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文檔簡介

1、選修 3 問題歸納專題 1:基因工程1. DNA 重組技術的基本工具: 限制性核酸內切酶(限制酶), DNA 連接酶,運載體。2. 基因工程中用到的酶,及其作用:限制酶:切割 DNA 。DNA 連接酶:把 DNA 片段拼接成新的 DNA3. 基因表達載體的組成: 目的基因,啟動子,終止子,標記基因。4. 啟動子的作用: 驅動目的基因轉錄出 mRNA 最終獲得所需蛋白質。5. 終止子的作用:終止 mRNA 勺轉錄。6. 標記基因的作用: 為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來。7. 基因工程的變異原理: 基因重組。8. DNA 分子雜交技術的原理: 堿基互補配對原則

2、。9. PCR 技術的原理: DNA 雙鏈復制的原理(堿基互補配對) 。10. 獲取目的基因的方法: 從基因文庫中獲取。利用 PCR 技術擴增。利用化學方法人工合成。11?將目的基因導入植物細胞的方法: 農桿菌轉化法。基因槍法?;ǚ酃芡ǖ婪ā?2. 將目的基因導入動物細胞的方法: 顯微注射技術。13?將目的基因導入微生物細胞的方法: 用 Ca2+處理成感受態(tài)細胞。14. 檢測目的基因是否插入受體細胞的方法: DNA 分子雜交技術。15. 檢測是否轉錄出 mRNA 勺方法:分子雜交技術。16. 檢測是否翻譯出蛋白質的方法: 抗原抗體雜交。17. 基因工程常用的載體有哪些: 質粒、入噬菌體衍生物、

3、動植物病毒18. 培育轉基因植物常用什么細胞做受體細胞: 受精卵或體細胞。19. 培育轉基因動物常用的細胞: 受精卵20. 基因工程制藥常用的受體細胞: 微生物細胞21. 基因工程的載體必須具備的條件: 能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存; 具有一至多個限制酶切點,以便與外源基因連接 具有某些標記基因,供重組 DNA 的鑒定和選擇。 對受體細胞無害 載體 DNA 分子大小應合適,以便提取和在體外進行操作22. 基因工程操作的核心步驟: 基因表達載體的構建23. 構建基因表達載體的目的: 使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定遺傳,并且可以遺傳下一代。 使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。24. 目的基因能否在真核

4、生物中穩(wěn)定遺傳的關鍵: 轉基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因。25. Ti 質粒上的 T DNA 的特點:Ti 質粒上的 T DNA(可轉移的 DNA 可轉移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的 DNA 上。26. 農桿菌轉化法中構建基因表達載體時目的基因插入的部位: Ti 質粒上的 T DNA 上專題 2:細胞工程1. 細胞工程中用到的酶,及其作用:纖維素酶,果膠酶:用于植物體細胞雜交技術中去除植物細胞壁。 胰蛋白酶:用于動物細胞培養(yǎng)技術中使剪碎的組織分散成單個細胞,和解除原代培養(yǎng)中細胞貼壁和接 觸抑制現(xiàn)象。2. 植物組織培養(yǎng)技術的原理: 植物細胞的全能性。3. 植物體細胞雜交技術的原

5、理: 植物細胞具有全能性。細胞膜具有流動性。選修 3 問題歸納 1-By Li CHO4. 動物細胞培養(yǎng)的原理: 細胞增殖。5. 動物細胞融合技術的原理: 細胞膜具有流動性。6. 動物(體)細胞核移植的原理: 動物細胞核的全能性。7. 去除細胞壁(獲得原生質體)的方法: 利用纖維素酶,果膠酶去除細胞壁。8. 誘導植物原生質體融合的方法:物理法:離心、振動、電擊等?;瘜W法:聚乙二醇( PEG 誘導。9. 培育無病毒植株的方法:植物組織培養(yǎng)(選取植物分生區(qū)附近(如莖尖)的細胞進行組織培養(yǎng),獲得脫毒苗。 )10. 制造人工種子的方法: 植物組織培養(yǎng) (以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、 不定芽、 頂芽和腋

6、芽等為材料, 經人工薄膜包裹得到的種子。)11. 將動物細胞分散成單個細胞的方法: 從健康動物體內取出組織塊,剪碎,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處 理一段時間,使組織分散成單個細胞。12. 去除卵母細胞的細胞核的方法: 通過顯微操作取出卵母細胞的細胞核。13. 激活核移植的重組細胞使其分裂和發(fā)育的方法: 用物理法或化學法(如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活受體細胞,使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。14. 誘導動物細胞融合的方法:物理法:離心、振動、電擊等。 化學法:聚乙二醇( PEG 誘導。生物法:滅活的病毒15. 傳統(tǒng)生產抗體的方法: 向動物體內反復注射抗原,使動物產生抗體,然后從動

7、物血清中分離所需的抗體。16. 制備單克隆抗體時篩選出雜交瘤細胞的方法:用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選(在該培養(yǎng)基上只有融合的雜種細胞才能生長) 。17. 制備單克隆抗體時篩選出產生專一抗體的雜交瘤細胞的方法: 對經過選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。18. 大量培養(yǎng)雜交瘤細胞及獲得單克隆抗體的方法: 在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng),在培養(yǎng)液中獲得單克隆抗體。 注射到小鼠體內增殖,在小鼠腹腔中提取單克隆抗體19. 卵母細胞采集的方法: 對于實驗動物(如小鼠、兔,以及家畜豬、羊等) :用促性腺激素處理,使其排出更多的卵子,然后從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。 對于大家畜或大

8、型動物(如牛):從屠宰場已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞,也可以借助超聲波探 測儀、內窺鏡或腹腔鏡等工具確定卵泡位置,直接從活體動物中吸取卵母細胞。20. 動物細胞核移植技術的受體細胞: 去核的卵母細胞21. 單克隆抗體所需的細胞: B 淋巴細胞( B 細胞分化后可產生抗體的漿細胞) 、骨髓瘤細胞22. 微型繁殖的特點(優(yōu)點) : 高效快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖; 保持優(yōu)良品種的遺傳特性; 不受自然生長季節(jié)的限制(因為在具有一定人工設施的室內生產) 。23. 雜交瘤細胞的特點: 既能產生特異性抗體,又能大量繁殖。24. 單克隆抗體的特點: 特異性強,靈敏度高,并可大量繁殖。25. 植物細胞表達全能

9、性所需的條件: 離體狀態(tài)。有一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件。26. 動物細胞培養(yǎng)的條件: 無菌、無毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液、培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具無菌處理) 營養(yǎng)(糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、促生長因子、動物血清、血漿等) 溫度(36.5 ± 0.5 C)和 pH (7.2-7.4 )選修 3 問題歸納 - 2-By Li CHO 氣體環(huán)境( 95 聽氣和 5% CQ )專題 3:胚胎工程1. 精子采集和獲能的方法: 假陰道法、手握法、電刺激法。2. 胚胎移植的供體和受體進行同期發(fā)情處理的方法: 注射相關激素。3. 使供體超數(shù)排卵的方法: 注射促性腺激素。4. 胚

10、胎收集的方法: 用特制的沖卵裝置,把供體母牛內的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)5 ?保存胚胎的方法: 放入-196 C 的液氮中保存6. 進行胚胎移植的方法: 手術法:引出受體子宮和卵巢,將胚胎注入子宮角,縫合創(chuàng)口。 非手術法:將裝有胚胎的移植管送入受體母牛子宮的相應部位,注入胚胎7. 對胚胎進行性別鑒定的方法: DNA 分子雜交技術(利用基因探針鑒定)分析胚胎細胞的染色體組型8. 胚胎移植、胚胎分割的時期: 囊胚或桑椹胚時期9. 胚胎移植的供體必須具備的條件: 遺傳性能和生產性能優(yōu)秀的個體10. 受體必須具備的條件: 有健康的體質和正常繁殖能力的個體。11. 胚胎工程的生理學基礎:生理學基礎 意義

11、同種動物的供體和受體發(fā)情排卵后,生殖器官的生理變化 是相同的。 為供體的胚胎移入受體提供相同的生理 環(huán)境。早期胚胎形成后,在一定時間內不會與母體子宮建立組織 上的聯(lián)系, 為胚胎的收集提供了可能而是處于游離狀態(tài)。受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應。 為胚胎在受體內的存活提供了可能供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系,但其 遺傳特性不 為移植后的胚胎繼續(xù)發(fā)育提供了營養(yǎng)等 方面的受影響。 保障12. 阻止多精入卵受精的屏障 :第一道屏障:透明帶反應第二道屏障:卵細胞膜反應13. 卵子是否受精的標志:卵細胞膜和透明帶之間是否出現(xiàn)第二極體。14. 哺乳動物受精卵發(fā)育經歷的時期及各時

12、期的主要特點:準備階段 1: 精子獲能:精子必須在雌性動物生殖道發(fā)生相應生理變化后,才能獲得受精能力的現(xiàn)象。準備階段 2: 卵子的準備:即卵子在輸卵管內達到減數(shù)第二次分裂中期( MH )時,才具備受精能力。 受精階段 : 精子穿越放射冠和透明帶(1) .頂體反應:使頂體內的酶釋放出來并溶解卵丘細胞之間的物質,形成精子穿越放射冠的通路。(2) .穿過放射冠:在卵子外圍集聚有幾十個精子,它們首先穿放射冠。(3) 穿過透明帶: 穿過放射冠的精子立即與透明帶接觸,頂體酶隨后將透明帶溶出一條孔道(第一道屏 障)(4) 透明帶反應: 當精子穿越透明帶,觸及卵細胞膜的瞬間,會產生阻止后來的精子進入透明帶的生

13、理 反應。 精子進入卵細胞膜卵細胞膜封閉作用: 精子入卵后,卵細胞膜會立即發(fā)生一種生理反應,拒絕其他精子再進入卵內,是防止 多精入卵受精的 第二道屏障 原核形成和融合精子進入卵子后 , 原有核膜破裂,形成新核膜,形成雄原核。卵子被激活完成減數(shù)第二次分裂,排出第二 極體,形成雌原核。兩者向細胞中部靠攏 , 并相互融合成一個細胞核 , 這時稱受精卵。 原核形成: 雄原核形成和雌原核形成 配子結合: 雌雄原核融合形成合子 (受精卵 )15. 如何獲得胚胎干細胞: 從早期胚胎或原始性腺分離出來。選修 3 問題歸納 -3-By Li CHO16. 胚胎干細胞的特點: 在形態(tài)上:體積小、細胞核大、核仁明顯

14、。 在功能上:具有發(fā)育全能性,既可以分化為成年動物體內任何一種組織細胞。專題 4:生物技術安全性和倫理問題1. 轉基因生物存在安全性的原因: 局限性:對基因的結構 ,基因間的相互作用及基因的調控機制都了解的相當有限 外源性:轉移的基因雖然是功能已知的基因 ,但不少是異種生物的基因 。 隨機性:外源基因插入宿主基因組的部分往往是隨機的。爭論主要集中在哪些方面: 食物安全、生物安全、環(huán)境安全。2. 設計試管嬰兒與試管嬰兒的主要區(qū)別: 設計試管嬰兒比試管嬰兒多出了胚胎移植前的遺傳學診斷過程。3. 中國政府對克隆人的態(tài)度: 禁止生殖性克隆人。四不原則:不贊成,不允許,不支持,不接受任何生殖性克隆人試驗

15、。但是,中國不反對治療性克隆。4. 中國政府對生物武器的態(tài)度:在任何情況下不發(fā)展、不生產、不儲存生物武器,并反對生物武器及其技術和設備的擴散。專題 5:生態(tài)工程1. 生態(tài)工程建設的目的: 遵循自然界物質循環(huán)的規(guī)律,充分發(fā)揮資源的生產潛力,防止環(huán)境污染,達到經濟效益和生態(tài)效益的同步發(fā)展。2. 生態(tài)工程的特點: 與傳統(tǒng)的工程相比,生態(tài)工程是一類少消耗、多效益、可持續(xù)的工程體系。3. 生態(tài)工程的基本原理有哪些,結合實例理解各原理。 物質循環(huán)再生原理理論基礎 : 生態(tài)系統(tǒng)的物質循環(huán) 物質能夠在各類生態(tài)系統(tǒng)中,進行區(qū)域小循環(huán)和全球地質大循環(huán),循環(huán)往復,分層分級利用,從而達到取 之不盡,用之不竭的效果。例

16、:無廢棄物農業(yè) 物種多樣性原理理論基礎:生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性 例:單一的樟子松林被松毛蟲害死 。食物鏈短而單調,缺少松毛蟲的天敵。珊瑚礁維持很高的生物多樣性 協(xié)調與平衡原理 理論基礎:生物與環(huán)境的協(xié)調與平衡 協(xié)調:適應平衡:處理好生物與環(huán)境的協(xié)調與平衡,需要考慮環(huán)境承載力,又稱環(huán)境容納量 例:水葫蘆泛濫對生態(tài)系統(tǒng)造成影響,西北地區(qū)衰敗的楊樹 整體性原理 理論基礎:社會、經濟、自然復合系統(tǒng) 人類處在一個社會、經濟、自然復合而成的系統(tǒng)中。進行生態(tài)工程建設時,不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的 規(guī)律,更重要的是要考慮到經濟和社會等系統(tǒng)的影響力。例:林業(yè)工程建設中的問題: 一方面號召農民種樹,另一方面要考慮

17、農民的生活問題 系統(tǒng)學和工程學原理(1)系統(tǒng)的結構決定功能原理理論基礎:分布式優(yōu)于集中式和環(huán)式運用:改變和優(yōu)化生態(tài)系統(tǒng)的結構,達到改善系統(tǒng)功能的目的例:?;~塘(2) 系統(tǒng)整體性原理理論基礎:整體功能大于部分之和系統(tǒng)各組分之間要有適當?shù)谋壤P系,只有這樣才能順利完成能量、物質、信息等的轉換和流通,并且實現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果,即“ 1 + 1>2 ”。例:珊瑚礁“白化”( 以下內容了解即可 )62. 其他相關問題歸納:(I) 需要用兩種限制酶同時切割目的基因和質粒比用同一種限制酶切割更好的原因: 避免質粒和質粒之間選修 3 問題歸納 - 4-By Li CHO目的基因和目的基因之

18、間的連接。 培育轉基因動物常用受精卵做受體細胞的原因: 受精卵的全能性高,細胞較大,易操作 將目的基因導入微生物細胞必須先用 ??7? 理的原因:未處理的微生物吸收外源 DNA 能力較弱。(4) 培育乳腺生物反應器時,必須將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起的原因: 轉基因動物進入泌乳期后,可以通過分泌乳汁來生產所需藥物。(5) 植物組織培養(yǎng)常選取分生組織做培養(yǎng)材料的原因: 幼嫩的組織脫分化較為容易。(6) 利用植物組織培養(yǎng)技術培育脫毒植物時取材部位及原因: 植物分生區(qū)附近 (如莖尖) 的病毒極少,甚至無病毒細胞具有全能性的原因: 具有某種生物的全部遺傳信息的任何一個細胞都具有

19、發(fā)育成完整生物的潛能。(7) 不同物種間一般進行體細胞雜交而不進行有性雜交的原因: 不同的兩種生物之間存在著天然的生殖隔離,用傳統(tǒng)的雜交方法不可能得到二者的雜種后代。(8) 動物細胞培育常選擇胚胎或幼齡動物的組織和器官的原因: 胚胎或幼齡動物的組織和器官分裂能力強,增殖能力強。(9) 動物細胞培育通常得到單層細胞的原因: 動物細胞存在細胞貼壁現(xiàn)象,培養(yǎng)貼附性細胞時細胞要貼附在底物上才能生長繁殖。(10) 轉基因克隆助器官無免疫排斥反應的原因: 豬的內臟構造、大小、血管分布與人極為相似,而且豬體內隱藏的可導致人類疾病的病毒要遠遠少于靈長類動物。(II) 動物細胞培養(yǎng)液中加入抗生素并需要定期更換培

20、養(yǎng)液的原因: 防止培養(yǎng)過程中的污染,以便清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成傷害。(12) 動物細胞培養(yǎng)液及發(fā)育培養(yǎng)液中需要加入動物血清及血漿的原因: 補充培養(yǎng)基中缺乏的物質。(13) 動物細胞培育的氣體條件: 95% 勺空氣,5% 勺 CO2加入氧氣的作用: 02 是細胞代謝所必須的物質加入???的作用:維持溶液的 pH(14) 核移植的供體細胞一般選擇傳代 10 代以內的原因: 該種細胞代謝旺盛分裂能力強且遺傳物質未發(fā)生改變。(15) 核移植的供體細胞一般選擇 Mil 期去核卵母細胞的原因: 因為 Mil 期卵母細胞核位置靠近第一極體用微型吸管一并吸出細胞核與第一極體。卵母細胞

21、去核的原因: 為使核移植的胚胎或動物的遺傳物質全部來自有重要利用價值的動物提供的體細胞(16) 核移植的動物與供體動物遺傳物質不完全相同的原因: 絕大部分 DNA 來自供體細胞核,但其核外還有少量的 DNA 即線粒體中的 DNA 是來自于受體卵母細胞。此外還受環(huán)境因素的影響。(17) 核移植的動物與受體動物遺傳物質不完全相同的原因: 核移植的胚胎的遺傳物質全部來自供體細胞。(18) 制備單克隆抗體時,誘導動物細胞融合后需要篩選的原因: 在誘導動物細胞融合后會出現(xiàn)許多種類的細胞。采集的是未成熟的卵母細胞。(19) 從卵巢采集的卵母細胞一般需要經過培養(yǎng)才能進行受精的原因:(20) 精子必須獲能的原

22、因: 要讓精子具有受精能力。(21) 胚胎移植為什么被稱為胚胎工程的最后一道“工序” :因為在胚胎工程中通過任何一項技術都必須移 植給受體才能遺傳給后代。(22) 試管動物屬于有性生殖的原因: 經過體外受精。(23) 胚胎分割屬于無性生殖的原因: 來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質。(24) 胚胎分割必須將內細胞團均等分割的原因: 不均等分割會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。(25) 將外源基因導入線粒體或葉綠體中可以避免通過花粉擴散的原因: 花粉中沒有線粒體和葉綠體。(26) 外源基因導入受體細胞后導致細胞死亡的原因: 無具體答案。選修 3 問題歸納 -5-By Li CHO63. 理解

23、并熟記下列相關過程和圖解:(1) 基因工程的操作步驟: P8(2) 農桿菌轉化法示意圖: P12(3) 蛋白質工程操作流程: P27(4) 植物組織培養(yǎng)的過程: 植物體細胞雜交技術的流程: P36(5) 動物細胞培養(yǎng)過程: P45(6) 動物細胞核移植過程: P48(7) 體細胞核移植技術用于人類疾病治療的過程: P49(8) 動物細胞融合的過程: P52(9) 單克隆抗體制備的過程: P53(10) 精子細胞變形成精子示意圖 P61:(11) 受精過程: P65(12) 哺乳動物早期胚胎發(fā)育過程: P66(13) 哺乳動物體外受精的過程: P72(14) 牛胚胎移植過程: P77(15) 牛胚胎分割和性別鑒定示意圖: P79(1

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