水質(zhì)細菌檢驗箱簡介

1、水質(zhì)細菌檢驗箱簡介用途： 使用于師團在實驗室或野外條件下進行水中細菌總數(shù)和和大腸菌群的檢驗。 必要時還 可進行水中腸道致病菌（沙門氏菌屬和志賀菌屬）的檢驗。 新款可測 :細菌總數(shù)、總大腸菌 群、大腸埃希氏菌、耐熱大腸菌群 性能：本箱操作簡便、檢驗快速、結(jié)果準確。其中，水中細菌總數(shù)的檢驗采用 膜營養(yǎng) 墊法。 所用的培養(yǎng)基是新研制的無瓊脂培養(yǎng)基。 可獲得與實驗室條件下常規(guī)標準平板法同樣 的結(jié)果，水中大腸菌群的檢驗采用 膜營養(yǎng)墊法。所用的培養(yǎng)基是新研制的改良遠藤培 養(yǎng)基， 比普通的遠藤氏培養(yǎng)基能獲得更加滿意的檢驗結(jié)果。 尤其是對水中損傷大腸菌的檢驗 有較好的效果， 這樣對消毒后水的檢驗?zāi)塬@得更加安全

2、可靠的結(jié)果； 水中腸道致病菌沙 門氏菌屬和志賀氏菌屬的檢驗， 采用常規(guī)和快速方法相結(jié)合。 先用新研制的沙門氏菌屬 志賀氏菌屬通用增菌培養(yǎng)基增菌，然后用協(xié)同凝集試驗法進行檢驗， 24 小時可初步報告結(jié) 果， 箱內(nèi)還裝有新研制的沙門菌屬志賀氏菌屬選擇培養(yǎng)基，必要市可進行常規(guī)檢驗， 并可獲得準確的檢驗結(jié)果。整套裝置由采樣檢驗箱和選購部分 -微型培養(yǎng)箱組成。可在野外或現(xiàn)場進行采樣和檢驗，微 型培養(yǎng)箱采用交、直流兩用電源可在沒有交流電條件下使用。箱內(nèi)的各種培養(yǎng)基忽然試驗器材用完后可隨時與億通電子有限公司聯(lián)系補充。 使用本檢驗箱時首先將箱內(nèi)酒精燈裝入酒精；酒精棉球瓶中裝入75%濃度的酒精。一、采樣檢驗箱內(nèi)

3、器材和藥品01、說明書1份02、DY II 型移液管1支03、DY II 型移液管吸嘴10 支04、接種棒1支05、金屬鑷子1把06、圓珠筆1支07、特種紅鉛筆1支08、塑料培養(yǎng)皿20 付09 、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基50 管10、改良遠藤培養(yǎng)基50 管11、沙門似志賀氏菌屬增菌培養(yǎng)基20 管12、協(xié)同凝集試劑1套13、沙門氏志賀氏菌增菌瓶3個14、改良 SS 選擇瓊脂1瓶15 、克氏雙糖鐵培養(yǎng)基1瓶16、水樣稀釋瓶（ 50ml ）1個17、酒精棉球瓶1個18 、微孔 膜（ 35mm 0.45um）3*100 張19 、紙墊（ 47mm ）7*40 張20、小杯（ 45-150ml ）1個21、酒精燈

4、1付22、塑料注射器（ 20ml ）1付23、細菌過濾器1套24、小毛巾1條25 、火柴1 盒26 、塑帽試管10 支、采樣檢驗箱使用方法1、 細菌中數(shù)檢驗方法1. 1 試驗準備：1.1.1 水樣采集：采水容器事先滅菌或使用前用被檢水反復(fù)沖洗數(shù)次，然后采水。1.1.2 移液管吸嘴的消毒： 取下套在酒精燈上的支架， 把支架小口端安裝在酒精 燈口上， 杯放在支架上，倒入適量水，把吸嘴放入 杯內(nèi)，煮沸 5-10 分鐘，備 用。1.2. 肉湯營養(yǎng)紙墊制備：1.3.1 將小皿用酒精棉球擦拭消毒，晾干后每皿加一片紙墊。1.2.2 取肉湯安瓶一支倒人小杯內(nèi)， 加入 15mi 蒸餾水或自來水煮沸溶解即為營養(yǎng)肉

5、 湯。必要時?？梢灾苯佑瞄_水沖泡溶解。1.2.3 取盛有紙墊小皿，每皿紙墊加營養(yǎng)肉湯 1.8-2.5ml （液體充盈程度以不淹沒濾 膜為宜），即為肉湯營養(yǎng)墊，備用。1. 3 檢驗水樣：1.3.1 細菌過濾器系統(tǒng)的組裝； 從檢驗箱中取出過濾器， 將濾床 板端插入檢驗箱前 側(cè)箱壁與塑料板之間的夾縫內(nèi)，把三通管帶細塑料管一端插入濾器下面的孔 內(nèi)，三通管大孔端插入 20ml 注射器頭下，接頭處要嚴密。備用。1.3.2 細菌過濾器的處理：用燃著的酒精棉球擦拭細菌過濾器的濾床和漏斗，待涼 后，取一片濾膜，放在濾床上，裝上漏斗并擰緊。過濾水樣：生活飲用水為1ml，平分兩份，水源水可同時做原水1ml和稀釋50

6、 倍（箱內(nèi) 50ml 小瓶放入 1ml 被檢水源水，家 50ml 冷開水或無菌水） 1ml 兩個 稀釋度， 水樣加到濾器中后使之全部覆蓋膜面， 然后抽濾至水干， 將阻菌濾膜面朝 上貼于肉湯營養(yǎng)墊上。注意膜與營養(yǎng)墊之間不要有氣泡。1.4培養(yǎng)：37C培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24小時。1.5 菌落計數(shù)：計數(shù)膜上所有菌落數(shù)。細菌總數(shù)計數(shù)方法：細菌總數(shù)（個/ml）=膜上的平均菌落數(shù)*稀釋倍數(shù)1. 6 注意事項：1.6.1 檢驗細菌總數(shù)過程中應(yīng)盡量做到無菌操作。1.6.2 每檢驗完一個水樣應(yīng)用燃著的酒精棉球燒灼漏斗和濾床后，再進行檢驗第二 個樣品。1.6.3 每次試驗完畢，必須用干紗布把過濾漏斗和濾床等處擦干，以免

7、腐蝕漏斗。2、 大腸菌群檢驗方法：2.1 試驗準備： 同細菌總數(shù)檢驗方法（ 1.1）2.2 遠藤營養(yǎng)墊的制備：2.2.1 將小皿用酒精棉球擦拭消毒、晾干。每皿內(nèi)加一片紙墊。2.2.2 取遠藤培養(yǎng)基安瓶一支，倒人小杯內(nèi)，從酒精棉球瓶內(nèi)取出棉球擠壓1-2 滴酒精于培養(yǎng)基上使其剛好濕透，用玻棒攪勻，然后加 15ml 冷開水或蒸餾水，搖勻溶解即 為遠藤營養(yǎng)墊。2.2.3 取盛有紙墊培養(yǎng)皿，每皿紙墊加遠藤培養(yǎng)液 1.8-2.5ml （液體充盈程度以不淹沒 濾膜為宜），即為遠藤營養(yǎng)墊。2.3 檢驗水樣：細菌過濾器系統(tǒng)的組裝：同細菌總數(shù)（）232細菌過濾器系統(tǒng)的處理：同細菌總數(shù)（）233過濾水樣：生活飲用水

8、，應(yīng)檢100-330ml，將被檢水樣倒入漏斗內(nèi)至上刻度線處（100ml）,檢驗330ml水量時，可過濾100ml后，再加100ml，直至濾完330ml，（如 遇不易過濾水，可分 2-3張膜過濾，分別貼于 2-3個遠藤應(yīng)營養(yǎng)紙墊上，結(jié)果將膜上菌 落數(shù)相加計算），將膜取下，小心貼于備用的遠藤營養(yǎng)紙墊上。此時應(yīng)注意勿使濾膜與 營養(yǎng)墊之間留有氣泡；檢驗未處理的水源水，取1ml水眼個，方法：同細菌總數(shù)，不同處僅把阻菌膜貼于遠藤營養(yǎng)墊上。2.4培養(yǎng)：37C培養(yǎng)箱中，培養(yǎng) 18-24小時。2.5菌落計算：計數(shù)膜上帶有金屬光澤或深黑色菌落。即為大腸菌數(shù)。大腸菌群數(shù)計算方法：大腸菌群數(shù)（個/升）= 膜上菌落數(shù)*

9、稀釋倍數(shù)*1000被檢水樣體積（ml）2.6注意事項：同一水樣，同時檢驗細菌總數(shù)和大腸菌群時，可不處理濾器；其它項同細菌總數(shù)（1.6）水中腸道致病菌（沙門氏菌屬和志賀氏菌屬）檢驗方法：3.1快速檢驗法：增菌培養(yǎng)：直接增菌法：吸取待檢水樣 10ml放入增菌瓶中，加入一小管（0.44g）沙門氏菌一志賀氏菌通用增菌培養(yǎng)基，充分振搖攪拌使其溶解。然后置37C培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時。濃縮增菌法：吸取待檢水樣100ml （更大或更小體積的水樣，視水質(zhì)而定）通過濾膜過濾，然后將阻菌濾膜取下，放入含有一小管（0.44g）沙門氏一志賀氏菌通用增菌培養(yǎng)基的10ml增菌液中（可用被檢水或無菌蒸餾水配制增菌液）置37 C

10、培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24小時。協(xié)同凝集試驗：具體步驟見“協(xié)同凝集試驗方法”。不同種類的抗原液（即不同種類的沙門氏菌、志賀氏菌增菌后的菌懸液）分別用對應(yīng)的凝集試劑進行協(xié)同凝集試驗， 根據(jù)凝集與否判斷為陽性或陰性。協(xié)同凝集試驗方法：取0.5ml生理鹽水將協(xié)同凝集試劑溶解，用手搖勻。取1滴凝集試劑于載玻片上，加一滴抗原液（經(jīng)增菌液培養(yǎng)24小時的水樣），充份混勻，1-3分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。結(jié)果判斷標準：懸液完全透明，出現(xiàn)大量凝塊和顆粒為+透明度稍差，出現(xiàn)大量凝塊和顆粒為+懸液半透明，凝塊和顆粒較少為+懸液不透明，有少量顆粒為+懸液渾濁，無顆粒出現(xiàn)為一+以上為陽性，+為可疑。對照：標準抗原作陽性對照生理鹽水作陰性對

11、照3.134注意：協(xié)同凝集試劑應(yīng)置低溫冷凍保存，有效期 3年。3.2常規(guī)檢驗方法：增菌培養(yǎng)：快速檢驗法中的直接增菌法和濃縮增菌法相同，其中志賀氏菌的增 菌時間可以為16-18小時。平板分離：取上述經(jīng)增菌的沙門氏菌、志賀氏菌培養(yǎng)液，用接種環(huán)化線接種改 良SS選擇瓊脂平板，置 37C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。（如使用其它選擇培養(yǎng)基時，請注 意對宋內(nèi)氏痢疾桿菌是否良好，還是不生長或生長很差）。3.2.3挑選菌落接種雙糖管：每個平板挑取 5個以上可疑腸道病原菌菌落，接種于雙 糖鐵或三糖鐵試管培養(yǎng)基中（將克氏雙糖鐵干燥培養(yǎng)基加水煮沸溶解后分裝于塑帽試管 中，3ml，高壓蒸汽滅菌或水浴 100C 15分鐘后放

12、成高層斜面，凝固后即成）。置37 C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時。附：沙門氏菌屬和志賀菌屬在改良SS選擇瓊脂平板上的菌落特征：沙門氏菌屬，菌落呈無色透明或半透明或中間有黑心，直徑為1-3毫米（培養(yǎng)時間長時，有的菌落中心略呈微粉色，但與紅色的大腸菌菌落完全不同）。志賀氏菌屬，菌落呈無色透明或半透明（宋氏痢疾桿菌的菌落中心有時略呈淺色），直徑1-3毫米。3.2.4生化反應(yīng)及血清學(xué)檢驗：沙門氏菌屬：在雙糖鐵或三糖鐵培養(yǎng)基上，底層變黃（分解葡萄糖產(chǎn)酸），產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣（如傷寒沙門氏菌不產(chǎn)氣），一般產(chǎn)H2S;斜面呈紅色（不分解乳糖）。用沙門 氏菌多價血清或單價抗血清進行凝集試驗，根據(jù)凝集與否判斷為陽性或陰性。志賀氏菌屬：在雙糖鐵或三糖鐵培養(yǎng)基上，底層變黃（分解葡萄糖產(chǎn)酸），不產(chǎn)氣，無動力，不產(chǎn) H2S