不同廠家的銀杏葉片黃酮含量的比較與分析

1、    不同廠家的銀杏葉片黃酮含量的比較與分析        摘要目的：對(duì)市售不同品牌的銀杏葉片進(jìn)行質(zhì)量考查，制訂科學(xué)合理 統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：采用HPLC測(cè)定了11個(gè)制藥公司的15批銀杏葉片 的黃酮含量。結(jié)果：各制藥公司生產(chǎn)的銀杏葉片黃酮含量差異較大，且 主要峰之間的比例亦有差異。結(jié)論：建議進(jìn)一步考察工藝，制訂統(tǒng)一的 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以保證銀杏葉片質(zhì)量。關(guān)鍵詞銀杏葉片；黃酮；HPLCComparative study of the flavonoids from tablets

2、of Ginkgo biloba Tao Qiaofeng(Tao QF)(Zhejiang Provincial Institute f or Drug Control,Hangzhou 310004)ABSTRACTOBJECTIVE：To comparative the quality of tablet s of Ginkgo biloba on market.METHODS:The flavonoids were analysed in 15 batches of the tablets produced by 11 manufactures using RP-HPLC.RESUL

3、TS:These batches of tablets differ greatly in the flavonoids and the ratio of three main peaks.CONCLUSION:The experiment provided the data and method for improving the technique of preparation and quality of the tablets.KEY WORDStablet of Ginkgo biloba,flavonoids,HPLC 近年來，銀杏葉已成為植物藥開發(fā)研究的熱點(diǎn)，由于銀杏葉含有黃酮類

4、化合物和萜類銀杏內(nèi) 酯等獨(dú)特的活性成分，備受國(guó)內(nèi)外的關(guān)注。我國(guó)在銀杏葉制劑開發(fā)研究中也取得了很大進(jìn)展 ，大批新產(chǎn)品問世，如片劑、膠囊劑、口服液、茶劑等。目前銀杏葉提取物及制劑尚無統(tǒng)一 的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，就所含的銀杏黃酮亦無統(tǒng)一的含量測(cè)定方法。本文參考文獻(xiàn)對(duì)市售11個(gè)制藥公 司生產(chǎn)的15批銀杏葉片進(jìn)行了黃酮含量測(cè)定并作比較分析，為該制劑的工藝改進(jìn)及制訂統(tǒng)一 的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供數(shù)據(jù)和方法。1儀器與試藥Waters高效液相色譜儀(配備510泵、U6k進(jìn)樣器、490檢測(cè)器、820色譜工作站),CQ-250型超 聲波清洗器(上海超聲波儀器廠)。槲皮素、異鼠李素(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，山奈酚(s igma公司，

5、含量90%，定性用)，甲醇(色譜純)，其它試劑為分析純。銀杏葉片(市售)。2實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果2.1色譜條件：色譜柱為Nova-pa k C18(4)200×4mm(大連化物所)，流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸溶液(11),檢測(cè)波長(zhǎng)36 0nm,靈敏度0.10.3AUFS,進(jìn)樣量10l,柱溫為室溫。色譜見1，2。2.2測(cè)定方法：取銀杏葉片20片(糖衣片除糖衣)，精密稱定，研細(xì)，精 密稱取適量(相當(dāng)于銀杏黃酮80mg),精密加入甲醇25ml,稱定重量，超聲處理20min，取出并放 冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失重量，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液10ml置燒 瓶中，加入甲醇10ml,4%

6、硫酸溶液20ml,置水浴回流3h,放冷，用甲醇定量轉(zhuǎn)移置50ml量瓶， 搖勻，濾膜濾過即為供試品溶液。另取槲皮素對(duì)照品適量用甲醇溶解并制成0.12mg/ml的溶 液作為對(duì)照品溶液。分別量取上述兩溶液注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積，計(jì)算槲皮素(Q)、 山奈酚(K)、異鼠李素(I)三個(gè)甙元含量，乘以計(jì)算因子相加即得銀杏黃酮含量，計(jì)算公式為 :756.7/302.2×Q+740.7/286.2×K+770.6/316.2×I，測(cè)定結(jié)果見表1。1對(duì)照品色譜Q- 槲皮素；K-山萘酚；-異鼠李素(下同)2樣品色譜表1銀杏葉片黃酮含量測(cè)定結(jié)果生產(chǎn)廠批號(hào)標(biāo)示量(mg/片)測(cè)定結(jié) 果(

7、mg/片)標(biāo)示量的百分含量(%)三個(gè)甙元的比例(QKI)A9411039.66.4266.910.800.36B9410159.69.75101.610.360 .21B9412109.611.45119.311.030.33C9410109.69.84102.511.100.40C9504139.69.85102 .610.860.40C9510309.610.04104.610.970.39D9505039.68.9092.711.020.30E9501019. 69.84102.510.760.37F9503029.66.2665.21 0.930.53G9306019.60.11-G9

8、409029. 60.11-H9405019.68.2585.911.200.43K9406149.68.3386.811.240.42ICHB01106959.68.6690.210.880.27J240297.26.9296.110.850.263討論3.1從表1可見，目前市 場(chǎng)上的銀杏葉片生產(chǎn)廠家較多且標(biāo)示量相同為含銀杏內(nèi)酮9.6mg/片(含銀杏葉提取物40mg/片 )，但不同廠家的銀杏黃酮測(cè)定結(jié)果差異很大，15批中有11批在標(biāo)示量的80%120%,兩批只 有標(biāo)示量的60%,還有2批含量甚微(幾乎檢不出)。有必要對(duì)銀杏片及中間體提取物制訂統(tǒng)一 的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以保證臨床療效。3.2據(jù)報(bào)道17

9、，銀杏葉 中黃酮類化合物主要是以槲皮素(Q)、山奈酚(K)、異鼠李素(I)為甙元的，其中Q和K為主要 甙元，I僅為Q或K的1/52/5,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見，除B廠941015和G廠的2批樣品外，12批樣品 中三種甙元比例(QKI)為1(0.98±0.16)(0.38±0.07)，這一結(jié)果與報(bào)道相符。但B 廠941015為10.360.21,即槲皮素含量大大高出山奈酚含量，這是什么原因引起值得進(jìn)一 步研究，銀杏葉中的甙元比例反映了其所含化學(xué)成分的特性，這一信息須引起我們的足夠重 視，合理的比例可確保以多組分共存的銀杏葉的內(nèi)在質(zhì)量及其提取工藝的科學(xué)性。3.3目前銀杏黃酮的分析方法多

10、為HPLC法，但在測(cè)定條件及計(jì)算上均存 在差異，本文建議在研究的基礎(chǔ)上對(duì)測(cè)定方法標(biāo)準(zhǔn)化，同時(shí)對(duì)另一有效成分銀杏內(nèi)酯制訂相 應(yīng)的質(zhì)量控制方法。 作者單位：杭州 310004 浙江省藥品檢驗(yàn)所參考文獻(xiàn)1Hasler A,Sticher O,Meier B.Identification and det ermination of the flavonoids from Ginkgo biloba by high performance liquid chrom atography.J Chromatogr,1992,60541.2Sticher O.Quality of Ginkgo preparations.Planta M ed,1993,592.3陶巧鳳，黃宗玉，范秀林.高效液相色譜法測(cè)定銀杏葉制 劑中黃酮含量.中成藥，1994，15(12)14.4浙江省藥品標(biāo)準(zhǔn).浙Q/WS-1362-93.5廣東省藥品標(biāo)準(zhǔn).粵Q/WS-3527-94.6Pietta PG,Mauri PG,Bruno A.Identification of flav onoids from Ginkgo biloba L.,Anthemis nobilis L. and Equisetum arv