Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀

1、Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀 Amaxa公司簡介Amaxa公司成立于1998年，是德國一只處于快速發(fā)展中的生物技術(shù)團(tuán)隊(duì)，他們致力于一種高效率、非病毒基因轉(zhuǎn)染技術(shù)Nucleofector 的開發(fā)。在Nucleofector 技術(shù)和成功融資的基礎(chǔ)上，Amaxa公司從最初的兩個人迅速發(fā)展到現(xiàn)在的80多位技術(shù)人員的隊(duì)伍，并迅速成為非病毒基因轉(zhuǎn)染技術(shù)領(lǐng)域里最主要的公司之一。Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀是將傳統(tǒng)地電穿孔技術(shù)和專用地轉(zhuǎn)染試劑結(jié)合起來的產(chǎn)物，針對不同的細(xì)胞類型，采用一套最理想的轉(zhuǎn)染試劑和轉(zhuǎn)染程序，以達(dá)到最理想的轉(zhuǎn)染效率。Nucleofecto

2、r 核酸轉(zhuǎn)染儀特別適用于轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞和難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，如T細(xì)胞及PC-12細(xì)胞系等。Nucleofector 技術(shù)是獨(dú)一無二的，因?yàn)樗梢灾苯訉NA轉(zhuǎn)染到細(xì)胞核內(nèi)，因此實(shí)現(xiàn)了因受到細(xì)胞分裂限制而一直困擾人們的原代細(xì)胞的高效率轉(zhuǎn)染。在Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀的幫助下，您可以在腫瘤研究、免疫學(xué)、組織工程學(xué)及心血管疾病研究領(lǐng)域中輕而易舉地獲得大于90的高效率基因轉(zhuǎn)染率。 Nucleofector 技術(shù)由兩部分組成Nucleofector Solution轉(zhuǎn)染溶液轉(zhuǎn)染過程中，細(xì)胞首先懸浮在轉(zhuǎn)染試劑中，選擇相應(yīng)地過程，僅需幾秒鐘，轉(zhuǎn)染結(jié)束，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基中培養(yǎng)、觀察。針對不同的轉(zhuǎn)染細(xì)

3、胞都有相應(yīng)地轉(zhuǎn)染試劑，配合相應(yīng)地Amaxa轉(zhuǎn)染儀過程，使DNA直接轉(zhuǎn)入細(xì)胞核內(nèi)，轉(zhuǎn)染效率高，易操作，實(shí)驗(yàn)周期短N(yùn)ucleofector Device轉(zhuǎn)染儀Nucleofector 轉(zhuǎn)染儀的原理使電穿孔技術(shù)，但它有一般的電穿孔無法比擬地優(yōu)點(diǎn)，它具有獨(dú)特地電子參數(shù)，每一套電子參數(shù)是作為一種程序去適應(yīng)不同的細(xì)胞類型。由于電子參數(shù)是預(yù)先精心設(shè)計(jì)好的，因此操作者不用進(jìn)行電子參數(shù)的優(yōu)化、轉(zhuǎn)染條件的摸索等繁瑣的工作，您只需按動按鈕選用規(guī)定的程序即可。Nucleofector 核酸轉(zhuǎn)染儀的整個操作過程只需四步，非常簡單、高效。特點(diǎn) 轉(zhuǎn)染效率高因?yàn)镈NA是直接轉(zhuǎn)入細(xì)胞核中，很容易得到高轉(zhuǎn)染效率。如大多數(shù)細(xì)胞系核

4、原代細(xì)胞地轉(zhuǎn)染效率位50-70；某些原代細(xì)胞，如人表皮纖維原細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率超過90。 轉(zhuǎn)染速度快由于基因轉(zhuǎn)染不依賴細(xì)胞分裂，在大多數(shù)細(xì)胞類型轉(zhuǎn)染地基因2-4小時就能檢測表達(dá)，這大大縮短了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法必須24-48小時才能表達(dá)地時間。這樣加快了實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，這個實(shí)驗(yàn)只需一天就能完成。 操作簡單方便Nucleofector 轉(zhuǎn)染技術(shù)操作不到1小時就能完成。應(yīng)用免疫學(xué)/血液學(xué)Amaxa公司的細(xì)胞轉(zhuǎn)染儀不僅可以轉(zhuǎn)染原代T、B細(xì)胞，而且對免疫細(xì)胞系如，K562，JURKAT或白血病細(xì)胞如CLL或AML等細(xì)胞都能進(jìn)行高效率轉(zhuǎn)染。單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或郎格罕氏細(xì)胞、單核細(xì)胞派生或CD34陽性細(xì)胞派生的樹突狀細(xì)胞的實(shí)

5、驗(yàn)方案也已開發(fā)出來。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：Human B Cells、Human T Cells、Human CD34 Cells、K562 CellsDMSZ）、JURKAT Cells。心血管研究過去，繁瑣的優(yōu)化步驟和缺乏重復(fù)性嚴(yán)重地阻礙了心血管轉(zhuǎn)染地的研究，現(xiàn)在，借助于Nucleofector 技術(shù)，已能成功進(jìn)行成體干細(xì)胞、CD34陽性細(xì)胞、CD34陽性細(xì)胞派生的干細(xì)胞和間葉干細(xì)胞（MSC）等的轉(zhuǎn)染。近來，關(guān)于這些干細(xì)胞分化成內(nèi)皮細(xì)胞或心肌細(xì)胞以及他們在適宜組織的定位的文獻(xiàn)已經(jīng)發(fā)表，這些資料顯示了Nucleofector 技術(shù)在干細(xì)胞治療心血管病的潛力。Amaxa公司

6、現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：HUVECs（Human Umbilical Vein Endothelial Cell）、HCAECs、Human AoSMCs、Human CD34 Cells。皮膚醫(yī)學(xué)和組織工程N(yùn)ucleofector 轉(zhuǎn)染技術(shù)對于人的皮膚纖維原細(xì)胞或人的表皮黑色素細(xì)胞獲得高轉(zhuǎn)染效率，為皮膚學(xué)在基礎(chǔ)和臨床研究提供了很多新的機(jī)會，如研究纖維癥和傷口愈合，軟骨細(xì)胞基因的過度表達(dá)會加深對骨關(guān)節(jié)炎機(jī)理的理解?？傊?，Nucleofector 轉(zhuǎn)染技術(shù)大大促進(jìn)了皮膚很軟骨細(xì)胞治療操作的進(jìn)展，在將來的基因治療中充滿前景。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：Human Dermal F

7、ibroblasts（轉(zhuǎn)染率>70）、NHEMs。腫瘤研究惡性癌變是基因紊亂導(dǎo)致的不可調(diào)控的細(xì)胞無限生長。Nucleofector 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染法主要針對正常的原代細(xì)胞和其他惡性細(xì)胞系等，因此，它可以用于腫瘤分析中基因突變的分析。并且和其他方法相比，轉(zhuǎn)染基因的表達(dá)僅在2-4小時就能檢測到（如，肝細(xì)胞瘤細(xì)胞系HepG2的轉(zhuǎn)染），而其他方法需要等到24-48小花似，所以，Nucleofector 加速了實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程。在惡性疾病的治療中，基因轉(zhuǎn)染將有助于高效的、有針對性的和安全抗癌的治療方法的產(chǎn)生。Amaxa公司現(xiàn)在可以提供一下轉(zhuǎn)染試劑盒：HUVECs、NHEms、Human Dendritic C

8、ells、Commonly used cellline（CHO-K1（ATCC）、CHO-K1（DSMZ）、COS-7（DSMZ）、HEK293（ATCC）、293HEK（DSMZ）、HeLa（DSMZ）、HepG2（ATCC）、NIH3T3（DSMZ）。神經(jīng)生物學(xué)在大多數(shù)情況下，將基因轉(zhuǎn)染進(jìn)入有絲分裂后期的神經(jīng)細(xì)胞（如原核腦皮層核海馬趾神經(jīng)細(xì)胞）被證實(shí)是無效的。其他轉(zhuǎn)染方法如磷脂鈣/DNA共沉淀法、陽離子脂質(zhì)體法或顯微注射法等對神經(jīng)細(xì)胞都是有毒的，他們通常導(dǎo)致被轉(zhuǎn)染的細(xì)胞存活率不到10。經(jīng)改良后的病毒轉(zhuǎn)染法，如腺病毒核Semilki forest病毒具有較高的轉(zhuǎn)染率，單病毒載體的構(gòu)建是耗時的、并且伴有不安全的擔(dān)憂，病毒感染有可能感染蛋白質(zhì)的合成，更有甚者，由于病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)后蛋白表達(dá)的水平太高，可能導(dǎo)致不正常的蛋白定位等錯誤的信息出現(xiàn)。應(yīng)用Nucleofector 技術(shù)，質(zhì)粒或寡核苷肽可以有效地轉(zhuǎn)移到原代神經(jīng)細(xì)胞和細(xì)胞系中，轉(zhuǎn)染后在很短時間內(nèi)就有蛋白質(zhì)地表達(dá)。更重要的是，蛋白質(zhì)表達(dá)的水平受轉(zhuǎn)入的DNA量的影響。目前，神經(jīng)干細(xì)胞和星細(xì)胞等的實(shí)驗(yàn)方案正在開發(fā)中。Nucleofecor 技術(shù)高轉(zhuǎn)染率和高