化妝品32種禁限用染料成分的檢測(cè)方法和編制說明(共36頁)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)附件 2：化妝品中 32 種禁限用染料成分的檢測(cè)方法1 范圍本方法規(guī)定了測(cè)定染發(fā)類化妝品中 32 種禁限用染料成分（見附錄 A）的高效液相色譜法。本方法適用于染發(fā)類化妝品中 32 種禁限用染料成分的含量測(cè)定。本方法無法區(qū)分所涉及染料成分的游離態(tài)、硫酸鹽和鹽酸鹽，化妝品中各種形態(tài)同時(shí)存在時(shí)，應(yīng)換算成一種形態(tài)，以總量表示。2 原理用無水乙醇+水=1+1 的混合溶液提取染發(fā)類化妝品中的 32 中禁限用染料成分，用高效液相色譜儀進(jìn)行分析，以保留時(shí)間和紫外吸收光譜定性，峰面積定量。本方法中 32 種禁限用染料成分的檢出限、定量下限及取 0.5g 樣品時(shí)的檢出濃度

2、及最低定量濃度見表 1。表 1 32 種禁限用染料成分的檢出限、檢出濃度、定量下限、最低定量濃度序號(hào) 附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱檢出限/ g檢出濃度/（g/g）定量下限/ g最低定量濃度/（g/g）131,5-萘二酚5.010-3201.510-260251-萘酚3.010-3121.010-240382,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl8.010-3322.510-21004102,6-二氨基吡啶1.510-26057-萘二酚3.010-3121氨基-3-羥基吡啶1.310-2524氯-p-苯二胺硫酸鹽1.510-2

3、605甲基雷瑣辛1.310-2524硝基-p-苯二胺5.010-3201.510-260精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)序號(hào) 附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱檢出限/ g檢出濃度/（g/g）定量下限/ g最低定量濃度/（g/g）10314-氨基-2-羥基甲苯6.510-3262氨基-3-硝基苯酚6.510-3262氨基-m-甲酚8.010-3322.510-210013344-氯雷瑣辛5.010-3201.510-26014364-硝基-o-苯二胺1.510-2605.010-22

4、0015406-氨基-m-甲酚1.010-2403.010-212016426-羥基吲哚3.010-3121醌3.010-3121-氨基苯酚6.510-3262-苯二胺8.010-3322.510-21002072N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽2.510-21007.510-23002173N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽2.510-21007.510-23002274N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl2.010-2806-苯基-p-苯二胺2.510-3108.010-3

5、322481o-氨基苯酚6.510-3262-氨基苯酚6.510-3262基甲基吡唑啉酮2.010-2806-甲基氨基苯酚硫酸鹽1.010-2403-苯二胺1.210-2483.510-21402991間苯二酚8.010-3322.510-2100精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)序號(hào) 附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱檢出限/ g檢出濃度/（g/g）定量下限/ g最低定量濃度/（g/g）3095甲苯-2,5-二胺硫酸鹽2.010-2806苯-3,4-二胺8.0

6、10-3322.510-210032OPDo-苯二胺8.010-3322.510-21003 試劑 除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為超純水。3.1 無水乙醇。3.2 甲醇，色譜純。3.3 乙腈，色譜純。3.4 亞硫酸氫鈉。3.5 磷酸溶液（1+9）：吸取磷酸（20=1.69g/mL）10mL，加水 90mL。3.6 磷酸鹽混合溶液：稱取十二水合磷酸氫二鈉 1.8g、磷酸二氫鉀 2.8g 和庚烷磺酸鈉（C7H15SO3Na）1.0g，用水稀釋至 1L，混勻，配制成含庚烷磺酸鈉（1g/L）的磷酸鹽緩沖液，加入磷酸溶液（3.5） ，調(diào)節(jié) pH 至 6.0 左右，0.45m 微孔濾膜過濾。3.7

7、 染料類化合物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（染料成分）=10g/L）：稱取染料對(duì)照品約100mg（精確至 0.1mg）于 10mL 容量瓶中，以 2g/L 亞硫酸氫鈉水溶液 + 無水乙醇（3.1）=1+1 的混合溶液定容至 10mL，配成約 10g/L 的單標(biāo)溶液。以下幾種物質(zhì)在上述溶劑中的溶解性較差，分別采取如下措施：甲苯-2,5-二胺硫酸鹽和 2-氯-p-苯二胺硫酸鹽 2 種物質(zhì)直接用 2g/L 亞硫酸氫鈉水溶液溶解并定容；甲苯-3,4-二胺直接用無水乙醇（3.1）定容；2-硝基-p-苯二胺和 4-硝基-o-苯二胺需將稱樣量減至 25mg，再用無水乙醇（3.1）定容，配成約2.5g/L 的單標(biāo)溶液。儲(chǔ)備液

8、保存于 04冰箱中，最多使用 2 天。4 儀器和設(shè)備4.1 高效液相色譜儀，具有二極管陣列檢測(cè)器。4.2 pH 計(jì)。4.3 超聲波清洗器。4.4 離心機(jī)。精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)5 分析步驟5.1 樣品預(yù)處理樣品預(yù)處理稱取樣品約 0.5g（精確至 1mg）于 10mL 具塞比色管中，加無水乙醇（3.1）+ 水=1+1的混合溶液至刻度，超聲提取 15min。超聲過程中，若水溫高于 40應(yīng)停置降溫，冷卻后繼續(xù)超聲，直至樣品溶液完全均一化。渾濁溶液可取適量高速離心，取上清液經(jīng) 0.45m微孔濾膜過濾，濾液作為待測(cè)溶液，并盡快測(cè)定。5.2 測(cè)定測(cè)定5.2.1 色譜參考條件色譜柱：Su

9、pelco DISCOVERY RP-AMIDE C16柱（250mm4.6mm，5m）或等同柱；色譜保護(hù)柱：Supelco DISCOVERY RP-AMIDE C16保護(hù)柱（20mm4.0mm，5m）或等同柱；流動(dòng)相 1：乙腈（3.3）+ 磷酸鹽混合溶液（3.6）=10 + 90；流動(dòng)相 2：甲醇（3.2）+ 磷酸鹽混合溶液（3.6）=10 + 90；流動(dòng)相 3：乙腈（3.3）+ 磷酸鹽混合溶液（3.6）=40 + 60；流量：1.0mL/min；檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；柱溫：25。5.2.2 校準(zhǔn)曲線的制備參照色譜圖 1色譜圖 3，對(duì) 32 種禁限用染料成分進(jìn)行分

10、組，并根據(jù)分組情況，分別移取適量染料類化合物標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（3.7）于 10mL 容量瓶中，用無水乙醇（3.1）稀釋至刻度，配成 500mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。各取混合標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用無水乙醇（3.1）稀釋，配成 10mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、250mg/L、500mg/L 共 6 個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)系列。標(biāo)準(zhǔn)系列應(yīng)于使用前配制。取各標(biāo)準(zhǔn)系列 5L 注入高效液相色譜儀，分別采用 3 種流動(dòng)相進(jìn)行分析，記錄各色譜峰面積，繪制校準(zhǔn)曲線。32 種禁限用染料成分在流動(dòng)相 1 和流動(dòng)相 2 中的保留時(shí)間參考附錄 B。5.2.3 樣品測(cè)定 在設(shè)定色譜條件下，取待測(cè)溶液 5L 注入

11、高效液相色譜儀，分別采用 3 種流動(dòng)相體系精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)進(jìn)行分析。色譜圖檢出的物質(zhì)，經(jīng)與該物質(zhì)對(duì)照品的保留時(shí)間和紫外光譜圖比較確證后，根據(jù)峰面積，從校準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)組分的質(zhì)量濃度。若待測(cè)溶液中染料成分的質(zhì)量濃度超過了校準(zhǔn)曲線線性范圍的上限，需對(duì)待測(cè)溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋。注：實(shí)際操作過程中，可參考附錄 B 中 32 種禁限用染料成分在流動(dòng)相 1 和流動(dòng)相 2 中的保留時(shí)間，并結(jié)合色譜分離情況和樣品中染料成分的不同，對(duì) 32 種染料成分進(jìn)行合理分組，使各染料成分獲得完全分離。6 平行實(shí)驗(yàn) 按以上步驟，做兩份樣品的平行測(cè)定。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不大

12、于這兩次測(cè)定值的算術(shù)平均值的 10%。7 結(jié)果計(jì)算 D Vw（染料成分）= 100 （1） m 106式中：w（染料成分） 染發(fā)類化妝品中染料成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%； 從校準(zhǔn)曲線上查得的待測(cè)樣液中染料成分的質(zhì)量濃度，mg/L；V 樣品定容體積，mL；m 樣品取樣量，g；D 稀釋倍數(shù)（不稀釋則取 1） 。8 回收率和精密度32 種禁限用染料成分的提取回收率在 82% 115%之間，方法回收率在 86% 114%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在 1.1% 9.9%之間。9 色譜圖精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)min0510152025mAU050100150200 DAD1 D, Sig=280,8

13、Ref=off (RFJ20110808RFJ20110808 2011-08-08 09-06-15RFJ00007.D) 3.808 4.958 5.471 6.213 6.694 7.268 8.391 9.166 10.848 11.149 13.547 14.072 16.359 17.915 21.117 24.136 25.506圖 1 第一組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 11：p-苯二胺；2：p-氨基苯酚；3：甲苯-2,5-二胺硫酸鹽；4：m-氨基苯酚；5：o-苯二胺；6：2-氯-p-苯二胺硫酸鹽；7：o-氨基苯酚；8：間苯二酚；9：2-硝基-p-苯二胺；10：甲苯-3,4-

14、二胺；11：4-氨基-2-羥基甲苯；12：2-甲基雷瑣辛；13：6-氨基-m-甲酚；14：苯基甲基吡唑啉酮；15： N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl；16：4-氨基-3-硝基苯酚min05101520253035mAU01020304050 DAD1 E, Sig=280,16 Ref=off (RFJ20110713RFJ20110712 2011-07-13 14-25-18RFJ00026.D) 5.710 7.296 8.745 10.217 11.447 12.618 15.010 22.369 23.385圖 2 第二組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 21：m-苯二胺；2：

15、2,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl；3：氫醌；4：4-氨基-m-甲酚；5：2-氨基-3-羥基吡啶；6：N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽；7：p-甲基氨基苯酚硫酸鹽；8：4-硝基-o-苯二胺；9：2,6-二氨基吡啶；10：N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)min02.557.51012.51517.52022.5mAU024681012 DAD1 E, Sig=280,8 Ref=off (RFJ20110801RFJ20110801 2011-08-01 10-55-31RFJ00021.D) 4.012 5.361 6.454 7.482 8.

16、589 11.781 12.541 22.142圖 3 第三組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 31：N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl；2：苯基甲基吡唑啉酮；3：6-羥基吲哚；4：4-氯雷瑣辛；5：2,7-萘二酚；6：N-苯基-p-苯二胺；7：1,5-萘二酚；8：1-萘酚精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)附錄 A32 種禁限用染料成分信息表編號(hào)INCI 名中文名稱31,5-Naphthalenediol1,5-萘二酚51-Naphthol1-萘酚82,4-Diaminophenoxyethanol HCl2,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl102,6-diaminopyridine2

17、,6-二氨基吡啶132,7-Naphthalenediol2,7-萘二酚152-amino-3-hydroxypyridine2-氨基-3-羥基吡啶212-Chloro-p-phenylenediamine sulfate2-氯-p-苯二胺硫酸鹽242-Methylresorcinol2-甲基雷瑣辛252-Nitro-p-phenylenediamine2-硝基-p-苯二胺314-Amino-2-hydroxytoluene4-氨基-2-羥基甲苯324-Amino-3-nitrophenol4-氨基-3-硝基苯酚334-Amino-m-cresol4-氨基-m-甲酚344-Chlororeso

18、rcinol4-氯雷瑣辛364-Nitro-o-phenylenediamine4-硝基-o-苯二胺406-Amino-m-cresol6-氨基-m-甲酚426-Hydroxyindole6-羥基吲哚61Hydroquinone氫醌67m-Aminophenolm-氨基苯酚70m-Phenylenediaminem-苯二胺72N,N-Bis(2-hydroxyethyl)-p- phenylenediamine sulfateN,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽73N,N-Diethyl-p-phenylenediamine sulfateN,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽74N,N-Di

19、ethyltoluene-2,5-diamine HClN,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl78N-Phenyl-p-phenylenediamineN-苯基-p-苯二胺81o-Aminophenolo-氨基苯酚83p-Aminophenolp-氨基苯酚85Phenyl methyl pyrazolone苯基甲基吡唑啉酮精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)編號(hào)INCI 名中文名稱87p-Methylaminophenol sulfatep-甲基氨基苯酚硫酸鹽88p-Phenylenediaminep-苯二胺91Resorcinol間苯二酚95Toluene-2,5-diamine s

20、ulfate甲苯-2,5-二胺硫酸鹽96Toluene-3,4-diamine甲苯-3,4-二胺OPDo-Phenylenediamineo-苯二胺精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)附錄 B32 種禁限用染料成分在流動(dòng)相 1 和流動(dòng)相 2 中的保留時(shí)間參考數(shù)據(jù)表保留時(shí)間/ min出峰順序附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱流動(dòng)相 1流動(dòng)相 2188p-苯二胺5.0496.163282,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl5.0847.176370m-苯二胺5.2445.681483p-氨基苯酚5.5877.1335152-氨基-3-羥基吡啶6.39611.125695甲苯-2,5-二胺硫酸鹽6.4408.

21、750772N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽6.72212.067867m-氨基苯酚6.7877.4569334-氨基-m-甲酚7.3410.0371061氫醌7.3388.63911OPDo-苯二胺7.4098.15612212-氯-p-苯二胺硫酸鹽8.61910.0761381o-氨基苯酚9.34510.5561487p-甲基氨基苯酚硫酸鹽9.54914.93115102,6-二氨基吡啶10.72423.231691間苯二酚11.16513.33617252-硝基-p-苯二胺11.52713.2901896甲苯-3,4-二胺14.24518.76519314-氨基-2-羥基甲苯1

22、4.86320.54220242-甲基雷瑣辛16.58219.7652173N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽16.77534.27722406-氨基-m-甲酚18.59626.69623364-硝基-o-苯二胺19.97722.0542485苯基甲基吡唑啉酮22.17633.7942574N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl26.43850精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)出峰順序附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱保留時(shí)間/ min流動(dòng)相 1流動(dòng)相 226324-氨基-3-硝基苯酚26.80734.85427426-羥基吲哚35.05643.50428344-氯雷瑣辛48.193502913

23、2,7-萘二酚50503078N-苯基-p-苯二胺50503131,5-萘二酚50503251-萘酚5050精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)化妝品中 32 種禁限用染料成分的檢測(cè)方法編制說明1 任務(wù)來源受國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局保健食品化妝品監(jiān)管司委托，根據(jù)食藥監(jiān)許函2011126 號(hào)關(guān)于委托組織開展化妝品中 m-苯二胺等八種禁用物質(zhì)或限用物質(zhì)檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)研究的函和食藥監(jiān)許函2011262 號(hào)關(guān)于委托開展化妝品中 24 種染發(fā)劑的檢測(cè)方法研究的函 ，開展化妝品中 32 種禁限用染料成分檢測(cè)方法研究，建立染發(fā)類化妝品中多種染料成分的快速、準(zhǔn)確、靈敏的色譜檢測(cè)方法。2 研究背景染發(fā)作為美容

24、方式之一，已經(jīng)成為一種世界流行的時(shí)尚。在英國(guó)，染發(fā)劑的消費(fèi)增長(zhǎng)率已經(jīng)連續(xù) 8 年高居生活必需品之首。染發(fā)劑可分為氧化型（永久性）染發(fā)劑、直接型（暫時(shí)性或半永久性）染發(fā)劑、金屬鹽類染發(fā)劑、天然植物型染發(fā)劑等。其中的氧化型染發(fā)劑以其染色效果好、維持時(shí)間長(zhǎng)等諸多優(yōu)點(diǎn)在歐洲和美國(guó)占到市場(chǎng)分額的 80%。染發(fā)劑中的染料成分多屬于芳香胺類化合物，芳香胺中有很多物質(zhì)具有致癌性，所以染發(fā)劑的安全性一直受到人們的極大關(guān)注。在我國(guó)，消費(fèi)人群也不斷擴(kuò)大，由于大面積使用染發(fā)劑的時(shí)間并不長(zhǎng)，目前染發(fā)劑引起的各種健康問題并沒有引起人們的足夠重視，但是染發(fā)人群出現(xiàn)低齡化，意味著人們?nèi)景l(fā)的時(shí)間可能越來越長(zhǎng)，而染發(fā)劑的各種隱性

25、危害很可能在今后幾年內(nèi)突出地顯現(xiàn)出來。由染發(fā)劑引起的過敏反應(yīng)非常普遍，長(zhǎng)期使用還可能致畸、致突變及引起內(nèi)分泌效應(yīng)等。鑒于染發(fā)劑存在的各種安全問題及數(shù)目龐大的接觸者和使用者，加強(qiáng)對(duì)染發(fā)劑的衛(wèi)生管理和日常監(jiān)督非常必要。鑒于染發(fā)劑存在的各種安全隱患，我國(guó)化妝品衛(wèi)生規(guī)范 （2007 年版）規(guī)定了 93 種暫時(shí)允許使用的染發(fā)劑，并明確了化妝品中最大允許使用濃度和各種限制條件。但是，目前只能對(duì) 8 種染料成分進(jìn)行檢測(cè)，覆蓋率不到 1%。因此急需建立化妝品中更多染料成分的檢測(cè)方法，以滿足監(jiān)督檢測(cè)的需求。3 研究現(xiàn)狀針對(duì)種類繁多的染料成分，各國(guó)科學(xué)家一直積極地研究新方法以適應(yīng)不斷增加的新型染發(fā)劑的檢測(cè)要求。由

26、于氧化型染發(fā)劑所占的份額最大，研究人員將重點(diǎn)放在這一領(lǐng)域，精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)只有少數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道了直接型染發(fā)劑的檢測(cè)方法研究。文獻(xiàn)中報(bào)道使用的儀器種類很多，有薄層色譜（TLC） 、高效液相色譜（HPLC） 、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（HPLC/MS） 、氣相色譜（GC） 、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC/MS） 、毛細(xì)管電泳（CE）等。在我國(guó)， 化妝品衛(wèi)生規(guī)范 （2007 年版）中列出了 93 種染發(fā)劑原料名單，但只推薦了其中 8 種染料成分的檢測(cè)方法，存在著大量的檢測(cè)空白，急需建立相應(yīng)的方法。根據(jù)染料的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)，液相色譜是比較合適的檢測(cè)手段。本項(xiàng)目擬采用高效液相色譜法，開展

27、化妝品中 32 種禁限用染料成分的檢測(cè)方法研究，建立染發(fā)劑中多種染料成分的快速、準(zhǔn)確、靈敏的色譜檢測(cè)方法，為衛(wèi)生監(jiān)管提供良好的技術(shù)支持。4 項(xiàng)目完成情況 根據(jù)食藥監(jiān)許函2011126 號(hào)關(guān)于委托組織開展化妝品中 m-苯二胺等八種禁用物質(zhì)或限用物質(zhì)檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)研究的函和開展化妝品中 m-苯二胺等 8 種禁限用染料成分檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)研究項(xiàng)目委托協(xié)議書的要求，按期完成 8 種禁限用染料成分的檢測(cè)方法，并按食藥監(jiān)許函2011262 號(hào)關(guān)于委托開展化妝品中 24 種染發(fā)劑的檢測(cè)方法研究的函的要求，同時(shí)提交另外 24 種染料成分的檢測(cè)方法，具體情況如下： （1）建立了化妝品中 32 種禁限用染料成分的高效液

28、相色譜檢測(cè)方法。本項(xiàng)目中 32 種禁限用染料成分的方法檢出限小于 100g/g，提取回收率在 82%115%之間，方法回收率在 86%114%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在 1.1% 9.9%之間，在 5mg/L500mg/L 的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r0.998） ，基本滿足分析檢測(cè)要求。 （2）本方法負(fù)責(zé)起草單位為中國(guó)疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所，參與驗(yàn)證單位分別是北京市疾病預(yù)防控制中心、廣東省疾病預(yù)防控制中心、上海市疾病預(yù)防控制中心和山東省疾病預(yù)防控制中心。本方法主要起草人為朱英、朱會(huì)卷、楊艷偉，參加起草人為吳大南、魯琳、李金花、李蔚、鐘志雄、張昀、陳金東、聶鯤。驗(yàn)證結(jié)果滿足化妝品及

29、其原料中禁限用物質(zhì)檢測(cè)方法驗(yàn)證技術(shù)規(guī)范相關(guān)要求。5 方法概述5.1 儀器Agilent 公司 Agilent1100 高效液相色譜儀。超聲波清洗器。離心機(jī)。5.2 試劑精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)染料標(biāo)準(zhǔn)品：p-苯二胺、p-氨基苯酚、甲苯-2,5-二胺硫酸鹽、m-氨基苯酚、o-苯二胺、2-氯-p-苯二胺硫酸鹽、o-氨基苯酚、間苯二酚、2-硝基-p-苯二胺、甲苯-3,4-二胺、4-氨基-2-羥基甲苯、2-甲基雷鎖辛、6-氨基-m-甲酚、苯基甲基吡唑啉酮、N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl、4-氨基-3-硝基苯酚、6-羥基吲哚、4-氯雷瑣辛、2,7-萘二酚、1,5-萘二酚、N-苯

30、基-p-苯二胺、1-萘酚、m-苯二胺、氫醌、4-氨基-m-甲酚、2-氨基-3-羥基吡啶、N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽、p-甲基氨基苯酚硫酸鹽、2,6-二氨基吡啶、4-硝基-o-苯二胺、N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽、2,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl 共 32 種染料對(duì)照品（除 2,4-二氨基苯氧基乙醇HCl 由化妝品公司提供外，其余 31 種均購于美國(guó) SIGMA 公司和日本東京化成公司，純度95%） ；無水乙醇、磷酸、氨水、亞硫酸氫鈉、十二水合磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀為分析純，均購于北京化學(xué)試劑公司；乙腈和甲醇為色譜純，購于 Fisher 公司；庚烷磺酸鈉為色譜純，購于美國(guó) T

31、echnologies 公司。5.3 方法5.3.1 色譜條件色譜柱：Supelco DISCOVERY RP-AMIDE C16柱，250 mm 4.6 mm，5m。色譜保護(hù)柱：Supelco DISCOVERY RP-AMIDE C16保護(hù)柱，20 mm 4.0 mm，5 m。磷酸鹽混合溶液：稱取十二水合磷酸氫二鈉 1.8g、磷酸二氫鉀 2.8g 和庚烷磺酸鈉（C7H15SO3Na）1.0g，用水稀釋至 1L，混勻，配制成含庚烷磺酸鈉（1g/L）的磷酸鹽緩沖液，加入磷酸溶液（1+9）調(diào)節(jié) pH 至 6.0 左右，0.45m 微孔濾膜過濾，作為磷酸鹽體系。流動(dòng)相 1：乙腈+磷酸鹽混合溶液=1

32、0+90；流動(dòng)相 2：甲醇+磷酸鹽混合溶液=10+90，流動(dòng)相 3：乙腈+磷酸鹽混合溶液=40+60。流量：1.0 mL/min。檢測(cè)器：二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為 280 nm。柱溫：25。5.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制染料成分標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（染料組分）=10g/L）：稱取染料對(duì)照品約 100mg（精確至0.1mg）于 10mL 容量瓶中，以 2g/L 亞硫酸氫鈉水溶液 + 無水乙醇 = 1 + 1 的混合溶液定容至 10mL，配成約 10g/L 的單標(biāo)溶液。以下幾種物質(zhì)在上述溶劑中的溶解性較差，分別采取如下措施：甲苯-2,5-二胺硫酸鹽和 2-氯-p-苯二胺硫酸鹽 2 種物質(zhì)直接用 2g/L

33、亞硫酸氫鈉水溶液溶解并定容；甲苯-3,4-二胺直接用無水乙醇定容；2-硝基-p-苯二胺和 4-硝基-o-苯二胺需將稱樣量減至 25mg，再用無水乙醇定容，配成約 2.5g/L 的單標(biāo)溶液。儲(chǔ)備溶液保存于精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)4冰箱中，最多使用 2 天。根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行分組后，分別移取染料標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于 10mL 容量瓶中，再用無水乙醇稀釋至刻度，配成 500mg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。各取適量混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，用無水乙醇稀釋成 5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、250mg/L、500mg/L 共 6 個(gè)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)系列。標(biāo)準(zhǔn)系列應(yīng)于使用前配制。取各標(biāo)準(zhǔn)系列

34、 5 L 注入高效液相色譜儀，記錄各色譜峰面積，繪制校準(zhǔn)曲線。5.3.3 樣品預(yù)處理稱取樣品約 0.5g（精確至 1mg）于 10mL 容量瓶中，用無水乙醇 + 水 = 1 + 1 的混合溶液定容至 10mL，超聲提取 15min。超聲過程中，若水溫高于 40度應(yīng)停置降溫，冷卻后繼續(xù)超聲，直至樣品溶液完全均一化。渾濁溶液可取適量高速離心 5min。上清液經(jīng)0.45m 濾膜過濾，濾液作為待測(cè)樣液備用并盡快測(cè)定。若待測(cè)樣液中染料成分的質(zhì)量濃度超過了線性范圍的上限，需對(duì)待測(cè)樣液進(jìn)行適當(dāng)稀釋。5.3.4 結(jié)果計(jì)算 根據(jù)峰面積，于校準(zhǔn)曲線分別得出待測(cè)樣液中染料成分的質(zhì)量濃度，樣品中的含量應(yīng)在此濃度上乘稀

35、釋倍數(shù)。6 方法研究6.1 色譜柱的選擇根據(jù)染料成分的結(jié)構(gòu)性質(zhì)及文獻(xiàn)查閱結(jié)果，選擇流動(dòng)相 1，并考察了 ODS-2 HYPERSIL C18、ZORBAX SB C8 和 DISCOVERY RP-AMIDE C16 3 種色譜柱，結(jié)果分別見圖 1、圖 2 和圖 3。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，使用 ODS-2 HYPERSIL 柱時(shí)峰形大多不規(guī)則，使用 ZORBAX SB C8 柱時(shí)有部分物質(zhì)峰形較差，使用 DISCOVERY RP-AMIDE C16柱時(shí)多數(shù)物質(zhì)的峰形都能得到較好地改善。這是因?yàn)?DISCOVERY RP-AMIDE C16柱中含有酰胺結(jié)構(gòu)，適宜分離胺類化合物，故選擇DISCOVERY

36、 RP-AMIDE C16柱作為分析柱。精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè) min01020304050mAU020406080100120140 DAD1 B, Sig=254,16 Ref=off (D:公 公 公 1ZZDATAZZ0107-1002-0201.D) 2.076 2.430 2.663 2.966 3.043 3.091 3.388 4.186 5.107 5.304 5.824 6.905 7.613 9.298 9.812 11.535 15.023 15.614 16.553 19.647 22.309 22.930 32.924 37.010圖 1 部分染

37、料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖，ODS-2 HYPERSIL 色譜柱min0510152025mAU050100150200 DAD1 D, Sig=280,8 Ref=off (RFJ20110909RFJ20110909 2011-09-09 10-07-36RFJ00007.D) 2.721 3.228 3.395 3.721 5.698 5.882 6.997 7.670 8.321 10.335 11.760 13.021 13.865 16.207 19.407 20.794 23.379 24.406圖 2 部分染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖，ZORBAX SB C8色譜柱 min01

38、02030405060mAU-20020406080100120140 DAD1 C, Sig=280,8 Ref=360,100 (D:公 公 公 1ZZDATAZZ70210ZZ000007.D) 4.584 6.618 8.325 23.509 31.820圖 3 部分染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖，DISCOVERY RP-AMIDE C16色譜柱6.2 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇根據(jù)單標(biāo)的紫外光譜圖，統(tǒng)計(jì)了各種染料成分在不同檢測(cè)波長(zhǎng)下特征吸收的分布情況。精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，32 種染料類化合物在 220nm 242nm 和 270nm 310nm 均有特征吸收，

39、可選擇 230nm、280nm 為通用檢測(cè)波長(zhǎng)，但 280nm 處的吸收低于 230nm?？紤]到 280nm 的抗干擾能力較 230nm 強(qiáng)，且該波長(zhǎng)下的檢出限完全能夠滿足檢測(cè)要求，故選擇 280nm 作為統(tǒng)一檢測(cè)波長(zhǎng)。6.3 流動(dòng)相的選擇6.3.1 水相的選擇根據(jù)文獻(xiàn)查閱結(jié)果，分別試驗(yàn)了乙腈+磷酸鹽體系和甲醇+醋酸鹽體系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，磷酸鹽體系峰形及分離效果較好，后者分離尚可，峰形稍差，故確定乙腈+磷酸鹽體系=10+90 為流動(dòng)相體系。在以上流動(dòng)相體系的基礎(chǔ)上對(duì)水相中的對(duì)離子試劑濃度及 pH 值進(jìn)行了進(jìn)一步優(yōu)化。通過在磷酸鹽體系中加入 0g/L 1.5g/L 的庚烷磺酸鈉及改變 pH 來優(yōu)

40、化流動(dòng)相體系。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不加庚烷磺酸鈉時(shí)，峰形稍有拖尾，加入后有較好改善，加入量為 1.0g/L 1.5g/L 時(shí)效果均較好，確定 1.0g/L 為最佳濃度。當(dāng)流動(dòng)相 pH 值為 5 時(shí)，峰形稍有不規(guī)則，pH 值為 6和 7 時(shí)均較好，考慮到該色譜柱最高允許使用 pH 值為 7.5，故最后確定的 pH 值為 6。6.3.2 有機(jī)相的選擇由于染料種類多，單獨(dú)用乙腈+磷酸鹽一套體系難以完全分離，有些物質(zhì)會(huì)重疊出峰，所以同時(shí)選擇了洗脫能力不同的另一種有機(jī)相甲醇和磷酸鹽的混合體系，二者結(jié)合進(jìn)行分離。32 種染料成分在流動(dòng)相 1 和流動(dòng)相 2 中的分離情況見表 1。表 1 32 種染料成分在流動(dòng)相 1

41、和流動(dòng)相 2 中的保留時(shí)間分布情況保留時(shí)間/ min出峰順序附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱流動(dòng)相 1流動(dòng)相 2188p-苯二胺5.0496.163282,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl5.0847.176370m-苯二胺5.2445.681483p-氨基苯酚5.5877.1335152-氨基-3-羥基吡啶6.39611.125695甲苯-2,5-二胺硫酸鹽6.4408.750772N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽6.72212.067867m-氨基苯酚6.7877.4569334-氨基-m-甲酚7.3410.0371061氫醌7.3388.63911OPDo-苯二胺7.4098.156122

42、12-氯-p-苯二胺硫酸鹽8.61910.0761381o-氨基苯酚9.34510.5561487p-甲基氨基苯酚硫酸鹽9.54914.931精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)出峰順序附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱保留時(shí)間/ min流動(dòng)相 1流動(dòng)相 215102,6-二氨基吡啶10.72423.231691間苯二酚11.16513.33617252-硝基-p-苯二胺11.52713.2901896甲苯-3,4-二胺14.24518.76519314-氨基-2-羥基甲苯14.86320.54220242-甲基雷瑣辛16.58219.7652173N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽16.77534

43、.27722406-氨基-m-甲酚18.59626.69623364-硝基-o-苯二胺19.97722.0542485苯基甲基吡唑啉酮22.17633.7942574N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺HCl26.4385026324-氨基-3-硝基苯酚26.80734.85427426-羥基吲哚35.05643.50428344-氯雷瑣辛48.1935029132,7-萘二酚50503078N-苯基-p-苯二胺50503131,5-萘二酚50503251-萘酚5050由以上結(jié)果可知，由于乙腈和甲醇的洗脫能力不同，二者結(jié)合基本上能分離所有的 32種染料成分，但是其中的 6-羥基吲哚、4-氯雷瑣辛、

44、2,7-萘二酚、1,5-萘二酚、N-苯基-p-苯二胺和 1-萘酚 6 種成分由于保留時(shí)間太長(zhǎng)，效率低，不可取。故在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步試驗(yàn)了3 種有機(jī)相比例更高的流動(dòng)相體系以進(jìn)一步提高上述 6 種成分的洗脫能力，結(jié)果見表 2。表 2 6 種染料化合物在不同流動(dòng)相體系中保留時(shí)間的分布情況保留時(shí)間/min出峰順序物質(zhì)名稱乙腈+磷酸鹽體系=50+50乙腈+磷酸鹽體系=40+60乙腈+磷酸鹽體=35+6516-羥基吲哚4.5545.8666.91424-氯雷瑣辛4.8466.4117.92232,7-萘二酚5.2137.3759.52141,5-萘二酚6.46410.08114.1085N-苯基-p-苯二胺

45、6.50510.36014.57661-萘酚9.73718.52327.991由表 2 可知，磷酸鹽的體積分?jǐn)?shù)降低至 60%65%時(shí)，能較好地分離上述 6 種成分，且體積分?jǐn)?shù)在 65%時(shí)其他成分在短時(shí)間內(nèi)出峰完全，不干擾上述 6 種成分的測(cè)定。所以當(dāng)樣品中含有這 6 種成分時(shí)可采用此方法以縮短出峰時(shí)間。如果繼續(xù)降低磷酸鹽的體積分?jǐn)?shù)，雖然可以進(jìn)一步縮短保留時(shí)間，但會(huì)有部分成分達(dá)不到基線分離。苯基甲基吡唑啉酮在流動(dòng)相體系 1 中峰寬較大，N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl 有時(shí)與 4-氨基-3-硝基苯酚不能完全分離，故將這 2 種物質(zhì)也可以加到這 6 種成分中，此時(shí) 8 種成分能達(dá)到基線分離

46、。精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)根據(jù)以上數(shù)據(jù)，將 32 種染料類化合物分為三組：第一組使用流動(dòng)相 1，第二組用流動(dòng)相 2，第三組用流動(dòng)相 3，具體分組情況見表 3、表 4 和表 5，三組的色譜圖見圖 4、圖 5、圖 6。表 3 第一組所含染料成分出峰順序物質(zhì)名稱出峰順序物質(zhì)名稱1p-苯二胺92-硝基-p-苯二胺2p-氨基苯酚10甲苯-3,4-二胺3甲苯-2,5-二胺硫酸鹽114-氨基-2-羥基甲苯4m-氨基苯酚122-甲基雷瑣辛5o-苯二胺136-氨基-m-甲酚62-氯-p-苯二胺硫酸鹽14苯基甲基吡唑啉酮7o-氨基苯酚15N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl8間苯二酚164-

47、氨基-3-硝基苯酚表 4 第二組所含染料成分出峰順序物質(zhì)名稱出峰順序物質(zhì)名稱1m-苯二胺6N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽22,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl7p-甲基氨基苯酚硫酸鹽3氫醌84-硝基-o-苯二胺44-氨基-m-甲酚92,6-二氨基吡啶52-氨基-3-羥基吡啶10N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽表 5 第三組所含染料成分出峰順序物質(zhì)名稱出峰順序物質(zhì)名稱1N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl52,7-萘二酚2苯基甲基吡唑啉酮6N-苯基-p-苯二胺36-羥基吲哚71,5-萘二酚44-氯雷瑣辛81-萘酚min0510152025mAU050100150200 DAD1 D,

48、 Sig=280,8 Ref=off (RFJ20110808RFJ20110808 2011-08-08 09-06-15RFJ00007.D) 3.808 4.958 5.471 6.213 6.694 7.268 8.391 9.166 10.848 11.149 13.547 14.072 16.359 17.915 21.117 24.136 25.506圖 4 第一組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 11：p-苯二胺；2：p-氨基苯酚；3：甲苯-2,5-二胺硫酸鹽；4：m-氨基苯酚；5：o-苯二胺；6：2-氯-p-苯精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)二胺硫酸鹽；7：o-氨基苯

49、酚；8：間苯二酚；9：2-硝基-p-苯二胺；10：甲苯-3,4-二胺；11：4-氨基-2-羥基甲苯；12：2-甲基雷瑣辛；13：6-氨基-m-甲酚；14：苯基甲基吡唑啉酮；15：N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl；16：4-氨基-3-硝基苯酚min05101520253035mAU01020304050 DAD1 E, Sig=280,16 Ref=off (RFJ20110713RFJ20110712 2011-07-13 14-25-18RFJ00026.D) 5.710 7.296 8.745 10.217 11.447 12.618 15.010 22.369 23.385 Ar

50、ea: 124.096 34.325圖 5 第二組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 21：m-苯二胺；2：2,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl；3：氫醌；4：4-氨基-m-甲酚；5：2-氨基-3-羥基吡啶；6：N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽；7：p-甲基氨基苯酚硫酸鹽；8：4-硝基-o-苯二胺；9：2,6-二氨基吡啶；10：N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽min02.557.51012.51517.52022.5mAU024681012 DAD1 E, Sig=280,8 Ref=off (RFJ20110801RFJ20110801 2011-08-01 10-55-31RFJ0002

51、1.D) 4.012 5.361 6.454 7.482 8.589 11.781 12.541 22.142圖 6 第三組染料混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，流動(dòng)相 31：N,N-二乙基甲苯-2,5-二胺 HCl；2：苯基甲基吡唑啉酮；3：6-羥基吲哚；4：4-氯雷瑣辛；5：2,7-萘二酚；6：N-苯基-p-苯二胺；7：1,5-萘二酚；8：1-萘酚6.4 線性范圍及檢出限結(jié)合樣品中染料成分的實(shí)際加入量和樣品稱樣量，本研究確定最高配制濃度為500mg/L，最低配制濃度為 5mg/L，這一范圍完全滿足實(shí)驗(yàn)要求。分別配制 5mg/L、25mg/L、50mg/L、100mg/L、250mg/L 和 500mg/

52、L 共 5 個(gè)系列濃度精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)的混合標(biāo)準(zhǔn)系列，進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的面積響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x） ，面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行相關(guān)分析得到線性方程和相關(guān)系數(shù)（r） 。同時(shí)，對(duì)含混和標(biāo)準(zhǔn)系列的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)分析，記錄相應(yīng)的面積響應(yīng)值，以被測(cè)物質(zhì)基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x） ，面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo)（y）建立基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行相關(guān)分析得到線性方程和相關(guān)系數(shù)（r） ，結(jié)果見表 6。表 6 32 種染料成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線及相關(guān)系數(shù) 序號(hào)附錄 A中編號(hào)物質(zhì)名稱標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)131,5-

53、萘二酚y= 3.88x - 9.970.9997y= 3.45x + 0.6270.9996251-萘酚y= 3.86x- 2.561.0000y= 4.00 x - 7.370.9998382,4-二氨基苯氧基乙醇 HCly = 1.55x - 6.380.9997y = 1.43x - 13.10.99904102,6-二氨基吡啶y = 2.00 x + 2.650.9997y = 1.78x + 11.70.99905132,7-萘二酚y = 2.93x + 0.9781.0000y= 3.10 x + 0.9610.99996152-氨基-3-羥基吡啶y = 7.05x - 2.430

54、.9999y = 6.26x + 40.70.99897212-氯-p-苯二胺硫酸鹽y = 0.876x - 2.930.9995y = 0.871x + 1.540.99998242-甲基雷瑣辛y = 1.31x - 3.960.9998y = 1.29x 2.8410-20.99999252-硝基-p-苯二胺y = 11.0 x - 41.60.9998y = 11.2x - 20.70.999910314-氨基-2-羥基甲苯y(tǒng) = 4.84x - 18.40.9997y = 4.83x - 23.70.999711324-氨基-3-硝基苯酚y = 8.86x - 9.380.9999y

55、= 8.97x - 16.80.999912334-氨基-m-甲酚y = 3.06x - 1.700.9999y = 3.00 x - 0.1921.000013344-氯雷瑣辛y= 2.44x - 0.1241.0000y= 2.38x+ 2.681.000014364-硝基-o-苯二胺y = 9.22x - 25.20.9999y = 8.90 x + 3.740.999915406-氨基-m-甲酚y = 4.63x - 30.70.9994y = 4.21x 24.00.999716426-羥基吲哚y=3.98x+6.6410-21.0000y = 3.92x+ 5.151.000017

56、61氫醌y = 5.33x + 7.660.9997y = 5.64x + 4.351.00001867m-氨基苯酚y = 4.99x - 17.20.9997y = 4.94x - 10.50.99981970m-苯二胺y = 3.91x - 30.50.9992y = 3.65x + 0.2321.00002072N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽y = 1.76x - 20.70.9990y = 1.77x - 37.10.99822173N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽y = 1.26x - 10.50.9989y = 1.13x - 7.870.99902274N,N-二乙基

57、甲苯-2,5-二胺 HCly = 2.22x - 9.680.9999y = 2.05x - 4.470.99972378N-苯基-p-苯二胺y= 11.6x- 20.20.9999y = 10.2x + 4.991.00002481o-氨基苯酚y = 6.52x - 25.80.9998y = 6.31x - 4.921.00002583p-氨基苯酚y = 3.00 x - 12.40.9996y = 2.81x - 8.920.99992685苯基甲基吡唑啉酮y= 3.40 x- 19.60.9996y = 2.89x - 10.70.99952787P-甲基氨基苯酚硫酸鹽y = 1.83

58、x + 3.330.9990y = 1.67x + 10.50.99932888P-苯二胺y = 2.79x - 12.70.9995y = 2.69x - 6.920.99982991間苯二酚y = 3.58x - 8.580.9998y = 3.34x - 4.420.99993095甲苯-2,5-二胺硫酸鹽y = 1.55x - 7.280.9995y = 1.47x - 8.080.99963196甲苯-3,4-二胺y = 3.32x - 19.80.9997y = 3.36x - 12.90.999532OPDO-苯二胺y = 5.47x - 26.60.9994y = 5.51x

59、8.2910-21.0000精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè) 由表 6 可知，除 N,N-雙(2-羥乙基)-p-苯二胺硫酸鹽基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)為 0.9982 和N,N-二乙基-p-苯二胺硫酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)為 0.9989 外，其余染料的線性相關(guān)系數(shù)均0.9990，滿足方法要求，且兩種曲線差異不大，在實(shí)際工作中可直接使用標(biāo)準(zhǔn)曲線。檢出限是指檢測(cè)器恰能產(chǎn)生 3 倍噪聲時(shí)的色譜進(jìn)樣量。對(duì)工作曲線逐級(jí)往下稀釋，計(jì)算信噪比（S/N） 。以 S/N=3 為檢出限，以 S/N=10 為定量下限。當(dāng)樣品稱樣量為 0.5g，定容體積為 10mL 時(shí)，計(jì)算檢出濃度和最低定量濃度。32 種染料成

60、分的檢出限、定量下限及檢出濃度和最低定量濃度見表 7。表 7 32 種染料成分的檢出限、定量下限及檢出濃度和最低定量濃度序號(hào)附錄 A 中編號(hào)物質(zhì)名稱檢出限/g檢出濃度/（g/g）定量下限/g最低定量濃度/（g/g）131,5-萘二酚5.010-3201.510-260251-萘酚3.010-3121.010-240382,4-二氨基苯氧基乙醇 HCl8.010-3322.510-21004102,6-二氨基吡啶1.510-26057-萘二酚3.010-3121氨基-3-羥基吡啶1.010-2403氯-p-苯二胺硫