粗毛淫羊藿黃酮提取物的制備工藝研究

1、粗毛淫羊藿黃酮提取物的制備工藝研究         09-09-06 14:47:00     編輯：studa20                     作者：盛茂銀，楊慶雄，陳慶富【摘要】  目的優(yōu)選淫羊藿黃酮類物質(zhì)的制備工藝。方法設(shè)計(jì)了6 種提取工藝對(duì)粗毛淫羊藿

2、黃酮類物質(zhì)的制備進(jìn)行了研究。結(jié)果6 種工藝提取物產(chǎn)量順序?yàn)楣に?，1 工藝2 工藝3，4，5。不同工藝提取物總黃酮含量有極顯著差異，其高低依次為：工藝3工藝1工藝2工藝4工藝5工藝6。工藝2，4，6提取物淫羊藿苷含量最高，其次是工藝3，均顯著高于其余工藝，而工藝1 提取物的淫羊藿苷含量最低，平均值僅有0.70 %。結(jié)論工藝2 和3 較好，其提取物產(chǎn)量、總黃酮含量和淫羊藿苷含量均較高，對(duì)相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有一定的參考意義。 【關(guān)鍵詞】  粗毛淫羊藿 黃酮 淫羊藿苷 提取工藝Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction technology of

3、 flavonoids from  E. acuminatum. MethodsSix extraction technologies were compared by the extracting output and the content of flavonoids and icariin.ResultsThe order of extracting output was Technology-6 and 1 Technology-2 Technology -4, 3 and 5. There were significant differences among flavone

4、 contents in extracts from six technics, with the order: Technology-3 Technology-1 Technology-2 Technology-4 Technology-5 and 6. The icariin contents of extracts from technology 2, 4, and 6 were the highest, Technology 3 the second, and they were all significant higher than the others. The icariin c

5、ontent of Technology-1 extract was the lowest, only 0.70%.ConclusionThe better extracting technologies are Technology 2 and 3, which have higher  extracting output,flavone and icarii contents from E. acuminatum than others.Key words：Epimedium acuminatum;   Flavoniods; Icariin; &#

6、160; Extracting technology淫羊藿(barrenwort)是我國(guó)著名的傳統(tǒng)中藥，為小檗科(Berberidaceae)淫羊藿屬Epimedium L.多年生草本藥用植物，又名仙靈脾、羊合葉等1。早在神農(nóng)本草經(jīng)即記載其“主陰痿絕傷、莖中痛、益氣力、強(qiáng)志”。本草綱目稱其為“堅(jiān)筋骨，益精氣，補(bǔ)腰脾，強(qiáng)心力”。近年來(lái)，研究表明淫羊藿的藥理主要集中在免疫、生殖系統(tǒng)、核酸代謝、心腦血管系統(tǒng)及抗衰老等方面，同時(shí)在抗腫瘤方面的藥效研究也取得一定的進(jìn)展2。目前的藥理研究認(rèn)為，該屬植物的有效成分是總黃酮，其中核心成分是淫羊藿苷3。本屬植物大多種類均可藥用，以箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊

7、藿、朝鮮淫羊藿和粗毛淫羊藿使用最多。其中，粗毛淫羊藿由于其具有巨大的野生蘊(yùn)藏量，以及很高的總黃酮與淫羊藿苷含量，將會(huì)成為中藥淫羊藿最主流品種之一4。    中藥提取物是指采用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，對(duì)傳統(tǒng)中藥材進(jìn)行提取加工而得到的具有相對(duì)明確藥效物質(zhì)基礎(chǔ)以及嚴(yán)格控制標(biāo)準(zhǔn)的中藥產(chǎn)品，可作為中藥制劑的原料藥和食品添加劑5。由于中藥提取物的標(biāo)準(zhǔn)化相對(duì)于原材料標(biāo)準(zhǔn)化要容易得多，所以中藥提取物的產(chǎn)業(yè)化是推進(jìn)中藥現(xiàn)代化和中藥技術(shù)創(chuàng)新的重要環(huán)節(jié)，也是中藥進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)最現(xiàn)實(shí)的突破口。淫羊藿由于在藥用、保健方面具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，導(dǎo)致其在提取物市場(chǎng)成為最熱門品種之一，國(guó)內(nèi)具有其生產(chǎn)能力的產(chǎn)家

8、就多達(dá)數(shù)十家。目前淫羊藿提取物的標(biāo)準(zhǔn)是總黃酮與淫羊藿苷兩種成分的含量。 到目前為止，淫羊藿提取物產(chǎn)業(yè)，已具備了一定的規(guī)模，但該提取物的研制、生產(chǎn)、流通等各個(gè)環(huán)節(jié)都缺乏必要的管理規(guī)范，使得相關(guān)產(chǎn)品眾多、規(guī)格雜、生產(chǎn)企業(yè)多而小、經(jīng)營(yíng)渠道雜、經(jīng)營(yíng)秩序混亂，致產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，這都阻礙了淫羊藿提取物產(chǎn)業(yè)化的更進(jìn)一步發(fā)展。本研究設(shè)計(jì)了6 種提取工藝分別對(duì)粗毛淫羊藿進(jìn)行了提取物的制備，并且對(duì)所得提取物的總黃酮與淫羊藿苷含量進(jìn)行了測(cè)定、統(tǒng)計(jì)分析比較，來(lái)討論6種提取工藝的優(yōu)劣，對(duì)淫羊藿提取物的制備及其產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展提供一定的參考。1 儀器與試劑Shimadzu LC-2010A型高效液相色譜儀，Y

9、MC Pack-ODS-A 150 mm×4.6mm 型HPLC色譜柱，Shimadzu UV-2450型紫外-可見光譜儀，Sartorius LE225D型電子分析天平，中國(guó)藥品生物制品檢定所的淫羊藿苷標(biāo)準(zhǔn)品（0737-200111），甲醇、乙腈均為色譜純（默克公司）。    實(shí)驗(yàn)材料為粗毛淫羊藿E. acuminatum Franch.，由貴州師范大學(xué)植物遺傳育種研究所采集隊(duì)采集于貴州省開陽(yáng)縣，憑證標(biāo)本（標(biāo)本號(hào)：05060301）存于貴州師范大學(xué)植物遺傳育種研究所標(biāo)本室。2  方法與結(jié)果2.1  6 種提取工藝及其提取物的得率2.

10、1.1  6 種提取工藝的流程2.1.2  6種提取工藝的提取物得率及其多重比較每種工藝提取3 次，對(duì)所得結(jié)果運(yùn)用生物統(tǒng)計(jì)方法中的多重比較6來(lái)分析這6 種提取工藝的提取物得率高低的次序。結(jié)果見表1。表1  6種提取工藝的提取物得率及多重比較（略）    由表1可以看出，6 種工藝的提取物得率具有顯著的差異，其中以工藝6 和工藝1 的得率最高，工藝2 次之。工藝3 與工藝4 的提取物得率沒(méi)有極顯著的差異，工藝5 的得率最差。2.2  6種提取工藝的提取物總黃酮含量測(cè)定2.2.1  對(duì)照品溶液制備精密稱取干燥至恒重的淫

11、羊藿苷對(duì)照品適量，用乙醇溶解，制成1 mg/ml的溶液作為對(duì)照品溶液。2.2.2   供試品溶液制備精密稱取干燥至恒重的提取物0.1 g，用乙醇溶于100 ml的容量瓶中，超聲30 min，放置冷卻，定容，作為供試品溶液。2.2.3   最大吸收波長(zhǎng)的測(cè)定分別精密稱取對(duì)照品和供試品溶液1 ml，各置100 ml容量瓶中，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下操作，用紫外分光光度計(jì)于220400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描，得紫外吸收光譜。結(jié)果表明，供試品紫外吸收曲線及最大吸收波長(zhǎng)270 nm，與淫羊藿苷對(duì)照品完全一致，故采用270 nm波長(zhǎng)測(cè)定供試品的吸收度。2.2.4   標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取對(duì)照品溶液0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 ml置100 ml容量瓶中，置80 水浴中揮盡溶劑，放冷，加硫酸2 ml搖勻，置80