些基因(如致病基因和易感基因)資訊的身份證,便于醫(yī)生對(duì)疾病進(jìn)行診治。(2)爭論焦點(diǎn)l 反對(duì)者認(rèn)為,
32、完全沒有必要,因?yàn)椋耗壳叭祟悓?duì)基因結(jié)構(gòu)及基因間相互作用,要想通過基因檢測達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的,況且人類的多基因病,既與基因有關(guān),由于環(huán)境與習(xí)慣有關(guān);個(gè)人基因資訊的泄露所造成的基因歧視已經(jīng)在社會(huì)上出現(xiàn)了。l 支持者認(rèn)為,有必要,因?yàn)椋弘m然基因不是決定一切的,但是有一些遺傳性疾病在后代中復(fù)現(xiàn)率很高,通過基因檢測可以及早采取預(yù)防措施,適時(shí)進(jìn)行治療,達(dá)到挽救患者生命的目的;對(duì)于基因歧視現(xiàn)象,可以通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法得以解決。專題5 生態(tài)工程5.1 生態(tài)工程的基本原理一、生態(tài)工程提出的原因Ø 傳統(tǒng)的經(jīng)濟(jì)模式正在毀壞水、大氣、土壤和生物資源,消耗地球增給我們的自然資本
33、。Ø 為了實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展,經(jīng)濟(jì)發(fā)展必須生態(tài)學(xué)規(guī)律,走生態(tài)經(jīng)濟(jì)之路。生態(tài)經(jīng)濟(jì)主要是通過實(shí)行“循環(huán)經(jīng)濟(jì)”的原則,使一個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)出的污染物,能夠成為本系統(tǒng)或者另一個(gè)系統(tǒng)的生產(chǎn)原料,從而實(shí)現(xiàn)廢棄物的資源化,而實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一就是生態(tài)工程。二、生態(tài)工程的概念生態(tài)工程是指人類應(yīng)用生態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué)等學(xué)科的基本原理和方法,通過系統(tǒng)設(shè)計(jì)、調(diào)控和技術(shù)組裝,對(duì)已被破壞的生態(tài)環(huán)境進(jìn)行修復(fù)、重建,對(duì)造成環(huán)境污染和破壞的傳統(tǒng)生產(chǎn)方式進(jìn)行改善、并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力,從而促進(jìn)人類社會(huì)和自然環(huán)境的和諧發(fā)展。l 產(chǎn)生:是人類學(xué)習(xí)自然生態(tài)系統(tǒng)“智慧”的結(jié)晶,是生態(tài)學(xué)、工程學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)等學(xué)科交叉而產(chǎn)生的新興
34、學(xué)科。l 目的:遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力,防止環(huán)境污染,達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。l 特征:與傳統(tǒng)的工程相比,生態(tài)工程是一類低消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。三、生態(tài)工程的原理(一)物質(zhì)循環(huán)再生原理1、解釋:地球以有限的空間和資源,長久維持著眾多生物的生存、繁衍和發(fā)展,奧秘就在于物質(zhì)實(shí)現(xiàn)了循環(huán)往復(fù)、分層分級(jí)利用,從而達(dá)到取之不盡,用之不竭的效果。而在沒有物質(zhì)循環(huán)的系統(tǒng),就會(huì)產(chǎn)生廢棄物,造成環(huán)境污染,并最終影響到系統(tǒng)的穩(wěn)定和發(fā)展。2、舉例:“無廢棄物農(nóng)業(yè)”“無廢棄物農(nóng)業(yè)”(如右圖)是我國古代傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)的輝煌成就之一,也是生態(tài)工程最早、最生動(dòng)的一種模式。土壤肥力是一切
35、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)特別是種植業(yè)的基礎(chǔ),我們的祖先之所以維持土壤肥力幾千年,其中的訣竅就在于實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)的循環(huán)利用。(二)物種多樣性原理1、解釋:一般而言,物種繁多而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性。農(nóng)業(yè)和林業(yè)生產(chǎn)為追求最大產(chǎn)量,常常忽略生物多樣性而連年種植單一品種,這往往會(huì)造成病蟲害增加,環(huán)境惡化。生物多樣性程度高,可以為各類生物的生存提供多樣的機(jī)會(huì)和條件。眾多的生物通過食物鏈關(guān)系互相依存,就可以在有限的資源條件下,產(chǎn)生或容納更多的生物量,提高系統(tǒng)生產(chǎn)力。即使某個(gè)物種由于某種原因而死亡,也會(huì)有其他物種占據(jù)它原來的生態(tài)位置,從而避免了系統(tǒng)結(jié)構(gòu)或功能的失衡。2、舉例:人工單一樟子常常會(huì)遭到松林松毛蟲的肆虐
36、,一種小小的楊樹天牛曾經(jīng)將幾十億株楊樹毀于一旦;而珊瑚礁區(qū)存在于養(yǎng)分稀少的深海中,但其中的生物種類卻非常多,保持著很高的穩(wěn)定性。(三)協(xié)調(diào)與平衡原理1、解釋:在進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè)時(shí),生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡也是需要考慮的問題之一。處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡,需要考慮環(huán)境承載力。環(huán)境承載力(又稱環(huán)境容納量)是指某種環(huán)境所能養(yǎng)活的生物種群的數(shù)量,如果生物的數(shù)量超過了環(huán)境承載力的限度,就會(huì)引起系統(tǒng)的失衡和破壞。2、舉例:我國西北一些地區(qū)年降雨量小于450mm,是只適宜種植灌木和 草的地區(qū),但卻被硬性規(guī)定種植屬于喬木的楊樹,以致到處都是“楊家將”。生態(tài)的不適應(yīng)使許多地方的楊樹長成半死不活的“小老頭”遠(yuǎn)不如當(dāng)?shù)貥浞N那樣有較高的生態(tài)適應(yīng)性,結(jié)果防護(hù)林成了殘敗的“灰色長城”。(四)整體性原理1、解釋:人類是處在一個(gè)社會(huì)-經(jīng)濟(jì)-自然復(fù)合成的巨大系統(tǒng)中。進(jìn)行生態(tài)工程建設(shè)時(shí),不但要考慮自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律,更重要的是,還要考慮到經(jīng)濟(jì)和社會(huì)等系統(tǒng)的影響力。 此外,社會(huì)習(xí)慣、法律制度等也都對(duì)生態(tài)工程建設(shè)有著重要影響。 2、舉例:在進(jìn)行林業(yè)工程建設(shè)時(shí),一方面要號(hào)召農(nóng)民種樹,另一方面一定要考慮貧困地區(qū)農(nóng)民的生活問題,如糧食燒柴等以及收入等問題。否則隨時(shí)會(huì)出現(xiàn)“前面造林,后面砍林”的現(xiàn)象。(五)系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理1、系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理(1)解釋:生態(tài)工
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